山茱萸多糖对HDF细胞β-半乳糖苷酶及p16表达的影响

目的探讨山茱萸多糖对抗HDF细胞衰老的作用及其可能的调控机制。方法体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF),实验组从40代开始加多糖含药血清,观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,分光光度法检测β-半乳糖苷酶活性,免疫组化法检测p16蛋白的表达。结果衰老组细胞活力下降,β-半乳糖苷酶含量升高,p16蛋白表达阳性细胞数升高;山茱萸多糖可提高细胞活力、降低β-半乳糖苷酶含量,p16蛋白表达阳性细胞数下降。结论山茱萸多糖可通过改变p16的表达而发挥其抗HDF细胞衰老作用。

马齿苋水提液对D-半乳糖致衰老模型小鼠心肌线粒体的保护作用(英文)

背景:线粒体是细胞内主要耗氧部位,是产生自由基的主要场所,也是内源性自由基攻击的靶部位,其结构和功能会随着年龄的增加而改变,逐步导致全身性生理功能下降。马齿苋(Portulaca oleraceaL.)有长寿菜之称,营养丰富,又有抗自由基作用,其抗衰老作用是否与心肌线粒体的保护有关值得探讨。目的:观察马齿苋水提液对衰老模型小鼠心肌线粒体磷脂的脂质过氧化和呼吸链酶活性的影响,分析其心肌保护作用途径。设计:完全随机分组设计,对照动物实验。单位:佳木斯大学基础医学院生化教研室。材料:①于2004-01/08在佳木斯大学实验动物中心完成动物饲养和实验,在生物化学教研室完成动物的处死、心脏取材、线粒体的制备,在生物化学教研室、大学实验中心、化学与药学院完成指标的测定。选用成年纯系昆明种健康小白鼠30只,雌雄不拘。②按随机摸球法分为3组:青年对照组8只,衰老模型组和模型给药组各11只。③马齿苋由佳木斯市中医药研究所提供,本校生药教研室鉴定,制成含生药浓度1kg/L水提液。心磷脂标准品由美国Sigma公司提供;丙二醛、Ca2+-ATP酶活性测定试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。方法:①衰老模型组每日颈背部皮下注射D-半乳糖100mg/kg;马齿苋多糖组除注射D-半乳糖外,同时按含生药13g/(kg·d)灌服马齿苋水提液;青年对照组每日皮下注射等容量的生理盐水。连续给药30d,于最后一次给药次日处死,迅速取心脏,备用。②参考南京建成生物工程研究所提供的方法制备线粒体。按试剂盒说明测定线粒体内丙二醛含量及Ca2+-ATP酶活性;采用高效液相色谱法测定线粒体膜磷脂中心磷脂相对含量;采用伍期专的方法测定复合体Ⅰ及复合体Ⅱ+Ⅲ活性。③计量资料差异比较采用方差分析和t检验。主要观察指标:各组小鼠心肌线粒体膜磷脂组成、线粒体丙二醛含量及复合体Ⅰ、复合体Ⅱ+Ⅲ和Ca2+-ATP酶活性比较。结果:小鼠30只均进入结果分析。①心肌线粒体内丙二醛含量:衰老模型组为(8.827±0.873)μmol/g,高于青年对照组和马齿苋组[(5.194±0.674),(5.901±0.743)μmol/g,t=7.48,7.22,P<0.01]。②心肌线粒体内心磷脂相对含量及Ca2+-ATP酶活性:衰老模型组分别为(0.156±0.012)mg/g,(1.267±0.167)μkat/g,低于青年对照组和马齿苋组[心磷脂:(0.190±0.022),(0.184±0.021)mg/g;Ca2+-ATP酶:(1.870±0.254),(1.780±0.237)μkat/g,t=3.23,5.61,P<0.05～0.01]。③心肌线粒体内复合体Ⅰ和复合体Ⅱ+Ⅲ活性:衰老模型组分别为(3.517±0.383),(20.217±2.200)μkat/g,低于青年对照组和马齿苋组[复合体Ⅰ:(6.817±0.600),(6.067±0.750)μkat/g;复合体Ⅱ+Ⅲ:(56.400±4.933),(51.800±4.217)μkat/g,t=5.74,9.86,P<0.01]。结论:马齿苋水提液可能通过抑制心肌线粒体磷脂的脂质过氧化和改善呼吸链酶的活性而实现对线粒体的保护作用。

棉花根对老年小鼠红细胞和脑内SOD活性及MDA含量的影响

采用自然衰老的小鼠,观察棉花根水煎剂对老年小鼠红细胞和脑内超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化物的代谢产物丙二醛(MDA)含量的影响。实验结果表明:棉花根可使老年小鼠红细胞和脑内MDA含量明显下降,SOD活性增高,SOD/MDA的比值显著升高。提示棉花根可抑制老年小鼠体内脂质过氧化物的生成,提高SOD活性,进而延缓机体,尤其是脑的衰老过程。

红花黄色素对衰老模型小鼠脑细胞凋亡的影响

目的:探讨红花黄色素对衰老模型小鼠脑细胞凋亡及其相关因素的影响及其作用机制。方法:采用D—半乳糖制作衰老模型小鼠作研究对象,用大孔树脂法提取红花黄色素,同时观察不同剂量红花黄色素对脑细胞凋亡及Bcl—2的影响作用。结果:红花黄色素能显著降低脑细胞凋亡率,提高Bcl—2的表达,以大剂量和中剂量组效果比较显著(P<0.01,P<0.05)。结论:红花黄色素是红花延缓衰老作用的有效成分,衰老导致脑细胞凋亡大量出现,红花黄色素减少脑细胞凋亡率,以红花黄色素大剂量组效果最佳。

山茱萸纳米制剂对AD模型大鼠BDNF/TrkB途径的调节作用

目的探讨山茱萸纳米制剂对D-半乳糖(gal)诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠学习记忆能力下降的影响及BDNF/TrkB信号转导途径的作用机制。方法雄性SD大鼠40只,体重350～400 g,随机分为青年组、模型组、山茱萸水提组和山茱萸纳米水提组,采用D-gal连续侧腹部注射8 w制作AD模型,采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,山茱萸水提组和山茱萸纳米水提组大鼠经胃灌服等剂量山茱萸连续30 d。检测血清SOD活性和MDA含量,RT-PCR法检测大鼠海马BDNF、TrKB、SYP表达,Western印迹法检测海马p-ERK蛋白水平。结果模型组、山茱萸水提组和山茱萸纳米水提组血清SOD活性显著低于青年组(P<0.01),而MDA显著高于青年组(P<0.01),且山茱萸水提组和山茱萸纳米水提组SOD活性和MDA含量均较模型组明显改善(P<0.01)。山茱萸各组均能上调模型大鼠脑BDNF、TrkB、SYP mRNA表达水平,并可提高P-ERK表达水平,其中纳米水提组的上调作用好于水提组。结论 BDNF的低表达可降低TrkB的表达,山茱萸纳米制剂可通过有效提高SOD活性、上调BDNF/TrkB/ERK的表达水平,提高SYP表达,而改善AD模型大鼠学习记忆能力,其中纳米制剂组的效果好于水提液组。

红花黄色素对衰老模型小鼠肝线粒体膜磷脂影响的实验研究

目的 :探讨小鼠肝线粒体膜磷脂组成的随龄变化及红花黄色素对其的影响。方法 :采用HPLC法测定线粒体膜PC、PE、CL的含量 ,陈思峰法测定PLA2 活性。结果 :衰老模型组PC、PE、CL均明显降低 ;PLA2 活性随增龄而升高。SYP可升高衰老模型组PC、PE、CL含量 ;显著降低衰老模型组PLA2 活性。结论 :D -半乳糖模型出现拟衰老时线粒体膜磷脂改变特征 ,SYP可显著改善肝线粒体膜磷脂的组成。

山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力及Klotho/Akt信号通路的影响

目的探讨山茱萸多糖对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力及Klotho/Akt信号通路的影响。方法采用D-半乳糖腹腔注射法制备Wistar大鼠脑老化模型,然后给予不同剂量山茱萸多糖观察大鼠学习记忆能力、β-半乳糖苷酶活性、Klotho、Akt、FoxO3a、Mn-SOD等指标变化。结果与模型组比较,山茱萸多糖中、高剂量组学习记忆能力提高(P<0.01),Klotho、Mn-SOD、FoxO 3 a mRNA表达升高(P<0.01),Klotho、Mn-SOD蛋白表达升高(P<0.01),而Akt mRNA表达降低(P<0.01)。结论山茱萸多糖可提高脑老化模型大鼠学习记忆能力,其机制与提高海马组织中Klotho通路相关分子表达,激活下游靶分子Mn-FoxO3a和Mn-SOD表达有关,进而改善大鼠的学习记忆能力。

不同浓度山茱萸多糖对HDF细胞衰老的影响

目的研究不同浓度山茱萸多糖对体外培养人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF)的影响,探讨制备含山茱萸多糖家兔血清的最佳采血时间。方法选择家兔为对象,制备含山茱萸多糖血清,DMEM培养基培养复制性衰老HDF细胞;采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,MTT法检测细胞活力。将HDF细胞分为4组,观察不同浓度含山茱萸多糖家兔血清培养基对衰老HDF细胞细胞活力的影响。结果血清中山茱萸多糖浓度在给药1.5,2,4h明显高于给药0.5、11h(P<0.001),给药2,2.5,3,3.5,4h高于0.5、11h(P<0.01),而在给药48,72h则明显降低(P<0.01)。培养基中加入含山茱萸多糖兔血清(SCP)0.5%、1%和1.5%均能提高衰老HDF细胞活力(P<0.01),细胞衰老表型不明显,其中1%SCP组效果好于0.5%,1.5%组。而2%SCP组和3%SCP组表现明显的细胞生长抑制。结论制备含山茱萸多糖家兔血清最佳取血时间是在给药后1.5～2h或4h,山茱萸多糖抗HDF细胞衰老作用效果最好的是1%含山茱萸多糖兔血清组。

茜草多糖对衰老模型小鼠脑细胞凋亡影响的实验研究

目的探讨茜草多糖延缓衰老作用机制及其对脑细胞凋亡的影响和作用机制。方法采用D-半乳糖衰老模型小鼠作为研究对象,提取茜草多糖,观察茜草对脑细胞凋亡、Bcl-2、线粒体细胞色素C(cytC)和Ca2+含量的影响。结果D-半乳糖衰老模型小鼠脑细胞凋亡率明显增加,而Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),线粒体cytC和Ca2+含量明显下降(P<0.01),茜草多糖可明显降低凋亡细胞数(P<0.01),增加Bcl-2的表达(P<0.05),提高线粒体cytC水平和Ca2+含量(P<0.01)。结论茜草多糖具有延缓脑细胞衰老的作用,可通过①上调Bcl-2蛋白的表达,②保护线粒体避免cytC的释出,③提高线粒体Ca2+缓冲含量,从而发挥抑制脑细胞凋亡的作用。

山茱萸多糖延缓衰老作用的研究

健康长寿是人类经久不衰研究的热门课题之一。尤其是进入21世纪后，社会人口的老龄化进程迫使我们对衰老及衰老相关疾病、有效防治衰老措施的研究有更深刻的理解和阐述。而衰老是内外环境引发的机体各种功能普遍减弱的过程，表现为渐进性、累积性和普遍性。中药以其特有的效果，在抗衰老研究领域占有重要的地位。有关中药及其组分在抗衰老和抗肿瘤研究的众多发现，例如银杏叶、人参皂甙等，不仅推进研究的深入，而且也得到多数学者的认可。

山茱萸多糖抗HDF衰老与cyclinD1表达的关系

目的:探讨山茱萸多糖对抗HDF细胞衰老作用及对细胞周期蛋白的作用。方法:体外培养HDF细胞,实验组从40代开始加多糖含药血清。在培养至43代、47代和50代采用MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测cyclinD1的mRNA表达,并与30代时进行比较。结果:衰老组细胞活力下降,cyclinD1 mRNA表达升高;山茱萸多糖血清可提高细胞活力,降低HDF细胞cyclinD1 mRNA含量表达。结论:山茱萸多糖可能通过改变细胞周期调控因子的表达而发挥其抗HDF细胞衰老作用。

白术水煎剂对老龄大鼠心肌Na^+,K^+-ATPase和血清TAA的影响

目的：探讨白术对老年大鼠心肌细胞膜钠钾ＡＴＰ酶（Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ）活性和总抗氧化能力（ＴＡＡ）的影响，及产生显著影响的时间．方法：给老年Ｗｉｓｔａｒ大鼠灌服白术水煎制，制备血清、心肌匀浆和心肌细胞膜，分别测定血清ＴＡＡ和Ｎａ＋， Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性，并与对照组进行比较．结果：老年大鼠心肌 Ｎａ＋， Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性和ＴＡＡ明显低于青年对照组（Ｐ＜０．０５， Ｐ＜０．０１）．灌服白术后３０天心肌Ｎａ＋， Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ明显高于老年时照组，分别为（０． ９１± ０． ０５）、（０． ６２ ± ０． ０９）μ ｍｏｌＰｉ．ｍｇ－１Ｐｒ．ｈ－１；而血清ＴＡＡ在２０天时明显高于老年对照组，分别为（６．６６±０．９０）、（５．３８±０．５８）Ｕ．ｍｌ－１；两组各项比较差异均有显著性（Ｐ＜０．０１）；血清ＴＡＡ和Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ呈显著的正相关。结论：白术能明显增强心肌Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ活性，其机理可能与血清ＴＡＡ的提高有关，白术的显效时间为 ３０天．

红细胞免疫功能的随龄变化及D-半乳糖的作用

目的 :探讨红细胞免疫功能的随龄变化及 D-半乳糖的作用 ,以明确衰老红细胞免疫功能研究领域中 D-半乳糖模型的应用。方法 :采用不同月龄昆明种小鼠和 Wistar大鼠 ,测定红细胞 C3b受体花环率及免疫复合物花环率。结果 :RBC-C3b RR和 RBC- ICR随龄明显增加 ,D-半乳糖衰老模型大鼠和小鼠均出现类似老年小鼠红细胞免疫学变化的特征。雌性大鼠红细胞免疫复合物花环率显著高于雄性。结论 :D-半乳糖衰老模型鼠出现类似自然衰老鼠的红细胞免疫变化 。

适应教育发展,改革生物化学教学

目的:研究生物化学教学手段、教学方法改革,提高教学效果。方法:自2002级开始,实施教学设计和教学内容改革、教学方法和教学手段的改革。结果:学生学习成绩有了明显提高,取得良好的效果。

改革医学生物化学实验教学,提高学生综合素质

目的:探索实验教学提高学生素质的方法,提高学生创新思维和能力。方法:结合生物化学教学实际,通过实验内容组合、学生观察能力的培养;实施适合的实验评价办法,强化实践教学的独特教学优势。结果:本法可明显提高学生观察能力与分析能力,提高学生的实验技能和理论知识理解。结论:实验教学改革可促进学生综合素质的提高,促进青年教师的成长,有利于进一步进行教学改革。

于术对衰老大鼠抗氧化系统影响的实验研究

目的 探讨于术的抗衰老作用机制 ,并寻求合理的用药时间。方法 采用自然衰老的 Wistar大鼠 ,测定血清总抗氧化能力 (TAA)、红细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性、肝组织丙二醛 (MDA)和脑组织脂褐素 (LPF)及心肌细胞膜 Na+ ,K+ - ATP酶 (Na+ ,K+ - ATPase)活性 ,观察于术对它们的影响。结果 于术能明显提高老年大鼠血清 TAA、红细胞 SOD及 Na+ ,K+ - ATPase活性 (P<0 .0 1 ) ,而明显降低 MDA的含量和脑 LPF的生成 (P<0 .0 1 )。结论 于术可明显提高老年大鼠抗氧化能力 ,具有抗衰老作用 ,理想的用药时间为 2 0 d。

小鼠组织胶原随龄变化与SOD活性和LPO含量关系的研究

观察小鼠皮肤等组织胶原含量与ＳＯＤ活性、ＬＰＯ含量的变化，探讨胶原随龄变化的机理。结果表明，随增龄皮肤、肝脏组织中ＳＯＤ活性下降，ＬＰＯ含量增加；皮肤和肝脏组织胶原的含量随龄下降；相关分析表明组织ＬＰＯ含量和ＳＯＤ活性与组织胶原含量有关。提示动物组织胶原含量的随龄变化与其体内抗自由基损伤能力降低，脂质过氧化反应增强有关。

棉花根水煎剂对D-半乳糖所致小鼠亚急性衰老模型影响的实验研究

通过观察棉花根水煎剂对D－半乳糖诱导的衰老模型小鼠红细胞和脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和过氧化脂质（LPO）含量，探索棉花根的抗衰作用。结果表明，灌服棉花根组小鼠SOD活性明显高于对照组，而LPO含量则明显低于对照组，提示其具有抗衰作用。

碱性磷酸酶与老年性骨折愈合关系初探

本文报告了老年患者骨折愈合过程中血清碱性磷酸酶(AKP)活性的变化并与年青患者进行比较。结果表明,青年骨折愈合过程中伤后24h与第一周相比,AKP活性显著增高(P<0.01).而老年性骨折愈合过程中AKP活性无变化,提示老年骨折愈合时间延长的原因可能是伤后成骨细胞生长不活跃所致。为老年骨折愈合提供了实验依据。

熟地提取液对衰老模型小鼠脑组织NOS、NO、SOD和LPO的影响

目的探讨熟地不同溶媒提取液抗衰老的机制。方法观察小鼠脑组织中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）、一氧化氮（ＮＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化脂质（ＬＰＯ）的随龄变化，并观察了熟地的氯仿及乙醇提取液对上述指标的影响。结果熟地的氯仿及乙醇提取液均能明显提高Ｄ－半乳糖致衰老模型小鼠脑组织中ＮＯＳ和ＳＯＤ的活性，使ＮＯ含量增加，ＬＰＯ含量无明显降低。结论熟地氯仿提取液具有延缓衰老的作用。