丹参SmWRKY33基因的克隆与表达分析

为了研究WRKY33基因在丹参非生物胁迫中的作用机制,以白花丹参为试验材料,对丹参转录组数据进行分析,挖掘出丹参WRKY33基因参考序列并设计特异性引物,利用基因克隆技术从丹参中克隆出WRKY33基因的全长cDNA,命名为SmWRKY33。对SmWRKY33基因进行生物信息学分析,同时利用荧光定量方法探究SmWRKY33基因在逆境胁迫下的表达模式。结果表明,SmWRKY33基因核苷酸长度为1 635 bp,编码544个氨基酸。生物信息学分析显示,SmWRKY33基因的理论相对分子量为60 835.66,等电点为7.00,定位于细胞核,不存在跨膜区及信号肽,SmWRKY33蛋白为不稳定亲水蛋白。亲缘关系显示,SmWRKY33与紫苏、芝麻、白花泡桐的WRKY33亲缘关系较近。密码子偏好性分析得出拟南芥真核表达最适应丹参SmWRKY33基因的外源表达。qRT-PCR结果表明,SmWRKY33基因在低温、高温、PEG、NaCl等逆境胁迫诱导下具有不同的表达模式,其中低温、NaCl能显著诱导SmWRKY33基因的高表达,说明该基因对温度调节、盐胁迫较为敏感,猜测其参与温度、盐胁迫调控反应机制。本试验首次从丹参中克隆出SmWRKY33基因,探讨了该基因在丹参逆境胁迫下的作用机制,旨在为培育丹参的抗逆新品种提供参考基因。

射干总酚提取条件优化及含量测定

射干为多年生药用草本植物,具有利咽止痛、清热解毒、消痰之功效,临床主要用于治疗呼吸系统疾病,常与其他中药配合治疗支气管哮喘、扁桃体炎及儿童咳嗽等。射干中黄酮类化合物为主要物质,此外还有酚类、醌类、甾类化合物及其它一些微量成分。总黄酮的研究及应用已经比较深入,为拓展射干的应用领域,提高射干利用率,对总酚类物质进行分析和研究逐渐发展起来。本研究建立射干总酚的快速测定方法,为筛选射干优良种质提供技术支撑;比较射干不同部位总酚的含量,为射干的综合利用提供资料;分析不同烘干温度对射干总酚含量的影响,为进一步研究射干的初加工方式奠定基础。本试验所得的结果为射干在医学上的发展提供理论支撑。

秦艽组6种植物种子的比较和扫描电镜观察

对大叶秦艽、粗茎秦艽、麻花秦艽、达乌里秦艽、黄管秦艽和管花秦艽共6种秦艽的种子进行比较,并对种子表面进行了扫描电镜观察,发现6种秦艽种子在颜色、长宽比、千粒重、种脐和表面纹饰等方面存在明显差异,这些特征为秦艽种子的鉴定和分类提供了依据。

丹参肉桂醇脱氢酶基因(SmCAD)的克隆及表达分析

肉桂醇脱氢酶(cinnamyl alcohol dehydrogenase,CAD)依赖于NADPH还原肉桂醛及其衍生物,是催化木质素单体生物合成途径的最后一步关键酶。通过分析丹参转录组数据库,从丹参中获得一条肉桂醇脱氢酶基因,命名为SmCAD(Genebank注册号:HQ162287)。该序列包含一个长为1083 bp的开放阅读框,有3个内含子和4个外显子,编码360个氨基酸,含有NADP(H)结合域,Zn1和Zn2锌结合位点。利用BD walking的方法获得其启动子序列1202 bp,序列分析结果表明,SmCAD启动子区包含茉莉酸甲酯(MeJA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)响应元件以及MYB结合位点。利用实时荧光定量PCR分析表明,该基因在丹参根、茎、叶中均有表达,且其表达受到MeJA的诱导和GA3的抑制,推测该基因可能参与了丹参对外源信号的应答反应。研究结果可为进一步研究SmCAD基因在丹参中的具体功能提供理论依据。

丹参木质素及其单体含量的测定

本文建立了一种准确、快速的检测丹参中木质素及其单体含量的方法。采用Klason法和紫外分光光度法分别对丹参根和茎中酸不溶性木质素(Klason木质素)和酸溶性木质素含量进行了测定;运用硫代酸解法并结合气相色谱-质谱法(GC-MS)分别对丹参根和茎中各木质素单体组成进行了分析。结果显示,总木质素在丹参根和茎中的含量分别为280.7mg/g和160.4mg/g,其中Klason木质素含量分别为173.8mg/g和134.5mg/g;酸溶性木质素含量分别为106.9mg/g和25.9mg/g。H型、G型和S型木质素单体在丹参根中的含量分别为14.4μmol/g、2 070.2μmol/g、1 886.4μmol/g,在丹参茎中的含量分别为15.3μmol/g、212.8μmol/g、50.6μmol/g。利用本研究建立的方法可以准确、快速的检测丹参中各类木质素及其单体的含量,此方法可为其它药用植物木质素类化合物的定性、定量分析提供借鉴。

4种秦艽药材中宏量和微量元素的比较分析

采用火焰原子吸收光谱法测定大叶秦艽、麻花秦艽、粗茎秦艽和小秦艽4种不同秦艽药材中Fe、Zn、Du、Mn、Da、K、Na、Mg等8种宏量和微量元素的含量。结果发现:4种秦艽药材中宏量元素和微量元素的含量存在较大的差异,其中主产陕西的大叶秦艽中Ca、Mg、K、Zn、Mn的含量高于其他3种秦艽中的含量。

丹参锚蛋白重复序列家族基因的克隆和表达分析

用降落PCR的方法获得了丹参锚蛋白重复序列家族基因(SmARP).生物信息学显示,SmARP所编码蛋白的分子质量为19,064kD,理论等电点为8.4,是一种不稳定而且无信号肽和无跨膜区域的蛋白.该蛋白的二级结构中主要存在α螺旋(39.64%)和无规卷曲(42.01%),其三维结构模型中每个锚蛋白重复序列折叠成两个反向平行的α-螺旋,每两个α-螺旋中间形成一个长环.实时荧光定量PCR结果显示,该基因在丹参的根、茎、叶、花中均有表达.

射干叶固态发酵对其有效成分影响的研究

试验旨在研究射干叶固态发酵对其有效成分的影响。试验采用固态发酵技术,以植物乳杆菌为菌种,对射干叶的发酵条件进行优化,并对发酵后射干叶中总黄酮、总酚、抗氧化活性和5种黄酮类有效成分进行测定。结果表明,经固态发酵增加了射干叶中总黄酮、总酚的含量和抗氧化能力。射干叶最佳发酵条件为不添加碳源、液料比4 mL/g。固态发酵显著提高了射干叶中鸢尾黄素、野鸢尾黄素和次野鸢尾黄素的含量。研究表明,固态发酵技术提高了射干叶有效成分的含量,增强了抗氧化活性。

秋水仙素诱导薄荷染色体加倍技术研究

对秋水仙素诱导薄荷染色体加倍技术进行研究,以期筛选出诱导薄荷染色体加倍的最适体系,获得染色体加倍的变异植株。以秋水仙素为诱变剂对带有腋芽的薄荷茎段进行处理,结合流式细胞检测、根尖染色体数目观察等方法对变异植株的倍性进行鉴定,比较秋水仙素不同浓度与处理时间的诱变效果。结果显示,用100 mg/L的秋水仙素处理带有腋芽的薄荷茎段1 d,诱变效果最好,诱变率可达33%。通过流式细胞检测、根尖染色体数目观察等方法鉴定获得多倍体植株10个,与亲本植株相比,其植株形态主要表现为叶厚、茎秆粗、锯齿较深,生长速度缓慢;有8个植株挥发油含量提高,其中最高含量达到2.21%,为亲本植株(1.12%)的1.97倍。本研究通过秋水仙素诱导成功获得染色体加倍的薄荷植株,为薄荷的品种改良和选育提供了可靠的理论依据。

河南省小麦化肥减量化研究

河南省作为我国的粮食主产区,肩负着粮食安全和绿色发展双重任务,面临较大压力。尽管河南省化肥减量取得一定成效,但化肥施用总量和施用强度依然偏高。化肥施用量过高将影响河南省农业高质量发展战略的顺利实施。文章以河南省小麦种植为例,分析了河南省小麦化肥施用现状,在借鉴先进地区种养结合经验基础上,提出加强推广有机肥替代化肥;加强种养结合,促进畜禽粪污资源化利用;建立完整的农业面源污染台账制度等政策建议。

林下射干生长、光合特性及药材质量的研究

目的:筛选适宜林下栽培的优良射干种质,为林下射干栽培奠定基础。方法:通过间伐及整枝等措施,形成林下郁闭度为0.3的生长环境,对不同产地来源的射干种质进行栽培比较试验,观测不同产地来源种质的光合特性、生长指标及药材有效成分含量。结果:S4(辽宁锦州)根长和异黄酮类总含量显著高于其他种质;S2(河北安国)株高、叶绿素和野鸢尾黄素含量最高;S3(甘肃酒泉)根部干重最大,其次S2(河北安国)根部干重较大;S5(安徽亳州)的根幅最大且净光合速率、蒸腾速率及气孔导度均为最大;S1(河北涉县)总黄酮含量最高;S3(甘肃酒泉)和S4(辽宁锦州)总酚含量相对较高。结论:甘肃酒泉射干根茎干重最大,河北安国射干药材质量较高,生长也较旺盛,安徽亳州射干光合能力较强。因此,河北安国和安徽亳州射干能更好地适应遮阴环境,更适应林下种植。

陈艾提取物的总黄酮、总酚酸含量及抗氧化活性研究

采用超声辅助提取陈艾(Artemisia argyi)总黄酮、总酚酸,并利用清除ABTS+自由基、DPPH自由基试验来对不同年份陈艾提取物的抗氧化能力进行研究。结果表明,新鲜艾草、一年陈艾、三年陈艾和三年陈艾残渣中所含的总黄酮及总酚酸含量有显著差异。其中,三年陈艾中的总黄酮、总酚酸含量最高,并且有较强的抗氧化活性。一年陈艾次之,新鲜艾草其含量最低,对自由基的清除作用相对较低。相关性研究显示,陈艾总黄酮与总酚酸含量和采用DPPH、ABTS+法评价的抗氧化活性无显著相关性。

中西医结合治疗慢性盆腔炎的临床观察

慢性盆腔炎好发于30～50岁经产妇女,为妇科的常见病多发病,且该病的发病率呈逐年上升的趋势,临床通过对80例慢性盆腔炎患者进行分组,治疗组41例采用抗生素配合中药灌肠治疗,对照组39例单用抗生素治疗,结果显示:中药灌肠配合抗生素可以有效的治疗该病,且大大的缩短了病程。

中西医结合治疗功能性子宫出血108例

功能性子宫出血在临床上有许多治疗方法，但要达到预期疗效并非易事，本院3年来使用小剂量激素配合中药治疗功能性子宫出血108例，取得了满意效果，现报道如下，以探讨中西药治疗功能性子宫出血的可行途径。

鹿蹄橐吾不同器官挥发性成分的SPME-GC-MS分析

本研究采用固相微萃取法(SPME)分别提取鹿蹄橐吾根、茎、叶、花各部位挥发性成分,结合气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对各部位挥发性成分进行定性与定量分析。鹿蹄橐吾根、茎、叶和花中分别鉴定出28、13、9和18种挥发性成分,其中α-蒎烯为各器官的共有成分。不同器官中脂肪酸含量依次为:根(98.94%)>茎(97.41%)>花(91.85%)>叶(90.19%)。在四个器官中均检测到饱和脂肪酸,而在根中未检测到不饱和脂肪酸,表明鹿蹄橐吾不同器官中脂溶性成分在组成和含量存在一定差异。

薄皮甜瓜品种引种筛选试验

为更好地满足市场和消费者对于薄皮甜瓜的需求,解决安阳地区甜瓜产业发展中品种良莠不齐的问题,本研究综合比较博洋61、博洋63、博洋95、博洋9、菊城622、菊城九号、七彩酥香6号、七彩酥香9号、五台山26、五台山29共10个薄皮甜瓜品种的含糖量、口感、风味、产量及适应性,为筛选出适合安阳地区设施栽培的优质薄皮甜瓜品种提供参考。试验结果表明,博洋61、博洋95的品质和果实外形较其他品种均表现较好且市场销售情况良好,综合产值较高,可以适度推广种植。

柴胡不同部位总黄酮含量及抗氧化活性比较研究

目的:探讨北柴胡Bupleurum chinense不同部位总黄酮含量和抗氧化活性的差异,为柴胡地上部分综合开发利用提供理论依据。方法:采用乙醇提取,并结合加热和超声辅助提取,在单因素筛选的基础上,采用正交试验优化总黄酮提取工艺。采用比色法(亚硝酸钠-氯化铝),以芦丁为标品,对野生柴胡和栽培柴胡不同部位总黄酮含量进行测定。以其对羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力来分析不同部位总黄酮提取液的体外抗氧化活性。结果:柴胡不同部位中黄酮类物质含量差异显著,且野生柴胡与栽培柴胡不同部位总黄酮积累规律呈现一致性,即地上各部位总黄酮含量显著高于根部,其中叶片和花含量最高,其次是茎杆,根含量最低。柴胡根、茎、叶黄酮提取液对DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力存在差异,清除率由强到弱依次为叶>茎>根。结论:北柴胡不同部位总黄酮含量从高到低分别为花、叶>茎>根。柴胡不同部位所含总黄酮均有较强的抗氧化能力,作为食品天然抗氧化剂具有较大潜力。因此,应加大柴胡地上部综合开发利用,为扩大药源提供理论依据。

农业经济视角下中药材产业分析

随着改革开放和市场经济的进一步深入,中药生产及其贸易也具有广阔的经济前景,农村经济需要新的动力来源,中药材经济为其提供了强大动力,但是发展中尚存在一些问题,影响行业的健康发展。文章概述了我国中草药的发展现状,指出了中药材产业中存在的诸多问题,提出了行之有效的策略,以期为促进我国中草药产业的蓬勃发展提供参考。

射干总黄酮提取工艺优化及其抗氧化活性研究

采用超声辅助提取射干总黄酮,在单因素试验的基础上,采用正交试验设计,对射干总黄酮提取工艺进行优化;然后,采用优化后的工艺对射干不同部位(须根、主根、花梗、叶、花、茎)的总黄酮进行提取,通过DPPH自由基清除率和ABTS^(+)自由基清除率2个指标对射干不同部位提取物的抗氧化能力进行了比较。结果表明:射干总黄酮超声提取的最佳工艺条件为乙醇浓度60%、液料比1∶20、提取温度70℃、超声波功率80 W,该提取条件下射干不同部位的总黄酮含量具有显著差异,其中叶的总黄酮含量最高、茎的总黄酮含量相对较低。射干不同部位提取物对DPPH和ABTS^(+)自由基的清除能力存在着一定差异,其中,花梗提取物对DPPH自由基的清除能力最强,IC_(50)为0.48 mg/mL;须根和叶提取物对ABTS^(+)自由基的清除作用较好,清除率分别为97.98%和96.90%。射干总黄酮含量与其抗氧化活性的相关性分析结果显示,射干总黄酮含量与其DPPH自由基的清除能力相关不显著,但与ABTS^(+)自由基的清除能力呈极显著正相关。

射干种子萌发抑制物特性研究

探讨射干种子休眠原因,研究其内源抑制物质的存在部位及其特性,可以为射干种子休眠机理与破休眠技术的深入研究奠定基础,为射干种苗高效繁育提供参考。观察记录射干种子的形态结构后,将其置于蒸馏水中浸泡,定时取出称重,测定射干种子的吸水规律;在花盆中分别播种去皮和带皮的射干种子,观察其萌发情况;采用培养皿滤纸法,以蒸馏水处理为对照(CK),研究不同浓度的射干种皮浸提液和胚乳浸提液对小麦种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:射干种子外覆致密的黑色种皮,种子吸水速率呈先快后慢的变化,种皮透水性良好,不存在吸水障碍;射干去皮种子的发芽率和发芽势均显著高于带皮种子,种皮中可能存在影响种子萌发的抑制物质。射干种皮浸取液处理小麦种子后,38 h内明显抑制小麦种子萌发,且对小麦种子的萌发具有延后作用;并显著抑制小麦幼苗植株和根的生长,且浸提液浓度越高,对小麦种子萌发的延后作用以及抑制幼苗株高和根系生长的影响越明显。射干胚乳浸提液对小麦种子萌发和幼苗生长无显著影响。射干种子种皮内存在种子萌发抑制物,该抑制物具有延缓种子萌发和抑制幼苗生长的作用。