HPLC图谱研究大黄“炒炭存性”

目的建立大黄HPLC指纹图谱,并根据主要成分峰面积的变化,分析不同炮制时间对大黄炭饮片质量的影响。方法采用Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为280 nm,柱温为35℃,建立HPLC指纹图谱;采用“中药色谱指纹相似度评价系统(2012版)”对不同产地的大黄样品图谱进行处理,并对不同炮制时间的大黄炭样品进行HPLC图谱的分析与对比。结果建立的大黄HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,通过与对照品比对,指认了8个成分,分别为没食子酸、儿茶素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚和5-羟甲基糠醛;同时,通过HPLC色谱图的比对,发现了大黄炭生成了5个新成分,发现了大黄炭不同炮制时间,各成分的变化趋势。结论建立的大黄HPLC指纹图谱方法重现性好,稳定可行;大黄的“炒炭存性”HPLC色谱图研究,可为大黄炭饮片质量控制和评价提供参考。

吉兰-巴雷综合征中枢神经系统病理改变

目的 观察吉兰－巴雷综合征（Ｇｕｉｌｌａｉｎ－Ｂａｒｒ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＧＢＳ）中枢神经系统病理改变。方法２２例病人，其中全解８例，脑、脊髓、坐骨神经局解１４例。常规取块，光镜观察。结果①３例脑表静脉充盈，脑回变宽，脑沟变窄和轻度杭大孔疝；②大脑神经节细胞多呈缺血性改变，海马锥体细胞轻微脱落，运动神经细胞核染色质溶解。延髓、脑桥有轻微水肿。８例于延髓、脑桥小血管周围有淋巴细胞浸润，２例在脑桥与额叶白质处有灶性脱髓鞘。部分小脑浦肯野细胞脱落，１例于小脑分子层有数处以小胶质细胞为主的小胶质结节；③１６例脊髓前角细胞肿胀，染色质呈中心性溶解，核偏位，以颈、腰段改变最明显。在胞浆内可有空泡形成，伴淋巴细胞浸润；④周围神经：２０例以节段性脱髓鞘和淋巴细胞浸润为主要改变，另有２例轴索改变较重，肿胀断裂，髓球形成等，疑为急性炎性轴索型神经根神经病。结论①脑干和脊髓内的淋巴细胞浸润，可视为周围神经病理改变的继续和扩延；②胶质结节的发现提示病人有嗜神经病毒感染的可能；③大脑、脑干灶性脱髓鞘，表明ＧＢＳ可以合并中枢神经系统脱髓鞘。

人朊病毒病的临床、病理及动物传递的实验研究

根据本文报告经病理证实的人朊病毒病１４例。Ｃｒｅｕｔｚｆｅｌｄｔ－Ｊａｋｏｂ氏病（ＣＪＤ）９例、Ｇｅｒｓｔｍａｎｎ－Ｓｔｒａｕｓｓｌｅｒ－Ｓｃｈｅｉｎｋｅｒ氏综合（ＧＳＳ）５例。５例免疫组化染色阳性。３例ＣＪＤ脑匀浆进行Ｃ５７ＢＬ／６ｃｌａ、ＢＱ１ｂ／ｃ及ｗｉｓｔｅｒ鼠脑内接种．１例于第二代发病，余为第三代发病。资料提示：１．国人ＣＪＤ相对发病较多；二、国内确有ＧＳＳ值得注意；三、免疫组化相当敏感；四、ＣＪＤ脑活检组织可成功地进行实验的动物传递。

HPLC法同时测定白英叶中绿原酸、咖啡酸及芦丁的含量

目的:建立HPLC法同时测定白英叶中绿原酸、咖啡酸及芦丁含量的方法。方法:采用HPLC法,Angilent ZorbaxODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱前加保护柱;流动相为乙腈-1%冰醋酸溶液,梯度洗脱;流速:0.6 ml·min^(-1);柱温:25℃;检测波长327 nm。结果:绿原酸质量浓度在2.16～43.20μg.·ml^(-1)(r=0.999 5)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.05%,RSD=1.29%;咖啡酸质量浓度在2.15～43.04μg·ml^(-1)(r=0.999 8)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为100.04%,RSD=1.65%;芦丁质量浓度在5.24～104.74μg·ml^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率99.60%,RSD=1.74%。结论:该方法准确、重复性良好,能同时测定白英叶中的3种有效成分,可用于白英药材及饮片的质量控制。

HPLC法测定人参芦中人参皂苷Rb_1、Rg_1、Re的含量

目的:建立人参芦中人参皂苷Rb_1、Rg_1和Re的含量测定HPLC方法。方法:Agilent Zorbax ODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱前加保护柱,检测波长为203 nm;流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速:1.0ml·min^(-1);柱温:27℃;结果:结果表明人参皂苷Rb_1在1.0～10.1μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 8;平均回收率为99.7%,RSD=1.96%(n=5);人参皂苷Rg_1在1.0～10.1μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 7,平均回收率为99.9%,RSD=1.54%(n=5);人参皂苷Re在0.69～6.90μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 4,平均回收率为99.5%,RSD=1.58%(n=5)。结论:该法简便、准确,可作为人参芦的质量控制。

大脑动脉环前部破裂动脉瘤的病理研究

目的研究颅内动脉瘤破裂病理改变与临床关系.方法对12例颅内动脉瘤的部位、大小、破口、瘤壁修补、瘤内血栓形成、脑室内积血、脑组织梗死等进行详细的病理学研究.结果12例动脉瘤均位于大脑动脉环前部;16 h以内死亡者目视能见到动脉瘤顶部破口;破裂次数越多,瘤体越大且不规则;破裂动脉瘤修复初期以纤维蛋白为主,间有少许淋巴细胞和红细胞,2～3周后则以胶原纤维为主,辅以新生的毛细血管;12例中5例伴脑室内积血,破入途径不同,脑室积血表现也不一样;3例颈颅内动脉瘤内血栓形成,波及大脑中动脉主干伴发脑梗死.结论破裂的动脉瘤组织学修复需要一定的过程,早期并不牢固.预防再破裂是治疗原则之一;脑梗死的发生机制除迟发性脑血管痉挛外,颈内动脉瘤内血栓形成是常见原因之一;脑室内积血是蛛网膜下腔出血早期的并发症,临床宜密切观察,适时考虑脑室外引流.

颅脑眼手术后的Creutzfeldt-Jakob病

目的 探讨医源性Creutzfeldt Jakob病 (CJD)的发病与手术间隔时间、临床表现、基因表达、异常朊蛋白 (prionprotein ,PrP)沉积和实验动物传递。方法 颅脑眼手术后 1～ 4年发生肌阵挛、痴呆并经脑活检证实的 3例CJD病人 ,2例行PrP免疫组化染色 ,1例行PrP基因检测和实验动物传递。结果 2例脑内发现了异常PrP沉积 ,1例PrP基因密码子 12 9为甲硫氨酸 ,缬氨酸杂合子型 ,实验鼠传递成功。结论 颅脑手术后CJD ,其潜伏期明显短于眼部手术 ,PrP沉积均为突触型 ,即使 12 9M/V多态性的脑组织匀浆 ,通过昆明鼠传递也能获得成功。医疗实践中宜警惕本组疾病 ,防止医源性传播。

白英总生物碱的抗炎活性研究

目的:观察白英总生物碱的抗炎活性。方法:培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用200μmol·L^(-1)双氧水(H_2O_2)损伤细胞;培养小鼠单核/巨噬细胞(RAW 264.7),用脂多糖(LPS)诱导;抽签法随机分成正常组、模型组、阳性对照组、白英总生物碱低、中、高剂量组。给药后,继续培养,应用CCK-8法观察细胞存活率;饲养SD大鼠,抽签法随机分为正常组、模型组、阳性对照组、白英总生物碱低、中、高剂量组,观察白英总生物碱对角叉菜胶诱导大鼠急性踝关节肿胀度的影响,测定前列腺素E2(PGE_2)、环氧化物水解酶-2(COX-2)含量。结果:白英总生物碱中剂量对H_2O_2损伤的HUVEC细胞的影响以及高剂量组对LPS诱导的巨噬细胞RAW 264.7的影响,均和阳性对照组相当,差异无统计学意义(P>0.05);中、高浓度白英总生物碱能够明显降低大鼠急性踝关节肿胀度,降低大鼠足趾渗出液中PGE2、血清中COX-2含量,与模型组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:白英总生物碱具有明显的抗炎活性,有必要进一步深入研究其药效及作用机制。

灵丹片中灵芝多糖的含量测定

目的建立灵丹片中控制多糖含量的质检方法。方法采用紫外分光光度法在625 nm处测定灵丹片中多糖含量。结果测量多糖平均回收率100.15%,RSD=1.053%,灵丹片中多糖含量各批含量不一。结论该方法简便易行,准确精密,尤其适用于对该产品的快速分析。

Gerstmann—Strussler综合征——一个家系两代5例临床、病理、免疫组化及动物接种传递的实验研究

经过连续4年观察,发现和证实一个家系两代5例Gerstmann—strāussler综合征。发病年龄17～26岁。首发症状为小脑性共济失调,伴下肢肌萎缩。CT示小脑萎缩。4例发病后4～17年死亡。经小脑活体组织检查、免疫组织化学染色及实验室内动物传递等研究,证明国内确有此病,应予注意。

国人Creutzfeldt-Jakob病的可能危险因素

目的 研究国人Creutzfeldt-Jakob病(CJD)的可能危险因素。方法 对30例已确诊的CJD进行地域、职业、颅脑外伤与手术、角膜手术、脑深部电极检查、输血及血液制品、生长激素注射、饮食习惯、遗传以及家族患神经系统其他变性疾病等10项回顾性研究。结果 (1)国内未发现硬膜、角膜移植、生长激素注射、脑深部电极检查所致的CJD;(2)未发现此病与职业相关以及接触牛、羊肉较多的人易患CJD;(3)未发现CJD有高发区;(4)白内障手术、颅脑外伤及开颅手术、遗传及家族中有患神经系统其他变性疾病者,可能为国人CJD的危险因素。结论 国人CJD的可能危险因素,既不同于西方,也有别于日本,充分认识这些事实,对减少医源性传播有积极意义。

Creutzfeldt－Jakob病的免疫组织化学研究

４例Ｃｒｅｕｔｚｆｅｌｄｔ－Ｊａｋｏｂ病（ＣＪＤ）的新鲜脑组织石腊切片用改进的免疫组织化学染色，均呈突触型阳性。不仅证实诊断正确，而且为研究国人ＣＪＤ的分子生物学与临床病理的联系提供了依据。

灵芝及其制剂中灵芝多糖的提取与含量测定的研究概况

目的:介绍近10年来灵芝及其制剂中灵芝多糖的提取和含量测定的方法。方法:通过查阅相关文献,综述其提取和含量测定的研究概况。结果:灵芝多糖的提取以水提为主,并可在提取前对灵芝子实体采取预处理,多糖的含量测定方法主要有可见紫外分光光度计法和滴定法如姆松—华尔格法。结论:灵芝多糖的水提取和含量测定方法简单、可行,但控制灵芝及其制剂的质量的方法尚有待进一步探索与研究。

HPLC法同时测定大黄炭中没食子酸和5-羟甲基糠醛的含量

目的:建立一种同时测定大黄炭中没食子酸和5-羟甲基糠醛含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:Agilent Zorbax ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(8∶92),流速:0.8 ml·min^-1,柱温:25℃,检测波长273 nm。结果:没食子酸、5-羟甲基糠醛分别在5.48~54.84μg·ml^-1(r=0.999 8)、6.96~69.58μg·ml^-1(r=0.999 8)浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为101.54%(RSD=0.48%)、102.79%(RSD=1.07%)(n=6)。5-羟甲基糠醛含量在大黄饮片炮制20 min达到峰值,和中药专家传统"炒炭存性"经验判断的时间节点一致。结论:该方法简便、灵敏度高、重复性好,能同时测定大黄炭中2种关键成分的含量,是用于大黄炭饮片质量控制的一种可靠方法。

Creutzfeldt-Jakob病的磁共振诊断

目的 探讨头部磁共振成像对Ｃｒｅｕｔｚｆｅｌｄｔ－Ｊａｋｏｂ病（ＣＪＤ）的诊断价值。方法 ２例均经脑活检、免疫组化及实验鼠传递证实，分别于发病后２、１２个月进行头部磁共振检查。结果 ２ 例双侧尾核、壳核于Ｔ２加权像均呈对称性均质高信号。结论 头部磁共振成像的异常信号对ＣＪＤ诊断虽非完全特异，但结合临床具有一定价值。

成人肾上腺脑白质营养不良

报道２例经病理证实的成人肾上腺脑白质营养不良病例。患者均呈进行性痴呆，皮质盲，去皮层状态。分别于病后６个月，１８个月死亡。例１行脑组织极长链脂肪酸含量及其比值测定。结果明显高于对照组，从而肯定了诊断。

蛛网膜下腔出血丘脑下部的病理和临床(摘要)

本文观察23例蛛网膜下腔出血丘脑下部的病理。主要改变:1.漏斗、乳头体被血液覆盖, 2.漏斗部膨隆;3.第三脑室积血扩张,4.并发脑内出血或梗塞时,第三脑室往往向对侧移位;5.乳头体向下方移位;6.丘脑下部组织水肿、血管充盈、神经核团细胞坏变,偶可见小出血或小梗塞灶。

对Creutzfeldt-Jakob病的思考与展望

由于疯牛病与Creutzfeldt-Jakob病(CJD)关系密切而受到全世界广泛关注.1986年英国首次发生疯牛病,随后世界各国相继采取了一系列预防控制措施,但未能阻止疯牛病的传播;1996年传播到法国、爱尔兰、瑞士、德国、葡萄牙、意大利、阿曼、丹麦、荷兰、比利时等国家,2000年底德国、芬兰、西班牙、希腊4国几乎同时发现疯牛病,再次掀起悍然大波.2001年以后东欧的捷克、斯洛伐克、波兰、亚洲的日本也发现疯牛病,2003年加拿大本土发生疯牛病.此外,阿曼、福兰克群岛也从进口牛中检出疯牛病.2004年1月6日加拿大和美国专家共同宣布,基因检测结果表明2003年12月23日在美国华盛顿洲发现的疯牛病病牛来自加拿大.由此可见,疯牛病已经从西欧传到东欧、亚洲和北美洲,似乎正跨越洲际不断蔓延,从地理分布上已经逼近中国.

灵丹片提取工艺优选

目的:优选灵丹片中丹参、灵芝的提取工艺。方法:采用正交设计,以灵芝多糖和丹参酮(?)A的含量为指标。结果:优选的灵芝提取工艺为10倍量水,每次煎煮2．5 h,煎煮3次。丹参优化提取工艺为95％乙醇提取2次,每次1．5 h,每次用8倍量溶剂。结论:该优选提取工艺合理。

家族性Creutzfeldt-Jakob病

目的确定家族性Creutzfeldt-Jakob病(CJD)的临床特点并探讨其可能的发病机制。方法对一个CJD家系进行系谱调查,并采用蛋白捕获法进行脑脊液14-3-3蛋白定量;应用PCR方法,结合DNA测序技术,检测朊蛋白(PrP)基因类型。结果(1)两代4例的发病年龄早于散发性CJD,而且有早发的趋势;(2)先证者脑脊液14-3-3蛋白为125ng/ml,高出截点13.9倍;(3)先证者PRNP第788碱基和789碱基之间插入1个碱基A,致使PRNP第231位点发生插入突变;(4)患者弟弟及其女儿未发现有PrP基因突变。结论先证者为PRNP第231位点插入突变致家族性CJD,其临床表型与散发性CJD无明显不同,但发病年龄早于散发性CJD,同一家系患者死于同一年龄段。