胚胎植入前遗传学检测技术的临床应用和发展前景

植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)是辅助生殖与遗传学诊断技术相结合的一种胚胎检测技术,指对植入前的胚胎进行染色体或者特定基因检测,使得面临较高遗传风险妊娠的夫妇在选择遗传学正常的胚胎植入子宫后,可以降低自然流产的风险或者避免遗传性出生缺陷。相比于传统的产前诊断技术,PGT技术可以避免因发现胎儿遗传异常后不得不面临的选择性流产的身心痛苦,越来越成为人们首先考虑的生殖干预方式。

北京城市副中心绿色建筑高质量发展政策保障研究

为推动绿色建筑高质量发展,我国陆续出台了许多相关政策,北京城市副中心(以下简称副中心)作为先行先试的示范区,开展了系统的政策保障工作。本文分析了副中心绿色建筑政策现状、政策性缺口和未来挑战,探究了政策经验和可行性政策工具,研究和借鉴国内外政策经验并探究政策目标和发展方向,在此基础上构建保障政策框架,以期为绿色建筑高质量发展提供良好的政策导向。

生长激素预处理应用于首次促排卵周期不理想患者的临床效果

目的观察生长激素(GH)预处理应用于首次促排卵周期结局不理想患者的临床效果。方法回顾性分析2016年1月1日至2021年4月30日期间在中信湘雅生殖与遗传专科医院首次行IVF/ICSI助孕,且至少包含1次胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)周期患者的临床资料,共91例患者。所有患者首个促排卵周期结局不理想,于下一个月经周期前的6~8周使用GH预处理,连续使用至HCG日。采用自身对照的方法,比较前后两次助孕的促排卵情况及胚胎发育情况。结果整体分析发现,给予GH预处理后,全部91例患者本周期的获卵数、MⅡ卵数、双原核(2PN)卵数、囊胚数、优质囊胚数、整倍体囊胚数、囊胚形成率及整倍体囊胚率均显著高于上一周期(P<0.05)。对其中41例前后周期均采用拮抗剂方案促排卵患者的临床资料进行比较发现,本周期的囊胚数、优质囊胚数、整倍体囊胚数、囊胚形成率及整倍体囊胚率均显著高于上一周期(P<0.05)。将拮抗剂方案促排卵患者按照不同年龄进行分层分析发现,≥38岁组和<38岁组中,本周期的囊胚数及囊胚形成率均显著高于上一周期(P<0.05);并将≥35岁患者进一步细分为≥40岁组和35岁≤年龄<40岁组,结果发现≥40岁组中前后周期的促排卵及胚胎发育情况比较均无显著性差异(P>0.05),而35岁≤年龄<40岁组中本周期的囊胚数、优质囊胚数、整倍体囊胚数、囊胚形成率及整倍体囊胚率均显著高于上一周期(P<0.05)。又按照抗苗勒管激素(AMH)水平不同进行分层分析发现,AMH>1.2 ng/ml组中本周期的囊胚数、优质囊胚数、整倍体囊胚数、囊胚形成率及整倍体囊胚率均显著高于上一周期(P<0.05);AMH≤1.2 ng/ml组中本周期的2PN卵数、囊胚数显著高于上一周期(P<0.05)。结论对于IVF/ICSI周期中无获卵/无囊胚形成或PGT-A周期结局不好的<40岁、AMH>1.2 ng/ml的患者,在促排卵过程中添加GH预处理可以明显改善胚胎发育情况及胚胎质量。

一例X染色体结构重排导致DMD疾病

假肥大型肌营养不良(Duchenne/Becker muscular dystrophy,DMD/BMD)是一种最常见的进行性肌营养不良疾病,呈X-连锁隐性遗传,主要由DMD基因的缺失、重复及点突变所致,极少数病例是由于染色体结构重排破坏了DMD基因而引起疾病的发生。本文报告了1例经多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)和下一代测序检测后原因未明的、具有典型症状的DMD患者。采用核型分析、FISH分析及三代测序、Sanger测序综合分析发现,患者存在母源性的X染色体臂间倒位(Chr.X:g.[31939463–31939465del;31939466–131765063 inv;131765064–131765067del])半合子变异。由于该变异破坏了DMD基因和HS6ST2基因,因此推测该变异是患者发病的遗传学病因。患者表现肌无力等典型的DMD症状,没有明显的Paganini-Miozzo综合征相关症状。本病例的明确诊断,提示结构重排破坏DMD基因也是导致DMD重要原因之一;常规遗传学检测阴性的患者应考虑核型分析、FISH验证等结构重排变异检测技术,通过三代测序技术能确定大概的重排断点位置,Sanger测序可明确断点区域序列。本病例报告通过明确的遗传学诊断为该患者所在家庭进行生殖干预、降低再生育风险提供了诊疗基础。

早期胚胎极性建立及对谱系分化的影响

极性建立是影响早期胚胎发育的关键因素之一。极性建立起始于8细胞胚胎的肌球蛋白磷酸化,磷酸化激活肌动蛋白导致其启动收缩力。随后,肌动蛋白发生重组在每个卵裂球的非接触表面形成富含微绒毛的顶端结构域,并在极性蛋白复合物等的共同作用下形成标志着顶端结构域成熟的肌动球蛋白环。从极性建立的过程可知,顶端结构域的形成受到肌动蛋白相关蛋白以及极性蛋白复合物的影响,并且部分合子基因组激活(zygote genome activation,ZGA)和谱系分化特异性基因也会调控极性建立。在早期胚胎发育过程中,极性建立是第一次细胞谱系分化的基础。它通过影响不对称细胞分裂、谱系分化因子的不对称定位以及Hippo信号通路的活性来调控谱系分离和形态发生。本文对哺乳动物早期胚胎极性建立及对谱系分化影响的相关研究进行了梳理和总结,并讨论了目前已有研究在调控机制和物种方面的不足,以期为阐明早期胚胎极性建立提供线索与系统性视角。

中国广核集团核电站在役检查技术研发中心2023年度研究进展

中国广核集团核电站在役检查技术研发中心(以下简称“集团研发中心”)2023年度在无损检测技术理论研究、无损检测技术开发、智能检测装备研发、无损检测仪器等方面开展多项研发工作。集团研发中心在蒸汽发生器传热管胀管过渡段旋转探头双推技术、蒸汽发生器传热管氦检漏技术、反应堆压力容器相控阵检测技术、控制棒驱动机构热套管测量系统、控制棒束组件检查设备、基于深度学习的核电站射线自动评片系统等研发工作上取得了许多进展。

溶剂发泡对天然气净化装置的影响分析

甲基二乙醇胺(MDEA)是天然气净化工业中常用的脱硫剂,溶剂发泡常见于该类脱硫剂,会影响装置平稳生产,严重时造成冲塔事故。分析了溶剂发泡原因,对装置的影响及原理,并对消泡后的操作给出建议。结果表明:溶剂发泡主要是泡沫的累积,在体系中泡沫生成容易,生成速度大于消泡速度;发泡后,溶剂对羰基硫的吸收能力增强,湿气中羰基硫质量分数下降29.6%,闪蒸罐液位会不断上涨,再生塔液位下降,塔顶温度平均上升3.14℃,回流量增加436kg·h^(-1);消泡后装置短时波动较大,应注意液位控制,根据酸性气量调整克劳斯炉配风。

干细胞概述

干细胞是存在于胚胎和成体中的一类特殊细胞,它能长期地自我更新,在特定的条件下具有分化形成多种终末细胞的能力,不同来源的干细胞分化潜能各异。从早期胚胎内细胞团分离的胚胎干细胞能分化形成个体所有的细胞类型,并具有在体外无限增殖的能力,是最具有临床应用前景和研究价值的干细胞之一。在成体各种组织和器官中也存在成体干细胞,用于维持机体结构和功能的稳态。近期有关成体干细胞可塑性的研究和成体组织中多能干细胞存在的证据扩大了人们对成体干细胞分化潜能的认识。干细胞具有的多向分化潜能和自我更新能力使其成为未来再生医学的重要种子细胞,并成为研究人类早期胚层特化和器官形成、药物筛选以及基因治疗的最佳工具。

小鼠体外培养囊胚辅助孵化的初步研究

目的 :探索体外培养和辅助孵化技术对体外发育小鼠囊胚孵出率的影响。方法 :将昆明白种小鼠的 2～ 4-细胞胚于体外培养到囊胚 ,观察比较 :(1 )体外培养囊胚与体内发育囊胚的自然孵化率 ;(2 )体外培养囊胚经辅助孵化后与未行辅助孵化 (对照组 )的体外孵化率。结果 :(1 )体外培养囊胚与体内发育囊胚的自然孵化率分别为 75.4%和 96 .2 % ;有显著差异 (P<0 .0 0 1 )。 (2 )辅助孵化与对照组的体外孵化率分别为 97.7%和 74.0 % ,有明显差异 (P<0 .0 5)。结论 :体外培养对囊胚的孵化有不利影响 ;

单精子胞质内注射治疗严重男性不育和受精障碍102个周期的回顾性分析

回顾性分析从 1 998年 1月至 2 0 0 0年 1 2月在我室接受单精子显微授精治疗的共 1 0 2个周期。以 2 0 0 0年2月为界 ,随着显微操作技术 ,的改进和操作环境的改善 ,后阶段单精子显微注射的存活率 (90 6 % )、受精率 (73 3 % )、胚胎发育率 (97 3 % )较前阶段 (分别为 68 8% ,39 0 % ,78 7% )有显著提高。两阶段临床妊娠率分别为 41 3 %和2 1 4% 。

人类发育欠佳胚胎在卵裂期及囊胚期移植后的临床结局比较

目的比较分析人类体外受精后的发育欠佳胚胎,行卵裂期移植或囊胚培养后,哪一种策略更有利于改善患者的临床结局。方法患者入选标准:体外受精第3天(d3)所有胚胎均为发育欠佳胚胎(胚胎卵裂球数<6-细胞,或胚胎碎片为10%～20%)。将患者随机分为两组:卵裂期移植组(n=114)及囊胚培养组(n=106)。比较两组间的临床妊娠率、继续妊娠率及植入率。结果卵裂期移植组与囊胚培养组的移植周期临床妊娠率(38.6%vs 24.5%)、继续妊娠率(35.1%vs 24.5%)及植入率(24.5%vs 17.9%)差异均无统计学意义。由于囊胚培养组具有较高的周期取消率(53.8%),卵裂期移植组的取卵周期临床妊娠率显著高于囊胚培养组(38.6%vs 11.3%)。结论人类发育欠佳胚胎在卵裂期进行移植更加适合。

重度卵巢过度刺激综合征并发胸腹腔积液治疗的回顾性分析

目的:探讨体外受精-胚胎移植术(IVF-ET)后发生重度卵巢过度刺激综合征(OHSS)并发胸腹腔积液的有效治疗方法。方法:回顾性分析132例因IVF-ET术后发生重度OHSS患者的临床资料。分析比较3种不同的治疗方法:低分子右旋糖苷联合白蛋白保守治疗(I组,25例)、6%中分子羟乙基淀粉(维容)保守治疗(Ⅱ组,67例)和早期积极抽吸腹水治疗(Ⅲ组,40例)对控制OHSS并发胸腹水的治疗效果。结果:3组治疗后均能有效改善OHSS症状和各项血液生化指标,但是Ⅲ组的住院天数[(7.4±4.5)d]显著少于I组和Ⅱ组[(21.4±9.2)d和(15.6±6.7)d],治疗费用Ⅲ组[(2656.2±1882.8)元]也显著低于I组和Ⅱ组[(11937.6±7989.8)元和(5182.7±2991.7)元]。结论:尽早采用腹部B超引导下经腹壁放液术必要时结合维容扩容治疗OHSS是一种费用低,效果好的方法。

全胚冷冻后行FET避免IVF/ICSI—ET助孕治疗中、重度OHSS发生风险

目的比较对于体外受精/胞浆内单精子注射—胚胎移植(IVF/ICSI-ET)助孕后有OHSS高风险患者进行鲜胚移植或取消鲜胚移植行全胚冷冻、冻胚移植两种不同处理方式对助孕结局的影响。方法回顾性分析2010年1～12月在该院生殖中心接受IVF/ICSI-ET助孕存在OHSS发生高风险的共1 578例患者临床资料,比较行鲜胚移植或取消移植行全胚冷冻后冻胚移植(FET)两种不同处理方式所获得的妊娠结局及处理后OHSS发生率。结果 2010年鲜胚移植共计9 009周期,OHSS高风险患者共计1 578周期(E2≥4 000pg/mL或取卵数≥30个)。OHSS高风险患者进行鲜胚移植为1 284周期,其临床妊娠率为60.9%;全胚冻存294周期,行首次FET为250周期,临床妊娠率54.0%(P<0.05);两组的着床率分别为39.7%(1111/2 802)和35.7%(185/518),流产率分别为9.7%(76/782)和8.9%(12/135)。OHSS高风险患者进行鲜胚移植后发生重度OHSS共46周期,其发生率为3.6%(46/1 284),高于全胚冷冻组0.3%(1/294),亦高于全年度非OHSS高风险鲜胚移植患者的1.3%(100/7 725周期)(P<0.05)。结论 OHSS高风险患者进行全胚冷冻后冻胚移植首周期较鲜胚移植能有效避免重度OHSS的发生。

人类胚胎干细胞向造血细胞和内皮细胞诱导分化的初步研究

胚胎干(ES)细胞是一种能够自我更新、长期增殖并且具有多向分化潜能的干细胞。近年来的研究表明, 小鼠胚胎干细胞体外分化能够模拟体内造血发育的过程。为探讨诱导人类胚胎干细胞向造血细胞和内皮细胞的 分化的方法,将人类胚胎干细胞去饲养层,形成拟胚体(EB)培养3天后消化;采用基质细胞条件培养基联合细胞 因子的诱导体系,诱导8天后,种植到半固体培养基中培养7-14天。应用RT-PCR检测诱导细胞flk-1、BMI-1、scl、 Zeta-globin造血相关基因的表达;流式细胞术检测KDR、CD34等造血细胞表面抗原的表达;免疫组织化学检测集落 细胞的表面标记。结果表明:①半固体培养基中出现20-30个细胞组成的集落,集落细胞再种植仍然能够形成大 小相似的细胞集落;另外一些较大的细胞集落中CD45细胞呈阳性。②部分细胞贴壁生长形成内皮细胞样集落,Ⅷ 因子、KDR、UEA检测均为阳性。③在ES细胞内有少量flk-1、BMI-1表达,而scl、Zeta-globin基因不表达;自发分化 3天的EB可见flk-1、BMI-1表达上调;消化形成单细胞并诱导4天,检测到flk-1、BMI-1、scl、Zeta-globin基因的表 达,第8天仍然检测到flk-1、BMI-1、scl基因的表达,Zeta-globin基因不表达。④诱导8天的细胞中表达flk-1阳性细 胞的率为9.8％,CD34阳性细胞占总细胞量的16.8％。

Wnt3a和Activin A共同促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化

【目的】研究Wnt3a和ActivinA存限定性内胚层诱导中共同作用的最佳时间窗。【方法】在无饲养层体系培养的人胚胎于细胞中，加入25ng／mLWnt3a和100ng／mLActivinA，共同作用不同时间（1～4d），收集不同作用时间点（0，1，2，3，4，5d）细胞，对原条、内中胚层前体标记Brachyury及限定性内胚层标记Sox17分别进行免疫荧光染色，统计阳性细胞总数，计算阳性细胞率。以看家基阕β-actin作为对照，采用RTPCR方法对原肠作用基因（Goosecoid（GSC）、Mixll）及三胚层发育相关基因（内胚层基因Sox17、Foxa2，内中胚层前体基因Braarchyury，中胚层基因Flk-1，外胚层基闪Pax6，胚外内胚层基因Sox7、CDX2）的表达进行检测。【结果]Wnt3a与ActivinA共同作用1～4d，均能获得限定性内胚层细胞，其中二者共同作用1d分别能获得（78．9±7．3）％Brachyury阳性细胞和（85．2±3．8）％的Sox17阳性细胞。RTPCR结果显示，在Wnt3a与ActivinA共同作用下，原肠作用基因及三胚层发育相关基因表达的时间有差异。【结论】Wnt3a和ActivinA共同作用1d，是有效促进人胚胎干细胞向限定性内胚层细胞分化的最佳作用时间窗。

人类不成熟卵母细胞体外成熟影响的因素初探

为研究在自然月经周期中获得的人类不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体体外成熟培养条件 ,作者从手术切除的卵巢组织获取不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体 ,分别置于 90 % Ham' F-1 0 + 1 0 %灭活人血清 + FSH+ h CG(模拟卵泡液 )与 5 0 %Ham' F-1 0 + 5 0 %人类成熟卵泡液中培养 48h。结果显示 ,卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体在两种体外成熟培养基中培养 48h后 ,成熟率分别为 41 .8%和 2 1 .1 % ,两者之间存在统计学差异 (P<0 .0 5 )。作者还比较了在前一种培养基中卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体和裸卵的体外成熟率 ,分别为 41 .8%和 7.6% ,两者间存在统计学差异 (P<0 .0 0 5 )。将获取的不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体按供者年龄分成 2 5～ 3 5岁组和 3 6～46岁组 ,比较此两组卵母细胞在前一种培养基中成熟率 ,分别为 5 7.1 %和 2 5 .0 % ,两者间在统计学上有显著性差异 (P<0 .0 1 )。结果提示 :不成熟卵母细胞 -放射冠 -卵丘细胞复合体可在模拟卵泡液中培养成熟 ,优于 5 0 % Ham' F-1 0 + 5 0 %人类成熟卵泡液 ;卵丘细胞包裹对于卵母细胞体外成熟有重要作用 ;供卵者年龄可影响卵母细胞的体外成熟率。

黄河口耕地遥感动态监测及其生态环境安全分析

采用多时相陆地卫星TM数据,以分类后比较法和历史土地利用专题图支持下的目视检测方法进行黄河口耕地变化动态监测。建立了基于TM数字图像的耕地变化及其相关自然和人为因素变化的指标,对与耕地变化相关的自然环境要素变化及人为影响进行了分析。结果表明:从1987～1998年,垦利县耕地增减变化较大,面积减少了5321.8hm2,平均每年减少483.8hm2。耕地的变化反映出该区土壤盐渍化的加重和水源的匮乏,以及人为不良活动的影响。在此基础上提出了该区生态环境安全的对策措施。

卵母细胞体外培养时间对单精子胞浆内注射临床结局的影响

目的探索最适合的单精子胞浆内注射(ICSI)时机。方法根据从患者取卵结束到开始ICSI的时间(t),将患者分为3组:A组(2h≤t<4h,n=60),B组(4h≤t≤6h,n=85),C组(6h<t≤8h,n=62)。回顾性分析了卵母细胞体外培养时间对于ICSI患者的受精、胚胎发育及临床结局的影响。结果 B组及C组患者的临床妊娠率及植入率均显著高于A组。结论适度的卵母细胞体外培养时间(4～8h)有利于改善ICSI患者的临床结局。