表皮生长因子对晶状体和角膜上皮细胞增生的刺激作用

目的探讨不同浓度的表皮生长因子（ＥＧＦ）对晶状体和角膜上皮细胞增生的刺激作用。方法利用培养的兔晶状体和角膜上皮细胞，通过ＭＴＴ方法，检测细胞增殖密度。培养晶状体上皮细胞的ＥＧＦ浓度（１～２５０ｎｇ／ｍｌ）分为８组；而培养角膜上皮细胞的ＥＧＦ浓度（４～１０００ｎｇ／ｍｌ）分为１０组。结果ＥＧＦ浓度在３２ｎｇ／ｍｌ时，促晶状体上皮细胞的增生作用最强，与无血清组比较差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。促角膜上皮细胞增生的最佳浓度为１６ｎｇ／ｍｌ，与无血清组比较差异显著（Ｐ＜０．０５）。结论上述结果为今后在细胞和分子水平上研究白内障和角膜伤口愈合的发生规律及其机制提供实验资料。

晶体上皮细胞经辐射后AgNORs的形态定量研究

利用银染和图像分析技术对受照不同剂量６０Ｃｏγ线（０、１０、２０、３０和５０Ｇｙ）和照后不同培养时间（３、５和７天）的兔晶体上皮细胞的ＡｇＮＯＲｓ进行了定量分析。结果表明，各剂量组ＡｇＮＯＲｓ颗粒的面积、面积百分比、平均光密度和积分光密度降低，与对照组相比均有明显的差异（Ｐ＜００１）。随照射剂量和照后培养时间的增加，ＡｇＮＯＲｓ颗粒面积进行性减小（Ｐ＜００１），尤其５０Ｇｙ组比对照组降低了７９８２％，表明晶体上皮细胞的增生明显受到抑制。辐射剂量在２０Ｇｙ以下时，ＡｇＮＲＯｓ颗粒的平均光密度随培养时间的延长而增加（Ｐ＜００５）；在３０Ｇｙ以上时，结果与此相反。细胞核随照射剂量的增加而增大，２０Ｇｙ达到高峰。上述结果为探索放射性白内障的发生机理提供了客观指标。

放射性间质性肺炎的病变规律及其机理研究

本实验采用203只雄性Wistar大鼠经^(60)Coγ线胸部(全胸、半胸),单次(10、30、50、70Gy)及分次(累积30、60Gy)照射。于照射后0.5,1、2、3、6、9、12个月分批活杀,通过病理学(光镜、电镜)、免疫组化、定性定量等多项指标观察结果表明:于30Gy剂量组发生了典型放射性间质性肺炎(RIP)。肺脏病变呈进行性发展,可分为四期:渗出期、肉芽生长期、纤维增生期、胶原化期。认为RIP分为四期更能较准确客观反映其病变的发生发展过程。照射后肺组织肥大细胞、Ⅱ型细胞均可能参与其肺纤维化形成。

人白细胞DR抗原在冠状动脉粥样硬化早期病变中的表达及与CS－PG的关系

为研究人白细胞ＤＲ抗原（ｈｕｍａｎｌｅｕｋｏｃｙｔｅａｎｔｉｇｅｎ－ＤＲ，ＨＬＡＤＲ－ＤＲ）和硫酸软骨素蛋白聚糖（ｃｈｏｎｄｒｏｉｔｉｎｓｕｌｆａｔｅｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ，ＣＳ－ＰＧ）在人冠状动脉中的表达，将１３例年轻人（１５岁～３９岁）的冠状动脉（左旋支或左前降支）用福尔马林固定后，进行石蜡包理，其中６例为对照组（正常组），７例为病变组（脂纹组）。连续切片后，应用微波炉对两组各例进行ＨＬＡ－ＤＲ和ＣＳ－ＰＧ免疫组织化学染色。切片经图象分析仪定量后，所得结果显示，病变组内膜ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数密度和ＣＳ－ＰＧ阳性细胞面密度都分别明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），并且对照组和病变组内膜ＨＬＡ－ＤＲ数密度和ＣＳ－ＰＧ面密度都呈显著正相关（Ｐ＜０．０１）。从脂纹组中任取一例进行ＣＤ６８、增殖细胞核抗原的免疾组织化学染色，经镜下观察发现，ＣＤ６８阳性细胞同时也是ＨＬＡ－ＤＲ阳性；ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞大部分是增殖细胞核抗原阳性。提示冠状动脉粥样硬化早期病变中ＨＬＡＤＲ表达与泡沫细胞的形成、平滑肌细胞的增殖、ＳＣＰＧ增多有密切关系。

肝素、5-羟色胺和白介素-1对NIH/3T3成纤维细胞AgNORs影响的图像分析

应用核仁组成区相关蛋白银染技术（ＡｇＮＯＲｓ）结合图像分析观察了肝素、５－羟色胺和白介素质（ＩＬ－１）对体外培养的ＮＩＨ３Ｔ３成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ的影响。结果表明：（１）加入０．１－０．４ｍｇＬ浓度的肝素培养后第３天，成纤维细胞嗜银蛋白颗粒面积（Ａｇ－ａ）、积分光密度（Ａｇ－ｉｏｄ）和嗜银相关蛋白面积与核面积的百分比（Ａｇ－ａ／Ｎａ）均出现升高，其中以０．１０和０．２０ｍｇＬ浓度的肝素刺激作用最强，三个指标的均值分别为对照值的１．４７、１．５４和１．９４倍（Ｐ＜０．０１）；（２）加入不同浓度５－羟色胺后ＡｇＮＯＲｓ的三个参数呈现出类似的升高趋势，而以１．０和２．０×１０－６ｍｏｌＬ浓度的５羟色胺显示出较强的促进作用，成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ的三个指标相当于对照值的１．５３、１．５７和２．４２倍；（３）在所观察的ｌＬ－１四种浓度范围内，以１００和２００×１０３ｕＬ浓度的ｌＬ－１对成纤维细胞的促增殖作用最强，三个指标的均值分别为对照值的１．６０、１．８４和２．４２倍。

冠状动脉内弹力膜缺损与内膜增厚的关系

目的：研究冠状动脉（冠脉）内弹力膜缺损与内膜增厚及动脉粥样硬化发生发展的关系。方法：应用图像分析仪对北京地区１０２例意外死亡年轻人（１５～３９岁）冠脉近侧端进行了形态定量及统计学处理。结果：在同体三支冠脉的比较中内弹力膜缺损程度以左前降支居首位，其次为右冠脉和左旋支。男重于女。内弹力膜缺损程度与内膜增厚呈正相关（ｒ＝０．８７，Ｐ＜０．０１）。紧接内膜增厚高峰之后的年龄组第二弹力膜检出率最高，此后十年间内膜亦无明显进一步增厚。随年龄增长第二弹力膜检出率降低，内膜增厚程度加重。结论：内弹力膜缺损的量与内膜增厚的程度及速度关系密切；第二弹力膜的形成对减慢内膜增厚速度有重要意义。

地塞米松对成纤维细胞核仁组成区相关嗜银蛋白增生的抑制作用

目的和方法：应用核仁组成区相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）染色结合图像分析技术，观察皮质类固醇激素地塞米松对体外培养的ＮＩＨ／３Ｔ３成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ增生的抑制作用。结果：（１）地塞米松对正常和不同因子刺激的成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ的增生均显示不同程度的抑制作用，其抑制强弱的顺序为：正常＞５－羟色胺＞ＩＬ－１和肝素；（２）地塞米松的抑制作用与其浓度密切相关，对正常、５－羟色胺和肝素、ＩＬ－１刺激的成纤维细胞增生的最佳抑制浓度分别为５０、１００和１５０×１０３μｇ／Ｌ。结论：上述实验结果为进一步研究地塞米松抗纤维化作用以及抑制成纤维细胞增生的作用机制提供了重要依据。

动脉粥样硬化高、低发区年轻人冠状动脉管壁结构重塑与动脉粥样硬化的关系

由于动脉粥样硬化病变主要发生在内膜,在冠状动脉左前降支近侧端居首位,故对我国动脉粥样硬化高（北京）、低（南宁、宁波渔区）发区327例意外死亡年轻人冠状动脉左前降支近侧端做了多参数形态测量,所得数据进行统计学处理,以探讨动脉粥样硬化高、低发区同龄年轻人冠状动脉管壁结构重塑的差异及与动脉粥样硬化的关系。发现北京年轻人冠状动脉管壁结构重塑改变早、进展快,各项指标明显高于低发区同龄年轻人,其中35～39岁组冠状动脉管腔狭窄检出率达10.7％,与动脉粥样硬化中、晚期病变的高检出率相符;宁波渔区居民总趋势与北京相似,但管腔狭窄检出率4.7％;南宁年轻人管壁结构重塑晚于北京两个年龄组,程度轻、进展慢,管腔狭窄检出率1.8％。说明三地区同龄年轻人在增龄过程中,由于环境因素等的影响,冠状动脉管壁结构的重塑存在明显差异,与动脉粥样硬化病变的发生发展密切相关。血管壁结构重塑;冠状动脉;年轻人;动脉粥样硬化;

碱性成纤维细胞生长因子对人晶状体上皮细胞促增殖作用研究

目的 研究了碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对人晶状体上皮细胞 (HLECs)的促增殖作用。方法 胎儿晶状体上皮细胞原代与传代培养。第 2代培养细胞中添加bFGF ,浓度 10 - 3～ 10 3ng/ml ,用甲基噻唑基四唑 (MTT)测定法观察bFGF对HLECs的影响。结果 HLECs具有不易贴附、融合较慢及不易生长等特点。bFGF促进HLECs的增殖 ,浓度为 1～ 10 2 ng/ml,具有统计学差异 ,10 2 ng/ml有明显的促增殖作用 ;呈浓度依赖性。

异位妊娠与正常输卵管粘膜形态计量研究——100例测试结果分析

在对１９９０年度北京市部分地区异位妊娠病例进行临床病理学研究的基础上，就其中８０例可供形态计量学研究的输卵管样品及对照组２０例由于子宫或卵巢病变而切除的正常输卵管应用Ｑｕａｎｔｉｍｅｔ９７０图像分析仪（英国剑桥），采用ＱＵＩＰＳ软件编制的程序，进行了形态计量学观察。两组的年龄大致相同，均为生育期妇女。结果显示异位妊娠组输卵管粘膜纤毛细胞密度极显著减少（Ｐ＜０００１），纤毛密度亦极显著减少（Ｐ＜０００１），纤毛高度极明显变化（Ｐ＜０００１）。结果表明输卵管粘膜损伤与纤毛活动力减弱，使孕卵向宫腔转移速度变慢或中途停顿，是异位妊娠的重要因素；而造成输卵管粘膜损伤的主要原因是输卵管各类炎症病变，极少数亦可能为发育异常。

创伤愈合中肥大细胞的形态变化及定量研究

创伤愈合过程中，参与或涉及的种类很多，其中肥大细胞、成纤维细胞等对创伤愈合起着极为重要的作用。本实验以雄性北京小型猪为创伤模型，观察了碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）治疗后肥大细胞（Ｍａｓｔｃｅｌ，ＭＣ）在创伤愈合中的动态变化，并结合图像分析进行了定量研究。结果发现：创伤后ＭＣ数量和ＭＣ内颗粒数量发生了改变，ｂＦＧＦ也参与了创伤修复过程。本研究的结果提示ｂＦＧＦ和ＭＣ可能参与了这一过程，但对于这两者的关系和在其中的作用均需要进一步研究。

γ-干扰素对NIH/3T3成纤维细胞AgNORs影响的定量研究

用细胞核仁组成区相关蛋白染色与图像分析技术，研究γ干扰素（ＩＦＮγ）对正常和不同因子刺激的ＮＩＨ／３Ｔ３成纤维细胞相关嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）的影响。发现（１）不同浓度的ＩＦＮγ对正常成纤维细胞的生长显示出明显的抑制作用，其中以２５０×１０３ｕ／Ｌ浓度ＩＦＮγ的抑制作用较强（Ｐ＜００１）；（２）ＩＦＮγ对肝素、５羟色胺和ＩＬ１刺激的成纤维细胞增殖的影响表明，２５０×１０３ｕ／Ｌ浓度的ＩＦＮγ对肝素和５羟色胺刺激的成纤维细胞显示出明显的抑制作用，其ＡｇＮＯＲｓ三个参数的均值相当于对照值的５４％和５１％，而２５０和５００×１０３ｕ／Ｌ浓度的ＩＦＮγ能明显抑制ＩＬ１刺激的成纤维细胞生长，其抑制率分别为对照值的６１％和５５％（Ｐ＜００１）；（３）比较ＩＦＮγ对正常和刺激生长的成纤维细胞的作用，发现ＩＦＮγ能不同程度地抑制成纤维细胞的生长，其中对５羟色胺刺激的成纤维细胞抑制作用最强，其次为正常和ＩＬ１刺激的成纤维细胞，而对肝素刺激的成纤维细胞增生的抑制作用较弱，其抑制率分别为对照值的６３％，６６％，７３％和８５％。以上结果为ＩＦＮγ治疗各种因素，特别是辐射引起的器官纤维化研究提供了?

食鱼因素对年轻人主动脉壁的影响及其与动脉粥样硬化早期病变发生发展关系的研究

食鱼因素对年轻人主动脉壁的影响及其与动脉粥样硬化早期病变发生发展关系的研究王爱忠，贾杭若，缪明泉，赵培真，张英珊，丛祥凤，杨瑞彪，张振声１材料和方法收集渔区（宁波、舟山）３６例意外死亡的年轻人（１５～３９岁）的新鲜（死后２４ｈ内解剖）主动脉。取胸主动...

人主动脉内膜细胞增生及蛋白聚糖的形态定量研究

目的：探讨北京、南宁年轻人主动脉内膜平滑肌细胞增生及蛋白聚糖含量与动脉粥样硬化高发、低发的关系。方法：收集１５～３４岁意外死亡者主动脉（北京１６２例、南宁１１５例），用ＱＴＭ９７０图像分析仪测试了主动脉３个部位的内膜厚度、细胞密度及阿新蓝着染的蛋白聚糖相对含量（光密度）。数据建库后用ＳＰＳＳ软件统计分析。结果：内膜厚度随年龄而增加，但细胞密度变化不明显。北京标本内膜厚度及细胞密度均高于南宁，而蛋白聚糖相对含量却低于南宁。内膜细胞密度与蛋白聚糖相对含量负相关。结论：两地年轻人不同的主动脉内膜平滑肌细胞增生程度及蛋白聚糖含量与动脉粥样硬化高发、低发有关。

肝硬变、肝细胞癌DNA含量的形态计量研究

本文应用二倍体离差指数(2cDI)、五倍体超过率(5cER)和恶性指数(MI)等参数,对肝癌和肝硬变DNA含量进行了分析.结果:在肝癌组这三个指标都显著高于非癌组,有助于肝癌的诊断.近、远癌肝和肝硬变的2cDI和MI与正常肝之间无显著差异,提示近、远癌肝和肝硬变的增生程度未发生质的变化,而5cER却显著高于正常肝,表明这些部位的异倍体细胞数已较正常肝显著增多.

兔眼辐射损伤后角膜和晶体上皮细胞DNA含量的定量分析

利用改良Feulgen染色和图像分析技术对不同剂量6 0 Coγ射线 (0、 10、 2 0和 30Gy)和照后不同时间 (3、 15天和 1、 3、 6个月 )的兔眼角膜和晶体上皮细胞的DNA含量进行了定量分析。结果表明 ,各剂量组DNA含量的MOD和IOD值降低 ,与对照组相比均有明显差异 (p<0 0 1) ,提示辐射能引起角膜及晶体上皮细胞核中DNA含量发生规律性变化 ,因此角膜及晶体上皮细胞DNA含量测定可以作为眼辐射损伤的指标之一 ,为其诊断提供实验依据。

辐射后兔晶体上皮细胞酸性磷酸酯酶的定量分析

目的 研究电离辐射对离体培养的兔晶体上皮细胞中酸性磷酸酯酶的影响。方法 用6 0Coγ线单次照射培养的第三代兔晶体上皮细胞 ,经ACP细胞化学方法染色后 ,用图像分析技术对其进行定量分析。结果 1、晶体上皮细胞于培养后 3天可见有单个细胞从晶体上皮长出 ,至培养第三代的细胞经 30Gy6 0 Coγ线照射后 ,细胞生长速度变慢 ,细胞形态不规则。照射后ACP呈强阳性表达 ,照后 7天更为明显。电镜观察可见 ,晶体上皮细胞核仁肿胀 ,染色质稀少 ,内质网扩张 ,线粒体萎缩。溶酶体膜破裂 ,随着照后时间延长 ,病变更为明显。 2、定量结果显示 :各剂量组在照后3和 7天 ,ACP的面积、平均光密度、积分光密度均显著高于对照组 (P <0 .0 0 1) ,其中 7天各指标升高更为明显 ,此结果与电镜所见相一致。结果提示 ,电离辐射对细胞溶酶体膜造成损伤是ACP活力改变可能的机理 ,而后者可能是导致晶体上皮损伤和死亡的原因之一。

兔角膜上皮细胞培养方法的建立及^(60)Coγ射线照射后的形态定量学研究

建立角膜上皮细胞培养的方法，并观察电离辐射照射后的形态计量改变。用角膜组织块培养原代细胞并传至3代，以10、20、30和50Gy ^(60)Coγ射线对离体细胞样品进行照射，观察照后不同时间其形态学改变，并用图像分析仪对细胞核、细胞浆的面积及核浆比进行定量分析。发现正常的角膜上皮细胞呈多角形或棱形，胞核位于细胞正中或偏中；照射后细胞胞核、胞浆明显增大，胞质内可见空泡，界限不清，核空泡化，核膜破裂，核浓缩、碎裂等。形态计量结果证明照后细胞核与细胞浆明显增大(p＜0.01），其核浆比随照后时间的延长而减小(p＜0.01)，均以20～30Gy组最为明显，表明照射引起胞浆的改变(肿胀)比核更明显。本研究结果为进一步研究角膜上皮细胞的照射效应提供了基础。

^(60)Co γ 线照射大鼠肥大细胞的定量分析

用新建立的阿里新蓝－番红花红染色结合图像分析，观察了正常和６０Ｃｏγ线照射大鼠肥大细胞（ＭＣ）数量和定量参数的改变，发现：（１）正常大鼠皮肤组织ＭＣ数量最多，胞体较大，胞浆颗粒密度和数量均高于肝脏；胃组织ＭＣ数量最少，胞体介于皮肤和肝脏之间，然而其颗粒密度最高，颗粒数量仅次于皮肤；肝脏ＭＣ数量居中，胞体较小，其颗粒密度和数量均低于皮肤和胃组织。（２）照射后各组织ＭＣ数量出现一致增加，其颗粒密度和数量也出现规律性变化：如照后３和９个月，皮肤和肝脏ＭＣ颗粒密度和数量均明显高于对照组，提示此时期激活的ＭＣ具有旺盛的合成和释放颗粒的能力；而在照后６和９个月，颗粒密度和数量均出现降低，推测此时期可能为颗粒合成低峰期。胃组织在照后３－９个月，其颗粒密度和数量均持续降低，表明胃组织ＭＣ释放颗粒的形式及合成颗粒的能力均不同于皮肤和肝脏。上述定量分析数据对于进一步探讨ＭＣ辐射损伤特点及其参与放射性器官纤维化形成的机理均具有重要意义。

渔区年轻人主动脉蛋白聚糖和嗜苏丹病变的定量分析

本文对渔区３６例意外死亡的年轻人（１５～３９岁）新鲜（死后２４ｈ内）主动脉进行了蛋白聚糖和嗜苏丹病变定量分析，同时与以往报道的南宁和北京人主动脉的蛋白聚糖和嗜苏丹病变测定结果进行比较。结果是：①蛋白聚糖总量２１１４±５８４（μｇ糖醛酸／ｇ内中膜湿重，下同）；硫酸乙酰肝素－蛋白聚糖４８１±１２７，占蛋白聚糖总量的２３．１％，硫酸软骨素－蛋白聚糖１００４±３８６，占４６．７％；硫酸皮肤素－硫酸软骨素－蛋白聚糖６２８±１９５，占３０．２％；（２）主动脉内膜嗜苏丹病变测试结果明显好于南宁，更好于北京。