日本血吸虫童虫冷冻保藏方法的改进

研究日本血吸虫童虫保藏技术的目的是为了使经冷冻的童虫直接应用于免疫预防、免疫诊断、药物治疗的感染动物模型及虫种保存。自从James(1981)首先提出冷冻保存曼氏血吸虫以来,Stirewalt等(1984)、许绶泰等(1989,1990)相继进行冷冻保存血吸虫方法的研究。本文是在上述工作的基础上,对许绶泰等的冷冻保存童虫技术进行改进,以找出可以实际应用的方法。 (一)材料和方法 冷冻用日本血吸虫尾蚴由本所钉螺室提供,所用钉螺系湖北钉螺,血吸虫为日本血吸虫中国大陆株安徽贵池品系。

内蒙古土耳其斯坦东毕吸虫及其在终末宿主体内发育的研究

通过本试验证实土耳其斯坦东毕吸虫在终末宿主体内发育是:尾蚴侵入皮肤后至第5天皮肤内发现童虫,其中1.5～2.5天皮内童虫最多,并在2.5天开始向肺组织移行,至第6.5天肺组织内发现较多童虫,第8.5天肺组织内童虫数明显减少,并开始向肝脏的静脉管移行。在感染后第12.5天,肺组织内已找不到童虫,肝脏内可找到大量童虫。在感染后22.5天,大量童虫定居在肝脏的门静脉和肠系膜静脉内,同时发现部分配偶合抱的虫体。其结果表明:土耳其斯坦东毕吸虫的移行路线是由皮肤侵入后经静脉管入肺静脉后又随血循环进入肝脏,最终定居肝门静脉和肠系膜静脉,这与日本血吸虫的移行路线基本相同。

吡喹酮肌肉注射液治疗山羊实验感染日本血吸虫病研究

本研究以二种吡喹酮肌肉注射液治疗山羊人工感染血吸虫病，剂量３０ｍｇ／ｋｇ，减虫率分别为９７．９％和９８．６％，减雌率分别为９７．９％和１００％；剂量２０ｍｇ／ｋｇ，减虫率分别为９６．３％和９８．１％，减雌率分别为９６．９％和９８．４％，显示了良好的疗效。二种吡喹酮肌肉注射液药剂稳定性好，放置二年，未见有毒性反应，建议可在现场试用。

中国大陆日本血吸虫同工酶谱的研究

本文报告应用酶电泳技术检测中国大陆云南、四川、湖北、湖南、江西、江苏、安徽七地自然隔离群日本血吸虫的ＬＤＨ、ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧ、Ｇ６Ｐ、ＧＤ１、ＩＤＨ、ＰＧＩ、ＡＤＫ、ＨＥＸ和ＥＳＴ１１种同工酶酶谱，情况。其中七地自然隔离群日本血吸虫的ＭＤＨ、ＭＥ、６ＰＧ、Ｇ６Ｐ、ＧＤ１、ＩＤＨ、ＰＧＩ、ＡＤＫ及ＨＥＸ９种同工酶图谱相同，说明我国大陆七地自然隔离群日本血吸虫基因结构基本相同，其亲缘关系密切。在ＬＤＨ同工酶图谱中，云南与四川；湖北与湖南；江西、江苏和安徽汇合为三个组群，这可能解释为我国日本血吸虫因地域关系而形成基因水平上的地理隔离群。而在ＥＳＴ同工酶图谱中，各地血吸虫图谱有差异和不同之处尚须进一步研究证实。

日本血吸虫童虫液氮冷冻保藏期的研究

日本血吸虫童虫经２４ｈ到２年冻藏后，其活力和感染率与冻藏时间长短不相关，与冻存培养液的ｐＨ相关，最佳ｐＨ为７。冻藏５０ｄ传至Ｆ４，冻藏２年传至Ｆ１。童虫及其子代在终宿主小鼠和中间宿主钉螺体内的移行、生长、发育、繁殖、传代、性别比率及对终宿主的致病力，同相应对照组无明显差异，由此证明日本血吸虫童虫可用液氮冻藏长期保种。

云南日本血吸虫群体生物学的研究

本文报告了我国云南南涧地区日本血吸虫群体生物学的特性。将捕获的该地区光壳钉螺，经人工选蚴，尾蚴感染实验家兔和小鼠，其平均虫卵开放前期、成虫回收率、两性虫体体长、性腺发育，血吸虫卵引起宿主肝脏组织的病理变化及幼虫大小和毛蚴感染异地钉螺的发育特点作了观察。并进行了１１种同工酶电泳图谱和蛋白质组分的分析。

重度感染日本血吸虫兔粪便虫卵孵化毛蚴试验

动物日本血吸虫感染强度是显示日本血吸虫病疫情和对环境污染状况的重要指数，也是选择治疗方式的主要依据。建立感染强度测定方法，可以为日本血吸虫病的防治和疫情监测提供技术和方法。由于日本血吸虫宿主动物繁多，既有各种家畜也有野生动物，其中间宿主又为两栖生活的...

绵羊日本血吸虫粪孵毛蚴的孵期和孵峰

绵羊日本血吸虫粪孵毛蚴的孵期和孵峰林邦发，孟秀珍，傅志强（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）现今，在家畜日本血吸虫病的诊断中，病原学的诊断方法仍然作为确诊的依据，目前使用粪孵毛蚴诊断日本血吸虫病中用三送（粪）三检或一送（粪）三检方法，检出...

日本血吸虫童虫冷冻保藏复苏后生活史循环的研究

本文报告了日本血吸虫童虫经液氮冻藏复苏后的生活史循环的情况。童虫冻藏３６天和５０天后腹腔注射感染小鼠，亲代成虫回收率为９．０和８．９％。感染鼠肝内的子代虫卵孵出的子１代毛蚴感染钉螺，感染率为５９和６７％；平均每个钉螺第１次逸出的子１代尾蚴数为８００～９００条。子１代尾蚴感染小鼠后，其子１代成虫回收率为５５和５６％。合抱雌、雄成虫的体长、性腺的发育和虫体对宿主的致病力与正常途径感染者无明显差异。

血吸虫阳性钉螺的冰箱保藏方法

血吸虫阳性钉螺的冰箱保藏方法林邦发（中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所２００２３２）日本血吸虫中间宿主的阳性钉螺是为研究血吸虫病的治疗、诊断、预防提供尾蚴和虫苗的重要材料，但阳性钉螺在实验室常温下培养，由于受环境（非自然条件）、生物（其它寄生虫和真...

肝片形吸虫幼虫在中间宿主体内的实验室培养

肝片形吸虫幼虫在中间宿主体内的实验室培养林邦发（中国农科院上海家畜寄生虫病研究所）肝片形吸虫病是危害家畜的重要寄生虫病，在我国的广大牧区，由于牛羊和其它反刍动物感染该病，而造成严重经济损失，为了防治和控制肝片形吸虫病的流行，必须开展化疗、免疫治疗和预...

日本血吸虫副肌球蛋白小鼠免疫试验

应用生物化学方法从日本血吸虫成虫中提取虫体副肌球蛋白,并把它结合佐剂FCA/FIA或BCG免疫两批BALB/c小鼠,获得了32.18%—48.52%的减虫率,但统计学上大都无显著差异.两次实验结果还表明,应用虫体副肌球蛋白结合FCA/FIA进行肌肉注射,和应用等量抗原结合BCG皮内注射免疫的BALB/c小鼠,获得的减虫率相当.

东方田鼠重复感染日本血吸虫试验研究初步

本试验以 10 0 0条日本血吸虫尾蚴同时攻击感染东方田鼠洞庭湖种群和东方田鼠宁夏指名亚种进行重复感染对比试验 ,并在攻击后不同天数分别同时解剖相同数目的两种群东方田鼠 ,收集其体内不同时段、不同部位的日本血吸虫童虫 ,比较结果证实东方田鼠对日本血吸虫具有天然的抗性 ,其抗性是可遗传的 ,不以东方田鼠的地域分布不同、生活环境的差异或传代数目的变化而有所不同 。

单克隆抗体和药物协同杀伤日本血吸虫的初步研究

本文报道了将保护性单克隆抗体SSj14和吡毗喹酮、菲诺贝特应用于抗日本血吸虫感染试验的初步结果:其中,单抗SSj14提纯物高剂量免疫昆明系小鼠后诱导的减虫率和减雌率分别为68.59%和70.33%;单抗SSj14和低剂量吡喹酮协同组在小鼠及兔体内诱导的减虫率和减雌率分别为82.36%和80.81%及40.72%、42.01%;菲诺贝特组的减虫率和减雌率分别为16.42%和24.66%;单抗、吡喹酮和菲诺贝特协同组的减虫率和减雌率分别为88.04%和90.73%.结果表明,保护性单抗SSj14可被应用于日本血吸虫病免疫预防的研究.

日本血吸虫重组抗原Sj GST Paramyosin 和 Sj 23对绵羊的保护性免疫试验

１９９４～１９９５和１９９７年应用日本血吸虫３类候选疫苗分别免疫绵羊，各组的减虫率、粪便虫卵减少率和组织（肝、大肠、小肠）的虫卵减少率分别是：虫体副肌球蛋白（ｎ－ｐａｒａｍｙｏｓｉｎ）组１７．４％～５５．３％，１４．６％～６８．１％和４８．９％～７６．７％；重组副肌球蛋白（ｒ－ｐａｒａｍｙｏｓｉｎ）组４１．４％～４４．２％，１５．９％～２５．１％和４１．１％～４８．０％；Ｓｊ２６谷胱甘肽Ｓ转移酶（ＧＳＴ）组５３．４％～６２．１％，１１．０％～３８．６％和１４．０％～６５．０％；ｒＳｊ２８ＧＳＴ组６１．４％～６８．５％，２２．９％～６０．０％和３９．０％～７６．０％；重组日本血吸虫２３ｋｕ大亲水区表膜蛋白（ｒＳｊ２３）组５１．２％～６６．１％，２１．９％～５８．４％和５４．３％～７６．７％。以ＥＬＩＳＡ检测免疫后的绵羊血清，３类抗原均诱发高水平的特异性ＩｇＧ抗体，表明以上疫苗具有诱发绵羊产生保护性免疫的作用。

中国大陆株日本血吸虫23kD基因重组抗原的研究──重组的23kD抗原大亲水区多肽对小鼠的免疫试验

把编码中国大陆株日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽的ＤＮＡ片段亚克隆到ｐＧＥＸ载体上进行表达，并用重组抗原和载体ｐＧＥＸ表达蛋白分别免疫了二批ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，结果与未免疫小鼠和载体ｐＧＥＸ表达蛋白免疫小鼠相比，重组抗原免疫小鼠分别获得了５７．８０％～７０．３０％和５２．６３％～６２．９６％的减虫率，证明重组的日本血吸虫２３ｋＤ抗原大亲水区多肽可诱导宿主抗血吸虫攻击感染的部分保护力。

IgM单抗体内、外杀伤日本血吸虫的研究

本文报道应用急性感染日本血吸虫的Ｂａ１ｂ／ｃ小鼠脾细胞和ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获得了一株具有抗血吸虫攻击感染保护作用的ＩｇＭ单抗ｓｓｊ１４。在被动免疫转移试验中，这株单抗在小鼠体内提供了２７．６９％～６８．５％的减虫率。体外ＡＤＣＣ试验显示该单抗参与了巨噬细胞和嗜酸性粒细胞介导的杀伤血吸虫童虫的作用，免疫化学特性测定表明该单抗同时对血吸虫尾蚴、成虫和虫卵三期虫体抗原起反应，靶抗原的分子量为２９０ＫＤ，分别位于血吸虫童虫和成虫的表膜及虫卵的卵壳。靶抗原表位的化学性质为多糖类，它同时被辐照致弱尾蚴免疫的大鼠血清、血吸虫慢性感染人血清和小鼠血清所识别。本文结果表明，ＩｇＭ抗体和多糖类抗原在血吸虫病免疫保护作用中发挥了重要的作用。

日本血吸虫冷冻童虫苗免疫绵羊试验

Taylor等(1976)的研究证明,用同种血吸虫辐照尾蚴或辐照童虫免疫接种绵羊,可使其对梅氏血吸虫(S.mat-theei)产生抵抗力。该作者等1979年用同种辐照童虫苗免疫接种绵羊,证明后者对牛血吸虫(S.bovis)也能产生抵抗力。Bick-le等(1979)应用同种和异种辐照致弱童虫免疫绵羊对抗梅氏血吸虫和牛血吸虫进一步作了试验观察。但直到1985年James等才首先应用冷冻辐照致弱童虫苗免疫接种绵羊预防牛血吸虫。关于绵羊日本血吸虫病方面,尚未见到有关免疫预防的报道。绵羊是日本血吸虫的易感动物之一。在我国人畜共患血吸虫病的传播方面,绵羊具有一定的重要性。

日本血吸虫谷胱甘肽S－转移酶小鼠免疫试验

用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析柱纯化中国大陆株日本血吸虫成虫谷胱甘肽Ｓ－转移酶（ＧＳＴ）。把纯化的ＧＳＴ结合福氏性剂免疫了二批达ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，获得了２９．５８～３２．７１％的减虫率和５２．９４～６８．１３％的粪便减卵率。ＥＬＩＳＡ试验表明免疫小鼠产生了体液免疫应答，免疫印迹试验（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔｔｉｎｇ）显示日本血吸虫水溶性成虫抗原和ＧＳＴ抗原的２６、２８ｋＤ蛋白被免疫小鼠血清所识别。

单克隆抗体和吡喹酮协同杀伤日本血吸虫的初步研究

昆明系小白鼠人工感染日本血吸虫尾蚴前２ｈ，４组口服低剂量吡喹酮（吡２０ｍｇ／ｋｇ或吡５０ｍｇ／ｋｇ），并被动免疫转移抗日本血吸虫单抗（ＭｃＡｂ１４或ＭｃＡｂ２４），其减虫率分别为４５．４０％（ＭｃＡｂ１４＋吡２０ｍｇ／ｋｇ）、４４．１５％（ＭｃＡｂ１４＋吡５０ｍｇ／ｋｇ）、４５．７４％（ＭｃＡｂ２４＋吡２０ｍｇ／ｋｇ）和６５．８７％（ＭｃＡｂ２４＋吡５０ｍｇ／ｋｇ），均高于２组被动免疫转移单抗组的减虫率［２９．８８％（ＭｃＡｂ１４）、４０．０１％（ＭｃＡｂ２４）］和２组单剂吡喹酮组的减虫率［１３．８５％（吡２０ｍｇ／ｋｇ）、３１．５０％（吡５０ｍｇ／ｋｇ）］。实验结果提示，单抗协同吡喹酮，可提高减虫率，对预防日本血吸虫病具有一定意义。