调补心肾方通过活化PI3K/Akt/mTOR通路促进阿尔茨海默病5xFAD转基因小鼠突触可塑性相关蛋白的合成

目的探讨调补心肾方(党参、制首乌、枸杞子、黄芪等)对阿尔茨海默病5xFAD转基因小鼠突触可塑性的影响及机制。方法取5月龄雄性野生型(WT)小鼠和5xFAD转基因小鼠各18只,分别随机分为对照组(0.9%NaCl)、调补心肾方组(颗粒剂,4.18 g·kg^(-1))、安理申组(盐酸多奈哌齐,0.625 mg·kg^(-1)),每组6只。按照上述分组灌胃给药,每日1次,共60 d。采用透射电镜观察小鼠海马组织超微结构;Western Blot法检测小鼠皮层组织中Synaptophsin、PSD-95、p-NMDAR1、NMDAR1、p-CaMKⅡa、CaMKⅡa、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达水平。结果与WT对照组比较,5xFAD对照组小鼠海马CA1区突触的超微结构不规则,线粒体萎缩、减少,线粒体嵴断裂、消失,突触膜弯曲不规则,突触囊泡减少,突触后致密物(PDS)变薄甚至断裂;皮层组织中Synaptophsin、PSD-95、p-NMDAR1/NMDAR1、p-CaMKⅡa/CaMKⅡa、PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达均明显下调(P<0.05)。与5xFAD对照组相比较,5xFAD调补心肾方组小鼠海马CA1区突触的超微结构有明显变化,线粒体数量增加,突触囊泡增多,突触膜完整,突触后致密物有增厚现象;皮层组织中Synaptophsin、PSD-95、p-NMDAR1/NMDAR1、p-CaMKⅡa/CaMKⅡa、PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论调补心肾方可能通过活化PI3K/Akt/mTOR通路,促进突触可塑性相关蛋白合成,进而改善AD的认知功能障碍。

全细胞膜片钳技术在神经元钙通道药理研究中的应用

全细胞膜片钳技术是研究离子通道和药物对离子通道影响的最重要的技术之一,但是由于其对实验技术要求高,对实验标本制备和实验环境、实验用溶液等条件均有严格要求等原因致使其在实际运用中较为困难。本文报告了运用全细胞膜片钳技术进行神经元钙通道药理研究的一些经验。

中西医结合治疗帕金森病便秘32例

目的观察中西医结合治疗帕金森病便秘的疗效。方法按随机数字表法,治疗组32例用中西药治疗,对照组28例用西药治疗,4周为1个疗程。结果治疗组在便秘症状积分、排便困难程度、粪便软硬程度、排便频率、伴随症状、生存质量自评量表评分上优于对照组。结论中西医结合治疗帕金森病便秘疗效优于西药治疗。

磷脂酶C-三磷酸肌醇途径参与β-淀粉样肽(25-35)诱导的海马神经元[Ca^2＋]i的增加

目的探讨内质网(ER)钙库在β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导的细胞内钙超载中的作用。方法用钙高度特异性荧光探针Flou-3/AM负载海马神经元,进行荧光染色,利用激光扫描共焦显微镜观察在不同药物干预条件下海马神经元内游离钙离子荧光强度的变化。结果 2、10、20μmol/L各浓度组凝聚态Aβ25-35均增加了海马神经元胞内[Ca2+]i(n=5,P<0.05);三磷酸肌醇受体(IP3R)的特异性抑制剂2-APB明显地抑制了胞内[Ca2+]i的增加,蓝尼碱受体(RyR)的特异性抑制剂硝苯呋海因(dantrolene)却无法抑制。Aβ25-35作用1h后内质网钙容量即有明显下降,作用24h后降低更为明显。在无细胞外钙情况下,磷脂酶C(PLC)的抑制剂U73122部分抑制了Aβ25-35诱导的胞内[Ca2+]i的增加。结论凝聚态Aβ25-35可通过IP3途径产生,IP3作用于IP3R而引起内质网钙的释放,磷脂酶C的活化可能参与了上述过程。

从检测血中FT_3、FT_4、T、E_2及皮质醇等指标探讨寒证热证的本质

目的 :探讨内分泌激素FT3 、FT4 、T、E2 及皮质醇 (cortisol,CO)水平与中医寒证热证的相关规律。方法 :选实热、虚热、实寒、虚寒证患者 2 0 2例及健康对照组 5 0名 ,检测血中FT3 、FT4 、T、E2 、CO指标。结果 :(1)FT3 、FT4 数值热证高而寒证低 ,依次为虚热证组 >实热证组 >对照组 >实寒证组 >虚寒证组 ,提示热证基础代谢及氧消耗升高而寒证正相反。 (2 )CO值实证高而虚证低 ,依次为实寒证组 >实热证组 >对照组 >虚热证组 >虚寒证组 ,提示CO为形成虚实的因素之一而与寒热关系不显著。 (3)性激素T热证高而寒证低 ;E2 女性热证低而寒证高。提示T值高为形成热证的因素之一 ,E2 值高为形成女性寒证的因素之一。结论

人参皂苷Rb1可能通过CDK5途径减轻Aβ_(25-35)诱导的胎鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化

观察人参皂苷Rb1对Aβ25-35诱导的海马神经元tau蛋白过度磷酸化的影响,并探讨其对周期依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase 5,CDK5)及激动亚基p25/p35的可能作用。通过蛋白免疫印迹法和免疫细胞化学染色法检测胎鼠海马神经元tau蛋白在Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平,及CDK5的两个亚基cdk5和p25/p35的蛋白水平。20μmol.L-1凝聚态Aβ25-35作用于海马神经元12 h,可使海马神经元tau蛋白在Thr205、Ser396和Ser404位点的磷酸化水平增高,p25的数量增多,但并不影响cdk5亚基的表达。人参皂苷Rb1可减轻凝聚态Aβ25-35诱导的海马神经元tau蛋白的过度磷酸化,抑制p35的降解并减少海马神经元p25的生成。人参皂苷Rb1可能通过CDK5途径减轻Aβ25-35诱导的胎鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化。

赤芍801对大鼠脑缺血/再灌注损伤后脑源性神经营养因子表达的影响

目的:探讨赤芍801(propyl gallate,PG)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤后神经功能损伤、细胞凋亡及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)表达的影响。方法:线栓右侧大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)制成SD大鼠短暂局灶性脑缺血模型,实验大鼠随机分成:正常对照组、假手术组、模型组、溶媒组、PG组(分PG23.5、47、94μmol/kg3个亚组)等5组。采用Longa等评分法进行大鼠神经功能评分;TUNEL染色法观察缺血/再灌注不同时段(1、2、4、7d)模型鼠缺血区周边组织阳性神经元数量;免疫组织化学、蛋白免疫印迹法检测缺血/再灌注后不同时段各组缺血区周边组织BDNF的表达情况。结果:脑缺血/再灌注后1d,模型大鼠神经功能缺损评分、TUNEL阳性细胞数均达到高峰。与此相仿,该时段缺血周边区的BDNF表达亦达到高峰,此后逐渐下降。该时段TUNEL阳性细胞数和BDNF表达与其它各时段(2、4、7d)比较均有升高(P<0.01)。予上述不同剂量组的PG干预后,47、94μmol/kg组大鼠的神经功能缺损评分、TUNEL阳性细胞数均有明显下降,同时缺血周边区的BDNF表达有明显增加;并以94μmol/kg组为著。结论:脑缺血/再灌注后BDNF的早期表达增加可能对促进缺血周围区的损伤修复有重要作用;PG能有效减轻脑缺血/再灌注损伤后神经细胞凋亡,改善神经功能缺损症状,机制可能与其促进BDNF的表达有关。

元通胶囊治疗血管性痴呆的临床研究

目的:观察元通胶囊治疗血管性痴呆(VD)的临床疗效。方法:将83例VD患者按2:1比例随机分为两组。治疗组(54例)用元通胶囊,每次3粒,每日3次口服;对照组(29例)予喜得镇,每次2mg,每日3次口服,两组疗程均为2个月。结果:总有效率治疗组(92.6％)明显优于对照组(72.4％,P<0.01);在智能量表积分、生活自理能力积分、中医症状积分和实验室指标等方面,治疗组均优于对照组,两组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:元通胶囊为治疗血管性痴呆的有效药物。

补阳还五汤对脑梗塞患者胰岛素及纤溶活性的影响

为探讨补阳还五汤治疗脑梗塞的有关机制 ,临床观测 2 7例脑梗塞患者治疗前后神经功能缺损评分 ,胰岛素及纤溶活性等指标。结果 :以补阳还五汤治疗后 ,脑梗塞患者 ISI、SOD、GSH-Px、NO、t-PA明显升高 ,INS、MDA、ET、PAI明显降低 ,神经功能缺损程度明显减轻。结论 :补阳还五汤能有效地改善脑梗塞患者的神经功能缺损程度 ,减轻 IR状态 ,清除氧自由基 ,改善 VEC功能 ,调节 t-PA。

N-乙酰基半胱氨酸对Aβ_(25-35)活化calpain活性的影响及可能机制

目的探讨N-乙酰基半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)对β淀粉样蛋白毒性片段25-35(Aβ_(25-35))活化calpain活性的影响及可能机制。方法运用Aβ_(25-35)来诱导皮质神经元的损伤,实验分为空白对照组、Aβ_(25-35)组、NAC与Aβ_(25-35)共同作用组,采用荧光酶标法检测calpain活性、氧自由基(H2O2)和线粒体膜电位;用化学发光法测定神经元内ATP水平。结果 Aβ_(25-35)(20μmol·L_(-1))作用12h可明显升高calpain活性;与Aβ_(25-35)处理组相比,NAC(10 mmol·L_(-1))预先作用24h,然后再与Aβ_(25-35)共同作用12h,可明显降低calpain活性;与空白对照组相比,Aβ_(25-35)处理组中的H_2O_2明显升高、线粒体膜电位和ATP水平明显下降;而与Aβ_(25-35)处理组相比,NAC预处理组中的H_2O_2水平下降、线粒体膜电位和ATP水平升高,这些差异皆有统计学意义。结论这些研究结果提示,NAC可能通过线粒体的保护作用来降低Aβ_(25-35)诱导的异常活化的calpain活性。

10kV电力电缆故障测寻方法探讨

电力系统作为一项基础设施,在国民经济发展中占据着举足轻重的地位。电缆是电力系统中一个重要组成部分,但目前电缆中还存在一些问题,影响了电力的发展。结合10 kV电力电缆实际情况,对电力故障的类型和原因进行了介绍,并在此基础上对故障测寻方法进行了分析。

水利施工中的混凝土裂缝的原因分析及防治措施

文章首先简要分析了水利工程施工中混凝土裂缝的主要成因,并在此基础上对水利工程施工中混凝土裂缝的有效防止措施进行论述。期望通过本文的研究能够对提高水利工程的整体质量有所帮助。

物理组分测试应用于生活垃圾分类实效分析

以上海市浦东新区生活垃圾分类居住区为研究对象,制定针对性方案对分类居住区垃圾物理组分进行测试,通过数据分析评价了垃圾分类管理路径的可行性、管理实效及不同居住区分类管理特征等。

居住区生活垃圾源头分类计量系统示范研究

以浦东新区为例,分析不同居住区生活垃圾分类收运模式,利用称重技术建立居住区"干湿"分类源头计量系统示范工程,并对计量数据进行整理分析,为管理部门决策提供数据支撑和技术支撑。

Clinical Study on Effect of Yuantong Capsule in Treating Vascular Dementia

Objective: To observe the clinical effect of Yuantong Capsule (YTC) in treating vascular dementia (VD). Methods: Eighty-three patients of VD were randomized on ratio of 2 : 1 into two groups, the 54 patients in the treated group were treated with YTC orally administered, 3 times a

调补心肾法改善皮质下小血管病性轻度认知功能障碍的临床研究

目的观察调补心肾法对皮质下小血管病性轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment due to subcortical small vessel disease,MCI-SSVD)患者认知功能的干预效果。方法 54例均为2010年6月—2013年8月在福建医科大学附属协和医院中医科门诊就诊或住院的MCI-SSVD患者,采用随机数字表法随机分为调补心肾法治疗组(简称调补心肾法组,28例)和盐酸多奈哌齐治疗组(简称多奈哌齐组,26例),在针对血管危险因素治疗的基础上,分别给予调补心肾法中药和盐酸多奈哌齐治疗,疗程为12周,并进行简易精神状态检查量表(mini mental state examination,MMSE)、蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,Mo CA)和中医痴呆证候量表检查及比较。结果治疗前两个治疗组的MMSE、Mo CA评分均低于健康对照组(P<0.05),尤其Mo CA评分更为显著(P<0.01);与本组治疗前比较,两治疗组治疗后MMSE、Mo CA评分均增加(P<0.05),但两组治疗后比较,差异无统计学意义(P>0.05);与本组治疗前比较,调补心肾法组治疗后中医痴呆证候量表评分显著减少(P<0.01),而多奈哌齐组差异无统计学意义(P>0.05);两治疗组治疗后Mo CA各分项检查中视空间与执行功能和延迟回忆评分均有增加(P<0.05,P<0.01)。结论调补心肾法可以改善MCI-SSVD患者的认知功能。

β淀粉样肽25—35对原代培养的海马神经元电压门控钙通道电流的影响

目的探讨β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))对海马神经元电压门控的钙通道电流(VGCC)的作用。方法应用全细胞膜片钳技术记录海马神经元上的 VGCC,通过设定不同的钳制电压分别记录高电压激活的钙电流(HVA-I_(Ca))和低电压激活的钙电流(LVA-I_(Ca)),并观察 Aβ_(25-35)对其的影响。结果分别对原代培养的海马神经元急性胞外给予2μmol/L和10μmol/L 的凝聚态 Aβ_(25-35),在最大激活电压下加药后,I_(Ca)幅度分别是加药前的99.80%±0.02%及100.00%±1.58%,差异没有统计学意义。10 μmol/L 凝聚态 Aβ_(25-35)预孵育24 h 可增大,I_(Ca),对照组(未给 Aβ_(25-35))为(24.49±4.35)pA/pF,Aβ_(25-35)组(预孵育24 h)为(46.59±7.15)pA/pF,两组差异有统计学意义(P<0.05);但Aβ_(25-35)组的膜电容[(14.34±1.74)pF]与对照组[(14.44±0.97)pF]相比差异没有统计学意义。结论急性给予凝聚态 Aβ_(25-35)对 VGCC 没有影响,24 h 预孵育凝聚态 Aβ_(25-35)增大了 VGCC,而膜电容没有改变,提示凝聚态 Aβ_(25-35)可通过对细胞膜上钙通道进行分子调控以增大 VGCC。