新型分子标记——SRAP与TRAP及其应用

SRAP与TRAP是最近发展的新型分子标记系统,具有简单、高效、高共显性、重复性、易测序等优点,尤其是可检测基因的可译框(ORFs)区域。本文对分别在芸薹属作物与向日葵中开发的SRAP、TRAP标记系统的基本原理与分析程序进行介绍。引物设计是SRAP与TRAP分析的关键,目前已开发出多个SRAP正、反向引物;与SRAP标记技术无须任何序列信息不同,TRAP技术需要基于已知cDNA或EST序列信息设计固定引物才可进行PCR扩增;二者PCR条件采用复性变温法,前5个循环复性温度为35℃,后30～35个循环为50℃;扩增产物可在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶上电泳,同位素或银染、EB检测。目前这两种标记系统已开始在多种作物的种质资源鉴定评价、遗传图谱构建(包括转录图谱)、重要性状标记乃至基因分离克隆等方面成功应用。

栽培茄与红茄(Solanum integrifolium)种间杂交及其杂种的特性分析

运用有性杂交方法 ,以野生种红茄与栽培种七叶茄、徐紫茄、安长茄为亲本进行种间杂交 ,结果仅获得红茄×七叶茄种间杂种。对F1 杂种若干特性进行分析 ,结果表明 :种间F1 多数形态性状居中 ,在生长势方面具有明显的杂种优势 ;F1 叶片中POD同工酶表现为双亲“完全互补型” ,COD、EST同工酶兼含双亲的部分谱带 ,多偏向母本野生红茄 ,有时还出现杂种酶带 ;RAPD标记表现为“偏母的互补型” ;花粉育性极低。另外还对F1 回交中柱头与花粉内相互作用进行了初步研究 ,发现红茄、七叶茄、安长茄花粉与花粉管可在F1 柱头与花柱中正常萌发。

分子标记辅助选择聚合棉花Rf1育性恢复基因和抗虫Bt基因

胞质雄性不育恢复系 0 - 6 13- 2R与转Bt基因抗虫棉R0 19(轮回亲本 )杂交、回交产生BC2 群体。利用CMS恢复基因Rf1紧密连锁的 3个SSR标记和Bt基因的PCR标记开展分子标记辅助选择培育聚合有Rf1和Bt的转基因抗虫棉恢复系。在分析的 5 9个BC2 单株中 5 5株存在恢复基因标记 ,5 4株存在Bt基因 ;综合标记分析结果 ,共获得 5 4个同时具Rf1与Bt基因的聚合单株 ;这些聚合单株自交后 ,通过标记辅助选择 ,获得 10株含Bt基因且Rf1纯合的单株。

辣椒F1杂种遗传纯度的种子蛋白、同工酶与RAPD鉴定

采用SDS -PAGE电泳技术对辣椒F1杂种 0 2 - 16及其亲本种子蛋白进行分析 ,杂种纯度为 96 0 % ;苗期真叶POD同工酶电泳也可明显区分假杂种 ,纯度检测结果为 96 7%。研究了Mg2 + 、dNTPs浓度对扩增结果的影响 ,建立起适合辣椒的RAPD PCR体系 ;从 91个引物中筛选出父母本有差异的引物 3个 ,利用引物N5对F1纯度进行初步鉴定 ,检测结果为 95 5 %。 3种方法检测与田间小区鉴定结果 96 2 %基本一致 ,表明这 3种方法可作为辣椒F1杂种 0 2 - 16纯度快速鉴定的有效手段。RAPD分析还揭示了辣椒栽培种内遗传多样性较低。

分子标记技术在蔬菜作物品种鉴定与纯度检测中的应用

品种鉴定与遗传纯度检测是蔬菜作物种子品质检验极为重要内容。本文综述了以蛋白质、DNA为基础的分子标记,如蛋白质与同工酶、RFLP、RAPD、SSR、ISSR等分析技术应用于蔬菜种子检测的基本原理与进展。利用标记分析技术成功进行F1种子纯度检测的关键是亲本与杂交种间稳定差异位点的获得。已获得的重要园艺性状紧密连锁的遗传标记将有利于F1种子纯度鉴定。由于分子标记客观、稳定、快速、高效,这些技术将在今后种子检测中起到重要作用。

萝卜MSAP体系优化与抽薹过程中MSAP分析

对萝卜基因组DNA的MSAP关键步骤进行了优化并应用于抽薹过程中甲基化样式分析。研究表明,MSAP分析需要较高纯度的模板DNA,HpaⅡ/M spⅠ-EcoRⅠ酶切连接体系中可选用10×T+0.1%BSA Buffer作为通用缓冲液,适宜的酶切连接条件为37℃,4 h;预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增体系反应模板,用优化的体系可获得稳定的MSAP银染指纹图谱;在优化体系的基础上,使用18对引物分析了萝卜抽薹过程中DNA甲基化水平的变化情况,结果表明在未现蕾—现蕾—抽薹过程中基因组DNA甲基化水平先降低,随着花茎的伸长DNA甲基化水平又逐渐上升,各个时期,CCGG内侧胞嘧啶完全甲基化程度均高于半甲基化的程度。

新形势下园艺创新创业人才特征及培养

园艺业已成为当今我国发展最快最活跃的产业之一。本文对新形势下园艺创新创业人才的基本特征与素质作一初步分析 ,并探讨了在现阶段条件下 。

几种茄属植物基因组DNA提取与RAPD分析

研究了适于茄子及其近缘野生种基因组ＤＮＡ的提取方法，并对ＤＮＡ初步进行了ＲＡＰＤ分析。结果表明：ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法不适于茄属植物ＤＮＡ提纯，而改进的ＣＴＡＢ－酚－氯仿－异戊醇对其成株叶／芽即可获得较高产率及纯度的ＤＮＡ；ＰＣＲ反应扩增出不同片段，引物ＯＰＧ—１１扩增片段在栽培品种与野茄中无差异，而在红茄与龙葵中呈现出一定的多态性。

栽培茄(Solanum melongena)与野生茄种间杂交及F_1鉴定

运用不同杂交方法，以３个茄子栽培品种“七叶茄”、“安长茄”及“徐紫茄”作亲本，与野生种“野茄”、“喀西茄”进行种间杂交，结果仅获得野茄／安长茄种间杂种。采用形态学比较和同工酶电泳分析方法对获得的种间杂种进行鉴定，结果发现种间杂种Ｆ１多数形态特征及同工酶谱带等性状表现为“偏母的互补型”

生物技术在西瓜遗传育种研究中的应用

离体培养、基因工程与分子标记分析等生物技术应用于西瓜性状遗传改良研究取得重要进展。目前已建立了成熟的西瓜高效离体培养再生体系,主要应用于优良种苗快繁与重要性状遗传转化研究;染色体组水平的倍性操作已成功用于西瓜育种实践;在西瓜中已鉴定克隆多个重要性状基因;采用农杆菌介导或直接转化法,已将一些目的基因导入西瓜中,进行抗病、耐盐等重要性状改良;RAPD、RFLP、SSR、ISSR、AFLP等多种分子标记开始广泛应用于西瓜种质资源分析与系统演化、品种鉴定与倍性分析、遗传图谱构建、性状基因连锁标记与标记辅助育种等方面。

园艺植物育种学研究性教学模式改革

园艺植物育种学作为园艺专业的核心科目,不仅涵盖了园艺植物的遗传变异、繁育目标、繁育方式以及繁育技术等内容,更是一门需要不断创新和注重实践运用的学科。为了提升园艺植物育种学的教学品质与效果,旨在探讨并提出对园艺植物育种学研究性教学模式的改革,涉及教学团队建设、教学内容优化、教学方式创新以及实验方案改进等多个方面。通过研究性教学模式的实施,以期学生能够全面掌控园艺植物的育种特性与育种方案的设计和实施,同时深入理解园艺植物育种的基本原则和方法,将所学知识融会贯通到植物育种的实践中,为乡村振兴计划培养出优秀且高端的育种人才。

实施SRT计划,加强园艺专业学生科研技能培养

学生科研技能培养是创新教育的重要组成部分,学生科研技能素质应包括团队精神以及文献资料信息获取、科研计划设计、科研仪器操作、结果分析、总结与报告表达等方面的能力。实施SR T 计划是成功进行园艺学科大学生科研技能培养的关键环节,应从加强项目指导与监督、实行导师制、坚持实验室开放等方面,确保SRT 计划高效实施,促进本科生科研素质的提高。

美国加州青花菜生产及其关键技术

青花菜又名西兰花、绿菜花,其营养丰富,具有食疗功效,国际市场十分畅销,也是我国近年来重要的出口创汇蔬菜.加利福尼亚州是美国第三大州,面积411 013 km2;地形地貌多种,沿海多山,海岸山脉海拔600～2 000 m,太平洋沿岸温度一般不超过32℃,也不低于0℃;加州气候条件多样,是美国重要的蔬菜生产地.2000年美国主要蔬菜种植(收获)面积848 256 hm2,总产值932 519.9万美元;其中加州为361 635 hm2,占全美的43%,总产值493 797.8万美元,占53%.现对美国加州青花菜生产作一介绍.

《园艺植物生物技术》课程建设研究与实践

《园艺植物生物技术》是园艺专业本科教学核心课程之一。文章阐述了《园艺植物生物技术》课程建设背景、建设思路与基本措施。从提高认识、加强教学队伍、精选教学内容、推进双语教学、在线开放课程建设以及优化教学方案与模式等方面,进行高质量课程建设,注重学生基础理论与基本技能学习,努力将学生引向园艺植物生物技术学科发展前沿,促进了高素质、国际化的园艺创新型人才培养。

萝卜细胞质雄性不育性遗传机制及其利用研究进展

细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility,CMS)在萝卜与近缘芸薹属作物杂种优势利用中起着重要作用,CMS育性机制的研究有助于揭示细胞核-质互作的分子基础。萝卜CMS不育类型主要有Ogura、Kos、NWB和DCGMS等。Ogura CMS起源于日本野生萝卜,多在四分体-单核小孢子期败育;NWB和DCGMS CMS起源于欧洲野生萝卜,败育发生在单核小孢子时期。现已鉴定到多个萝卜CMS不育基因(orf 138、orf125、orf463和orf463a等)及育性恢复基因(Rfo、Rf3、Rfs、Rfk1和Rfd1等)。通过分析不育基因与恢复基因(Rf)的遗传模式、结构特征和相互作用,初步阐明了萝卜Ogura CMS形成与育性恢复机制,即Rf基因所编码的PPR-B蛋白特异结合不育基因orf 138 mRNA,充当核糖体阻断剂特异性地阻止翻译延伸,从而降低ORF138蛋白含量以恢复育性,但是PPR-B蛋白上的结合位点尚需鉴定。此外,本文还对育性恢复基因标记开发、雄性不育系转育以及作为近缘种的不育胞质源等萝卜CMS不育胞质利用相关领域研究进展进行了阐述,并展望了CMS不育性遗传机制与利用领域存在的问题及研究重点。

番茄、茄子及其近缘野生种抗性与品质的初步评价

对 1 0个番茄材料的抗热性、TMV CMV Mi及蚜虫的抗性、Vc可溶性固形物含量、糖酸比等品质指标进行了鉴定 ;对 7个茄子材料的抗热性、黄萎病、Mi、二十八星瓢虫的抗性及Vc、干物质含量等品质指标进行了评价。为更好利用野生种的优良性状和扩大栽培种基因库提供了理论依据。

茄生物技术育种研究进展

茄子是一种重要的世界性蔬菜。在茄体细胞变异、体细胞杂交、单倍体育种、遗传转化以及分子标记遗传图谱构建和重要性标记分析等方面已有研究 。

优质萝卜南春白1号

南春白1号是针对我国长江中下游地区春季萝卜生产上易抽薹、供应中存在着"春淡"等问题而选育出的优质萝卜一代杂种.其母本为优良雄性不育系L-51春A,抽薹晚;父本为白萝卜高代自交系NC-1,冬性强,配合力高,抗病.2002～2003年南春白1号在江苏、上海、安徽等地进行品种比较试验,表现晚抽薹,优质,抗病,目前开始在长江中下游地区示范推广.