为探究鸭肠炎病毒(DEV)感染后雏鸭脾脏差异代谢物的变化,本研究选取41日龄健康绿壳蛋鸭,随机分为实验组(TD)和对照组(CK),实验组鸭经腿部肌肉接种DEV病毒液(0.2 m L/只,3.16×10^(9)TCID_(50)/0.1 m L),对照组注射等体积灭菌生理盐...为探究鸭肠炎病毒(DEV)感染后雏鸭脾脏差异代谢物的变化,本研究选取41日龄健康绿壳蛋鸭,随机分为实验组(TD)和对照组(CK),实验组鸭经腿部肌肉接种DEV病毒液(0.2 m L/只,3.16×10^(9)TCID_(50)/0.1 m L),对照组注射等体积灭菌生理盐水。于接种后66 h、90 h和114 h时剖杀各组鸭,无菌采集各组鸭脾脏组织样品采用PCR检测病原核酸,观察各组鸭各剖检病变,制备各组鸭脾脏组织切片观察其病理学变化。结果显示,TD组鸭脾脏样品经PCR扩增出DEV特异性DNA片段,而CK组未扩增到该条带;剖检病变观察可见TD组鸭脾脏肿大,呈斑驳状,被膜下有出血点;脾脏组织病变观察可见脾窦内充血,淋巴细胞数量减少,而CK组鸭脾脏无明显病变,确定DEV感染鸭模型建立。采用液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术检测实验组和对照组鸭脾脏的代谢组学,筛选并分析各组鸭潜在的差异代谢物及相关信号通路。结果显示,与CK组相比,TD组鸭脾脏在感染66 h、90 h和114 h时的差异代谢物质分别有38、64、71种,主要为花生四烯酸乙醇胺、γ-亚麻酸、吲哚-3-乙酸、二十二碳六烯酸、赖氨酸、前列腺素e3、马L-色氨酸、L-苯丙氨酸等;参与的代谢通路主要是色氨酸代谢、苯丙氨酸代谢、组氨酸代谢、酪氨酸代谢、氨基酸的生物合成、细胞色素P450对外源物质的代谢、氨酰t RNA的生物合成等,其中以花生四烯酸乙醇胺和色氨酸代谢为主的差异代谢物和代谢通路与鸭的免疫应答和炎症反应有关。上述结果表明,花生四烯酸乙醇胺和色氨酸可作为DEV感染鸭的生物标志物,DEV感染可能是通过色氨酸代谢通路引起鸭的炎症反应和免疫应答。本实验为进一步研究DEV的致病机制提供参考。展开更多
旨在探讨黄连防治鸭病毒性肠炎(duck viral enteritis,DVE)的作用机制,本研究首先应用中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine System Pharmacology Analysis Platform,TCMSP)筛选黄连活性成分及作用靶点,GeneCards数据...旨在探讨黄连防治鸭病毒性肠炎(duck viral enteritis,DVE)的作用机制,本研究首先应用中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine System Pharmacology Analysis Platform,TCMSP)筛选黄连活性成分及作用靶点,GeneCards数据库分析DVE相关靶点,Venny和Cytoscape3.7.2软件绘制黄连与DVE交集靶点及构建“药物-成分-疾病-靶点”网络,利用STRING数据库建立蛋白相互作用网络(protein interaction network,PPI),借助DAVID数据库进行靶点GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,然后分正常对照组、病毒感染组和黄连防治组进行动物干预试验,采集组织样本进行病理组织学观察和相关细胞因子测定,结果表明:筛选出黄连14个活性成分和212个作用靶点,其中,与DVE交集的靶点25个,涉及RNA聚合酶Ⅱ启动子转录、序列特异性DNA结合转录因子活性、免疫应答、炎症反应和细胞凋亡等生物学过程,富集在Toll样受体信号通路、炎症性肠病、细胞因子-细胞因子受体相互作用、单纯疱疹病毒感染等信号通路,核心靶点是IL-6、IL-10和STAT1;病毒感染组鸭肝、脾和十二指肠发生不同程度的病理损伤,且这些组织中IL-6含量较正常对照组鸭显著提升(P≤0.05),IL-10和STAT1含量显著降低(P≤0.05),而黄连防治组鸭肝、脾和十二指肠组织病理损伤明显减轻,IL-6、IL-10和SYAT1含量趋于正常水平。由此可见,黄连能有效缓解鸭病毒性肠炎所致的鸭机体组织病理损伤,其作用机制涉及到多种炎症反应信号通路。展开更多
文摘旨在探讨黄连防治鸭病毒性肠炎(duck viral enteritis,DVE)的作用机制,本研究首先应用中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine System Pharmacology Analysis Platform,TCMSP)筛选黄连活性成分及作用靶点,GeneCards数据库分析DVE相关靶点,Venny和Cytoscape3.7.2软件绘制黄连与DVE交集靶点及构建“药物-成分-疾病-靶点”网络,利用STRING数据库建立蛋白相互作用网络(protein interaction network,PPI),借助DAVID数据库进行靶点GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,然后分正常对照组、病毒感染组和黄连防治组进行动物干预试验,采集组织样本进行病理组织学观察和相关细胞因子测定,结果表明:筛选出黄连14个活性成分和212个作用靶点,其中,与DVE交集的靶点25个,涉及RNA聚合酶Ⅱ启动子转录、序列特异性DNA结合转录因子活性、免疫应答、炎症反应和细胞凋亡等生物学过程,富集在Toll样受体信号通路、炎症性肠病、细胞因子-细胞因子受体相互作用、单纯疱疹病毒感染等信号通路,核心靶点是IL-6、IL-10和STAT1;病毒感染组鸭肝、脾和十二指肠发生不同程度的病理损伤,且这些组织中IL-6含量较正常对照组鸭显著提升(P≤0.05),IL-10和STAT1含量显著降低(P≤0.05),而黄连防治组鸭肝、脾和十二指肠组织病理损伤明显减轻,IL-6、IL-10和SYAT1含量趋于正常水平。由此可见,黄连能有效缓解鸭病毒性肠炎所致的鸭机体组织病理损伤,其作用机制涉及到多种炎症反应信号通路。