果胶酶高产菌株EIM－6的筛选鉴定及其液体发酵产酶条件优化

通过筛选得到一株适合液体深层发酵培养的高产果胶酶菌株EIM-6,基于形态学与ITS序列分子系统进化分析,鉴定为Aspergillus niger.运用单因子实验确定EIM-6产果胶酶最适碳源和氮源.在此基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其产酶的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素.然后通过最陡爬坡实验在上升最高点处由中心组合实验和响应面分析确定其最适产酶条件.实验优化的最优产酶条件为:w(橘皮粉)4.09%,w(麸皮)3.16%,w((NH4)2SO4)0.35%,w(K2HPO4)0.3%,w(CaCO3)0.24%,初始pH 6,接种量107/mL,转速250 r/min,28℃培养80 h酶活达30 231 U/mL,与初始相比,酶活提高2.07倍.

儿童腹泻病458例病原学及临床分析

目的:探讨儿童腹泻病的病原菌分布情况及临床特点。方法:对458例住院腹泻儿童患者进行了常见肠道致病菌的培养、分离鉴定、药敏试验及轮状病毒抗原检测。结果:169例检出病原菌,检出率为36.9%。本组病例婴幼儿占74.24%,7～9月感染性腹泻病发病率最高,其次为10～12月。婴儿期以轮状病毒为主要病原,幼儿期以痢疾杆菌、轮状病毒、大肠埃希菌为主要病原。痢疾杆菌对头孢噻肟耐药率最低、其次为丁胺卡那霉素、头孢呋辛,大肠埃希菌对丁胺卡那霉素耐药率最低,其次为头孢噻肟、头孢呋辛,金黄色葡萄球菌对丁胺卡那霉素耐药率最低,其次为头孢噻肟。传统的一线抗生素氨苄青霉素、庆大霉素、头孢唑啉普遍存在耐药情况。结论:儿童腹泻病原菌类型复杂、多样,在诊治中应重视病原学诊断和合理应用抗生素。

重组SEA基因真核表达载体的构建及诱导小鼠抗肝癌免疫的效应

目的 构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)真核表达载体 ,并通过体内转染 ,观察其诱导抗小鼠肝癌的免疫效应。方法采用基因工程技术构建SEA基因的真核表达载体 ,使其表达SEA分子。通过阳离子脂质体介导的体内转染 ,观察其对小鼠肝癌的治疗作用。用51 Cr释放法测定治疗组与对照组动物脾淋巴细胞杀伤H2 2 细胞的活性。结果成功地构建了SEA真核表达载体 pLXSN SEA ,体内转染 pLXSN SEA的荷瘤小鼠肿瘤明显缩小 ,生存期延长 ,4 10小鼠肿瘤完全消退 ,且长期无瘤生存。CTL杀伤活性实验表明 ,瘤区内转染pLXSN SEA可诱导强烈的CTL杀伤效应 ,与对照组相比较差异显著 (P <0 .0 1)。结论超抗原SEA体内转染对肿瘤具有明确的治疗作用 。

多发性抽动症的临床及视频脑电图分析

【目的】探讨多发性抽动症(tourettesyndrome,TS)的视频脑电图改变及其的临床特点、病因及治疗,为临床防治提供科学依据。【方法】对48例TS患儿进行视频脑电监测并结合临床资料分析结果。【结果】视频脑电图异常21例(43.8%),其中轻度异常15例,大多表现为基本节律紊乱,慢波多于同龄儿童,α波指数减少等非特异性变化;中度异常5例,表现为弥漫性慢波、有尖波、棘波、棘慢波综合;重度异常1例,表现为各导出现较多的棘波和棘慢波综合。【结论】视频脑电检查既可长时间地监测脑电情况,又可同步监测患者临床特征,为临床医生充分认识TS提供可靠依据。

儿童脑萎缩性疾病CT与临床的相关研究

【目的】探讨小儿脑萎缩性疾病的头颅CT特点与病因、临床的关系。【方法】回顾分析187例小儿脑萎缩的临床资料。【结果】小儿脑萎缩的病因以围产期异常、中枢神经系统感染和脑外伤为主,分别占41.7%、24.1%、12.3%。瘫痪类型与脑萎缩的范围及程度相关,弥漫性脑萎缩和局限性脑萎缩所致瘫痪类型不同。癫痫发生率为70.6%,与脑萎缩范围有关。脑萎缩范围越大,癫痫发生率越高,弥漫性脑萎缩组癫痫发生率显著高于局限性脑萎缩组。【结论】CT检查安全迅速,颅内结构显示准确,是目前诊断脑萎缩最为可靠的方法之一,可为临床诊断及预后判断提供依据。

小鼠肝癌细胞系Hepa16 B7.1瘤苗抗肿瘤免疫的实验研究

目的 :研究小鼠肝癌细胞系Hepa1 6转染B7.1基因后在体内外抗肿瘤免疫的作用 .方法 :采用脂质体介导的方法用pLXSNB7.1转染PA3 17包装细胞 ,经G4 18筛选出高滴度阳性的细胞克隆 ,以流式细胞仪检测B7.1分子的表达情况 ;用所获病毒上清进一步感染Hepa1 6细胞 ,观察转染B7.1基因后Hepa1 6细胞作为肿瘤疫苗在体内外诱发抗肿瘤免疫的情况 .结果 :Hepa1 6/B7.1高表达B7.1分子 ,其致瘤性明显降低 ,接种小鼠后成瘤率为 2 0 % ,而亲代Hepa1 6细胞成瘤率为 10 0 % .转B7.1基因肿瘤细胞疫苗可抑制肿瘤生长速度 ,延长荷瘤小鼠生存期 ;且转B7.1基因肿瘤细胞疫苗具有保护性免疫反应 .结论 :转B7.

儿童脑瘫66例脑电地形图与CT分析

对 66例脑瘫患儿进行了脑电地形图 ( BEAM)检查 ,并与同步脑电图 ( EEG)、头颅 CT进行了对比分析。结果 :脑瘫患儿 BEAM改变主要是δ或θ频段功率升高 ,α频段功率降低。对 CT有局灶性改变的患儿 ,BEAM多能显示与 CT病变部位一致的局灶δ或θ高功率区 ,范围较 CT大。提示 :脑电地形图检查安全、迅速、经济、无损伤 ,可定量分析大脑功能损害的情况 ,而 CT则可反映大脑结构的改变 。

某湿法冶金流程运行状态的在线评价方法优化及仿真分析

在分析某金氰化浸出工艺中浸出过程与置换两个工序的运行状态相关变量基础上,以综合经济效益为全流程的评价指标,选取了各工序运行状态的评价指标,提出了基于粗糙集的工业流程运行状态在线评价方法,建立了工序层模型与目标层模型,通过仿真分析验证了模型的在线评价及非优追溯法的有效性。结果表明所建立模型具有一定的可靠性和有效性。

一种新的支持向量机大规模训练样本集缩减策略

支持向量机(SVM)在许多实际应用中由于训练样本集规模较大且具有类内混杂孤立点数据,引发了学习速度慢、存储需求量大、泛化能力降低等问题,成为直接使用该技术的瓶颈。针对这些问题,通过在点集理论的基础上分析训练样本集的结构,提出了一种新的支持向量机大规模训练样本集缩减策略。该策略运用模糊聚类方法快速的提取出潜在支持向量并去除类内非边界孤立点,在减小训练样本集规模的同时,能够有效地避免孤立点数据所造成的过学习现象,提高了SVM的泛化性能,在保证不降低分类精度的前提下提高训练速度。

果胶酶高产菌株EIM-4的鉴定及其液体发酵条件优化

目的:通过了解高产果胶酶菌株EIM-4的背景信息及优化其最适的产酶条件,为下一步工业化生产提供依据。方法:通过基于18S rDNA序列的系统发育进化分析对果胶酶高产菌进行鉴定,通过单因素试验和均匀设计获得最适产酶条件。结果:通过对18SrRNA基因的分子系统进化分析,菌株EIM-4被鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。通过单因素和均匀设计试验确定最佳产酶培养基为(g/L):橘皮粉32.9,黄豆粉10.7,(NH4)SO42.1,CaCO31.0,pH自然。结论:Aspergillus niger EIM-4的液体发酵产果胶酶的活力可达15159.82U/mL。

人肝癌细胞系中肿瘤相关基因MAGE的克隆

目的 克隆人肝癌细胞系HHCC中的肿瘤相关基因MAGE 1的全长cDNA。方法 根据GenBank中MAGE 1基因编码区 ,设计PCR引物 ,用RT PCR方法 ,从人肝癌细胞系HHCC中获得MAGE 1全长cDNA ,双酶切后连接入质粒 pUC19中 ,转化入大肠杆菌DH5α。挑选阳性克隆提取质粒 ,进行DNA序列分析 ,并将测得的核苷酸序列与GenBank中的DNA序列进行BLAST同源性分析。结果 获得MAGE 1全长cDNA、MAGE 6基因 4 6 3bp片段 ,以及 1个与MAGE 6基因编码区有 93%同源性的片段 ,可能为MAGE家族中的新成员。结论 人肝癌细胞系HHCC可表达多种MAGE基因 ,可能有新的MAGE基因出现 ,为研究MAGE基因在HCC中的表达模式及其在HCC免疫治疗中的靶点提供了新的资料。

福州森林红壤细菌的菌群结构及其功能分析

福建地区是我国的第二大林区,土壤类型主要表现为红壤。对福州地区森林中因木材腐朽而形成的树洞中的土壤样品进行筛选,构建了一份具有强木质纤维素降解能力的酸性红壤的细菌16S rRNA基因文库,利用限制性片段长度多态性(RFLP)对随机克隆进行筛选;对该生态环境下的细菌菌群进行了系统发育分析。结果表明土壤pH偏酸性严重影响了细菌类群的多样性,酸杆菌门Acidobacteria(71.5%)和变形菌门Proteobacteria(24.1%)是该酸性土样中的优势菌群,其中酸杆菌门在该生态系统中占有绝对优势。变形菌菌群中的主要类群为光合细菌,固氮细菌和溶菌细菌。研究表明,在木质纤维素自然降解的过程中,存在于酸性树洞土壤中的细菌参与了碳素和氮素的固定与循环,并对其微生态的稳定起到重要作用。

灰黄霉素高产变株与出发菌株18S rRNA基因序列的比较分析

根据真菌18S rDNA的保守序列设计引物,对灰黄霉素高产突变菌Penicillium griseofulvum F208与出发菌株Penicillium griseofulvum 3.5190的18S rRNA进行克隆测序及对比分析,并登录GenBank(序列号为EF608151和EF607282).依据18S rDNA建立的系统进化树表明突变株F208与出发菌株3.5190的遗传距离较远,而与Penicillium urticae亲缘关系最近.出发菌株3.5190与Penicillium commune亲缘关系最近.18SrDNA作为分子标记可有效地鉴别灰黄霉素产生菌(Penicillium griseofulvum)高产与低产菌株.

人细小病毒B19感染与小儿川崎病的关系

目的: 探讨人细小病毒B19感染与小儿川崎病的关系.方法: 用巢式PCR法对46例川崎病患儿进行B19 DNA检测,用ELISA法对其中的30例患儿进行B19 VP2 IgM检测.结果: 病例组46例,B19 DNA阳性14例( 30% ),对照组50例B19 DNA阳性2例,两组间差异显著(P<0 01).病例组B19 VP2 IgM阳性7 /30例,对照组50例均阴性.两组间差异极显著(P<0 01). 30例川崎病患者中B19 DNA,B19 VP2 IgM均阳性6例; 1例仅B19 VP2 IgM阳性; 4例仅B19 DNA阳性;B19 DNA和B19 VP2 IgM同时阴性19例,B19 DNA和B19 VP2 IgM一致率为83 3%,有一致性(P<0 01 ).B19阳性与阴性川崎病患儿在性别、年龄、常见临床表现、预后等方面无差别.结论: 我国川崎病患儿B19病毒感染率较高可能是导致川崎病的主要病原体之一.

宏基因组学在发现新基因方面的应用

现代分子微生物生态学研究表明,自然环境中约99%的微生物不能用传统的分离培养方法获得其纯培养,使得环境微生物中的多样性基因资源难以得到充分的开发和应用。宏基因组学是近年来发展起来的,通过直接提取特定环境中全部微生物的总基因组DNA并克隆到合适的可培养微生物宿主中,来筛选目的基因的方法。它已在微生物新功能基因筛选、活性物质开发和微生物多样性研究等方面取得了显著成果。该文旨在介绍宏基因组学在新功能基因发现方面的应用概况并结合我们的研究情况,对这一崭新领域中的最近研究进展进行简要综述。

病毒性脑炎患儿脑脊液和血清S-100β蛋白测定的意义

目的探讨病毒性脑炎(病脑)患儿脑脊液(CSF)和血清S-100β蛋白变化的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法对36例病脑和20例无神经系统疾病而需外科手术的腰麻患儿CSF和血清S-100β蛋白进行测定。比较昏迷组与无昏迷组、惊厥组与无惊厥组、有后遗症组与无后遗症组CSF和血清S-100β蛋白水平的差异。结果 1．病例组和对照组CSF 中S-100β蛋白水平分别为(0.641±0．390)、(0．037±0．014)μg/L,血清S-100β蛋白水平分别为(0．444±0．257)、(0．023± 0．009)μg/L,两组CSF、和血清S-100β蛋白水平均有显著性差异(P<0．01,0．05);昏迷组CSF和血清S-100β蛋白均显著高于无昏迷组(P均<0 01);惊厥组CSF和血清S-100β蛋白水平均高于无惊厥组(P均<0．01);后遗症组CSF和血清S-100β蛋白均高于无后遗症组(P均<0．01)。结论病脑患儿CSF和血清S-100β蛋白水平与疾病严重程度相关,检测病脑患儿S-100β蛋白水平的变化,有助于判定脑组织受损的严重程度及评估患儿的预后。

家庭康复训练对缺氧缺血性脑病患儿生长发育的影响

目的探讨家庭康复训练对缺氧缺血性脑病患儿生长发育的影响。方法将80例中度缺氧缺血性脑病患儿分为对照组(n=40)和观察组(n=40),对照组给予常规干预护理,观察组在对照组的基础上进行家庭康复训练。通过CDCC婴幼儿智力发育检查量表测试,比较两组患儿在3月龄及6月龄时智力发育指数(MDI)和心理运动发育指数(PDI);通过Gesell发育诊断量表对两组患儿1岁时的发育商进行比较。结果观察组患儿在3月龄及6月龄时MDI及PDI明显高于对照组(P<0.01);1岁时观察组患儿发育商高于对照组(P<0.05)。结论家庭康复训练能促进缺氧缺血性脑病患儿的智力发育。

红曲霉-中药合生元制剂中酶活力大小的研究

试验选取培养15、21和20 d的成熟红曲霉-中药合生元制剂干粉和培养20 d的成熟红曲霉-中药合生元制剂湿粉作为样品,每组做3个重复,取平均值。利用紫外分光光度法分别测定不同培养时间下红曲霉粉中的淀粉酶活力、蛋白酶活力和纤维素酶活力。研究结果表明:淀粉酶活力相对较高,且略有随培养天数增加而升高的趋势,蛋白酶活力很低,纤维素酶活力较低。

基于相似性分析的SVM快速分类算法

针对支持向量机(SVM)分类速度取决于支持向量数目的应用瓶颈,提出一种SVM快速分类算法。通过引入支持向量在特征空间的相似性度量,构建特征空间中的最小支撑树,在此基础上将支持向量按相似性最大进行分组,依次在每组中找到决定因子和调整因子,用两者的线性组合拟合一组支持向量在特征空间的加权和,以减少支持向量的数量,提高支持向量机的分类速度。实验结果证明,该方法能以很小的分类精度损失换取较大的分类时间缩减,满足SVM实时分类的要求。