日本血吸虫副肌球蛋白小鼠免疫试验

应用生物化学方法从日本血吸虫成虫中提取虫体副肌球蛋白,并把它结合佐剂FCA/FIA或BCG免疫两批BALB/c小鼠,获得了32.18%—48.52%的减虫率,但统计学上大都无显著差异.两次实验结果还表明,应用虫体副肌球蛋白结合FCA/FIA进行肌肉注射,和应用等量抗原结合BCG皮内注射免疫的BALB/c小鼠,获得的减虫率相当.

动物血吸虫病防制的主要进展、问题和今后工作重点

1 我国动物血吸虫病流行现状日本血吸虫病曾在我国南方12个省、市、自治区的400个县(市、区)流行,据统计全国曾有钉螺面积140亿m^2,病人1000万,病畜百万头以上。解放后,在党和各级政府的领导下和血防工作者的辛勤劳动下,我国血防工作取得了举世瞩目的成就,至今已有227个县(市、区)达到消灭血吸虫病标准,55个县达到基本消灭标准,占总疫区县数的70%。

日本血吸虫23kD抗原表位及多价疫苗的初步研究

目的 研究日本血吸虫 2 3kD抗原表位及日本血吸虫 2 3kD抗原大亲水区多肽 (LHD -Sj2 3)与脂肪酸结合蛋白(SjFABP)两个基因重组抗原联合免疫小鼠的保护效果。 方法 人工合成血吸虫 2 3kD抗原中一段可诱导T细胞和B细胞免疫应答的抗原表位多肽p14 ,与鸡白蛋白偶联后免疫小鼠。用LHD -Sj2 3和SjFABP两个基因重组抗原联合免疫大鼠 ,观察诱导的免疫保护效果。结果与结论 人工合成肽 p14诱导了 2 2 2 2 %～ 30 18% (P <0 0 5～ 0 0 0 1)的减虫率。用LHD -Sj2 3和SjFABP两个基因重组抗原免疫大鼠时 ,分别获得 32 14 %和 31 85 %的减虫率 (P >0 0 5 ) ,当用这两种基因重组抗原联合免疫大鼠时 ,获得了 4 7 2 8%的减虫率。加强抗原表位及“鸡尾酒”疫苗研究 ,可为寻找更高保护作用的抗血吸虫病疫苗提供基础。

中国家畜血吸虫病防治

本文对家畜血防在中国血吸虫病防控中的作用与地位、家畜/农业血防发展历程以及中国血吸虫病防治科研进展、面临的主要难点与挑战等方面进行了论述,并对今后家畜血防工作提出了建议。

中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究──重组的23kD抗原大亲水区多肽对小鼠的免疫试验

把编码中国大陆株日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽的ＤＮＡ片段亚克隆到ｐＧＥＸ载体上进行表达，并用重组抗原和载体ｐＧＥＸ表达蛋白分别免疫了二批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，结果与未免疫小鼠和载体ｐＧＥＸ表达蛋白免疫小鼠相比，重组抗原免疫小鼠分别获得了５７．８０％～７０．３０％和５２．６３％～６２．９６％的减虫率，证明重组的日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽可诱导宿主抗血吸虫攻击感染的部分保护力。

ABC-ELISA诊断耕牛日本血吸虫病

生物素—亲和素系统是前几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,不少实验室已把它应用于寄生虫病的免疫诊断,并得到了较为满意的结果。本文对ABC-ELISA法在耕牛日本血吸虫病免疫诊断上的应用价值做了初步探讨。(一)材料与方法1.材料:

IgM单抗体内、外杀伤日本血吸虫的研究

本文报道应用急性感染日本血吸虫的Ｂａ１ｂ／ｃ小鼠脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获得了一株具有抗血吸虫攻击感染保护作用的ＩｇＭ单抗ｓｓｊ１４。在被动免疫转移试验中，这株单抗在小鼠体内提供了２７．６９％～６８．５％的减虫率。体外ＡＤＣＣ试验显示该单抗参与了巨噬细胞和嗜酸性粒细胞介导的杀伤血吸虫童虫的作用，免疫化学特性测定表明该单抗同时对血吸虫尾蚴、成虫和虫卵三期虫体抗原起反应，靶抗原的分子量为２９０ＫＤ，分别位于血吸虫童虫和成虫的表膜及虫卵的卵壳。靶抗原表位的化学性质为多糖类，它同时被辐照致弱尾蚴免疫的大鼠血清、血吸虫慢性感染人血清和小鼠血清所识别。本文结果表明，ＩｇＭ抗体和多糖类抗原在血吸虫病免疫保护作用中发挥了重要的作用。

日本血吸虫谷胱甘肽S－转移酶小鼠免疫试验

用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）。把纯化的ＧＳＴ结合福氏性剂免疫了二批达ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，获得了２９．５８～３２．７１％的减虫率和５２．９４～６８．１３％的粪便减卵率。ＥＬＩＳＡ试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答，免疫印迹试验（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ）显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和ＧＳＴ抗原的２６、２８ｋＤ蛋白被免疫小鼠血清所识别。

虫卵尿素溶解性抗原在耕牛血吸虫病免疫诊断上的应用

Tsang(1981)、陶义训(1983)和黄民贵(1988)等先后报道了尿素溶解性虫卵抗原(JEU)的提取、分离和在人血吸虫病免疫诊断上的应用,证明了JEU具有较高的活力和特异性。本文探索了JEU在耕牛血吸虫病免疫诊断上的应用价值。(一)材料和方法1.JEU和水溶性抗原(SEA)的制备:操作流程如下图所示:

简易的Dot-ELISA法诊断耕牛和家兔日本血吸虫病

本实验用硝酸纤维膜为载体,水溶性日本血吸虫虫卵抗原为抗原,先后检测了18份实验感染黄、水牛血清、66份自然感染牛血清、84份阴性牛血清、40份实验感染兔血清和18份阴性兔血清,结果表明实验感染牛血清和兔血清都呈阳性反应,检出率达100％。自然感染牛血清的阳性检出率为93.9％(62/66),阴性牛血清的检出符合率为95.24％(80/84)。阴性兔血清都呈阴性反应。检测了4份肝片吸虫阳性兔血清和31份锥虫阳性牛血清,都不出现交叉反应。

编码中国大陆株日本血吸虫副肌球蛋白C端蛋白基因的克隆和表达

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）从中国大陆株日本血吸虫成虫ｃＤＮＡ文库中扩增到一编码血吸虫副肌球蛋白Ｃ端蛋白的ＤＮＡ克隆，并把该ＤＮＡ进一步亚克隆到ｐＴｒｃＨｉｓＡ载体上进行表达。表达产物的分子量为３３ｋｕ，它和纯化的中国大陆株日本血吸虫成虫副肌球蛋白一样，都能被抗曼氏血吸虫副肌球蛋白的单克隆抗体所识别。说明该重组抗原具有血吸虫副肌球蛋白的抗原性。

抗独特型抗体预防绵羊日本血吸虫病试验

抗独特型抗体预防绵羊日本血吸虫病试验林矫矫，田锷，叶萍，施福恢，付志强，石耀军，林邦发，陈永军，张正达，钱承贵，汪英华，顾忠娥，沈纬，郑晓东，朱炳辉（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）关于独特型免疫网络在曼氏血吸虫方面的研究，国外报道...

中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究──23kD抗原大亲水区多肽基因重组抗原的制备及抗原性测定

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术从中国大陆株日本血吸虫成虫ｃＤＮＡ文库筛选到一编码２３ｋＤ抗原大亲水区多肽的克隆基因，并把它连接到ｐＧＥＸ载体上进行ＤＮＡ序列分析和蛋白质表达。结果表明，该克隆基因和编码菲律宾株日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽的克隆基因碱基组成非常相似，１９３个碱基中只有一个不同，而且这个碱基差异不影响氨基酸序列组成。该重组基因在大肠杆菌里得到高产量表达，而且融合蛋白的纯化很方便。免疫印渍转移试验表明，该融合蛋白能被慢性感染日本血吸虫的小鼠血清、辐照致弱日本血吸虫尾为免疫动物血清、日本血吸虫成虫膜抗原和血吸虫谷腕甘肽转移酶（ＧＳＴ）免疫小鼠血清所识别，具有较强的抗原性。

中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究─—编码23kD抗原基因克隆的筛选

应用中国大陆株日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽和载体ｐＧＥＸ表达蛋白的基因重组抗原（Ｈ－Ｓ．ｊ．２３／ｐＧＥＸ）免疫ＣＢＡ小鼠，制各抗血吸虫２ｓｋＤ抗原的特异性免疫血清，并用该免疫血清作为探针筛选中国大陆株日本血吸虫ｃＤＮＡ文库，从３～４×１０￣４个ｃＤＮＡ噬菌体克隆中共钩取到三个阳性克险，其分子量分别为６００ｂｐｓ、７００ｂｐｓ和１０５０ｂｐｓ，并进一步把７００ｂｐｓ的克隆基因连接到ｐＧＥＭ载体上进行部分双链ＤＮＡ序列分析和ＰｍａｌＰ载体上进行蛋白质表达。

用小鼠肠淋巴结淋巴细胞制备抗日本血吸虫单克隆抗体

应用感染血吸虫尾蚴11周的Balb/c小鼠肠淋巴结淋巴细胞建立16株血吸虫虫卵抗原特异性的单克隆抗体,选择其中的8株进行扩大培养并进行特性测定。双向琼脂扩散试验表明8株单抗都属IgG_1亚型。ELISA试验表明8株单抗都只对血吸虫虫卵抗原起反应,对肝片吸虫抗原和锥虫抗原都不起交叉反应。血吸虫雄虫和虫卵冰冻切片IFA试验表明8株单抗都定位于虫卵卵壳,其中1株同时定位于雄虫表膜,2株同时定位于雄虫肠壁。免疫电转移试验表明8株单抗都能识别血吸虫虫卵抗原55～98KD之间的多条抗原条带,其中有3株单抗同时识别雄虫抗原的1～2条抗原条带。ADCC试验表明在巨噬细胞或嗜酸性粒细胞介导下,8株单抗中有7株杀伤血吸虫童虫的效果比1:2稀释的、感染血吸虫尾蚴8周的Balb/c小鼠血清强。

畜牧业生产中的立体污染及防治(一)

畜牧业生产中的立体污染是农业立体污染的重要组成部分。本文从畜牧业生产过程、饲养管理过程、交易和加工过程及畜禽病原微生物四个方面阐述了畜牧业在不当生产过程中造成的对大气、土壤、水体和生物的立体污染及其危害,并分析了造成立体污染的主要原因,提出了防治对策。

尾蚴抗原特异性的T细胞克隆的建立及其功能测定:Ⅰ.T细胞克隆的建立

本文报道了用早期感染曼氏血吸虫的C57BL/6小鼠纵隔淋巴结细胞建立七株对血吸虫尾拗抗原特异性的T细胞克隆,其中两株在被动免疫转移试验中对血吸虫的攻击感染具有显著的保护作用。用荧光标记的单克隆抗体检测证明七株T细胞克隆均为Thyl.2^+、 L_3T_4^+、 Lyt2^-的T辅助细胞。

尾蚴抗原特异性的T细胞克隆的建立及其功能测定——Ⅱ.T细胞克隆的功能测定

从早期感染曼氏血吸虫的C_(57)BL/6小鼠纵隔淋巴结细胞建立七株T细胞克隆。H^3-标记的淋巴细胞转化实验显示可溶性曼氏血吸虫尾蚴抗原、ConA和重组的人IL-2可促进这些T克隆细胞增殖,可溶性曼氏血吸虫虫卵抗原、成虫抗原及非特异性抗原PPD、纯化的老鼠IL-4均不起作用;体外实验显示T克隆细胞可诱导和增强对血吸虫尾蚴抗原特异性的肉芽肿反应;体内实验证实它们可调节血吸虫尾蚴抗原特异性的迟发型超敏反应。本文的结果为加深理解血吸虫病的免疫机制提供了一些实验依据。