TRAF3在免疫应答中的研究进展

目前在哺乳动物中已经发现了7个肿瘤坏死因子受体相关因子(TRAFs),主要参与肿瘤坏死因子受体超家族(TNFR)、Toll样/白细胞介素-1受体(TIR)、维甲酸诱导基因Ⅰ样受体(RLRs)的信号转导。TRAF3是TRAF家族中功能最为多样的成员之一。它能够正性调节Ⅰ型干扰素(IRFs)的产生,负性调节经典NF-κB、非经典NF-κB和丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号的激活。研究TRAF3在免疫信号通路中的作用、调控机制以及相关疾病具有重要的意义。

益肾通癃汤对前列腺癌裸鼠模型Nrf-2、SOD1的影响

目的:探讨益肾通癃汤对前列腺癌(prostate cancer,PCa)裸鼠模型核因子红细胞2相关因子2(Nrf-2)和超氧化物歧化酶1(SOD1)的影响。方法:SPF级雄性裸鼠接种PC-3细胞悬液,造模成功后随机分为模型组,益肾通癃汤低、中、高剂量组。模型组灌胃生理盐水[1 mL/(100 g·d)],益肾通癃汤各剂量组分别采用0.72、1.44、2.88 g/mL的益肾通癃汤灌胃[1 mL/(100 g·d)],灌胃21 d后处死裸鼠,称取瘤体质量计算抑瘤率,镜下观察病理改变,ELISA检测Nrf-2、SOD1表达量,WB(Western blot)、RTPCR检测Nrf-2、SOD1蛋白及mRNA表达。结果:与模型组比较,益肾通癃汤各剂量组抑瘤率升高(P <0.05,P <0.01),镜下观察细胞核裂解明显,可下调Nrf-2、SOD1蛋白及mRNA的表达(P <0.05,P <0.01);上述结果均呈浓度依赖性。结论:益肾通癃汤可能是通过抑制Nrf-2、SOD1的表达,诱导癌细胞氧化应激反应,达到对PCa的治疗作用。

输血医师规范化培训体系设计和探讨

强化输血医师队伍的规范化、专业化,可达到临床安全、科学、精准用血的目的,为医疗安全提供保障。研究结合输血医师岗位要求合理安排培训对象,制定培训计划,进行培训考核,设计和探讨输血医师规范化培训体系,为制定行业规范、指南共识提供可参考的模板。

基于Ras/ERK信号通路益肾通癃汤对人前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响

目的观察益肾通癃汤对人前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移能力的影响,从Ras/ERK信号通路调控角度初步探讨其作用机制。方法将PC-3细胞分为空白血清组和益肾通癃汤药物血清高、中、低剂量组(益肾通癃汤高、中、低剂量组),CCK-8法观察PC-3细胞增殖,倒置显微镜下观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡,Transwell小室检测PC-3细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PC-3细胞Ras/ERK信号通路相关蛋白及锌指转录因子(Snail)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)的表达,RT-PCR检测PC-3细胞E-cadherin、N-cadherin及Ras、细胞外调节蛋白激酶(ERK)mRNA表达。结果与空白血清组比较,益肾通癃汤高、中、低剂量组均可显著抑制PC-3细胞增殖,降低其贴壁生长能力,显著促进PC-3细胞凋亡,显著降低PC-3细胞体外侵袭、迁移能力(P<0.05,P<0.01),均呈剂量依赖性;Western blot结果显示,与空白血清组比较,益肾通癃汤高、中、低剂量组PC-3细胞中Snail、Ras、p-ERK1/2、ERK1/2、N-cadherin、基质金属蛋白酶-9蛋白表达均有一定程度下调,E-cadherin蛋白表达明显上调(P<0.05,P<0.01);RT-PCR结果显示,益肾通癃汤高、中、低剂量组PC-3细胞Ras、ERK1、N-cadherin mRNA表达下调,E-cadherin mRNA表达上调。结论益肾通癃汤可有效抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,促进其凋亡,抑制其侵袭及迁移能力及上皮间质转化进程,其作用机制可能与调控Ras/ERK信号通路有关。

基于数据挖掘的现代湖湘男科流派医家治疗激素难治性前列腺癌用药规律研究

目的基于数据挖掘研究现代湖湘男科流派代表医家谭新华、贺菊乔、陈其华治疗激素难治性前列腺癌(hormone refractory prostate cancer,HRPC)的用药规律。方法收集2012年5月至2020年8月现代湖湘男科流派医家谭新华、贺菊乔、陈其华于湖南中医药大学第一附属医院国医堂专家门诊治疗HRPC的处方,采用中医传承辅助平台软件(V 2.50)对上述处方进行描述性分析、关联规则分析、复杂系统熵聚类分析。结果本研究共纳入HRPC治疗处方241首,涉及药物99味,频次>100次的药物共14味,前5位依次为黄芪、甘草、三棱、莪术、熟地黄。药物四气前3位分别为温、寒、平;药物五味前3位分别为甘、辛、苦;药物归经前3位分别为肾、脾、肝。获得治疗HRPC药物组合28条;经复杂系统熵聚类分析后,获得7个核心药对及4个新药物组合。结论“肾虚血瘀”是HRPC发病的主要病机,现代湖湘男科流派医家治疗HRPC遣方用药侧重于益肾温阳,活血化瘀,可为中医临床治疗HRPC提供用药参考。

益肾通癃汤对人前列腺癌DU-145细胞上皮-间质转化及Ras/ERK信号通路的影响

目的:观察益肾通癃汤对人前列腺癌DU-145细胞上皮-间质转化(EMT)及Ras/ERK信号通路的影响并探讨其作用机制。方法:将人前列腺癌DU-145细胞分为空白血浆组,益肾通癃汤含药血浆高、中、低剂量组(以下简称中药高、中、低剂量组)。运用CCK-8法观察各组DU-145细胞增殖情况,Annexin V&PI双染色法进行细胞凋亡检测,PI法进行细胞周期检测,Transwell小室及划痕实验法检测各组DU-145细胞侵袭能力及迁移情况,Western印迹检测益肾通癃汤干预后各组DU-145细胞EMT及Ras/ERK信号通路相关蛋白的表达变化,RT-PCR检测DU-145细胞EMT及Ras/ERK信号通路相关蛋白的基因表达情况。结果:与空白血浆组对比,中药高、中、低剂量组均可显著抑制DU-145细胞增殖,降低其贴壁生长能力并呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);中药高、中、低剂量组可显著促进人前列腺癌DU-145细胞凋亡并呈剂量依赖性(P<0.01);中药高、中、低剂量组可显著调控DU-145细胞周期并呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);中药高、中、低剂量组可显著降低人前列腺癌DU-145细胞体外侵袭、迁移能力并呈剂量依赖性(P<0.05);Western印迹结果显示,与空白血浆组比较,中药高、中、低剂量组人前列腺癌DU-145细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子(Snail)、Ras、p-ERK1/2、ERK1/2、基质金属蛋白酶(MMP-9)等蛋白表达均存在一定程度的下调,而E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达上调并存在显著差异(P<0.05,P<0.01);RT-PCR结果显示,中药高、中、低剂量人前列腺癌DU-145细胞N-cadherin mRNA、Ras、ERK1表达下调,而E-cadherin mRNA表达上调并存在显著差异(P<0.05,P<0.01)。结论:益肾通癃汤能够有效抑制人前列腺癌DU-145细胞的增殖并促进其凋亡,调控细胞周期,抑制其侵袭及迁移能力及EMT进程,益肾通癃汤治疗前列腺癌的作用机制可能是通过抑制前列腺癌细胞EMT进程及Ras/ERK信号通路表达有关。

益肾通癃汤通过下调转化生长因子β抑制血管内皮生长因子信号通路抗前列腺癌机制研究

目的建立前列腺癌裸鼠模型,探讨益肾通癃汤(YSTLF)通过下调转化生长因子β(Transforming growth factor beta,TGF-β)从而调控血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)信号通路抗前列腺癌作用及其潜在的分子机制。方法选择对数生长期的前列腺癌PC-3细胞株,接种于40只BALB/c雄性裸鼠制备前列腺癌皮下种植瘤裸鼠模型,并随机分为模型组、益肾通癃汤低、中、高剂量组,每组各10只。各组按体重给予相应体积药物1 ml/(100 g·d),模型组予以生理盐水灌胃,益肾通癃汤低、中、高剂量组给予不同浓度(0.36 g/ml、0.72 g/ml、1.44 g/ml)益肾通癃汤中药液灌胃。连续灌胃21 d。比较各组抑瘤率,观察各组裸鼠瘤体病理形态;酶联免疫吸附剂测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)检测各组裸鼠血清TGF-β、VEGF、MMP-9水平;Western blot法及RT-PCR法检测各组裸鼠瘤体TGF-β、VEGF、MMP-9蛋白表达及mRNA表达情况。结果益肾通癃汤低、中、高剂量组瘤体质量呈现不同程度的生长抑制,与模型组对比瘤体质量明显降低(P<0.05,P<0.01),可显著改善裸鼠模型瘤体的病理变化;与模型组对比,益肾通癃汤低、中、高剂量组能够明显降低前列腺癌裸鼠模型血清中TGF-β、VEGF、MMP-9水平(P<0.05,P<0.01)及有效下调瘤体中TGF-β、VEGF、MMP-9的蛋白表达及mRNA表达水平(P<0.01)。结论益肾通癃汤对前列腺癌裸鼠皮下种植瘤有显著抑制作用,其机制可能与益肾通癃汤通过下调TGF-β抑制VEGF信号通路,进而调控肿瘤血管新生,抑制肿瘤生长相关。

益肾通癃汤对前列腺癌模型裸鼠N-cadherin、Vimentin蛋白表达的影响

目的:探究益肾通癃汤对前列腺癌(PCa)皮下种植瘤模型裸鼠N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)表达的影响。方法:用前列腺癌PC-3细胞悬液建立PCa皮下种植瘤模型裸鼠,造模成功后将其随机分为模型组、益肾通癃汤低剂量组、益肾通癃汤中剂量组、益肾通癃汤高剂量组,每组10只。各给药组灌胃给予相应药物,模型组灌胃给予等体积生理盐水,2次/d,连续3周。给药结束后,观察裸鼠一般状态,测量体质量及瘤体大小,称重并计算抑瘤率;运用HE染色观察各组裸鼠种植瘤病理学改变;ELISA法检测各组裸鼠血清中N-cadherin、Vimentin的水平;Western blotting检测各组裸鼠种植瘤组织中N-cadherin、Vimentin蛋白表达情况;PCR检测各组裸鼠种植瘤组织中N-cadherin m RNA、Vimentin m RNA表达情况。结果:与模型组比较,益肾通癃汤低、中、高剂量组裸鼠状态均可,瘤体质量,血清中N-cadherin、Vimentin水平,种植瘤组织中N-cadherin、Vimentin的蛋白及m RNA相对表达量均降低(P<0.05),瘤体细胞少量坏死;与益肾通癃汤低剂量组比较,益肾通癃汤中、高剂量组裸鼠一般状态可,瘤体质量,血清中N-cadherin、Vimentin水平、种植瘤组织中N-cadherin、Vimentin蛋白及mRNA相对表达量均降低(P<0.05),瘤体细胞部分坏死;与益肾通癃汤中剂量组比较,益肾通癃汤高剂量组裸鼠一般状态良好,瘤体质量,血清中N-cadherin水平,种植瘤组织中N-cadherin、Vimentin蛋白相对表达量,种植瘤组织中Vimentin mRNA相对表达量均降低(P<0.05),瘤体细胞坏死多;益肾通癃汤高剂量组裸鼠血清中Vimentin水平、种植瘤组织中N-cadherin mRNA相对表达量与益肾通癃汤中剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05);益肾通癃汤低、中、高剂量组裸鼠抑瘤率分别为26.67%、42.45%、66.26%。结论:益肾通癃汤对人前列腺癌PC-3细胞皮下种植瘤模型裸鼠N-cadherin、Vimentin蛋白的表达具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制肿瘤上皮间质转化(EMT)过程相关。

杭州市无偿献血者2021至2022年血源性感染性病原的流行病学调查

目的探究杭州市无偿献血者中常见血源性感染性病原的感染情况。方法收集2021年4月至2022年3月来自浙江省血液中心900份无偿献血者血清样本(已剔除HIV阳性样本),应用酶联免疫法筛查血清样本中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、抗-丙型肝炎病毒(HCV)、抗-梅毒螺旋体(TP)、巨细胞病毒(CMV)、EB病毒(EBV)、戊型肝炎病毒(HEV)IgM和IgG及人类嗜T淋巴细胞病毒(HTLV)-1/2抗体水平。采用SPSS 26.0统计学软件对数据进行分析。结果900份样本中,HBsAg、抗-HCV和抗-TP的阳性率分别为0.33%、0.33%和0.11%。CMV IgM和CMV IgG阳性率分别为0.33%和94.67%;EB VCA-IgM和EB EA-IgG阳性率分别为2.44%和8.11%;HEV IgM和HEV IgG阳性率分别为1.22%和14.78%;HTLV-1/2抗体阳性率为0。对IgM阳性情况分析,43份样本(4.78%,43/900)均呈单一病毒感染。对IgG阳性情况分析,666份样本(74.00%,666/900)为单一病毒感染,198份样本(22.00%,198/900)为混合感染。结论杭州市无偿献血者中检测出一定水平的HBsAg、HCV、TP、CMV、EBV和HEV抗体,对血液安全构成威胁,应加强血液筛查,保障安全用血。

基于网络药理学及分子对接技术探讨益肾通癃汤治疗前列腺癌分子作用机制

目的:运用网络药理学、分子对接技术及细胞试验研究益肾通癃汤治疗前列腺癌的分子机制。方法:借助TCMSP、TCMID数据库及相关文献检索益肾通癃汤活性成分及对应靶点,通过GeneCards、OMIM等数据库及相关文献检索前列腺癌的作用靶点,构建药物与疾病映射靶基因网络,利用STRING构建益肾通癃汤治疗前列腺癌的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并运用MCODE插件对上述构建的PPI网络进行模块化聚类处理,通过David数据库对药物-疾病关键靶基因进行GO功能富集分析以及KEGG信号通路富集分析,运用Autodock、Pymol等软件对益肾通癃汤的关键活性成分及关键靶点进行分子对接,并以细胞试验进一步验证相关靶基因。结果:益肾通癃汤治疗前列腺癌的"药物-疾病-靶点"网络共涉及153个共同靶点,其中益肾通癃汤治疗前列腺癌的共同靶点前10位分别为:AKT1、IL-6、VEGFA、TP53、TNF、CASP3、JUN、MAPK1、MYC、EGF,PPI网络构建后运用MCODE插件进行蛋白聚类共获得4个蛋白聚类群,GO功能富集提示益肾通癃汤治疗前列腺癌的生物学过程及功能集中在DNA转录功能、泛素样酶结合、雄激素受体功能、核受体功能、细胞周期、细胞凋亡等;KEGG通路富集分析提示益肾通癃汤治疗前列腺癌主要集中在肿瘤MicroRNA调控、细胞凋亡、细胞周期、免疫耐受、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、P53肿瘤抑制信号通路、肿瘤坏死因子(TNF)等信号通路;分子对接结果显示,益肾通癃汤治疗前列腺癌的主要活性成分槲皮素(quercetin)、芒柄花黄素(formononetin)、常春藤皂甙元(hederagenin)、山柰酚(kaempferol)、补骨脂素(psoralen)等与核心蛋白TNF、TP53、AKT1、MARK1、IL-6、MYC、VEGF等存在较好的结合性。细胞试验结果表明益肾通癃汤能够有效抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖并促进其凋亡,同时降低细胞迁移及侵袭能力。Western blot结果表明益肾通癃汤能够通过调控前列腺癌PC-3细胞的增殖、凋亡以及细胞周期相关蛋白的表达治疗前列腺癌。结论:益肾通癃汤治疗前列腺癌的分子机制可能与其调控细胞增殖、凋亡、细胞周期等生物学过程及信号通路相关。

基于生物信息学的益肾通癃胶囊治疗前列腺癌药效机制及其验证研究

目的:采用生物信息学研究益肾通癃胶囊治疗前列腺癌的药效机制,并借助细胞实验验证。方法:借助TCMSP、TCMID、GeneCards等数据库及相关文献检索益肾通癃胶囊及前列腺癌的作用靶点,构建益肾通癃胶囊治疗前列腺癌的药物-疾病-靶点网络及蛋白-蛋白相互作用网络,进行KEGG信号通路富集分析,并以细胞实验进一步验证相关靶基因。结果:共获取益肾通癃胶囊33个主要有效成分,278个作用靶点,3331个前列腺癌靶点,益肾通癃胶囊治疗前列腺癌共涉及185个共同靶点;KEGG通路富集分析提示益肾通癃胶囊治疗前列腺癌主要集中在肿瘤信号通路、MicroRNA调控、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p53肿瘤抑制、肿瘤坏死因子(TNF)、血管内皮生长因子(VEGF)等与细胞凋亡、细胞周期密切相关的信号通路。与空白血清组比较,益肾通癃胶囊低、中、高剂量组显著抑制前列腺癌DU-145细胞的增殖并促进其凋亡(P<0.05),同时能够将细胞周期阻滞在G0/G1期;与空白血清组比较,益肾通癃胶囊各剂量组Bax、Bcl-2、Ced-4、CDK4、CDK6、cyclin E1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),cyclin D1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:益肾通癃胶囊治疗前列腺癌的药效机制,可能与其调控细胞增殖、凋亡和细胞周期的信号通路相关。

针灸治疗男性不育症腧穴配伍规律的复杂网络分析

目的利用复杂网络技术分析针灸治疗男性不育症的腧穴配伍规律,为临床针灸治疗与研究男性不育症的选穴组方提供依据。方法检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网以及PubMed近20年关于针灸治疗男性不育症的临床研究文献,根据纳入排除标准筛选相关文献,建立针灸治疗男性不育症处方数据库,运用SPSS Modeler 18.0中的Apriori算法进行关联性分析,分析核心腧穴节点和配伍关系,利用Gephi0.9.2软件绘制复杂网络共现图。结果最终获得91篇符合标准的文献,提取针灸处方134条,涉及70个腧穴,腧穴总频次为666次。其中关元使用频次最高(75次,11.26%),其次为肾俞、三阴交、足三里、气海、命门等穴。腧穴归经主要为任脉、足太阳膀胱经。特定穴以交会穴使用频次最高,其次为五输穴和募穴。通过复杂网络拓扑结构分析发现关元、足三里、气海、肾俞、三阴交、太冲等23个腧穴为针灸治疗男性不育症的核心节点腧穴。结论针灸治疗男性不育症处方所选腧穴主要分布于下腹部、背腰部及下肢部,特定穴多选用交会穴、五输穴和募穴,在选穴和腧穴配伍方面注重上下配穴。