昆虫Bt毒素受体蛋白的研究进展

Bt是一种被广泛应用的生物杀虫剂 ,昆虫Bt受体蛋白在Bt发挥毒性过程中起到非常重要的作用 ,而且受体蛋白与Bt结合能力的改变可能是昆虫对Bt产生抗性的主要原因 ,近年来已成为国际研究的热点。该文从昆虫Bt受体蛋白的分离鉴定 ,结合动力学 ,与Bt杀虫毒性、抗性的关系及其分子本质等方面综述受体蛋白的研究进展。

棉铃虫对转Bt基因棉的抗性筛选及遗传方式的研究

通过室内筛选获得了棉铃虫Helicoverpaarmigera (H櫣ｂｎｅｒ)对转Bt基因棉的抗性种群 ,并在此基础上进行了抗性遗传方式的研究。试验结果表明 :经 16代筛选 ,棉铃虫对转Bt基因棉的抗性倍数上升到 43 3倍。筛选过程中 ,棉铃虫 7日龄幼虫的体重和成虫羽化率变化明显 ,被选为确定筛选剂量的标准。敏感与抗性棉铃虫杂交 ,正交、反交的显性度都小于 0、杂交过程中雌雄性比基本接近 1∶1、假设抗性基因为单基因时的χ2 值较低 ,因此 。

人工饲养棉铃虫技术的改进

在棉铃虫幼虫的人工饲料中加入复配维生素对大龄幼虫生长有利，其体重、蛹重、化蛹率、羽化率都明显高于不加维生素的配方。在饲喂成虫的糖水中加入维生素，可以提高成虫的交配率、产卵量和卵孵化率。在人工饲料中加入适量甲醛可以减少霉菌的污染。

棉铃虫取食转Bt基因棉花后中肠组织的病理变化

利用透射电镜观察棉铃虫 (H elicoverpaarmigera Hübner)取食含转 Bt基因棉的饲料后中肠组织的病理变化。结果发现 ,棉铃虫 3龄幼虫取食含转 Bt基因棉的饲料后中肠组织发生病变 ,随着取食时间的增加 ,变化越来越明显 ,取食 7d后 ,微绒毛脱落 ,质膜界限不清晰 ,线粒体和内质网减少 ,线粒体内嵴不清晰 ;棉铃虫对转 Bt基因棉产生抗性后 ,抗性种群棉铃虫取食含转 Bt基因棉的饲料 ,中肠仍会发生一系列组织病理变化 ,但病变程度减弱。同时 ,与分别取食含 Bt杀虫剂。

棉铃虫Bt抗性种群的RAPD-PCR初步分析

经室内筛选获得了棉铃虫对Bt杀虫剂、Bt毒蛋白和转Bt基因棉的抗性种群。利用RAPD技术 ,成功地扩增得到 10 5条多态性条带 ,经过聚类分析发现 ,棉铃虫对Bt产生抗性后在基因水平发生了变异。RAPD技术不仅可以用来鉴定棉铃虫对Bt是否产生抗性 。

棉铃虫对拟除虫菊酯的抗性稳定性研究

应用生物测定的方法研究了棉铃虫Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａａｒｍｉｇｅｒａ（Ｈüｂｎｅｒ）对溴氰菊酯高抗（１３６．７３倍）、对三氟氯氰菊酯（９．５０倍）和凯明二号（３．４０倍）低抗的３个种群的抗性稳定性。结果发现，无论棉铃虫的抗药性是高或低，在连续几代不接触药剂的情况下，都表现为抗性不断下降；第８代后３个种群都表现为抗性基本稳定，变化不大。停药后第８代分出部分种群作抗性再恢复试验，经６代连续点滴筛选后，３个种群抗性都有所回升。而且，棉铃虫对单剂抗药性衰退明显，但再恢复较快；对混剂的抗性衰退慢，再恢复也慢。

功夫菊酯防治棉铃虫的特性

功夫菊酯防治棉铃虫的特性中国农业科学院植保所梁革梅，郭予元，戴小枫，洪锡午功夫菊酯（ｌａｍｂｄａ－ｃｙｈａｌｏｔｈｒｉｎ）在国外广泛应用于多种农作物，可防治各类害虫。在中国除防棉花外，还在粮、油、烟、果、茶、蔬菜上进行大量试验、示范和使用。由于该品种...

烟粉虱成虫对不同寄主植物的选择性

选用棉花、烟草、番茄、甘蓝进行非选择性和选择性试验研究 ,探讨烟粉虱成虫对 4种寄主植物的嗜食性。结果表明 ,在 4种寄主作物共同存在时 ,烟粉虱成虫喜欢取食烟草 ,排列顺序为 :烟草 >番茄 >棉花、甘蓝 ;产卵量排列顺序为 :烟草、番茄 >甘蓝、棉花。当只有番茄和烟草两种寄主植物时 ,烟粉虱成虫趋向于取食烟草 ,但在番茄上产卵 ;只有烟草和甘蓝时 ,烟粉虱倾向于取食烟草并产卵 ;只有棉花和番茄时 ,烟粉虱对两种寄主没有明显的趋向 ;只有棉花和烟草时 ,烟粉虱显著的喜好在烟草上产卵 ;只有棉花和甘蓝时 ,烟粉虱趋向在棉花上取食产卵 ,但没有达到显著水平 ;同样只有番茄和甘蓝时 ,烟粉虱喜好在番茄上取食产卵 ,但没有达到显著水平。

昆虫抗寒性的研究进展

由于季节的变化,生活在温带和寒带的昆虫在生活史中都要面临冬季低温的制约。为繁衍后代,昆虫在长期的进化过程中,形成了一系列的适应对策和抗寒机制。本文综述了昆虫的越冬虫态、生态适应性、抗寒的生理生化及分子机理,包括过冷却点、体内含水量、冰核物质、抗寒性物质变化等抗寒机制,特别是对近年来引起关注的抗冻蛋白和热激蛋白的基因、结构、功能等的研究进展进行了综述,最后探讨了昆虫抗寒性研究与预测预报及害虫综合防治的关系。

苏云金芽孢杆菌杀虫机理及害虫对其抗性机制的研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、Bt毒蛋白的杀虫机理、昆虫对Bt的抗性机制及昆虫体内Bt受体蛋白与抗性的关系等研究现状的论述与分析,对Bt作物害虫抗性治理策略和前景进行了展望。

Bt棉对主要棉虫发生的影响及防治对策

对河南新乡棉区种植的转Ｂｔ基因棉和常规棉棉田虫情进行了定点系统调查和大田普查，结果表明：棉铃虫在两种棉田棉花上的落卵量无明显差别，而幼虫存量差异显著，Ｂｔ棉棉花上幼虫存量显著降低；Ｂｔ棉对棉蚜的发生无明显的影响，而Ｂｔ棉上棉红蜘蛛的发生比常规棉略重。

棉铃虫卵巢形态与卵子发生过程观察

害虫发生高峰期、发生量的准确预测和田间防治适期的确定与种群雌虫卵巢结构及卵子发生过程密切相关。为了明确棉铃虫Helicoverpa armigera卵巢结构及卵子发生过程,本研究利用光学体视显微镜和透射电子显微镜,对棉铃虫成虫卵巢管和卵子的超微结构进行了研究,并确定了发育级别划分标准。结果表明:根据卵巢的形状、卵的产生过程、卵黄沉积情况等将棉铃虫卵巢发育程度分为6个级别,即发育初期(0级)、卵黄沉积前期(Ⅰ级)、卵黄沉积期(Ⅱ级)、成熟待产期(Ⅲ级)、产卵盛期(Ⅳ级)和产卵末期(Ⅴ级)。根据卵子发生过程中滋养细胞、卵母细胞的变化,将卵子发生期分为3个阶段:卵黄发生前期、卵黄发生期和卵黄成熟期。本研究首次对棉铃虫的卵子发生进行电子显微观察,并完善了棉铃虫卵巢发育的分级标准,为进一步研究棉铃虫的生殖发育机理提供了理论参考,对田间棉铃虫种群发生期和发生量的预测预报也有重要的实践参考价值。

几种药剂对棉苗蚜、伏蚜的毒力测定和药效试验

测定了13种杀虫剂防治棉蚜的效果。经室内系列生物测定结果表明:啶虫脒、吡虫啉、阿维菌素、丁硫克百威、辛硫磷和毒死蜱6种药剂防治棉苗蚜、伏蚜的效果都很好;并选择这6种药剂进行了田间小区试验,试验结果基本与室内生测的结果相符,经总体评价认为:啶虫脒、吡虫啉、阿维菌素和丁硫克百威可以作为理想的防治棉蚜的杀虫剂。

防治棉铃虫的高毒农药替代品种研究

采用室内浸卵、浸叶和点滴法以及田间小区试验，对19种杀虫剂防治棉铃虫的作用特点和效果进行了系统研究。室内生物测定结果表明：多杀菌素对棉铃虫卵孵化有较好的抑制作用，90．40mg／L多杀菌素处理后棉铃虫卵的孵化率仅为42．86％；多杀菌素、甲氨基阿维菌素、高效氯氟氰菊酯、辛硫磷、丙溴磷、毒死蜱和高效氯氰菊酯对棉铃虫初孵幼虫的毒杀作用明显，原药稀释1.0×10^4-2．0×10^4倍时可使初孵幼虫死亡率迭100％；昆虫生长调节剂——氟啶脲、氟铃脲、甲氧虫酰肼原药稀释1000倍对棉铃虫初孵幼虫的致死率大于70％，且幼虫的生长受到明显抑制；甲氨基阿维菌素、高效氯氟氰菊酯、多杀菌素、毒死蜱、高效氨氰菊酯、丙溴磷、辛硫磷对低、高龄棉铃虫幼虫均具有较好的毒杀效果。田间小区试验结果表明，甲氨基阿维菌素、高效氯氟氰菊酯、丙溴磷、高效氯氰菊酯作用效果快且防治效果好，尤其是4000倍甲氨基阿维菌素和5000倍高效氨氟氰菊酯处理后第三天，其对棉铃虫的致死率迭100％；多杀菌素和甲氧虫酰肼作用效果稍差。若在棉铃虫卵高峰期适时施药，供试的6种药剂均可作为防治棉铃虫的高毒农药替代品种。

苜蓿夜蛾人工饲养技术

在 (2 6± 1)℃、光周期 14∶ 10 (光照∶黑暗 )、相对湿度 5 0 %～ 75 %的人工气候箱中 ,用以黄豆、小麦、酵母粉为主要原料 ,配以蔗糖、琼脂、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯 (尼泊金 )、维生素 C、复合维生素液、KOH液、乙酸液、甲醛液配制成的人工饲料饲养各虫态苜蓿夜蛾 ,连续饲养 17代 ,单雌产卵量、孵化率、幼虫成活率、幼虫期、蛹期、蛹重、化蛹率和羽化率等未出现退化现象。成虫补充糖分加复合维生素等营养成分 。

转Bt cry1Ah基因抗虫玉米对亚洲玉米螟、棉铃虫和黏虫的抗性评价

利用农杆菌介导法将Bt cry1Ah基因转入玉米自交系综31,获得对玉米螟有显著抗性的转基因玉米HGK60,为了研究其对鳞翅目害虫的杀虫活性,在室内和田间分别用亚洲玉米螟、棉铃虫和黏虫幼虫对HGK60玉米的杀虫效果进行检测。室内生物活性检测结果表明,取食HGK60玉米心叶的亚洲玉米螟幼虫在3 d后死亡率达100%;HGK60玉米对棉铃虫幼虫有毒杀作用,玉米不同部位对棉铃虫幼虫的杀虫效果存在差异;与非转基因玉米对照相比,取食HGK60玉米叶片一周后的黏虫幼虫体重增长明显受到抑制。田间生物活性检测结果表明,HGK60玉米对于亚洲玉米螟和棉铃虫有很强的杀虫活性,达到高抗级别,对于黏虫有一定的杀虫活性,为抗性级别。

棉铃虫中肠氨基氨肽酶N基因的克隆及序列分析

通过简并引物PCR结合RACE技术 ,从棉铃虫中肠中克隆了 1个氨基氨肽酶N基因 ,该基因全长 30 4 3bp ,阅读框包括 2 85 6bp ,编码 95 1个氨基酸。预测蛋白分子量为 10 8.3kD ,等电点为 5 .2 9。序列中具有谷氨酸锌化氨肽酶的保守结构GAMEN以及锌结合位点HEXXHX18E。N 末端 2 0个氨基酸具有信号肽的特征 ,C 末端 2 5个氨基酸具有明显的亲脂性 ,并且具有跨膜特征。该基因已经在GenBank中登记 ,序列号为 :AY1810 2 6。

昆虫对Bt抗性的适合度代价及其与抗性治理策略的关系

由于昆虫对Bt毒素抗性的发展,不利于Bt制剂和Bt转基因作物的长期有效使用。但是昆虫对Bt抗性的产生常伴有适合度代价,这种代价能够延缓或阻碍抗性等位基因的发展。许多研究已经证明,有分属鳞翅目、鞘翅目以及双翅目的昆虫Bt抗性品系存在适合度代价。适合度代价往往会受生态因素的影响。而且,昆虫适合度代价的产生与其抗性机制密切相关。庇护所策略延缓抗性发展的能力不仅与敏感种群与抗性种群能否自由交配有关,还与适合度代价的大小及抗性基因的显隐性等因素有关。适合度代价的研究对探讨抗性发展规律以及完善抗性治理策略是非常重要的。本文从适合度代价与抗性发展、抗性机制和抗性治理的关系等方面的进行综述,为发展Bt抗性治理策略提供参考依据。

Cry1Ac抗、感棉铃虫碱性磷酸酯酶(ALP1)的表达量比较

【目的】通过比较Cry1Ac抗、感棉铃虫昆虫中肠碱性磷酸酶(ALP1)表达量的差异及抗性棉铃虫取食Cry1Ac蛋白对ALP1表达量的影响,分析ALP1表达量变化与抗性的关系,为进一步明确Bt抗性机制、制定抗性治理策略提供理论依据。【方法】利用实时荧光定量PCR技术,比较敏感棉铃虫、Cry1Ac抗性棉铃虫取食含Cry1Ac蛋白的饲料和正常饲料后ALP1表达量的差异。【结果】ALP1在棉铃虫整个发育期都表达,幼虫的表达量最高,蛹期表达量最低,在成虫体内也有较高的表达;ALP1在幼虫中肠表达量最高,其次是后肠、前肠、马氏管,表皮中的表达量最低;与敏感品系相比,对Cry1Ac具有中等水平抗性的棉铃虫ALP1表达量明显增加,尤其是取食含Cry1Ac蛋白饲料的抗性棉铃虫幼虫的ALP1的表达量显著升高,但抗性棉铃虫取食正常饲料后,2、3龄幼虫的ALP1的表达量与敏感棉铃虫差异不显著;所有的抗性品系4龄棉铃虫幼虫中肠ALP1的表达量都显著高于敏感品系,而且随着棉铃虫抗性倍数的升高,ALP1的表达量呈逐渐降低的趋势。【结论】抗性棉铃虫中肠ALP1表达量的改变可能与Cry1Ac抗性、Cry1Ac代谢有一定的关系。

棉盲蝽综合治理研究进展

随着Bt棉花的大面积种植,盲蝽已上升成为我国棉花的主要害虫。本文从防治策略、经济阈值与预测预报、防治措施等方面综述了盲蝽防治的经验,并结合我国棉盲蝽的防治现状提出了对策与建议。