自体外周血干细胞移植治疗高危恶性实体瘤

目的 :探讨自体外周血干细胞移植治疗高危恶性实体瘤的可行性及疗效并了解干细胞动员、采集时机、骨髓恢复时间等问题。方法 :16例经病理确诊的高危乳腺癌、淋巴瘤及小细胞肺癌等在经不同程度的化疗后 ,进行了大剂量化疗并自体外周血干细胞的移植。结果 :全部病人均获造血重建 ,中性粒细胞 (>0 .5× 10 9·L-1)造血重建中位时间 14 (10～ 2 1)d ,血小板 (>2 0× 10 9·L-1)造血重建中位时间约 16 (12～ 2 5 )d。本组中 10例 (6 2 .5 % )病人随访中位时间 4 8月 (2～ 84月 )无病存活 ,6 (37.5 % )例复发。结论 :大剂量化疗并自体外周血干细胞移植治疗高危恶性实体瘤疗效好 ,且较安全 ,而骨髓恢复的快慢似和回输的单个核细胞的量有关 ,和年龄无关。

异基因外周血干细胞移植治疗恶性血液病的临床研究

目的 :探讨异基因外周血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗恶性血液病的临床疗效。方法 :以粒细胞集落剌激因子 (G CSF) 5μg·kg- 1 ·d- 1 动员外周血造血干细胞 ;预处理方案为TBI加VEAMC方案 ;输入CD34 + 细胞中位数为 5 .4(3 .2 0～ 9.33)× 1 0 8个 /kg ;用环孢素A加甲氨喋呤或甲基泼尼松龙防治移植物抗宿主病 (GVHD)。结果 :移植后ANC及PLT中位重建时间分别为 1 5d、1 9d ;1 5例中有 6例发生aGVHD(40 .0 % ) ,有 7例发生cGVHD(46 .6 % ) ;1 5例中有 6例 (40 .0 % )死亡 ,其中死于间质性肺炎 3例 ,因复发死亡 2例 ,死于GVHD引起的肝功能衰竭 1例 ;9例 (60 .0 % )患者无病生存。结论 :allo PBSCT有造血重建快、感染等移植相关死亡发生率低等优点 。

免疫抑制剂为主的综合方案治疗成人重型再生障碍性贫血的临床研究

目的 :研究成人重型再生障碍性贫血 (SAA)的治疗方案。方法 :观察以免疫抑制CSA、ATG联合SSL方案治疗成人SAA10例的临床疗效。结果 :7例有效 ,其中 4例达治愈标准。结论 :CSA、ATG联合SSL方案治疗成人SAA较单用CSA或ATG疗效有明显提高 ,SSL方案可作为成人SAA病人经CSA或ATG综合治疗后的长期维持治疗 ,方法安全 。

三氧化二砷对白血病细胞DNA损伤及凋亡相关基因表达的影响

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3 )对HL - 6 0 ,K5 6 2和NB4细胞DNA的损伤及对凋亡相关基因的调控。方法 :用荧光显微技术 ,单细胞彗星电泳观察As2 O3 对HL - 6 0 ,K5 6 2及NB4细胞DNA的损伤 ,用流式细胞术测定As2 O3 对HL - 6 0 ,K5 6 2及NB4细胞凋亡相关基因Bcl- 2和p5 3的表达。结果 :As2 O3 诱导HL - 6 0 ,K5 6 2和NB4细胞的凋亡时造成了DNA损伤 ;显著下调三种细胞内Bcl- 2蛋白的表达 ,且Bcl- 2下调程度与凋亡有着密切关系 ;上调了p5 3蛋白的表达。结论 :As2 O3 诱导细胞凋亡时发生了DNA的损伤 ,诱导凋亡主要是通过下调Bcl- 2和上调p5 3来实现。

自体造血干细胞混合HLA半相合异基因骨髓移植治疗恶性血液病

目的 :观察自体造血干细胞混合HLA半相合异基因骨髓移植治疗恶性血液病的疗效及移植相关并发症 .方法 :分析 1 995 0 1 / 2 0 0 3 0 1我院 33例自体造血干细胞混合HLA半相合骨髓移植患者的临床资料 .结果 :1 7(5 1 % )例患者发生了轻、中度口腔黏膜炎 ,重症出血性膀胱炎和肝VOD者各 1例 ,白质脑病 1例 ,全身放射治疗后发生脑水肿 1例 ,1例移植期间出现结核性胸膜炎 ,并发间质性肺炎 .对可评估的性别不同的 1 0例供受者性染色体分析发现 3例 (30 % )移植后形成混合嵌合体 ,仅 2例发生皮肤cGVHD .随防 4 2 (6 96 )mo ,1 9例 (5 7.6 % )无病存活 ,4例 (1 2 .1 % )移植相关并发症死亡 ,8例 (2 4 .2 % )术后复发 ,2例 (6 .1 % )发生了移植后MDS .结论 :自体造血干细胞混合HLA半相合异体骨髓移植 ,能够有效诱导GVL效应 ,提高疗效 ,减少复发 ,且并无增加移植相关并发症 .

112例造血干细胞移植总结报告

目的 :评价造血干细胞移植 (HSCT)治疗血液病的临床疗效及并发症。方法 :112例血液病患者行HSCT ,其中自体HSCT(auto -HSCT) 52例 ,混合HSCT(mixed -HSCT) 3 3例 ,异基因HSCT(allo -HSCT) 2 7例。结果 :随访平均 64个月 (2月～ 2 0年 ) ,62例 (55.4% )无病存活 ,其中 :auto -HSCT2 7/ 52例 (51.9% ) ,mixed -HSCT19/ 3 3例 (57.6% ) ,allo -HSCT16/ 2 7例 (59.3 % )。 51例(45.5% )死亡 ,其中 :auto -HSCT :18/ 52例 (3 4 .6% )复发死亡 ;7/ 52例 (13 .5% )移植相关死亡 ;mixed -HSCT :19/ 3 3例 (2 4.2 % )复发死亡 ;6/ 3 3例 (18.2 % )移植相关死亡 ;allo -HSCT :3 / 2 7例 (11.1% )复发死亡 ;2 / 2 7例 (7.4% )GVHD引起肝功衰竭死亡 ;6/2 7例 (2 2 .1% )移植相关死亡。结论 :HSCT治疗疗效确切 。

骨髓移植供体19例分析

本文分析了19例22例次各类骨髓供体的自身状况,重点讨论了供体髓采集质量及并发症,并与正常供体作了比较。结果表明,骨髓采集的部位选择,麻醉选择及骨髓采集量均无自身影响并且可直接进入BMT。并认为多次供髓,其间隔时间越长对有核细胞数影响越小。22例次发生并发症10次。FUO在自体供者中易发生(13％)。所有并发症均历时短暂,可迅速恢复。7例次异体正常供者血液学随访1～3年无异常。对今后临床BMT工作提供了参考依据。

PCR-SSCP在恶性血液病N-ras癌基因点突变检测中的应用

目的：检测血液系统肿瘤中Ｎ－ｒａｓ癌基因点突变的活性。方法：采用ＰＣＲＳＳＣＰ技术分析了２８例恶性血液病Ｎｒａｓ基因的突变活性，包括：ＡＮＬＬ６例，ＡＬＬ１２例，ＨＤ２例，ＮＨＬ３例，ＭＤＳ５例。结果：２８例中ＰＣＲＳＳＣＰ检测与正常对照，发生阳性者４例（１４．６％），其中ＡＬＬ１例（８．３％）、ＡＮＬＬ１例（１６．６％）、ＭＤＳ２例（４０％）。４例中有２例临床缓解后持续阳性，１例为ＡＬＬ患者，于骨髓移植后１０４ｄ复发死亡。１例ＭＤＳ患者转化为急性白血病，另２例临床缓解后３个月检测转阴，其中１例为ＡＮＬＬ，１例为ＭＤＳ。结论：ＰＣＲＳＳＣＰ方法可作为一种癌基因点突变检测手段常规应用于临床，但值得注意的是，ＰＣＲＳＳＣＰ方法只能提供分析区域是否存在突变点。

37例骨髓移植供体临床分析

骨髓移植(BMT)已广泛开展,既往骨髓供体一般是HLA相同的同胞或孪生子,也有HLA部分相同的家庭成员或HLA相同的无关者.近年来自体BMT渐趋普及,其优点在于不发生GVHD,为造血干细胞的一条重要来源.众所周知,BMT成功与否在造血干细胞的质量.进行大容量采集骨髓对于各类供髓者有否潜在危险值得探讨.本文分析我院37例供体情况,介绍如下.一、一般资料;1982年3月～1992年5月我科37例供者供髓40次.其中3例供髓2次.供者中男24例,女13例;中位数年龄28岁(15～50岁),其年龄分布见表1.自体供者30例,异体供者7例,自体供者中有2例2次供髓。

氮烯乙茶治疗晚期恶性组织细胞病

氮烯乙茶（7—乙基—8二甲基三氮烯茶碱,EDMTP）为一种抗癌活性较强的新型化合物,对小鼠移植性L615白血病有治愈活性。对某些实体瘤也有很好的抑瘤效应。我院应用该药对2例晚期恶性组织细胞病（简称恶组）治疗后短期内获完全缓解（其中1例已存活5年）。报告如下。

静脉滴注高剂量丙种球蛋白在血液病感染中的应用

2例静脉滴注12％人血丙种球蛋白10mL/d×7与抗生素合用治疗感染性血液病显效快,尤其在血液病患者中由于机体免疫功能异常或化疗后致免疫球蛋白低下而发生的严重感染,抗生素无效。合用本品后一般均在24-48h体温开始下降,72h后正常,连续使用1wk感染完全控制且利于本病缓解。

多聚酶链式反应在血液病诊断与监测中的应用

多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术由美国Cetus公司Mullis等于1985年建立.它是一种在体外将特异性DNA序列进行高效扩增的方法.不仅被广泛用于遗传性疾病及其产前诊断、感染性疾病病原的检测,而且用于各种类型肿瘤基因的研究.PCR作为一个“无细胞基因扩增系统”,其基础理论及应用研究主要用于从基因组DNA中产生大量特异DNA片段用于序列分析或分子克隆.从已知两端序列的双链DNA中产生特异性片段作为分子探针.通过选择性扩增cDNA的特殊片段进行cDNA克隆。

二氧化硒诱导的正常肝细胞株及肝癌细胞株的凋亡

目的 : 研究中毒剂量二氧化硒 ( Se O2 )对正常肝细胞 HL- 770 2及肝癌细胞 SMMC-772 1的影响。方法 : 用流式细胞术观察不同浓度硒对两种细胞的损伤作用及对两种细胞 Bcl- 2 ,P5 3蛋白表达的影响。结果 : 30 μmol/L的硒作用 48h可以明显抑制正常肝细胞株 HL- 770 2及肝癌细胞株 SMMC- 772 1的增生与活力 ,诱导两种细胞的凋亡 ,且两种细胞伴随着不同程度的 Bcl-2蛋白的下调及 P5 3蛋白的上调。结论 : 中毒剂量的 Se O2 诱导正常肝细胞 HL- 770 2和肝癌细胞 SMMC- 772 1的凋亡 ,且这种诱导凋亡作用是无选择性的 ,但两种细胞调亡的机制有一定区别。

环胞菌素A治疗再生障碍性贫血对骨髓细胞凋亡的影响

目的探讨环胞菌素A(CsA)治疗对再生障碍性贫血(再障)患者骨髓单个核细胞Fas(CD95)抗原表达及凋亡的影响作用。方法应用流式细胞仪测定24例再障患者CsA治疗前后骨髓单个核细胞(MNC)Fas表达率及凋亡率,其中急性再障7例,慢性再障17例;同时以20例正常人作对照。结果应用CsA治疗再障3个月时的总有效率58.3%。再障患者Fas表达率及凋亡率均高于正常对照(P<0.05);急性再障Fas表达率及凋亡率高于慢性再障,但差异无显著性(P<0.05)。用CsA治疗后,再障患者骨髓单个核细胞凋亡率明显低于治疗前(P<0.05)。结论CsA治疗可降低再障患者骨髓MNC的凋亡率,骨髓MNC的Fas表达率和凋亡率增高与再障发病有关。

三氧化二砷对白血病细胞凋亡和分化的双向诱导作用

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对白血病细胞株NB4,HL-60细胞凋亡和分化的双向诱导作用。方法:细胞分化抗原用相应抗体标记,用PI标记DNA,并用流式细胞仪检测。结果:0.6μmol·L-1As2O3作用72h能诱导NB4发生44.9%的凋亡,提高其浓度至8.1μmol·L-1,也能诱导HL-60发生62.3%凋亡,低浓度0.1～0.3μmol·L-1As2O3对NB4、0.1～2.7μmol·L-1As2O3对HL-60细胞无诱导分化作用,对分化抗原表达无影响。只有当浓度增至0.6和8.1μmol·L-1并作用较长时间才能使两种细胞分化抗原表达增加。结论:低浓度As2O3无促分化作用,较高浓度作用较长时间才显示诱导凋亡和一定的促分化作用。

G-CSF对不同人群CD34^+细胞及T细胞亚群影响的动态变化研究

目的 探讨应用G CSF动员外周血干细胞时,异体 自体造血干细胞移植供 受者的骨髓及外周血CD3 4+ 细胞和T细胞亚群的动态变化特点及最佳外周血干细胞采集时间。方法 对12例健康供者和16例化疗7d后的恶性血液病患者,以G CSF 15 0 μg 12h ,皮下注射,连用5d。应用流式细胞仪测定骨髓及外周血CD3 4+ 细胞和T细胞亚群。结果 ①应用G CSF前,两者骨髓CD3 4+ 细胞有显著差异(P <0 0 1)。应用48h后,两者的骨髓CD3 4+ 细胞均较前有明显增加(P <0 0 1) ,两者之间仍存在明显差异(P <0 0 1)。两者的骨髓CD3 4+ 细胞高峰值出现在96h后,较应用前差异显著(P <0 0 1) ,两者之间无差异(P >0 0 5 )。②应用G CSF前,两者的外周血CD3 4+ 细胞无明显差异(P >0 0 5 )。应用72h后,两者外周血中CD3 4+ 细胞均较前有明显增加(P <0 0 1) ,两者之间无明显差异(P >0 0 5 )。96h后,两者的CD3 4+ 细胞达高峰,较应用前差异显著(P <0 0 1)。两者之间无明显差异(P >0 0 5 )。③应用G CSF对两者的T淋巴细胞亚群无明显影响。结论 应用G CSF动员外周血干细胞96h后,异体 自体造血干细胞移植供 受者的骨髓及外周血CD3 4+ 细胞均达到高峰,可适时采集外周血干细胞。

小鼠白介素-12基因转染对EL4细胞在小鼠体内成瘤性的抑制作用

目的探讨逆转录病毒(RV)载体介导的小鼠白介素12(mIL-12)融合基因转染,对低免疫原性的小鼠T细胞淋巴瘤细胞EL4体内生长的影响。方法用共培养法导入基因,以PCR法检测基因的导入。以脾细胞增殖法测定mIL-12的生物学活性。观察导入mIL-12基因的肿瘤细胞EL4/12于小鼠皮下接种后的成瘤性。对预先接种野生型肿瘤细胞EL4的小鼠,用60Co照射的肿瘤疫苗EL4/12接种于瘤周,观察瘤苗的抗肿瘤作用等。结果在EL4/12细胞中,用PCR可特异地检测到mIL-12p35和p40亚基的cDNA片段。5×105EL4/12细胞48h表达的mIL-12达(10.2±3.2)ng。EL4/12细胞在小鼠体内的成瘤性明显下降。EL4/12瘤苗治疗组约50%的小鼠可长期无瘤生存,而对照组小鼠则在短期内全部成瘤死亡。部分长期生存的小鼠产生了有效的抗肿瘤免疫,能耐受野生型肿瘤细胞的二次攻击。与对照组相比较,疫苗治疗组中其余小鼠的成瘤时间延迟(P∨0.01),小鼠存活时间延长(P∨0.01);死亡时肿瘤体积小(P∨0.05),形成的肿瘤有完整包膜,瘤周和肿瘤内部有较多的淋巴细胞和浆细胞浸润等。结论转染mIL-12基因能抑制EL4肿瘤细胞的成瘤性。mIL-12基因修饰的肿瘤疫苗对野生型肿瘤细胞具有治疗作用。