板栗干腐病研究:Ⅱ.症状及病原

对板栗干腐病症状及病原的研究结果表明:1.板栗干腐病主要发生于种仁上,其病斑大小、质地不一。按色泽可分为褐、黑、白、灰、黄五类。果实其它部位也偶有症状产生;2.此病为多种真菌复合侵染所致。主要的致病菌有Phoma、Phomopsis、Dothiorella、Gloeosporium和Cytospora等属真菌,另有十余种弱寄生及腐生菌有时也混合发生。

植物微生态学的定义

微生态学(microecology)这一术语,是德国学者沃尔克·鲁斯(Volker Rusch)博士于1977年首次提出,并于1985年给“微生态学”下定义为“微生态学是细胞水平或分子水平的生态学”。中国康白教授于1988年在《微生态学》一书中为“微生态学”下定义为“研究正常微生物群与其宿主相互关系的生命科学分支。”微生物与植物的关系,在微生态学中是最典型、最原始和最明显的微生态学关系。

板栗干腐病诱病因素的研究之四

本文报道了板栗干腐病发生的诱因,并提出了该病的防治原理。研究结果表明,栗仁水分的丧失是干腐病发生的主要诱病因素。当栗仁含水量丧失5％时,病害开始发生;丧失30％时,病害发展至高峰;再继续失水则病情开始下降。针对这一特点,提出了以加强田间水分管理、及时收拾、快速运输、防止泡水和低温保藏为主要内容的综合防治措施。

板栗干腐病研究之三——病原物的侵染特点

采用对板栗结果枝实行分期套袋、人工接种、以及药剂防治等方法,以分析观察板栗果仁干腐病的侵染时期和发病规律。结果表明,干腐病是由多种弱寄生和腐生真菌引起的一种贮藏期复合病害。病原物于开花期经由花器侵入幼果,呈潜伏状态,直到果实成熟不表现症状。等到采收后,在加工干燥和运输贮藏过程中开始发病出现多种干腐症状,病势随贮藏期果仁水分的丧失而迅速发展,最后引至大量果仁腐败变质。以上结果对于控制病害有一定启示。

植物微生态学的研究

1977年德国沃尔克·鲁斯(Volker Rush)博士首次明确提出微生态学(microecology)这个词,1985年又重下了定义:“微生态学是细胞水平或分子水平的生态学”。中国康白教授于1988年在《微生态学》一书中提出“微生态学”,定义为“研究正常微生物群与其宿主相互关系的生命科学分支”。 生物体内微生物“有益”与“有害”的概念是按人类自身利益和认识所决定的。据初步研究植物体内真菌类微生物,对人有益的约占15％,有害的约占15％,表现中性的占70％,“益”与“害”之间并没有一个绝对界限。因此。

板栗干腐病的防治研究之五

研究证明,花期防治以及及时采收、低温贮藏和快速运输等保水措施是控制板栗干腐病的较为有效的措施。

苹果霉心病微生态研究

对苹果心室及霉心病病果心室的微生物区系,霉心病的发病特点及生态防治做了系统研究,认为霉心病及健康果实心室存在多种微生物,霉心病的发生是微生态系统失调引起的。霉心病具有复合侵染、潜伏侵染特性。一些芽孢杆菌(Bacillus.sp)对病原菌有拮抗作用。生态防治可以应用于霉心病的防治。

增产菌——植物微生态保健防治菌

增产菌的发明是世界首创。它与传统的思路截然不同,不是从土中、根围筛选微生物,而是筛选植物体自然生态系的成员;不是仅着眼于拮抗菌,而是另辟蹊径,寻找和筛选能促生、增产、改进品质和增强抗性的多功能菌。中国专利局已授予“作物增产菌及其选育与发酵工艺”以发明专利权,该发明获1990年度国家教委科技进步一等奖、第五届全国发明展览会银牌奖、第二届中国专利奖金奖。

芽孢杆菌绿色荧光蛋白标记及其在小麦体表定殖的初探

将来自质粒 pAD4 4 12的启动子和绿色荧光蛋白基因 gfpmut3a插入大肠杆菌 枯草芽孢杆菌穿梭载体pBE2 ,构建成芽孢杆菌表达载体 pGFP4 4 12 ,用其转化野生型生防芽孢杆菌 83 6和A 4 7等 8个菌株 ,均得到良好的发光表型。质粒稳定性实验表明重组质粒 pGFP4 4 12稳定性为 92 %。借助荧光显微镜对GFP标记的菌株A 4 7 gfp在小麦体表的定殖进行初步的研究。结果表明 :A 4 7 gfp能够在小麦根际及小麦体表定殖 (包括根表和茎叶表面 ) ;相对于在茎叶表面定殖的A 4 7 gfp在根表定殖的菌体与根的结合更为牢固 ;从根基到根尖A 4 7

有益内生细菌B946在小麦体内的定殖规律

通过筛选获得对小麦纹枯病有明显防治效果的蜡状芽孢杆菌B946菌株。采用链霉素和利福平抗性标记B946菌株,用平板菌落计数法检测其在小麦根、茎基部、叶内的定殖情况。结果表明:叶部接种B946,该菌能在接种叶内定殖,并能向茎基部、其它叶和根内转移;用B946菌悬液浸种处理,该菌能向茎基部和叶内转移;在一定范围内,菌悬液浓度108cfu/ml以上,浸种时间3h以上,栽培温度25℃,有利于B946在小麦体内的定殖转移。

SOD猕猴桃果汁对体液免疫、血清与红细胞丙二醛水平的影响

目的 研究超氧化物歧化酶 (SOD)猕猴桃果汁对降低血清、红细胞丙二醛 (MDA)含量及提高机体免疫球蛋白水平的作用。方法 测定 SOD猕猴桃果汁服用前后正常妇女红细胞 MDA及血清 MDA、免疫球蛋白 Ig G、Ig A、Ig M的含量。结果 SOD猕猴桃果汁服用后 ,红细胞与血清 MDA含量显著降低 ;免疫球蛋白Ig G、Ig A、Ig M均呈上升趋势 ,Ig G与 Ig M上升尤为明显。红细胞与血清 MDA含量与免疫球蛋白 Ig G、Ig A、Ig M均呈上升趋势 ,Ig G与 Ig M上升尤为明显。红细胞与血清 MDA含量与免疫球蛋白 Ig G、Ig A、Ig M均呈负相关 ;血清 Ig M与红细胞与血清 MDA含量呈显著负相关 ,Ig G与红细胞 MDA含量呈显著负相关。结论 纯天然 SOD猕猴桃果汁具有抗脂质过氧化、降低血清和红细胞 MDA含量、提高免疫球蛋白 Ig G、Ig A、Ig M的作用。

电脉冲穿孔法将苏云金杆菌δ-内毒素基因导入野生型芽孢杆菌

利用电脉冲穿孔法将带有苏云金杆菌毒蛋白基因的穿梭质粒导入几株野生型芽孢杆菌中，它们是野生型的蜡状芽孢杆菌、短芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌。通过观察在新霉素和氨苄青霉素平板上长出的抗性菌落数，计算出转化效率为１０＾１－１０＾４转化子／μｇＤＮＡ．从转化子中分离到的质粒ＤＮＡ大小及其用ＨｉｎｄⅢ酶切的片段与原始质粒ＤＮＡ相同，毒性测试表明重组转化子对烟青虫六天的致死率达９０－１００％。

枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化

在摇瓶发酵条件下,采用Plackett-Burman设计法和响应面分析法对枯草芽孢杆菌B908菌株的培养基配方进行优化,确定了影响B908菌株发酵液含菌量的3个重要因子依次为玉米粉、碳酸钙和豆饼粉;对这3个因子进行爬坡路径试验,通过响应面分析法确定了主要影响因子的最佳条件。优化后的培养基配方使摇瓶发酵液每毫升的含菌量从0.6×109个/ml提高到1.18×1010个/ml。

超氧化物歧化酶(SOD)的分子生物学

本文主要从分子生物学角度概述了超氧化物歧化酶基因的克隆,表达,分子调控,及转基因研究的情况。

蜡质芽孢杆菌超氧化物歧化酶的理化性质研究

本文对从蜡质芽孢杆菌发酵菌体中纯化的Ｆｅ－ＳＯＤ进行了理化性质研究，测定结果表明：在２７℃，ｐＨ６８，光照强度为４０００Ｌｕｘ条件下，光照２０分钟为酶活性测定的最佳条件；经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析得其亚基分子量为１７，７８３道尔顿；等电聚焦电泳表明：Ｆｅ－ＳＯＤ的等电点（ＰＩ）大约为６５左右；经ＤＮＳ法分析Ｎ－末端氨基酸为谷氨酸（Ｇｌｕ）；其氨基酸的组成中酸性氨基酸的含量大于碱性氨基酸的含量，表明此酶为酸性蛋白。

几种芽胞杆菌溶血素BL基因及其溶血素的检测

用PCR方法对几种芽胞杆菌溶血素BL基因进行了检测,结果表明7株蜡样芽胞杆菌含有溶血素BL基因hblA、hblC、hblD,其他枯草芽胞杆菌、多粘类芽胞杆菌、地衣芽胞杆菌检测到部分溶血素基因;通过血平板培养的方法检测结果表明只有含有溶血素全部基因的菌株才会产生溶血环,从而为筛选不产生溶血素的有益芽胞杆菌奠定一定基础。

小麦纹枯病生防芽孢杆菌的筛选及鉴定

从河南、北京等地采集小麦植株,分离得到202株内生芽孢杆菌,平板拮抗测定获得27株对小麦纹枯病菌拮抗效果明显的菌株。温室盆栽测定了27个菌株对小麦纹枯病的生防效果,其中菌株M-1、W-2和W-3的防治效果分别为60.4%、59.4%和56.6%。对3株生防菌株进行了分类学鉴定,M-1为多粘类芽孢杆菌,W-2为地衣芽孢杆菌,W-3为枯草芽孢杆菌。

植物内生蜡样芽孢杆菌M22 Mn-SOD基因的克隆及在大肠杆菌中表达

通过PCR和反向PCR,从蜡样芽孢杆菌M22中扩增到2条长度为1 322 bp和1 395 bp的基因片段(GenBank登录号为AY540749和AY468485),分别含657 bp和627 bp的开放阅读框,各自编码218个和208个氨基酸残基的功能蛋白。2个蛋白氨基酸序列同源性为46％,均不含信号肽。与其它锰超氧化物歧化酶序列同源性高,保守氨基酸残基类型及位置与其它Mn-SOD相同,可确定2个基因均为蜡样芽孢杆菌Mn-SOD基因。分别将2个基因的开放阅读框插入载体pET-22b(+)构建表达质粒pET-sodA,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达。SDS-PAGE显示融合蛋白相对分子质量分别为28 kD和27 kD。转入pET-sodA的SOD缺陷型大肠杆菌QC779转化子恢复在10μmol/L paraquat的LB平板上生长的能力。活性电泳显示,M22的Mn-SOD在QC779中成功表达。

巴斯德毕赤酵母表达系统研究进展

巴斯德毕赤酵母外源基因表达系统是近年来发展的一种优秀的真核表达系统 ,与传统的大肠杆菌和酿酒酵母表达体系相比 ,其具有的诸多优势使之研究价值及应用价值不断体现。综述了其在生物学特性、表达载体、基因整合、外源蛋白的分泌、诱导表达及发酵等方面的基础研究及新近研究进展。