通过型固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定中华鳖中8种抗病毒药物及2种代谢物

本研究以中华鳖中8种抗病毒药物(antiviral drugs,ATVs)及2种代谢物为研究对象,采用Wallelut Lipoclean磷脂去除小柱净化样品,建立了通过型固相萃取净化模式与超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)相结合的快速检测方法。样品在37℃下经酸性磷酸酯酶酶解,1%乙酸乙腈提取,通过型固相萃取小柱净化,40℃下氮吹浓缩后采用UHPLC-MS/MS检测,多反应监测(MRM)模式采集数据,内标法定量。针对不同ATVs之间极性差异大的特点,实验优化了仪器参数和前处理条件,重点对色谱柱进行了筛选并排除了生物内源性物质尿苷对利巴韦林的分析干扰,同时讨论了前处理过程中提取液和净化小柱选择对提取效率和净化效果的影响。在最优实验条件下,10种目标物在一定质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r 2)为0.994~0.998,方法检出限(MDL)为0.05~1.1μg/kg,方法定量限(MQL)为0.18~3.8μg/kg。在低、中、高3个添加水平下10种目标物的平均回收率范围为82.5%~103%,相对标准偏差(RSD)为3.11%~12.1%。该方法操作简便、快速、灵敏,重复性好,可用于大批量样品的同时快速检测,并成功应用于省级水产品质量安全风险监测工作。

同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定鱼肉粉中五氯酚钠的不确定度评定

采用同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定鱼肉粉中的五氯酚钠含量,依据JJF 1059.1—2012《测定不确定度评定与表示》等不确定度评定的相关标准及规范,对测定结果的不确定度进行评定。分别对标准溶液配制、样品称量、标准曲线拟合、测量重复性等影响不确定度的分量进行分析。结果表明,不确定度的主要来源是标准溶液的配制、样品测定重复性和标准曲线拟合。当包含因子k=2时,同位素稀释液相色谱-串联质谱法测定鱼肉粉中五氯酚钠的含量为24.4μg/kg,在95%的置信区间下,扩展不确定度为1.0μg/kg。该方法为科学评价实验结果的准确性提供依据,为评定其他相关检测方法的不确定度提供参考。

水产品药物残留快速检测质量控制技术探讨

水产品药物残留快速检测质量控制技术是确保检测数据准确性的重要基础,是水产品质量安全监管工作的重要组成部分,包含保证检测数据科学准确的全部活动措施。本文从检测人员、设备环境、方法标准、快检产品、质控样品等环节对结果判定的影响进行阐述,旨在探讨在水产品药物残留快速检测工作中,如何规范工作流程,严格质控措施,确保检测结果的科学准确并被有效采用,以期推动水产品检测行业的健康发展。

基于通过型固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中的氯霉素和红霉素

建立通过型固相萃取-高效液相色谱-串联质谱同时快速测定水产品中氯霉素和红霉素的分析方法。样品通过乙腈提取,Oasis PRi ME HLB小柱一步法净化,采用高效液相色谱-串联质谱仪多反应监测扫描模式检测和同位素内标定量。检测水产品中的氯霉素和红霉素定量限分别为0.1μg/kg和0.5μg/kg。不同水产品(鱼、虾和蟹)在3个添加水平的平均回收率在86.7%~102.6%之间,相对标准偏差小于5%(n=6)。本方法简单易行、灵敏度较高,在日常检测方面存在一定优势。

谷胱甘肽修饰的金纳米粒子探针比色法检测神经元素3

采用柠檬酸钠还原法合成了粒径为13 nm 的金纳米粒子,并在其表面修饰上谷胱甘肽（ GSH-AuNPs）。在一定的盐浓度范围内,谷胱甘肽能保护金纳米粒子免受盐诱导的聚集。当神经元素3（ Neuroge-nin3,ngn3）多肽片段存在时,在一定的盐浓度下,ngn3片段能够诱导GSH-AuNPs发生聚集,使金纳米粒子溶液由红色变成蓝色。以谷胱甘肽修饰的金纳米粒子为探针,建立了快速检测ngn3片段的比色方法。通过优化得到的最适实验条件为：ngn3与 GSH-AuNPs 的平衡反应时间10 min,缓冲液pH=6.0, NaCl 浓度100 mmol/L。在优化条件下,检测ngn3的线性范围为20~300μg/L,检出限（ LOD）为8μg/L。结果表明,本方法具有良好的选择性,可用于实际样品的检测。

新型QuEChERS方法结合高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱法快速测定鱼肉中14种激素

建立了一种新型QuEChERS前处理方法,结合高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱（LC-Q-TOF/MS）技术对鱼肉中14种激素进行快速筛查测定。样品加入水分散基质后采用乙腈提取,提取液经增强型基质去脂吸附剂（EMRlipid）脱脂,盐析后采用PSA吸附剂进一步净化并浓缩,然后用LC-Q-TOF/MS方法检测分析。所有药物在线性范围内线性良好,定量限范围为1.4-6.7μg/kg。3个添加水平（n=6）下草鱼基质的平均回收率为75.4%-103.6%,相对标准偏差（RSD）为2.4%-9.5%;大黄鱼基质的平均回收率为73.4%-101.5%,相对标准偏差（RSD）为2.4%-9.1%。该方法利用精确质量数匹配和自建标准谱库检索,实现快速筛查,并使用多级特征碎片离子进行确证,具有操作简便、结果准确等优点,适用于不同鱼肉基质,可作为鱼肉中14种激素类药物的高通量筛查和确认检测方法。本研究为监测鱼肉中激素类药物的风险提供了有效的技术手段。

水产品中五氯酚及其钠盐的高效液相色谱串联质谱检测方法的优化

对水产品中五氯酚及其钠盐的高效液相色谱串联质谱检测方法进行了深入优化。样品通过三乙胺碱化的70%乙腈水溶液提取,使目标物保持在离子态,之后采用大粒径的阴离子交换(MAXLP)小柱进行富集,依次用5%氨水(V/V)溶液、甲醇和50%的甲醇水溶液(含2%甲酸,V/V)进行淋洗,最后用5mL的4%甲酸甲醇溶液洗脱。净化浓缩后样品采用C18色谱柱进行分离,以甲醇和5mmol/L乙酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,多反应监测负离子模式扫描,采用同位素稀释内标法定量。目标化合物在相关范围内线性关系良好,相关系数r不低于0.99,方法在不同水产品基质中的定量限均为0.5μg/kg,基质加标回收率范围为92.4%~102.0%,相对标准偏差为3.21%~9.15%。经验证,本研究优化后的方法适用于水产品中五氯酚及其钠盐的残留检测,且相比标准方法,减少了前处理所需时间,同时避免了堵柱情况出现,解决了蟹类样品回收率偏低的问题。

高效液相色谱-串联质谱法快速测定乌鳢肌肉中金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚残留

采用通过型固相萃取方式净化样品,建立了乌鳢(Ophiocephalus argus Cantor)肌肉中金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚的液相色谱-串联质谱快速分析方法。样品采用80%乙腈水溶液(含0. 1%甲酸,V/V)进行提取,使用Oasis PRi ME HLB通过型固相萃取柱净化。净化后样品采用Phenomenex Kinetex F5色谱柱分离,以乙腈和5mmol/L乙酸铵水溶液(含0. 1%甲酸,V/V)为流动相进行梯度洗脱,多反应监测正离子模式扫描,采用同位素稀释内标法定量。3种目标化合物在相关范围内线性关系良好,相关系数不低于0. 99,定量限均为0. 5μg/kg,基质加标回收率为91. 7%～104. 0%,相对标准偏差为4. 6%～8. 1%。该方法前处理操作简便,灵敏度和准确度高,成功运用于24批次养殖乌鳢样品中金刚烷胺、金刚乙胺和美金刚的同时快速测定,结果上述药物均未检出。

QuEChERS-LC-MS/MS法测定水产配合饲料中4种常见黄曲霉毒素残留

采用改进的QuEChERS方法净化样品,建立水产配合饲料中4种常见黄曲霉毒素的液相色谱-串联质谱(LCMS/MS)分析方法。样品经水相基质分散后酸化乙腈提取,获得的提取液再经增强型基质去脂吸附剂(EMR-lipid)脱脂,盐析后经过N-丙基乙二胺(PSA)、氨丙基(NH_2)、十八烷基键合硅胶(C_(18))和无水硫酸镁(MgSO_4)吸附剂进一步净化并浓缩,然后用LC-MS/MS方法检测分析。结果显示:所有目标物在线性范围内线性良好,定量限均为1.0μg/kg。水产配合饲料中4个添加水平(n=6)的平均回收率为84.6%~104%,相对标准偏差(RSD)为3.5%~11%。该方法前处理操作简便,实验成本较低,灵敏度和准确度高,可实现水产配合饲料中4种黄曲霉毒素的准确测定。

HPLC-Q-TOF/MS法同时测定渔用饲料中磺胺类和喹诺酮类药物残留

建立高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱法(HPLC-Q-TOF/MS)同时测定渔用配合饲料中9种磺胺类和6种喹诺酮类药物的分析方法。结果表明,所有药物在线性范围内线性良好,相关系数均大于0.985,检出限为3.0~8.0μg·kg-1,定量限为10.0~25.0μg·kg-1。3个不同添加水平(n=6)的平均回收率为61.8%~92.4%,相对标准偏差为4.3%~12.3%。该方法操作简单、结果准确,适用于渔用配合饲料中多种磺胺类和喹诺酮类药物的快速定性筛查和定量检测。

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速筛查和确证渔药中86种非法添加化学品

建立了超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法快速筛查与确证渔药中86种非法添加禁限用药物的方法。渔药以80%(v/v)乙腈水溶液进行提取,通过稀释降低基质效应,采用ACQUITY PREMIER HSS T3色谱柱进行分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾双喷离子源(Dual AJS ESI)正离子模式分析检测。建立了86种药物的一级精确质量数据库和二级碎片质谱库。在全扫描采集模式下,以化合物的色谱保留时间、精确质量数、同位素分布和同位素丰度比定性;在Target MS/MS采集模式下,通过二级碎片离子的匹配进一步确证化合物,以准分子离子峰的峰面积定量,实现渔药样品中多目标药物的快速定性定量分析。86种药物在各自的线性范围内均呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.99,中草药制剂和抗生素粉剂的定量限(LOQ)范围分别为1~15 mg/kg和5~75 mg/kg,添加回收率范围为76.8%~112.1%,相对标准偏差(RSD,n=3)小于11.7%。该方法快速、简便、准确、灵敏,适用于不同种类渔药中禁限用非法添加药物的高通量筛查。将该方法应用于浙江省渔用投入品质量安全监督抽检项目中,共筛查60个样品,其中8种中草药制剂筛查出说明书中未明确标明的药物成分,1种抗生素粉剂未检出有效成分。该研究为渔药的质量安全监控提供了有效的技术手段。

LC-MS法测定水产品药物残留试验中减少基质干扰问题的方法探讨

对液相色谱—质谱联用法同时测定水产品中6种磺胺类和2种喹诺酮类药物残留的方法进行改进。结果显示,在50.0μg·kg^(-1)的加标水平下,采用液相色谱—质谱联用法同时测定草鱼和南美白对虾中6种磺胺类和2种喹诺酮类药物,平均加标回收率为56.5%~100.0%。通过复溶、冷冻的方法除去蛋白,平均回收率可提高到67.5%~101.0%,同时增加定容体积至2 mL,在10.0、30.0、50.0μg·kg^(-1)加标水平下,平均回收率可提高到84%~102%,相对标准偏差为3.5%~10.2%。

浙江省“渔业产业大脑”--渔业产业公共智能数字化平台构建探索与实践

数字经济时代下,以数字赋能助力农业产业高质量发展,是乡村振兴、渔业产业换道跨越发展的重点和关键。根据浙江省数字化改革“要加快推进‘产业大脑’向农业、服务业延伸”的要求,浙江省农业农村厅以数字化改革为引领,开发建设了全国首个省级渔业产业公共智能数字化平台--浙江“渔业产业大脑”。该平台围绕渔业生产、分配、流通、消费、要素、服务进行数字赋能,打造渔场建设、水产种业、养殖生产、质量安全、融合发展和政策服务等六大全产业链应用场景,集成产业地图,上线“浙农渔”服务端和治理端小程序,优化产业发展管理服务,促进渔业产业高质量发展,推动渔业全产业链数字化,实现帮农促富。文章总结了浙江省渔业产业公共智能数字化平台建设的内容和经验,以期为渔业数字化转型升级发展提供借鉴。

饵料类型对乌鳢肉色、肉质和营养成分的影响

乌鳢为我国主要的优质底栖淡水鱼类,也是目前养殖较为广泛的鱼类,养殖过程中所投喂的饵料往往影响着乌鳢体型、肌肉色泽、肉质和营养成分,这些均为衡量乌鳢食用品质的重要指标。本试验旨在通过测定投喂不同饵料的乌鳢鱼体形态、肉色、肉质和营养成分指标,研究饵料对乌鳢品质的影响。试验采集了相同喂养时间的全程饲料喂养、全程冰鲜鱼喂养和动物内脏(鸡肝、鸭肝)喂养的乌鳢,测定了肌肉肉色、硬度、弹性、紧实度等肉质指标以及营养成分指标。结果表明,不同饵料喂养的乌鳢肉质存在显著差异(P<0.05),乌鳢的营养成分与其食用品质具有一定的相关性。

周期性“饥饿-再投喂”对大口黑鲈幼鱼补偿生长的影响

在水温(26.5±1.2)℃下,将体质量(45.70±0.56)g的大口黑鲈Micropterus salmoides幼鱼分为4组,饲养在采光大棚内的30m2水泥池中,每池40尾,D0组每天饱食投喂2次,D1、D2、D3组分别投喂6d、5d、4d,饥饿1d、2d、3d,持续8周,每组3个重复池塘,研究周期性“饥饿-再投喂”对大口黑鲈幼鱼补偿生长的影响。结果发现,随着每周饥饿天数的增加,大口黑鲈的末体质量和增重率均不同程度下降,但D1组与D0组无显著差异(P>0.05)。大口黑鲈的日摄食量随饥饿时间的增加而显著提高(P<0.05),但各组间无显著差异(P>0.05)。D1组的饲料利用效率和蛋白质效率与D0组无显著差异(P<0.05);而D2和D3组显著低于D0组(P<0.05)。试验结束时,鱼体粗蛋白和粗脂肪含量随饥饿时间增加而下降。D3组鱼的胃和肠道蛋白酶活性显著低于D0组(P<0.05);D1组的胃和肠道脂肪酶活性较高;D1和D2组胃淀粉酶活性较高,肠道淀粉酶活性则随着饥饿时间增加显著上升(P<0.05)。饥饿使大口黑鲈血清甘油三酯和总胆固醇含量降低,血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶活性增加。血清生长激素水平随着饥饿时间增加而上升,类胰岛素生长因子-Ⅰ水平则下降(P<0.05)。结果表明:每周投喂6d饥饿1d的大口黑鲈饲料转化效率较高,实现了完全补偿生长,可供集约化养殖的科学投喂参考。

高效液相色谱-串联质谱法检测鱼肉中5种头孢类药物

建立高效液相色谱-串联质谱法同时检测鱼肉中5种头孢类抗生素(头孢氨苄、头孢洛宁、头孢匹林、头孢喹肟和头孢唑啉)残留的检测方法。鱼肉基质经乙腈提取,Prime HLB(6 m L,200 mg)固相萃取小柱净化。采用AB-4500 Qtrap液相色谱-串联质谱仪,Accucore C18 RP-MS色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm),以乙腈和体积分数0.1%的乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 m L/min,柱温30℃。采用电喷雾离子源,正离子扫描,多反应监测模式,外标法定量。结果表明:5种头孢类药物在0~75 μg/kg范围内线性良好,且在8 min内完全分离;5种头孢类药物的检出限均为0.5 μg/kg,定量限为2.0 μg/kg;在10、25、40 μg/kg加标水平下,5种头孢类药物的批内平均加标回收率为81.0%~111.0%,相对标准偏差为0.41%~10.50%,批间平均加标回收率为84.7%~106.0%,相对标准偏差为0.88%~8.71%。

Captiva EMR-Lipid小柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法快速测定水产品中五氯酚钠残留

本研究建立了一种基于Captiva EMR-Lipid小柱净化结合高效液相色谱-串联质谱技术(LC-MS/MS)快速分析多种水产品基质中五氯酚钠残留的方法。样品经1%乙酸乙腈溶液(v/v)提取,Captiva EMR-Lipid小柱净化后采用LC-MS/MS方法进行检测。选择ZORBAX RRHD Eclipse Plus C_(18)色谱柱作为分析柱,甲醇和5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相进行梯度洗脱,多反应监测负离子模式扫描,同位素内标法定量。结果表明,五氯酚钠在相关范围内线性关系良好,相关系数r不低于0.99,本研究方法在缢蛏(Sinonovacula constricta)、罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)、大口黑鲈(Micropterus salmoides)、中华鳖(Trionyx Sinensis)、大黄鱼(Larimichthys crocea)和青蟹(Scylla)样品中的定量限均为0.5μg/kg,基质加标回收率范围为89.6%~103.0%,相对标准偏差为4.39%~12.20%。该方法操作简便,测定结果准确、可靠,适用于水产品中五氯酚钠残留的快速测定。

凝胶色谱净化-气相色谱串联质谱法测定海产品中得克隆残留量

建立了凝胶色谱(GPC)净化、气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)测定海产品中得克隆的方法。得克隆包括syn-DP和anti-DP两种异构体,样品中的得克隆经正己烷/丙酮(1:1,v/v)溶液提取、GPC净化后,GC-MS/MS采用多反应监测模式(MRM)采集数据后进行定性/定量分析。得克隆的加标回收率:syn-DP测定回收率为89.3%~102.5%;anti-DP测定回收率为85.4%~102.1%。syn-DP和anti-DP的检出限分别为0.2μg/kg和0.5μg/kg(S/N=3)。方法的相对标准偏差(RSD)均≤10.0%。采用本方法对采自温州的美国红鱼、中国毛虾,采自台州的鲈鱼,以及采自舟山的大黄鱼进行检测分析,结果上述样品均未检出。

色谱-质谱联用在渔业污染事故分析中的应用

提出一种以乙酸乙酯为萃取溶剂、HP-5毛细管柱为色谱柱,结合气相色谱-质谱联用仪全离子扫描和选择离子扫描2种工作模式数据,对未知污染物进行分析的方法。应用该方法对宁波市象山县暴发的三疣梭子蟹苗种死亡事故进行调查分析,结果表明,在象山县三疣梭子蟹养殖塘水质、底质中均检测到高毒有机氯杀虫剂——硫丹,为渔业污染事故调查提供了强有力的依据。

浙江沿海重点养殖区域主要贝类重金属监测分析及膳食暴露评估

通过2017—2021年对浙江省沿海重点养殖区域缢蛏、贻贝等主要养殖贝类重金属的镉、铅含量进行调查监测分析,了解浙江沿海重点养殖区域主要养殖品种缢蛏、贻贝重金属污染水平,对其进行污染指数评价和膳食暴露评估,对其产品质量和消费安全进行评估。我们使用国标电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)食品中多元素测定方法对样品进行检测,并利用SPSS 23.0等对监测结果进行生物质量指数评价和膳食暴露评估。结果发现,503批次的贝类样品中,未有超过限量值标准的样品。贻贝铅元素整体污染水平较低,缢蛏铅元素污染水平略高,且有逐年上升趋势。镉元素整体污染水平比铅元素要低,其中贻贝的镉元素含量要远高于缢蛏的镉含量。铅元素在贻贝中生物质量指数较低,污染水平有逐年增加的趋势;镉元素不同地区污染水平不一,南麂岛区域污染水平高于嵊泗区域。贻贝铅元素膳食暴露量较低,铅元素的膳食暴露量均呈现逐年上涨的趋势,镉元素的膳食暴露量情况略好,没有出现超过世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会(JECFA)推荐值的情况,贻贝中镉元素的膳食暴露量要远高于缢蛏中镉元素的膳食暴露量。浙江沿海重点养殖区域主要养殖贝类铅、镉含量处于合格范围内,不同区域、不同品种的贝类重金属富集有差异。在进行膳食评估和膳食指导上,应根据不同的年龄阶段、不同的重金属元素分别进行评价。