黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠RAAS系统的影响

目的探究黄芪甲苷对骨质疏松模型小鼠维生素D系统和肾素-血管紧张素-醛固酮系统通路的影响,以期进一步阐明黄芪甲苷治疗骨质疏松的机制。方法将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为六组:空白组、模型组、黄芪甲苷低、中、高剂量组(6、12、25 mg/kg)、维生素D组(0.7μg/kg,1,25(OH)_(2)D_(3)),每组5只。采用HE染色法观察黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠骨组织病理学改变;采用ELISA法检测黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠血清AKP、25(OH)D_(3)的影响;采用Western-blot检测黄芪甲苷对地塞米松诱导的骨质疏松模型C57BL/6小鼠股骨VDR、FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达的影响。结果与空白组比较,模型组小鼠股骨骨皮质粗糙,破骨细胞增多,伴随凹坑吸收区域的增大,骨小梁变细,数量减少,间隙增大;与模型组比较,黄芪甲苷低、中、高剂量组小鼠股骨骨小梁变细、数量减少程度均明显减轻。与空白组比较,模型组小鼠血清AKP、25(OH)D_(3)含量显著降低(P<0.01);模型组小鼠股骨VDR蛋白表达量显著降低(P<0.01),FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,黄芪甲苷高、中剂量组和维生素D组小鼠血清AKP、25(OH)D_(3)含量显著升高(P<0.01);黄芪甲苷高、中剂量组和维生素D组小鼠股骨VDR蛋白表达量显著升高(P<0.01),FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达量显著降低(P<0.01)。结论黄芪甲苷可防治地塞米松诱导的C57BL/6J小鼠骨质疏松,其机制可能通过调节FGF23、ACE、AngⅡ蛋白表达有关。

基于中性粒细胞胞外诱捕网探讨白及修复溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障的作用及机制

目的基于中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)探讨白及对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜屏障的修复作用及机制。方法将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.3 g·kg^(-1))及白及低、中、高剂量组(0.3、0.6、1.2 g·kg^(-1)),每组8只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇灌肠法复制UC大鼠模型,造模成功后按照设定剂量灌胃给药,每日1次,连续灌胃给药21 d。在给药干预的第1、11、21天进行疾病活动指数(DAI)评分;采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理变化;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)含量;Western Blot法及免疫组化法检测大鼠结肠组织中NETs相关蛋白髓过氧化物酶(MPO)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、血管内皮生长因子(VEGF)以及紧密连接(TJs)相关蛋白封闭蛋白2(CLDN2)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠DAI明显升高(P<0.05);结肠组织黏膜层出现大面积变性坏死且肠腺结构消失,大量炎性细胞浸润,累及黏膜下层、肌层和浆膜层,病理评分明显升高(P<0.05);血清TNF-α、IL-1β水平明显升高(P<0.05);结肠组织中MPO、NE、VEGF、CLDN2蛋白表达明显升高(P<0.05),ZO-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠的DAI均明显降低(P<0.05);柳氮磺胺吡啶组和白及中、高剂量组大鼠结肠肠腺结构完整清晰,黏膜未见明显变性及坏死,可见少量炎性细胞浸润,病理评分明显降低(P<0.05);血清TNF-α、IL-1β水平明显降低(P<0.05);结肠组织中MPO、NE、VEGF、CLDN2蛋白表达明显降低(P<0.05),ZO-1表达明显升高(P<0.05)。结论白及可能通过调控NETs激活及TJs相关蛋白表达,降低血清炎症因子水平,从而修复肠道黏膜屏障,发挥治疗UC的作用。

基于肾藏精理论探讨中医药调控维生素D在泛血管疾病中的作用

动脉粥样硬化(As)是由于脂质沉积而引起的慢性炎症性病变,以As为最主要引发因素的泛血管疾病逐渐受到诸多学者的关注,其主要病理特征为血管病变。维生素D作为肾藏精的物质基础,在泛血管疾病中发挥重要的抗As作用,参与泛血管疾病的肾素-血管紧张素系统(RAS)调控、内皮细胞损伤、免疫反应改变、中性粒细胞胞外诱捕网调节、细胞凋亡和自噬等多个病理过程,是诸多研究中的新靶点。而中医药在泛血管疾病的防治中具有一定优势,其中药单味药、活性成分及复方可调控维生素D相关代谢,并对泛血管疾病的防治具有独特科学价值。该文主要对维生素D在动脉粥样硬化性泛血管疾病多个病理环节中的作用及相关中医药干预进行探讨,旨在从维生素D角度为中医药防治泛血管疾病提供有效思路。

基于细胞焦亡及中性粒细胞胞外诱捕网探讨刺梨根对溃疡性结肠炎大鼠的影响

目的 基于细胞焦亡与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)探讨刺梨根对溃疡性结肠炎(UC)大鼠的影响。方法 将大鼠随机分为正常组和造模组,造模组给予三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇联合灌肠建立UC大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、柳氮磺吡啶组(0.3 g/kg)和刺梨根低、中、高剂量组(2、4、8 g/kg),各组灌胃给予相应药物。给药21 d后,计算疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理改变,ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β和髓过氧化物酶(MPO)水平,Western blot及免疫组化法检测结肠组织NE、MPO、NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组DAI评分升高(P<0.01),血清IL-1β、IL-18、MPO水平升高(P<0.01),结肠组织NE、MPO、caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,柳氮磺吡啶组和刺梨根中、高剂量组DAI评分降低(P<0.05,P<0.01),血清IL-1β、IL-18、MPO水平降低(P<0.01),结肠组织NE、MPO、caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 刺梨根可能通过调控细胞焦亡及NETs缓解UC大鼠炎症反应,改善结肠病理损伤。

黄芪对银屑病小鼠模型皮损维生素D受体表达及IL-23、IL-17水平的影响

目的观察黄芪对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损维生素D受体(vitamin D receptor, VDR)表达及白细胞介素(interleukin, IL)-23、IL-17水平的影响。方法将造模成功小鼠,随机分为模型对照组、维生素D(30 ng/kg)组、甲氨蝶呤(1 mg/kg)组和黄芪低(2.4 g/kg)、中(4.8 g/kg)、高(9.5 g/kg)剂量组,另设正常对照组,持续干预3周。采用皮损严重程度指数(PASI)评分对小鼠皮损进行评分;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain, HE)染色观察小鼠皮损组织病理;酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测小鼠血清25(OH)D_(3)、IL-23、IL-17水平;Real-Time qPCR检测小鼠皮损VDR mRNA表达;免疫组化检测小鼠皮损VDR蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型对照组皮损改变明显,PASI评分显著升高(P<0.05),银屑病特征性病理改变,血清25(OH)D_(3)水平显著降低(P<0.05),IL-23、IL-17水平显著升高(P<0.05),皮损VDR mRNA、蛋白表达显著下调(P<0.05);与模型对照组比较,黄芪中、高剂量组和维生素D组、甲氨蝶呤组PASI评分显著降低(P<0.05),组织病理改善,25(OH)D_(3)水平显著升高(P<0.05),IL-23、IL-17水平显著降低(P<0.05),皮损VDR mRNA、蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论黄芪通过纠正IL-23、IL-17水平紊乱干预银屑病机制可能与调节VDR表达有关。

淫羊藿苷对心力衰竭血清中DCs与CD4^(+)T细胞共培养的影响

目的探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对心力衰竭血清中Dahl盐敏感大鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cells,DCs)与CD4^(+)T细胞共培养中CD4^(+)T细胞分化为辅助性T细胞(T helper cell,Th)17、调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)的影响。方法将50只SPF级5周龄雄性Dahl盐敏感大鼠(模型组)及同龄10只雄性Dahl盐抵抗大鼠(正常组)喂养至18周龄后麻醉制备心力衰竭血清与正常血清;收集分离2种大鼠的DCs与CD4^(+)T细胞,经流式细胞仪鉴定CD4^(+)T细胞纯度后将DCs和CD4^(+)T细胞按照110的比例共培养,共培养的细胞分为对照组(正常血清),模型组(心力衰竭血清),模型组^(+)维生素D组,模型组^(+)ICA高、中、低剂量组。药物干预24 h后收集细胞标本。流式细胞仪检测DCs和CD4^(+)T细胞共培养中Th17、Treg的阳性表达比例;ELISA检测DCs与CD4^(+)T细胞共培养上清液白细胞介素(interleukin,IL)-17、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、IL-6、IL-12、IL-10的水平。结果ICA与维生素D的治疗结果趋势一致,均可显著降低Th17细胞阳性表达率及Th17/Treg比值(P<0.01),升高Treg阳性表达率(P<0.01);显著升高IL-10水平(P<0.01),降低IL-17、TGF-β1、IL-6、IL-12水平(P<0.05)。结论ICA与维生素D能通过调节机体内Th17/Treg的平衡,降低促炎细胞因子IL-17、TGF-β1、IL-6、IL-12与升高抑炎细胞因子IL-10的表达来治疗心力衰竭。

四妙汤对高脂血症斑马鱼中性粒细胞募集的影响

目的:建立高脂血症斑马鱼模型,探讨四妙汤对高脂血症斑马鱼脂质代谢及中性粒细胞募集的影响。方法:受精5 d后的斑马鱼胚胎随机分为空白对照组,模型组,四妙汤高(2 mg/mL)、中(1 mg/mL)、低(0.5 mg/mL)剂量组,维生素D组(10μmol/L),阿托伐他汀钙组(0.3μg/mL),每组30条。采用高脂饲料喂养斑马鱼构建高脂血症斑马鱼模型,受精18 d后进行油红O染色、脂质水平、血管荧光成像、中性粒细胞募集检测。结果:与模型组比较,四妙汤低、中、高剂量组,维生素D组和阿托伐他汀钙组斑马鱼血管油红O染料附着减少,脂质沉积稍改善;四妙汤中、高剂量组,维生素D组和阿托伐他汀钙组总胆固醇、甘油三酯水平降低(P<0.05,P<0.01),四妙汤高剂量组和维生素D组血管荧光减少、管壁厚度降低(P<0.05),中性粒细胞在血管内的募集受到显著抑制(P<0.05)。结论:四妙汤可通过改善高脂血症斑马鱼模型脂质水平、降低血管荧光强度和管壁厚度、抑制中性粒细胞在血管内的募集实现对高脂血症的治疗。

土家药刺老苞不同极性提取物的HPLC指纹图谱方法验证研究

目的建立一种可用于不同极性刺老苞提取物的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱方法。方法采用HPLC法对色谱条件进行优化,并进行方法学验证。结果色谱条件为Agilent C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%磷酸(B)流动相梯度洗脱,检测波长280 nm,柱温30℃,进样量10μL。方法学验证显示,该HPLC指纹图谱法精密度、稳定性、重复性的相对标准偏差(RSD)符合要求。结论该HPLC指纹图谱法可同时应用于刺老苞不同极性提取物的检验,可初步比较各提取物之间的差异。

基于网络药理学与分子对接探索头花蓼抗肺炎的作用机制

目的:运用网络药理学与分子对接探索头花蓼抗肺炎的作用机制。方法:通过查阅文献收集头花蓼的化学成分,在chemdraw软件绘制分子结构图,通过PharmMapper数据库选择(NF)≥0.9的靶点蛋白获取潜在化合物的靶点;运用GeneCards、OMIM、DRUGBANK数据库以获得肺炎核心靶点;使用Metascape平台将头花蓼活性成分靶点和肺炎核心靶点交集进行GO和KEGG富集分析;使用Cytoscape3.8.2软件构建成分-靶点-通路图,AutoDock Tools 1.5.7、Pymol软件进行分子对接。结果:头花蓼中筛选获得38个活性成分、116个成分靶点、6个核心靶点;KEGG富集分析结果主要集中在IL-17信号通路、MAPK信号通路、TNF信号通路等;分子对接结果显示ALB、EGFR、CASP3、MAPK1、MAPK14、SCR与头花蓼主要化学成分的结合活性较好。结论:头花蓼中的核心化合物槲皮素、木犀草素、儿茶素等,可能通过ALB、EGFR、CASP3、MAPK1、MAPK14、SCR等靶点作用于IL-17、MAPK、TNF信号通路,从而达到治疗肺炎的作用。

黄芪生脉饮联合西药治疗慢性充血性心力衰竭的临床疗效观察

慢性充血性心力衰竭（CHF）是一种复杂的临床症状群，是各种原因引起心肌损伤，造成心肌结构和功能发生改变，致使心室充盈，射血障碍，心脏泵血功能降低不能满足机体代谢需要的一种临床综合征，是各种心脏病的最终发展阶段。常由冠心病、高血压、病毒性心肌炎等多种心血管疾病发展而来，

基于下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴探讨维生素D与肾虚证的关系

肾虚证的现代机制可能为下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能变化,而维生素D已经被证实与下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴具有较大关联,并且维生素D与肾上腺皮质的类固醇化合物合成相关,维生素D可能通过对下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴产生作用来对肾虚证产生影响。

黄芪对异丙肾上腺素致心肌肥厚大鼠维生素D-FGF-23-Klotho轴的调节作用研究

目的观察黄芪对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚模型血清25羟维生素D3、FGF-23、Klotho的影响。方法选用40只雄性SD大鼠,随机分为4组:对照组,模型组,黄芪8 g·kg-1组,卡托普利0.05 g·kg-1组。异丙肾上腺素2.4 mg·kg-1皮下注射,连续7d,造模结束,药物干预6周后酶联免疫法(ELISA法)检测血清25羟维生素D3[25(OH)D3]、Klotho、成纤维细胞生长因子(FGF-23),大鼠心肌标本HE染色,观察组织病理改变。结果与对照组比较,模型组血清25(OH)D3、Klotho降低,伴随血清FGF-23升高(P<0.05)。心肌HE染色见心肌排列紊乱,纤维化增生。与模型组比较,黄芪8 g·kg-1干预后,血清25(OH)D3、Klotho升高,FGF-23降低(P<0.05)。心肌纤维化程度减轻。结论黄芪具有调节异丙肾上腺素致心肌肥厚大鼠模型维生素D-FGF-23-Klotho轴的作用,逆转异丙肾上腺素致大鼠的心肌肥厚。

Th17/Treg细胞平衡:千金苇茎汤治疗COPD的潜在靶点

在慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发生发展过程中,Th17和Treg平衡起着至关重要的作用。而Notch通路对Th17和Treg有调节作用,可维持体内Th17/Treg的平衡,从而阻止疾病的进展。吸烟对人体健康的危害涉及到呼吸、心血管、神经等多个系统。千金苇茎汤是中医经典的清热解毒、清肺化痰、逐瘀排脓方剂,在临床中广泛用于包括COPD在内的各种呼吸系统疾病。为此,从千金苇茎汤对Th17/Treg的调节探讨与COPD的关系,为治疗提供了新的思路。

黄芪对维生素D缺乏大鼠骨质的保护作用

目的:观察黄芪对维生素D缺乏大鼠骨质的保护作用。方法:选用30只雄性SD大鼠,随机分为3组:对照组、模型组、黄芪组。实验周期8周。实验结束后,酶免法检测血清25羟维生素D3[25(OH)VD3]、成纤维生长因子-23[FGF-23]、Klotho,股骨HE染色。结果:与正常对照组比较,维生素D缺乏大鼠模型组血清25(OH)VD3、Klotho降低,FGF-23升高,存在骨质疏松。与模型组比较,黄芪组血清25(OH)VD3、FGF-23降低,Klotho升高;黄芪组骨质疏松明显改善。结论:黄芪具有调节维生素D缺乏大鼠FGF-23、Klotho,保护骨质作用。

红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达的影响比较

目的:通过研究红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞的增殖及B细胞白血病-淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bax)mRNA和蛋白表达的影响,初步探讨红景天心肌保护作用机制,并对两种饮片的效应差异性进行对比。方法:以H9c2心肌细胞为研究对象,分为正常组、模型组、红景天传统饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg/mL)、红景天破壁饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg/mL);H9c2心肌细胞给药后在缺血缺氧条件下培养8 h,试剂盒检测各组细胞存活率;PCR法检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA相对表达量;Western Blot法检测各组细胞Bax、Bcl-2蛋白相对表达量。结果:与模型组比较,红景天破壁饮片低、中、高剂量组及红景天传统饮片高剂量组均可显著提高H9c2细胞的存活率(P<0.05),相同剂量下,给予红景天破壁饮片的H9c2细胞存活率在不同程度上优于红景天传统饮片;红景天破壁饮片与传统饮片均可显著降低缺血缺氧H9c2细胞Bax mRNA及蛋白相对表达量(P<0.05),升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量(P<0.05)。结论:红景天改善缺血缺氧H9c2心肌细胞存活率、抗细胞凋亡作用具有剂量依赖性,且红景天破壁饮片的保护作用优于传统饮片,其作用机制与调节H9c2心肌细胞Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达有关。

补肾方药调节维生素D轴治疗阿尔茨海默病的作用机制

阿尔茨海默病是老年人群常见的疾病。维生素D缺乏与阿尔茨海默病有密切相关性。中医药补肾法对阿尔茨海默病具有一定的防治作用。但其作用分子机制有待进一步探讨。补肾方药能调节维生素D轴,为此,提出补肾方药可能通过调节维生素D轴治疗阿尔茨海默病的分子机制。

康心汤对维生素D缺乏小鼠心脏的保护作用研

目的:探讨康心汤对维生素D缺乏小鼠心脏的保护作用。方法:运用干扰维生素D合成的两个途径(避光及饮食),观察正常组、模型组、康心汤治疗组维生素D、肾素、心脏结构变化。结果:康心汤治疗组能改善维生素D缺乏模型心脏结构。结论:康心汤对维生素D缺乏模型心脏具有保护作用。

淫羊藿化学成分与药理作用研究进展

淫羊藿是临床上常用的中药,主要含有淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷、淫羊藿多糖、生物碱、植物甾醇、萜类化合物、绿原酸等营养成分及其他生物活性成分,对心血管系统、免疫系统、血脂、血糖均有调节作用,具有抗骨质疏松、降压、镇咳、祛痰等作用。临床上可用于治疗肾虚、骨质疏松和血管性疾病。对近年来关于淫羊藿化学成分与药理作用的研究进展做一综述,为淫羊藿的进一步开发利用提供理论依据。

从维生素D对mTOR的调节探讨补肾药物对衰老的作用机制

mTOR可对细胞内外各种刺激产生应答,其介导的信号通路与生长、代谢和衰老紧密相关。维生素D可抑制mTOR的表达并阻碍其下游信号通路,其受体VDR则参与mTOR、TGF-β、Hairless等信号通路的相互作用。而补肾药物可上调VDR的表达。研究已经证实,维生素D可延缓衰老的进程,并对与衰老相关的疾病有一定的控制作用。已有研究表明,将mTOR的表达降低后,小鼠的寿命明显延长。为此,从维生素D对mTOR的调节探讨补肾药物对衰老的作用机制。

从方剂“隐效”探讨乌头汤方证的拓展应用思路

通过分析乌头汤药物组成,结合方剂"隐效",探讨乌头汤方证的拓展应用,突破经方传统的应用范围,丰富乌头汤的配伍内涵信息,为更好地运用乌头汤提供临床思路。