牛轮状病毒免疫初探

研究证实,轮状病毒是近年来广泛流行于黄淮平原地区的黄犊牛腹泻症的主要致病因子之一.作者先后从安徽、河南两地的腹泻黄犊牛粪样中分离出3株适应MA-104细胞的轮状病毒株,通过人工发病试验证实它们对剥夺初乳的黄犊牛有致病作用.我们用牛轮状病毒BRV014高代细胞培养物,通过非肠道途径,在黄犊牛腹泻流行区免疫孕期母牛,较有效的控制了黄犊牛腹泻症的发生.材料与方法(一)病毒及免疫物牛轮状病毒BRV014株系从安徽省界首县黄犊牛腹泻粪样中分离.病毒经胰酶预处理后,接种MA-104细胞单层.

犊黄牛轮状病毒的致病性试验

1 引言1969年,Mebus等首次报道了在美国内布拉斯加州用腹泻牛采集的大便样品滤波感染剥夺初乳的牛产生了试验性腹泻,并从腹泻粪样中分离到轮状病毒。开辟了轮状病毒人工复制的途径。此后,国外有关牛轮状病毒研究报告甚多。

应用琼脂扩散试验检测盱眙水牛病抗体的探讨

以盱眙水牛病自然发病牛或人工感染传代病牛后期血清与病牛肝、淋巴结组织匀浆提取物进行琼脂扩散试验.结果.以病牛肝、淋巴结、脾混合提取物为抗原对该病后期血清可产生沉淀反应(10/13).取其中2头阳性病牛血清作为特异性抗体,对7头病水牛肝、脾、淋巴结混合悬液起反应;对另1头病水牛肝、淋巴结组织分别起反应;对该牛的脾组织不发生反应.

幼畜抗肠道感染免疫

幼畜抗肠道感染免疫林继煌，徐元昌（江苏省农科院畜牧兽医研究所）幼畜腹泻是影响畜牧业生产发展的一大障碍，每年都造成巨大的经济损失。防治主要依赖于母畜提供坚强的被动免疫以保护幼畜免受早期感染以及幼畜自身逐渐产生的免疫力以抵御外来病源的侵袭。本文拟对猪、牛...

RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒

根据猪传染性胃肠炎病毒 ( TGEV)纤突蛋白 S基因的 5′端核酸序列设计了 1对引物。该对引物扩增的目的片段长度为 886bp。在优化 RT-PCR反应条件的基础上 ,建立了检测 TGEV的 RT-PCR方法。用此RT-PCR方法检测 56份猪腹泻粪样 ,同时用夹心 ELISA法作对照。结果显示 ,RT-PCR法检测的 2 0份阳性粪样 ,用夹心 ELISA法检测有 1 4份呈阳性 ,两者的符合率为 89%。 RT-PCR法比夹心 ELISA法敏感性更高 ,可用于

逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测轮状病毒

为了给轮状病毒感染的诊断和流行病学研究提供更为敏感和可靠的手段，选取Ａ组轮状病毒ＶＰ７基因上的２段高度保守序列作为引物，在优化逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）条件的基础上，建立了检测轮状病毒的ＲＴ－ＰＣＲ方法。通过对比试验，确定了ＰＣＲ的最优模式：９４℃变性１ｍｉｎ→５５℃退火１ｍｉｎ→７２℃延伸２ｍｉｎ，３０个循环后再在７２℃下延伸１０ｍｉｎ。用此模式进行了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性和敏感性试验。检测的６株轮状病毒分离株（牛ＨＮ－７、ＢＲＶ００７、ＢＲＶ０１４、ＢＲＶ６５５５、猪Ｌｉ９９、Ｎａｎ８６）及２株参考株（牛ＮＣＤＶ、猴ＳＡ１１），都能扩增出唯一的３４２ｂｐ的目的条带；对猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）及传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）感染猪的粪样、正常ＭＡ１０４细胞检测结果均呈阴性；检测的敏感度可达１ｐｇ水平。对４０份猪、牛、兔的腹泻粪样检测，３０份呈阳性，而用作平行对照的夹心ＥＬＩＳＡ法检测，有２５份呈阳性，两者符合率为８７．５％。两法检测不符的５份粪样的ＰＣＲ扩增产物，用地高辛标记探针进行了斑点杂交，结果均呈阳性，表明ＲＴ－ＰＣＲ法比ＥＬＩＳＡ法敏感性高。

猪流行性腹泻研究概况

概述了猪流行性腹泻病毒的病毒特性、基因组结构及主要病毒蛋白、诊断方法、预防和治疗等方面国内外研究情况。

A组轮状病毒研究动态

概述了有关Ａ组轮状病毒的病原特性、基因组结构、病毒蛋白、诊断、血清分型、基因工程等方面国内外研究情况。Ａ组轮状病毒属呼肠孤病毒科，是引起婴幼儿和多种幼龄动物严重胃肠炎的重要病原之一。基因组由１１个片段的双股ＲＮＡ组成，分别编码１１种病毒蛋白（６种结构蛋白和５种非结构蛋白）。轮状病毒的诊断方法有多种，其中电镜法、酶联免疫吸附试验、核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳等３种方法最为常用。轮状病毒有两套血清学分类系统，目前已知至少有１４个Ｇ型、１８个Ｐ型。当前人们已将ＶＰ４、ＶＰ７在大肠杆菌、痘病毒、腺病毒、杆状病毒中表达成功。

猪传染性胃肠炎病毒弱毒株STC_3细胞培养特性及致病性研究

从美国引进的猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)弱毒株STC3 在ST、PK15及猪肾原代细胞上均能增殖 ,并产生明显的致细胞病变作用 (CPE) ,其中以ST细胞上的CPE最为迅速、明显 ,于接毒后 2 0— 2 4hCPE即可达 90 %— 10 0 % ,而在PK15及猪肾原代细胞上CPE形成较迟一些 ,在 42— 48h可达 80 %— 90 %。STC3 在ST、PK15及猪肾原代细胞上的TCID50分别为 10 -7.67/mL、10 -5.63 /mL和 10 -5.90 /mL。用较大剂量STC3 细胞毒经口接种被剥夺初乳的初生仔猪 ,仅表现为一过性的腹泻而不引起死亡 ,对 3日龄人工哺乳的仔猪则已完全丧失了致病力 ,但荧光抗体检查结果显示病毒在小肠粘膜上皮细胞中仍有增殖。由此可见 ,STC3 可能是

牛轮状病毒性腹泻的研究

从安徽、河南两地黄牛犊腹泻粪样中分离出了３株能在ＭＡ－１０４细胞上稳定繁殖、继代的轮状病毒（标号为ＢＲＶ００７、ＢＲＶ０１４及ＨＮ－７）。中和试验表明，该３株黄牛分离毒与北京奶牛毒ＢＲＶ６５５５及国外参考毒株ＮＣＤＶ之间抗原性无差异，同属轮状病毒血清６型（或牛轮状病毒血清１型），在亚组抗原特异性上均为第Ⅰ亚组。用ＢＲＶ０１４高代次（５０代以上）细胞培养物（ＴＣＩＤ５０＝１０－６．５）于孕母牛产前３个月和１个月经肌肉免疫注射２次，可明显提高母牛初乳中的轮状病毒抗体，在产后２０ｄ，抗体滴度仍能维持在１∶６４；临床观察，免疫母牛所产犊牛的腹泻发生率较对照组降低８３．８％。

用免疫金技术检测猪繁殖与呼吸综合征病毒

用胶体金标记提纯后的兔抗猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)IgG ,建立了一种以微孔滤膜为固相载体 ,以红色胶体金为标记物的检测PRRSV的斑点免疫金渗滤法 (DIGFA)。特异性阻断试验与交叉试验证明DIGFA检测PRRSV有较高的特异性。检测 1 5份临床样本 ,其中 3份DIG FA及细胞培养均为阳性 。

仔猪腹泻症发病特点及防制对策

仔猪腹泻是对养猪业造成重大损害的严重病害,经济损失也很大。由于仔猪腹泻的病因很多,多年养猪能手也很难分辨腹泻的原因,更不能做到对症治疗,本文为读者提供了一般仔猪腹泻的识别方法与防制对策,很有实用价值。

猪链球菌2型——人畜共患病新病原菌的研究概况

猪链球菌 2型是许多国家导致猪链球菌病的主要病原 ,90年代以来猪链球菌 2型已成为我国引起人畜共患病的一种重要的新病原菌。对该菌的致病因子及其之间的相互作用机理尚不清楚。通常认为荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白 (MRP)、细胞外因子 (EF)、猪溶素 (suilysin)等与致病力有关。该菌在绵羊血培养基上生长良好 ,呈α 溶血 ,48h后有草绿色色素沉着 ,革兰氏染色阳性 ,有荚膜 ;此菌的生化特性往往差异较大 ;乳胶或玻片凝集试验、核糖体分型试验、PCR等方法可进行鉴定。通常认为该菌对仔猪、山羊、家兔、BALB/C小鼠等有较强致病力 ,对普通小白鼠致病力低 ,而对雏鸡、雏鸭、成年豚鼠均不致病。灭活苗、弱毒苗和亚单位保护性抗原在一些国家已做了研究。

猪肺炎霉形体168弱毒株的回归试验

将猪肺炎霉形体 16 8无细胞培养弱毒株F34 0 经健康小梅山猪连续传 5代 ,每代观察 11— 16d ,临床无气喘和咳嗽症状 ,剖检无胰样小叶性肺炎病变 ,表明该菌株的稳定性和安全性良好 ;同时采集各传代猪的肺组织 ,用病肺块组织接种法分离培养猪肺炎霉形体 ,经 72h培养 ,其培养液呈微混浊 ,无沉淀 ,pH降至 6 .6 ,镜检见类圆球形菌体。

牛羊猪等家畜猝死症病原学研究初报

牛羊猪等家畜猝死症病原学研究初报董亚芳，郭明章，何孔旺，林继煌（江苏省农科院牧医所南京２１００１４）近年来，在我国长江以北地区的一些省，发生了一种牛、羊、猪等家畜以突然死亡为特征的疾病，由于病原未清，故俗称为家畜猝死症，造成颇大经济损失。我省主要发生...

牛猪轮状病毒血清分型及其抗原性比较

利用双向交叉中和试验对我国4株牛和4株猪轮状病毒做了血清分型,并比较了它们与国外参考毒株牛NCDV、猪OSU、猴SA-11和人Wa株轮状病毒之间的抗原相关性。结果,我国3株黄牛轮状病毒(HN-7、BRV007和BRV014),1株奶牛轮状状病毒(BRV6555)与牛参考毒株NCDV抗原性无差异,同属轮状病毒血清6型(牛轮状病毒血清1型或NCDV型)。4株猪轮状病毒则可分为两个型,溧99能被OSU抗血清高滴度中和,故划归轮状病毒血清5型(猪轮状病毒血清1型);而宁71、南86、和江150等3个毒株与溧99抗原性有明显差异,且与OSU抗血清无反应性,故暂列为猪轮状病毒血清2型。全部牛猪轮状病毒与猴SA-11、人Wa之间无抗原交叉。

用反向间接血凝试验快速检测轮状病毒抗原和抗体

用兔抗牛轮状病毒(NCDV株)IgG致敏绵羊红细胞进行反向间接血凝(RIHA)试验,直接检测105份犊牛腹泻粪样中的轮状病毒,查出阳性39份,阳性检出率为37.1％,与电镜检查,核酸PAGE和ELISA相比较,符合率分别为83.3％,91.7％和98.1％。同时还建立了用反向间接血凝抑制(RIHI)试验检测人和动物血清轮状病毒抗体的方法。两法特异性好,简便快速,易于推广。