金钗石斛中联苄类和酚酸类成分的抗氧化活性研究

目的研究金钗石斛体积分数60%乙醇提取物中联苄类和酚酸类成分的抗氧化活性,探讨其抗氧化活性与结构的关系。方法综合运用现代色谱学和光谱学方法对金钗石斛体积分数60%乙醇提取物中的化学成分进行分离鉴定;采用1,1-苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除法和氧自由基清除能力法两种体外活性测试方法评价分得的16个化合物的抗氧化活性。结果从金钗石斛体积分数60%乙醇提取物中分离得到3个新的联苄类化合物和13个酚酸类化合物,将它们的结构鉴定为nobilinA(1),nobilinB(2),nobilinC(3),丁香酸(syringicacid)(4),2-羟基苯丙醇(2-hydroxyphenylpropanol)(5),香草醛(vanil-lin)(6),罗布麻宁(apocynin)(7),松柏醛(coniferylaldehyde)(8),丁香醛(syringaldehyde)(9),丁香乙酮(syringylethanone)(10),对羟基苯甲醛(p-hydroxybenzaldehyde)(11),3-羟基-4-甲氧基苯乙醇(3-hydroxy-4-methoxyphenylethanol)(12),α-羟基丁香丙酮(α-hydroxysyringylethanone)(13),二氢松柏醇(dihydroxyconiferylalcohol)(14),对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoicacid)(15),对羟基苯丙酸(p-hydroxyphenylpropionicacid)(16)。1-二苯基-2-苄基苯肼(DPPH)法活性测试中,化合物4的活性明显强于维生素C(VitC),化合物1,2,12,14显示出弱于VitC但强于2,6-二羟丁基对甲酚(BHT)的活性,化合物3和8只显示很弱的活性;氧自由基清除能力法(ORAC)法测试结果表明,化合物2～4,7～10,15显示出强于VitC的活性,化合物12,14,16活性较弱。结论金钗石斛中的联苄类和酚酸类化合物大多具有不同程度的抗氧化活性,活性的强弱与分子结构之间存在一定的相关性。

茶多酚体内外抗流感病毒作用研究

研究了没食子儿茶素(Gallocatechin,GC)、表儿茶素(Epicatechin,EC)、表没食子儿茶素(Epigallocatechin,EGC)、表儿茶素没食子酸酯(Epicatechin gallate,ECG)、表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)、原儿茶醛(Protocatechuic aldehyde,PAD)、原儿茶酸(Protocatechuic acid,PA)共7种茶多酚类物质在MDCK细胞中的抑制流感病毒活性。结果表明,EGCG和ECG具有显著的抑制病毒作用,对感染H5N1、H1N1和H9N23种亚型流感病毒的MDCK细胞50%保护率浓度(EC50)分别在0.04~0.11mmol/L和0.05~0.07mmol/L范围,其保护效果均优于阳性对照药利巴韦林(EC50:0.41~0.53mmol/L)。7种茶多酚类物质对流感病毒神经氨酸酶(NA)均有不同程度的抑制作用,EGCG和ECG对H5N1、H1N1和H9N23种亚型流感病毒NA活性抑制浓度(IC50)分别在0.03~0.14mmol/L和0.34~0.69mmol/L范围。茶...

抗氧化能力指数(ORAC)测定原理及应用

目的介绍抗氧化能力指数测定方法的原理、应用及发展前景。方法被译为抗氧化能力指数的oxygenradicalabsorbancecapacity(ORAC)方法,是目前抗氧化研究领域中为人们所关注的一个评价方法。该方法以偶氮类化合物AAPH作为过氧自由基来源,SodiumFluorescein为荧光指示剂,维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准,使用荧光微孔板分析仪进行分析。结果方法的专属性、线性、精密度、准确度及重复性等与其他抗氧化能力分析方法相比具有诸多显著的优点。结论该方法目前已成功应用于生物样品、植物或食品提取物和纯化合物等多种样品的体内外抗氧化能力分析,并有希望在研究氧化与疾病发生关系等方面发挥重要的作用。

丹参酮类化合物对小鼠应激性肝损伤的保护作用

目的研究4种丹参酮类化合物对拘束应激引起小鼠肝损伤的保护作用。方法采用拘束负荷法造成小鼠应激性肝损伤。应用赖氏法测定小鼠血浆中ALT活性,TBARS法测定血浆及肝组织匀浆中的MDA含量,抗氧化能力指数(ORAC)法测定血浆抗氧化能力指数,HPLC法测定血浆及肝组织匀浆中维生素C和GSH水平,以及ORAC法测定和观察丹参酮类化合物的体内和体外抗氧化活性。结果与拘束模型组相比,4种丹参酮类化合物均可明显降低应激小鼠血浆ALT水平,提高肝组织匀浆的抗氧化能力指数、维生素C和GSH水平,并降低MDA含量。4种丹参酮类化合物体外也显示出较强的抗氧化能力。在体内和体外实验中,二氢丹参酮的抗氧化作用均明显优于其他3种丹参酮类化合物。结论丹参酮类化合物对拘束应激引起的小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能部分来自于其抗氧化活性。

1,3,7,9-四甲基尿酸抗抑郁作用的实验研究

目的探讨1,3,7,9-四甲基尿酸(theacrine,TC)的抗抑郁作用。方法采用悬尾实验、强迫游泳实验、自主活动实验、育亨宾(yohimbine)毒性实验、利血平(reserpine)实验以及5-羟色胺酸(5-HTP)诱导小鼠甩头行为等动物模型(各组剂量分别为3、10及30mg·kg-1,bid,连续7d灌胃给药)来评价TC的抗实验性抑郁效果及其可能的作用机制。结果与空白对照组相比,TC能明显缩短小鼠悬尾不动时间(P<0.01)及增加强迫游泳小鼠拨动转轮旋转次数(P<0.05),且对自主活动无影响。TC可一定程度上增强yohim-bine诱发实验动物死亡率,增强5-HTP导致的甩头行为(P<0.01)。此外,TC也具有明显地改善reserpine引起的小鼠体温下降(P<0.01),运动不能(P<0.05)和眼脸下垂(P<0.01)的作用。结论TC在多种抑郁模型上显示一定的药理活性,这些作用可能与影响单胺类神经递质有关。

黄芩苷与利巴韦林联用体内外抗流感病毒作用

目的评价黄芩苷与利巴韦林联用体内外抗流感病毒作用,为其临床上联用提供实验依据。方法 CPE法和MTT法测定药物单用及联用对感染3种不同亚型流感病毒MD-CK细胞的保护效果,分别应用合并指数法(combination in-dex,CI)和MacSynergyⅡ分析法,分析黄芩苷与利巴韦林体外联用的相互作用。神经氨酸酶(NA)抑制试验测定黄芩苷对流感病毒NA活性的抑制作用。应用H1N1亚型流感病毒(FM1株)人工感染BALB/c小鼠模型,评价黄芩苷与利巴韦林联用对感染小鼠的保护作用。结果体外黄芩苷与利巴韦林联用对H1N1和H5N1病毒的抑制表现为相加作用,对H9N2病毒的抑制表现为协同作用。黄芩苷对3种亚型流感病毒NA的半数抑制浓度(IC50)在0.29～0.49 mmol.L-1范围。利巴韦林与黄芩苷联合给药与单独给药相比,提高感染小鼠的存活率,延长其存活时间。结论黄芩苷对流感病毒NA活性具有抑制作用。黄芩苷与利巴韦林在体外联用,对不同亚型流感病毒的抑制表现为相加或协同作用;二者联用对感染流感小鼠的保护效果明显优于单用。

藤茶总黄酮对拘束负荷引起小鼠肝损伤的保护作用

目的研究藤茶总黄酮对拘束负荷造成小鼠肝损伤的保护作用。方法采用拘束负荷方法引起小鼠应激性肝损伤模型。赖氏法和TBARS法分别测定小鼠血浆中谷丙转氨酶活性和丙二醛含量,HPLC法测定肝组织匀浆中维生素C及谷胱甘肽水平,ORAC方法测定肝组织的抗氧化能力指数及藤茶总黄酮和二氢杨梅素的体外抗氧化活性。结果与拘束模型组相比,藤茶总黄酮可以明显提高拘束负荷小鼠肝组织匀浆的抗氧化能力指数、维生素C和谷胱甘肽水平,有效降低血浆中丙二醛含量和谷丙转氨酶水平。藤茶总黄酮及二氢杨梅素在体外显示出较强的抗氧化能力。结论藤茶总黄酮对拘束负荷引起的小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能部分来自于清除自由基和抑制脂质过氧化过程。

欧洲越桔花青素提取物对小鼠耐常压缺氧能力的影响

目的研究欧洲越桔花青素提取物(Myrtillus EX)对常压缺氧负荷小鼠抗缺氧能力的影响。方法采用HPLC/HPLC-MS分析Myrtillus EX中的不同花青素类成分。通过常压缺氧负荷小鼠模型观察Myrtillus EX对小鼠存活时间和耗氧量的影响,利用ORAC法测定血浆、大脑皮质及肝组织匀浆中的抗氧化能力指数,Griess化学法测定NO含量,以及TBARS法测定血浆、大脑皮质及肝组织匀浆中的MDA含量。结果Myrtillus EX可以明显提高常压缺氧负荷小鼠的耐缺氧能力,有效降低血浆、大脑皮质及肝组织匀浆中的MDA含量,并调节血浆、大脑皮质及肝组织匀浆中的NO含量。结论Myrtillus EX对常压缺氧负荷小鼠显示一定的保护作用,其机制可能与其自由基清除能力和抑制脂质过氧化作用有关。

黄芩苷联合帕拉米韦体内外抗甲型H1N1流感病毒作用

目的评价黄芩苷与帕拉米韦联合用药体内外抗甲型H1N1流感病毒作用。方法体外试验中,以甲型H1N1流感病毒感染MDCK细胞,黄芩苷与帕拉米韦联合用药,终点稀释法检测细胞上清液病毒滴度;体内试验中,以甲型H1N1流感病毒感染BALB/c小鼠,黄芩苷灌胃,帕拉米韦肌肉注射,两者联合给药,观察试验小鼠存活情况及体重变化。试验结果以MacSynergyⅡ软件分析两种药物体内外联合作用结果。结果细胞试验中,黄芩苷与帕拉米韦联用抗甲型H1N1流感病毒在95%置信区间内的协同值为3.2,表现为相加作用;小鼠试验中,黄芩苷与帕拉米韦联用,对提高感染流感病毒小鼠的存活率和抑制其体重下降表现为显著协同作用,协同值分别为69.0和105.2。结论黄芩苷与帕拉米韦联合抗流感作用比单独使用效果好,在临床上具有重要的应用价值。

蟾酥及其活性成分抗肿瘤作用研究进展

蟾酥作为一种传统中药,具有镇痛、消炎、麻醉等作用。近年来研究表明,蟾酥具有确切的抗肿瘤活性,能够诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞的分化,还有逆转耐药性、抑制肿瘤血管形成及增强免疫的作用。本文主要就蟾酥及其活性成分抗肿瘤作用的研究进展作一综述。

Triton WR-1339诱发小鼠高脂血症模型的研究

由于高脂血症可诱发心脑血管等多种相关疾病,因此人们十分关注对其治疗药物的研发和药效评价方法的建立。表面活性剂Triton WR-1339（tyloxapol）诱发动物高脂血症模型,具有操作简便且药效评价快速等特点而被广泛运用。本实验从基因水平探讨Triton WR-1339诱发高脂血症的机制,旨在为该模型用于降血脂药物筛选和药效评价提供有益的实验依据。

逍遥丸对小鼠行为绝望和应激性抑郁的影响

目的:观察逍遥丸对小鼠抑郁症状的改善作用并探讨逍遥丸对小鼠大脑皮质五羟色胺(5-HT)及五羟吲哚乙酸(5-H IAA)水平的影响。方法:采用小鼠开放场实验,小鼠强迫游泳及拘束负荷实验观察逍遥丸的抗抑郁作用,采用HPLC-库仑阵列电化学检测器测定拘束负荷小鼠大脑皮质5-HT及5-H IAA水平。结果:200、400、600 mg/kg逍遥丸连续给药5 d后,显著增加强迫游泳小鼠在水中转动转笼次数,缓解小鼠行为绝望状态并显示明显的抗抑郁作用,但在自主活动行为实验中未能确认逍遥丸的显著作用效果。实验中笔者还观察到逍遥丸能有效改善拘束负荷小鼠大脑皮质5-HT及5-H IAA水平,而对非拘束小鼠大脑皮质5-HT及5-H IAA水平没有显著影响。结论:逍遥丸具有一定的抗抑郁作用,其作用机制可能与改善小鼠大脑皮质5-HT水平相关。

王老吉凉茶对应激小鼠糖代谢机能及体内过氧化状态的影响

目的:研究王老吉凉茶(岗梅根,木蝴蝶,火炭母,金钱草,布渣叶,淡竹叶,金沙藤,五指柑,山芝麻,金樱根)对拘束负荷诱发小鼠糖代谢机能低下及体内过氧化状态的影响。方法:将雄性BALB/c小鼠分为正常对照组、应激对照组、阳性对照组、125及500 mg/kg王老吉凉茶给药组,每天灌胃给药一次连续给药5 d后拘束负荷应激20 h,灌胃葡萄糖2mg/kg检测血糖消除能力、血浆酮体水平、肝糖原合成能力、血浆过氧化状态及抗氧化能力水平。结果:与应激对照组相比,王老吉凉茶给药组能提高应激小鼠血糖消除速率,降低血浆酮体水平并促进肝糖原合成能力。此外,王老吉凉茶明显改善拘束负荷升高的血浆脂质过氧化反应的产物丙二醛(MDA)含量,提高血浆抗氧化能力指数(ORAC)水平。结论:王老吉凉茶改善拘束负荷诱发小鼠糖代谢机能低下,其作用机制可能与缓解机体内的过氧化状态有关。

金针菇多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨金针菇多糖(polysaccharides of Flammulina velutipes,FVP)对CCl4诱导的急性肝损伤的保护作用。方法小鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液(0.5%,5 mL.kg-1)12、24、48、72 h后测定血清ALT,确定CCl4急性肝损伤造模最佳时间为24 h。FVP(75,150,300 mg.kg-1)连续口服给药8 d,第7天采用CCl4制备小鼠急性化学性肝损伤模型,24 h后测定FVP对血清ALT、AST活性,肝匀浆SOD活性、MDA含量的影响。结果 FVP能显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,提高肝匀浆SOD的活性,降低MDA的含量。结论金针菇多糖对CCl4诱发的小鼠应激性肝损伤有一定的保护作用。

1,3,7,9-四甲基尿酸激活SirT3/AMPK/ACC信号通路减少高脂饮食小鼠肝脏脂肪化

目的研究嘌呤生物碱1,3,7,9-四甲基尿酸(theacrine)对高脂饮食小鼠肝脏甘油三酯蓄积的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 C57BL/6J小鼠高脂喂养17周诱导单纯性脂肪肝模型,连续6周给予theacrine后,分别对肝组织切片进行HE和苏丹IV染色,测定肝脏中甘油三酯(TG)水平,用Western blot法检测肝脏中SirT3蛋白表达、AMPK及ACC蛋白的磷酸化水平。应用compound C抑制HepG2细胞中AMPK磷酸化,检测theacrine干预后相关蛋白的表达。结果 Theacrine能减少高脂饮食小鼠肝脏中TG水平,改善肝脏脂肪变性状态,增加肝脏中SirT3蛋白表达及AMPK和ACC蛋白的磷酸化水平。抑制细胞内AMPK的磷酸化后,theacrine仍能激活SirT3,但抑制了ACC的磷酸化作用。结论 Theacrine对SirT3的激活不依赖于AMPK的激活,而对ACC的磷酸化依赖于AMPK的激活。其改善高脂饮食小鼠肝脏脂肪化的作用可能与激活SirT3/AMPK/ACC信号通路相关。

沙蟾毒精抑制肝癌HepG2细胞黏附、迁移和侵袭的作用

目的研究沙蟾毒精(Arenobufagin)对人肝癌细胞HepG2黏附、迁移和侵袭的抑制作用。方法 MTT法检测沙蟾毒精对HepG2细胞活力和细胞黏附能力的影响,划痕实验观察沙蟾毒精对HepG2细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究沙蟾毒精对HepG2细胞的迁移和侵袭的抑制作用,Western blot检测基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达水平变化。结果与空白组相比,沙蟾毒精可降低HepG2细胞的黏附能力,使Transwell小室膜上的肝癌细胞明显减少,并且呈剂量依赖性。Western blot结果显示沙蟾毒精可以明显抑制基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达。结论沙蟾毒精能抑制人肝癌细胞HepG2的黏附、迁移和侵袭,其机制可能与抑制MMP 2和MMP 9的表达有关。

榴莲壳提取物止咳、镇痛及抗菌作用研究

目的探讨榴莲壳提取物(DSE)止咳、镇痛及抗炎的作用。方法分别采用氨水及二氧化硫致小鼠咳嗽模型来评价DSE的止咳作用;采用醋酸致小鼠扭体反应及热板法评价DSE的镇痛作用;采用最小抑菌浓度(MIC)和抑菌圈法来评价DSE的抗菌作用。结果与空白对照组相比,300及900mg·kg-1DSE对氨水和二氧化硫所致的小鼠咳嗽潜伏期及咳嗽次数都有明显的抑制作用;DSE明显抑制醋酸所致小鼠的扭体反应的潜伏期及扭体次数,但不影响热板法所致的疼痛阀值;DSE对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及大肠埃希杆菌等细菌无抑制作用,对绿脓假单胞菌有较弱的抑制作用。结论DSE有明显的止咳作用,且对化学刺激所致的疼痛抑制作用优于物理性所致的疼痛抑制作用;DSE对绿脓假单胞菌有一定抑菌作用。

Ⅰ型单纯疱疹病毒潜伏感染及其应激复发

Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是常见的病原体,人是其唯一自然宿主。原发感染后,HSV-1在上皮细胞大量复制,然后沿轴突逆行至感觉神经节并潜伏下来。当机体在一定的应激负荷下,潜伏感染的病毒重新激活,从而造成复发性疾病。因此,阐明病毒潜伏感染及应激复发的相关机制,将对Ⅰ型单纯疱疹病毒预防、治疗和控制带来新的启示。该文就HSV-1潜伏感染与应激复发的相关机制进行综述。

SirT3调节氧化应激作用

依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的去乙酰化酶Sirtuin-3(SirT3)是在进化上高度保守的Sirtuin家族成员之一,能对线粒体内相关的乙酰化蛋白脱乙酰基,通过增加活性氧自由基(ROS)清除酶活性和稳定线粒体功能来抑制线粒体内ROS的蓄积。该文综述了SirT3调节因氧化应激诱发的功能性及器质性损伤的作用和机制,为SirT3在相关病理及生理机制的研究提供有益的参考。

知母总黄酮对溴酸钾诱发小鼠肝损伤的保护作用

目的研究知母总黄酮对溴酸钾(KBrO3)诱发小鼠肝损伤的保护作用。方法200mg/kgKBrO3ip诱发小鼠肝损伤模型,分别测定小鼠血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、NO、肝组织丙二醛(MDA)水平、抗氧化能力指数(ORAC)、谷胱甘肽(GSH)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与模型组相比,知母总黄酮可以明显降低因KBrO3引起的小鼠血浆ALT水平,保护因KBrO3诱发的肝损伤。此外,知母总黄酮有效地提高应激小鼠肝组织匀浆的ORAC、GSH及GSH-Px活性,降低血浆中NO及MDA水平。结论知母总黄酮对KBrO3诱发的小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能部分来自于清除自由基和抑制脂质过氧化过程。