宰前休息方式对猪福利、血液成分及肉质的影响

选取体质量约为100 kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪60头,随机分为3组:不休息组,休息3 h组,休息3 h+玩具组,公母各半。根据评分标准分别记录休息过程中猪的精神状况。放血时收集血样,用于分析血浆中皮质醇、促肾上腺皮质激素(ACTH)浓度,乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性,乳酸、血糖浓度;添加EDTA-K2抗凝剂的血样用于血细胞分析。同时在放血时,测定血温。屠宰后,测定背最长肌24 h滴水损失;背最长肌(LM)、半膜肌(SM)45 min以及24 h的pH、色值、导电率。结果表明:①休息3 h+玩具组在3个时间段的精神评分要极显著高于休息3 h组,随着时间的延长猪都表现出趋于平静的趋势;②休息3 h+玩具组和休息组3 h组在皮质醇、促肾上腺皮质激素要显著低于不休组(P<0.05),相反乳酸脱氢酶、肌酸激酶要显著高于不休息组(P<0.05),而休息3h+玩具组与休息3 h组差别不显著(P<0.05);③3个休息处理组在肉质指标上没有出现显著差别(P<0.05);④休息3 h+玩具组、休息3 h组在红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HGB)均要显著低于不休息组(P<0.05);休息3h+玩具组在白细胞数(WBC)上显著高于不休组(P<0.05);休息3 h组的淋巴细胞绝对值(W-SCC)显著高于不休息组(P<0.05);而休息3 h+玩具组与休息3 h组在所有的免疫指标上都没有显著差异(P>0.05)。根据上述的结果显示,宰前一定要让猪有一个休息的过程,这种措施能有效缓解猪的应激,并能恢复其免疫能力;在休息的过程中,添加部分福利玩具,至少对猪的精神状态有明显的好处。

宰杀方式对猪血液成分以及肉质的影响

选择体重约为100kg、氟烷基因型为NN的长×大二元杂交猪16头，按照年龄、体重相近，公母各半原则分为2组，试验1组采取直接刺杀心脏放血致死。试验2组采取电麻（75V、1．5A、3～4s）击晕后，割破颈部血管放血致死。屠宰后测定血液生化指标、相关肉质指标以及免疫指标。结果表明：屠宰方式对肉质与免疫能力的影响较小，但反映应激程度的激素指标（皮质醇、促肾上腺皮质激素）差异显著，在屠宰过程中，经历电麻击晕方式的猪比直接刺杀心脏放血屠宰的猪应激程度要小得多，从动物福利角度考虑，电麻击晕优于直接刺杀心脏放血。因此，在这2种屠宰方式选择上，应该优先考虑电麻击晕这一屠宰方式。

关于基层医院进修医师消化内镜教学的实践

消化内镜技术为诊断胃肠道疾病非常重要的技术。近年来，随着技术的发展，内镜技术已不再局限于单纯的诊断，而被越来越广泛地应用于内镜下组织粘合剂、套扎及硬化治疗食管胃底静脉曲张破裂出血等。我院内镜中心为西南地区最大的消化内镜诊疗培训中心，每年接收近千名基层医师及本科室研究生、实习生学习内镜诊疗技术，在临床带教过程中我们始终贯穿规范化教学，经过3—6个月的培训，取得了令人满意的效果。现报告如下。

熊脱氧胆酸和利福平诱导HepG2细胞核受体FTF和膜转运蛋白MRP3的表达

目的体外细胞培养观察利胆药物熊脱氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)及其衍生物牛磺熊脱氧胆酸(tauroursdeoxycholic acid,TUDCA)或利福平(rifampicin,Rif)对多耐药相关蛋白3(multidrug resistance-associate protein 3,MRP3)及其核受体FTF(fetoprotein transcription factor)表达的影响。方法用UDCA及其衍生物TUDCA或Rif分别刺激培养的肝癌细胞HepG2后,抽提HepG2的总RNA与细胞总膜蛋白、核蛋白,分别用Quantitative real-time PCR和Westernblot检测MRP3和FTF mRNA与蛋白水平表达的变化。结果UDCA及其衍生物TUDCA与Rif均可诱导HepG2细胞内核受体FTF表达增高,同时MRP3 mRNA和蛋白水平表达也相应增高。结论UDCA及其衍生物TUDCA和Rif刺激肝癌细胞HepG2细胞膜转运蛋白MRP3表达上调可能与核受体FTF途径相关。

齐墩果酸对阻塞性胆汁淤积大鼠胆酸转运蛋白OSTα/β和BSEP的调控作用

目的建立胆道结扎大鼠模型,观察胆道结扎所致肝外胆汁淤积时齐墩果酸对肝细胞表面胆酸转运蛋白OSTα/β和BSEP的调控作用。方法随机将45只SD大鼠分为9组,每组5只。假结扎组(Sham组)、胆道结扎组(BDL组)和齐墩果酸组(BDL+OA组)分别用生理盐水、齐墩果酸处理3 d、7 d、14 d后收集组织样本,提取肝脏RNA和总蛋白,分别在mRNA水平和蛋白水平检测OSTα/β和BSEP的表达变化。结果大鼠胆道结扎后,齐墩果酸干预3 d,胆酸转运蛋白OSTβ在mRNA和蛋白水平均增高,随着齐墩果酸干预时间的延长,在第7天时,胆酸转运蛋白BSEP的表达亦出现增高。第14天时,OSTα、OSTβ、BSEP表达均增高。结论齐墩果酸能够上调阻塞性胆汁淤积胆酸转运蛋白OSTα、OSTβ、BSEP的表达。

宰前应激对猪肉品质的影响及调控技术研究进展

宰前应激严重影响着猪肉品质以及猪的福利,引起了人们的广泛关注。国内外都在积极探索宰前应激对肉质的影响规律,以期望通过一些积极的调控手段来降低宰前应激对猪肉品质的影响,同时提高猪在运输、屠宰过程中的福利。本文主要综述了影响猪肉品质以及猪福利的宰前应激因素、应激的评价指标以及降低宰前应激的调控方法等方面的研究进展。

试论中国盐业垄断经营的法律规范问题

目前 ,中国盐业面临严重的行业垄断问题 ,政企不分 ,不规范的食盐与工业盐二元管理模式是这一问题症结所在。问题的解决不仅需要中国盐业在管理模式上进行创新 。

Ezrin上调HepG2细胞膜转运蛋白MRP2的表达

目的建立Ezrin基因表达缺失的Hep G2细胞株,并研究其在胆汁淤积时对Hep G2细胞胆汁酸转运蛋白多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的影响。方法不同位点干扰的Ezrin-shRNA质粒转染Hep G2细胞,筛选Ezrin基因表达缺失的Hep G2细胞。分别提取细胞总蛋白和膜蛋白,检测Ezrin基因表达缺失是否影响Hep G2细胞胆汁酸转运蛋白MRP2的表达。结果 RT-q PCR结果证实,Ezrin-shRNA#3质粒转染Hep G2细胞后成功抑制了Ezrin基因表达,抑制率为70%。蛋白免疫印迹表明,Ezrin基因表达缺失后,Hep G2细胞胆汁酸转运蛋白MRP2表达增高,但与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白免疫共沉淀检测生物素化MRP2膜蛋白表明,Ezrin基因表达缺失后,无论是胞浆中还是细胞膜上,MRP2膜蛋白均表达增高(P<0.05)。结论 Ezrin基因表达缺失后能够上调Hep G2细胞中MRP2膜蛋白,使其表达增高。

食盐专营的必要性及其法律规范问题的探讨

食盐是人民生活的必需品 ,食盐加碘 ,全民供应碘盐是消除碘缺乏病 ,提高国民素质 ,保护人民身体健康的重要工作。鉴于目前中国的实际情况 ,有必要对食盐实行国家专营管理 ,并且应该通过法律法规来规范食盐专营工作。

淮南猪与大白猪背最长肌不同发育阶段的甲基化差异基因筛选

试验旨在研究河南省地方品种淮南猪与引进品种大白猪背最长肌的甲基化,筛选影响背最长肌发育的候选基因。对淮南猪、大白猪胚胎期第38、58、78天和出生后第21天4个发育阶段的肌肉组织开展全基因组甲基化测序,比对不同发育阶段的甲基化差异。结果显示,在胚胎期第78天有2个信号通路CpG甲基化出现极显著差异,分别是黏着斑(ssc04510:Focal Adhesion)信号通路(P=0.004)、Ras相关蛋白1信号通路(ssc04015:Rap1)(P=0.014);胚胎期第58天细胞外基质受体相互作用(ssc04512:ECM-Receptor Interaction)等信号通路也存在CpG甲基化差异,但未达到显著性水平(P=0.088);筛选了黏着斑信号通路的Rap鸟嘌呤核苷酸交换因子1(Rap Guanine Nucleotide Exchange Factor 1,RAPGEF1)、层粘连蛋白γ3亚基(Laminin Subunit Gamma 3,LAMC3)、小鼠胸腺瘤病毒癌基因同源物3 (Murine Thymoma Viral Oncogene,Akt3)作为候选基因。综上,淮南猪与大白猪胚胎期第78天甲基化存在显著性差异,筛选到的3个候选基因分别通过诱导肌细胞的分化、调节肌细胞生长等生物学功能影响肌肉发育。

试论中国反垄断立法中的行政垄断规制问题

行政垄断 2 不仅仅是对竞争的扭曲 ,更是对市场经济制度本身的否定 ,在中国加入 WTO的大背景下 ,作为一部国际特征较为明显的法律 ,我国的反垄断立法既要反对行政垄断 ,更要反对经济垄断 ;反行政垄断是我国反垄断法的重要任务 。

面向农业科学数据的分布式存储方法研究

随着农业科技的飞速发展,农业科学数据以几何级数快速膨胀。面对持续增长的农业数据资源,如何有效地存储和管理海量的农业数据成为一个研究热点。借助Hadoop分布式存储框架的优势,提出了一种面向农业科学数据的分布式存储方法,该方法采用了"中心控制节点——数据节点"的存储体系,通过报文通信技术和混合式索引分布策略,实现了对海量数据的高并发式存储和检索。实验结果证明,该方法适用于各种类型的农业科学数据进行存储管理。

川西獐牙菜醇提物对内毒素所致大鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用

目的观察川西獐牙菜醇提物对内毒素所致大鼠胆汁淤积性肝损伤的保护作用,以及对肝细胞胆汁酸转运蛋白胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)和核受体(farnesoid X-receptor,FXR)的影响。方法 20只SD雄性大鼠采用随机分为4组(每组5只):生理盐水组、川西獐牙菜醇提物组、LPS+生理盐水组、LPS+川西獐牙菜醇提物组,所有大鼠均于处理后16 h取材。统计分析各组实验大鼠肝功能指标(ALT,AST、TBIL)、胆汁流速;采用Western blot及RT-PCR观察生理盐水组、川西獐牙菜醇提物组大鼠肝组织中BSEP和FXR在转录以及蛋白水平的表达。结果 LPS+生理盐水组与生理盐水组相比肝损伤指标ALT、AST、TBIL明显升高(P<0.05),胆汁流速明显下降(P<0.05);而LPS+川西獐牙菜醇提物组与LPS+生理盐水组相比ALT、AST、TBIL明显下降(P<0.05),胆汁流速明显升高(P<0.05)。川西獐牙菜醇提物组与生理盐水组相比BSEP蛋白水平的表达明显增高(P<0.05);与BSEP调控密切相关的核受体FXR蛋白和mRNA表达变化均不明显。LPS+生理盐水组与生理盐水组相比相比BSEP蛋白水平的表达明显降低(P<0.05);而LPS+川西獐牙菜醇提物组与LPS+生理盐水组相比BSEP蛋白水平的表达明显增高(P<0.05);但各组之间BSEP mRNA变化均不明显。结论川西獐牙菜醇提物能明显减轻内毒素诱导大鼠胆汁淤积性肝损伤,这可能与上调肝细胞胆酸转运蛋白BSEP的表达有关,而且BSEP表达的上调可能是通过转录后水平调节的。

基于J2EE平台的在线考试系统的设计与实现

J2EE平台是来自SUN公司的新的使用Java构建企业系统的标准平台和环境.将J2EE平台应用于在线考试系统的设计实现上,使其成为一个分布式的跨平台系统.文章就此将介绍在线考试系统的设计思路、实现方法、功能和特点.

川西獐牙菜醇提物对大鼠胆汁酸转运蛋白Mrp4、转录因子Nrf2表达的影响

目的观察川西獐牙菜醇提物对肝细胞胆汁酸转运蛋白Mrp4(multidrug resistanceassociated protein 4,Mrp4)、转录因子Nrf2的调控作用。方法将14只SD大鼠分为2组:正常对照组、川西獐牙菜醇提物组,每组7只。分别用生理盐水、川西獐牙菜醇提物处理7 d后,收集组织标本,免疫组化检测Mrp3、Mrp4在肝脏的表达变化,Western blot及RT-PCR检测胆汁酸转运蛋白Mrp3、Mrp4和转录因子Nrf2、核受体Lrh-1在蛋白及mRNA水平的变化。结果在mRNA水平,RT-q PCR结果显示川西獐牙菜醇提物组肝脏胆汁酸转运蛋白Mrp4表达较正常对照组增加2.1倍,同时,Mrp3表达增加1.7,转录因子Nrf2表达增高1.8倍,核受体Lrh-1表达增高1.4倍;在蛋白水平,Western blot结果表明川西獐牙菜醇提物组肝脏胆汁酸转运蛋白Mrp4表达较正常对照组组增加2.5倍,同时,Mrp3表达增高3.0倍,转录因子Nrf2表达增高2.3倍,核受体Lrh-1表达增高1.3倍,而免疫荧光结果则进一步证实了RT-q PCR与Western blot的结果,显示川西獐牙菜醇提物组Mrp3、Mrp4的表达较正常对照组组明显增强。结论川西獐牙菜醇提物能够刺激肝细胞表面胆汁酸转运蛋白Mrp4表达增高,这种调控作用可能与Nrf2相关。

阻塞性肝胆汁淤积下转录因子NR5A2和SP1、胆酸转运蛋白MRP3与肝脏损伤的相关性

目的研究阻塞性胆汁淤积下肝脏中转录因子NR5A2、SP1表达是否上调,以及其表达上调与胆酸转运蛋白MRP3基因的表达是否密切相关;MRP3表达上调是否具有减轻阻塞性胆汁淤积肝脏损伤的作用。方法收集阻塞性胆汁淤积组(胆结石或肝内胆管结石引起的黄疸患者手术切除的肝脏)和正常对照组(排除肝脏疾病的活检肝组织及肝转移癌无黄疸的患者肝脏)肝脏样品各15例。采用半定量PCR和免疫荧光方法检测NR5A2、SP1基因的表达,利用独立样品t检验和线性回归分析阻塞性胆汁淤积肝组织样品中MRP3 mRNA表达上调是否与NR5A2或SP1呈正相关,以及MRP3表达上调与反映肝脏损伤的指标ALT、AST是否存在负相关性。HE染色观察胆汁淤积组肝细胞坏死程度和MRP3蛋白表达高低的关系。结果阻塞性胆汁淤积肝脏中NR5A2和SP1 mRNA表达显著上调,其中NR5A2 mRNA增高3.7倍(P<0.01),SP1 mRNA上升3.2倍(P<0.01)。免疫荧光结果表明,阻塞性胆汁淤积组NR5A2和SP1蛋白表达也显著增加,NR5A2或SP1蛋白与胆酸转运蛋白MRP3 mRNA表达呈显著正相关(分别为r2=0.47,P<0.05和r2=0.51,P<0.01);MRP3蛋白表达与肝细胞坏死程度存在密切相关,并且MRP3蛋白表达量与ALT和AST均呈显著负相关(分别为r2=0.52,P<0.01和r2=0.39,P<0.05)。结论人阻塞性胆汁淤积下NR5A2和SP1表达上调,可诱导胆酸转运蛋白MRP3的表达,而MRP3表达上调可能有减轻肝脏损伤的作用。

川西獐牙菜醇提物上调HepG2细胞膜转运蛋白MRP3、核转录因子SP1及核受体CPF、PXR表达

目的体外培养HepG2细胞观察川西獐牙菜醇提物(Swertia mussitii Franch)对多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance protein 3,MRP3)、核转录因子SP1(specificity protein 1 transcription factor,SP1)及核受体孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、CYP7A启动子结合因子(CYP7A promoter-binding factor,CPF)表达的影响。方法用MTT比色法检测川西獐牙菜醇提物的最佳作用浓度,再分别于0、12、24、48、72h刺激HepG2细胞,抽提细胞的RNA、总蛋白和核蛋白,采用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测膜转运蛋白MRP3、转录因子SP1及核受体PXR、CPF在转录与蛋白水平的表达变化。每个时间点设立阴性对照DMSO组和阳性对照熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)组。结果川西獐牙菜醇提物可显著诱导HepG2细胞膜转运蛋白MRP3的mRNA和蛋白水平的高表达,其作用强于UDCA(P<0.05)。川西獐牙菜醇提物也可明显上调核转录因子SP1及核受体PXR的mRNA和蛋白表达水平,作用强于UDCA。对CPF表达的上调作用与UDCA相当(P<0.05)。结论川西獐牙菜醇提物可刺激HepG2细胞膜转运蛋白MRP3上调,且有可能是通过核转录因子SP1及核受体PXR、CPF上调其表达。

芒果苷上调HepG2细胞膜蛋白MRP3和核受体PXR、CPF表达

目的体外HepG2细胞培养观察芒果苷(mangiferin)对多耐药相关蛋白3(multidrug resistance-associate protein 3,MRP3)和核受体孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、CYP7A启动子结合因子(CYP7A promoter-binding factor,CPF)表达的影响。方法用芒果苷刺激HepG2细胞72 h后,分别抽提细胞RNA、膜蛋白及核蛋白,采用半定量RT-PCR和蛋白免疫印迹检测膜转运蛋白MRP3和核受体PXR、CPF在转录与蛋白水平的表达变化。熊脱氧胆酸(ursode-oxycholic acid,UDCA)处理的HepG2细胞作为阳性对照、DMSO处理细胞为阴性对照。结果芒果苷可显著刺激HepG2细胞膜转运蛋白MRP3的mRNA(比阴性对照组高3.0倍,P<0.05)和蛋白(比阴性对照组高3.3倍,P<0.05)表达,其作用强于UDCA。芒果苷也可明显上调核受体PXR[mRNA水平增高1.7倍(P<0.05),蛋白水平增高3.7倍(P<0.01)]、CPF[mRNA水平增高2.1倍(P<0.05),蛋白水平增高4.9倍(P<0.05)]的表达。结论芒果苷刺激肝癌细胞HepG2细胞膜转运蛋白MRP3的表达上调可能与核受体PXR、CPF途径相关。

ESR、FSHβ和PRLR基因与清平猪×大白猪杂交后代繁殖性能的关系

为了挖掘清平猪妊娠期短和产仔数多等优良繁殖性状的遗传背景,在清平猪与大白猪杂交后的F1代和F2代黑猪群体中进行了ESR、FSHβ和PRLR与该群体繁殖性能的关联性分析。结果显示:(1)FSHβ基因在F1和F2群体中的A等位基因与B等位基因的基因频率相近;ESR在F1和F2群体中的优势基因均为B等位基因;PRLR基因在F1群体中的优势基因为C等位基因,在F2群体中C等位基因与T等位基因的基因频率相近。(2)FSHβ不同基因型对F1群体的产活仔数和F2群体的总产仔数、初生体质量、断奶仔猪体质量和3周龄体质量等重要繁殖性状均有显著影响。(3)ESR不同基因型对F2群体妊娠期长短的影响表现为AB<AA<BB,ESR基因的AB型个体具有较短的妊娠期,但AA型比BB型个体的木乃伊数多0.46头。(4)PRLR不同基因型对F1群体的妊娠期有极显著影响,对总产仔数、断奶仔猪数和70日龄体质量有显著影响;对F2群体的弱仔数、初生体质量、断奶仔猪体质量和3周龄体质量有显著影响。结果表明,清平猪杂交后代的选育过程中可以淘汰部分FSHβ基因AA型个体,应该提高有利基因B等位基因在群体中的频率;ESR基因的AB型有利于缩短妊娠期,可淘汰AA型个体;PRLR基因中T等位基因是繁殖性状的有利基因,但可能与弱仔性状正相关,须慎重选择。

梗阻性黄疸大鼠肝细胞MRP2和FXR蛋白表达变化及意义分析

目的通过建立梗阻性黄疸动物模型,在蛋白水平观察多耐药相关蛋白MRP2(mu ltidrug resistance-assoc iated prote in2,MRP2)和类法尼醇X受体FXR(farnesoid X receptor)表达变化并分析二者之间的关系。方法用胆总管结扎术方法制备大鼠梗阻性黄疸模型,检测肝功能;提取大鼠肝细胞膜蛋白与核蛋白,测定提取液蛋白浓度;采用W estern b lot技术检测MRP2和FXR蛋白表达。结果梗阻性黄疸大鼠总胆红素、直接胆红素显著升高;与假手术对照组相比,梗阻性黄疸组大鼠肝细胞MRP2蛋白表达明显降低(P=0.041),FXR蛋白无表达,差异均有统计学意义。结论MRP2表达下调可能与FXR表达抑制有关,FXR蛋白可能对MRP2蛋白表达有正性调控作用。