甲磺酸瑞波西汀体外颉颃塞内卡病毒的研究

【目的】从含有127种化合物的FDA批准上市药物库中筛选具有颉颃A型塞内卡病毒(SenecavirusA,SV A)活性的化合物并研究其作用途径。【方法】利用荧光素酶重组塞内卡病毒(rSVA-NLuc)结合荧光素酶高通量筛选技术,建立抗SVA化合物体外筛选平台。从FDA批准上市药物库中筛选浓度为10μmol/L时具有抑制荧光素酶活性效应的化合物,并进一步利用实时荧光定量RT-PCR验证其抑制活性,通过反映乳酸脱氢酶(LDH)释放水平的细胞毒性试验进而确定其最大无毒浓度。针对病毒感染周期的吸附、入胞、复制和组装释放等4个主要过程,采用不同的细胞处理方法和实时荧光定量RT-PCR、间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)、蛋白免疫印迹(Western blotting)和病毒滴度测定(TCID_(50))等技术进行化合物分子额顽机制研究。【结果】从包含127种分子的FDA获批上市药物库中筛选出8种候选抗SVA活性分子,通过实时荧光定量RT-PCR及细胞毒性检测,鉴定出1种安全、有效的化合物——甲磺酸瑞波西汀。在病毒感染细胞36h内甲磺酸瑞波西汀可使SVA VP3蛋白表达量和病毒滴度均极显著下降(P<0.01)。甲磺酸瑞波西汀处理金黄仓鼠肾细胞(BSR-T7/5)可减少SVA的吸附和入胞;实时荧光定量RT-PCR也显示甲磺酸瑞波西汀能抑制SVA的组装阶段,但它对SVA的复制和释放阶段没有影响。【结论】本试验从FDA批准上市药物库中筛选出了1种细胞毒性较低且颉SVA效果优异的化合物一—甲磺酸瑞波西汀,该化合物通过抑制SVA的吸附、入胞和组装阶段来对抗SVA感染。本研究为抗SVA药物的进一步研发提供重要参考。

催乳素通过酪氨酸激酶2/信号传导及转录激活蛋白5信号通路促进奶牛乳腺上皮细胞乳铁蛋白合成和分泌

本试验旨在研究催乳素(PRL)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)中酪氨酸激酶2/信号传导及转录激活蛋白5(JAK2/STAT5)信号通路介导的乳铁蛋白(LF)合成和分泌的影响。添加不同浓度的PRL[0(对照)、10、100、1000 ng/mL]处理BMECs 24 h,分析PRL对LF含量和LF、催乳素受体(PRLR)以及JAK2/STAT5信号通路基因表达量和相关蛋白表达的影响。为了验证STAT5在PRL促进BMECs LF合成和分泌的关键作用,添加STAT5抑制剂匹莫齐特(Pimozide)[未添加Pimozide(对照)、10μmol/L Pimozide、100 ng/mL PRL、10μmol/L Pimo⁃zide+100 ng/mL PRL]处理BMECs 24 h,测定PRL和Pimozide对LF含量和LF、JAK2/STAT5信号通路基因表达量和相关蛋白表达以及相对荧光强度的影响。结果表明:1)与对照组相比,10、100、1000 ng/mL PRL能够显著或极显著提高BMECs上清液中的LF含量(P<0.05或P<0.01);Pimozide组能够极显著降低BMECs上清液中的LF含量(P<0.01);PRL组能够极显著提高BMECs上清液中的LF含量(P<0.01)。2)与对照组相比,10 ng/mL PRL组LF、PRLR、JAK2及STAT5基因相对表达量显著升高(P<0.05);100 ng/mL PRL组LF、PRLR、JAK2和STAT5基因相对表达量极显著升高(P<0.01);1000 ng/mL PRL组PRLR和STAT5基因相对表达量显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);Pimozide组LF基因相对表达量显著降低(P<0.05);PRL组BMECs中LF基因相对表达量显著升高(P<0.05)。3)100、1000 ng/mL PRL组BMECs中LF蛋白表达量极显著升高(P<0.01);10、100、1000 ng/mL PRL显著或极显著提高BMECs中p⁃JAK2/JAK2和p⁃STAT5/STAT5表达量(P<0.05或P<0.01);Pimozide组和Pimo⁃zide+PRL组极显著降低BMECs中LF蛋白表达量(P<0.01);PRL组极显著升高BMECs中LF蛋白表达量(P<0.01)。4)Pimozide组和Pimozide+PRL组显著或极显著降低BMECs中LF或p⁃STAT5的相对荧光强度(P<0.05或P<0.01);PRL组极显著升高BMECs中LF和p⁃STAT5的相对荧光强度(P<0.01)。综上所述,PRL通过JAK2/STAT5信号通路促进BMECs中LF合成和分泌。

治疗奶牛子宫内膜炎中药组方“益宫清”抗炎抑菌效果评价及泡腾栓的制备

为了检验自拟中药组方“益宫清”的抑菌和抗炎效果,并将其制成新型中药泡腾栓剂,试验采用试管二倍稀释法检测中药“益宫清”对子宫内膜炎常见致病菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);选择雌性C57小鼠32只,随机分为对照组、大肠杆菌组、“益宫清”中药组和恩诺沙星组,每组8只,对照组子宫灌注生理盐水,其余组灌注大肠杆菌建立子宫内膜炎模型,每24 h 1次,连续3次。首次造模24 h后,“益宫清”组灌胃中药液,恩诺沙星组灌胃恩诺沙星,每24 h 1次,连续2次。最后1次治疗24 h后处死小鼠,检测小鼠子宫指数;采用H.E.染色观察子宫组织病理变化;采用ELISA法检测子宫组织白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等相关炎症因子质量浓度。筛选合适的栓剂基质,利用正交试验筛选最佳基质配比,制成栓剂并进行质量检查。结果表明:“益宫清”水提取物对子宫内膜炎常见致病菌有一定的抑制作用,其中对无乳链球菌的抑制效果最强,MIC为3.91 mg/mL,MBC为7.81 mg/mL,然后依次是金黄色葡萄球菌、大肠杆菌。与对照组相比,大肠杆菌组子宫指数极显著增加(P<0.01);与大肠杆菌组相比,“益宫清”组子宫指数极显著降低(P<0.01),恩诺沙星组差异不显著(P>0.05);且“益宫清”水提取物能够缓解由大肠杆菌导致的子宫组织病理性损伤。与对照组相比,大肠杆菌组子宫组织中TNF-α、IL-1β质量浓度极显著升高(P<0.01),IL-6质量浓度显著升高(P<0.05);与大肠杆菌组相比,“益宫清”组子宫组织中TNF-α、IL-1β、IL-6质量浓度极显著降低(P<0.01),恩诺沙星组子宫组织中TNF-α、IL-6质量浓度显著降低(P<0.05)。泡腾栓优选配比为PEG-60006.8 g,柠檬酸1.2 g,碳酸氢钠1.6 g,主药含量2.4 g,质量检查合格。说明“益宫清”具有一定的抑菌和抗炎效果,并成功将其制成泡腾栓剂。

沥青路面养护工程中底油洒布的工艺优化研究

在高等级沥青路面病害的处治过程中重视并保证底层黏结油的洒布质量对保证沥青路面养护质量,进而延长路面使用寿命具有重要意义。本文通过分析沥青路面的材料组成及其力学性能特征,并基于养护工程的实际需要,提出了底层黏结油洒布工艺的优化措施及相关技术参数的量化和选择原则,同时对相应工程的应用效果和发展趋势进行了分析和展望。

五育融合视域下学校课后服务课程化的实施路径

课后服务课程化是提升课后服务质量的重要举措。课后服务课程化要遵循五育并举的原则、一体化原则、多元化原则和个性化原则,从两个方面推进,首先是进行课后服务课内课外一体化的设计,其次是进行课后服务课程化的整体设计与创新实施,同时要基于信息技术提升课后服务的质量。课后服务课程化的探索实践体现了学校课后服务工作从全面普及进入了向课后服务要质量的新阶段。

规模化奶牛场节本提质增效关键技术分析

奶业是农业现代化的标志性产业和一二三产业协调发展的战略性产业,规模化奶牛场是原料奶供给的源头并直接决定了民族奶业的核心竞争力。当前我国规模化奶牛场面临“奶价下行、成本高涨、经营亏损”的困境。文章从饲料精准加工、营养精准调控、疾病精准防控、环境精准管控四个维度对规模化奶牛场达成节本增效提质目标进行分析,以期为行业发展提供参考。

吉粒芬治疗终末期肝病合并脓毒血症临床疗效及免疫学机制研究

目的观察吉粒芬(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)在终末期肝病(end-stage liver disease,ESLD)合并脓毒血症中临床疗效及预后影响。方法选取2022年1月至2023年12月ESLD合并脓毒血症患者90例,采用简单随机抽样法分成rhG-CSF组、胸腺肽针组、对照组,每组30例。比较三组间治疗前后肝功能、细胞因子水平、治疗有效率、并发症及ESLD模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分系统。结果rhG-CSF组治疗总有效率为96.67%,明显高于另外两组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,rhG-CSF组、胸腺肽组肝功能、细胞因子水平及免疫功能恢复情况均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗及随访12周后,rhG-CSF组并发症最少,病死率最低。结论rhG-CSF辅助治疗ESLD合并脓毒血症临床疗效佳,可增强抗感染能力,改善预后。

下肢助力外骨骼的能量耗散仿真及拓扑设计

随着助力外骨骼机器人结构的不断发展,运动能量耗散不断地被降低。目前,多种下肢关节的助力外骨骼机器人取得新的进展,然而对于更高能效比助力外骨骼机器人还缺乏有效的参考。提出基于肌肉能量消耗对比,优化设计下肢助力外骨骼机器人的拓扑结构以提高能效比。首先,仿真分析下肢肌肉群在运动过程中的能量耗散;同时为了消除不同质量和负重方式对肌肉群能量耗散的影响,采用无质量主动拓扑结构进行助力,研究在相同速度下对下肢各肌肉群能量耗散对比;再对比已有文献外骨骼顺应性的特点,优化设计下肢助力外骨骼机器人拓扑结构;最后,得到了一个主被动混合助力的拓扑结构的下肢助力外骨骼机器人。无质量主动拓扑仿真计算表明,提出的下肢外骨骼机器人的拓扑结构降低了12.8%的能量耗散。

乳铁蛋白辅助治疗新冠肺炎的研究进展

由新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染引起的新冠肺炎可引起咳嗽、发热、细胞因子风暴、急性呼吸窘迫综合征等症状。SARS-CoV-2不但对人类健康造成重大侵害,还严重制约了全球经济发展。SARS-CoV-2可吸附宿主细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖(Heparan sulfate proteoglycans,HSPGs)并与血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)结合,通过不断复制侵入宿主细胞,造成肺脏、肾脏和心血管等器官疾病的发生。乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是一种糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)结合蛋白,具有抗病毒、抗菌、调节免疫、缓解炎症等多种功能。研究发现,乳铁蛋白可竞争性结合HSPGs,并具有辅助治疗新冠肺炎的重要作用。通过对乳铁蛋白抑制SARS-CoV-2感染及对新冠肺炎辅助治疗相关的研究进展进行综述,为其在医学、食品领域的应用提供理论参考。

湿地昆虫采集与监测方法研究进展

昆虫在湿地生态系统中扮演着至关重要的角色,对于维持生态平衡和生物多样性的稳定起着关键性作用,因此需要重视昆虫多样性的变化,通过对不同昆虫的采集与监测来进行昆虫数量及种类的分析。旨在对湿地昆虫采集与监测所涉及到的各类方法,适用的昆虫类群以及实践应用进行综述,以期为湿地生态研究保护工作提供参考。

脂肪组织炎症对动物健康影响因素分析

脂肪过度沉积或脂肪细胞肥大可导致脂肪组织炎症,表现为脂肪代谢紊乱和慢性脂肪组织炎症,使动物生产性能降低。当动物机体发生慢性脂肪组织炎症时会产生大量巨噬细胞及miRNA,并释放各种炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)],对机体肝脏、肌肉及其他器官或组织产生不利影响,使机体负担加重,引起各种疾病,造成不必要的经济损失。文章综述了脂肪组织炎症及其发展过程、动物脂肪代谢和脂肪组织炎症相关性,论述了脂肪组织炎症对动物机体各个器官产生的不利影响,以期为提高动物福利提供新的理论参考。

黑龙江省大庆地区猫下泌尿道疾病的调查与分析

为了解黑龙江省大庆地区猫下泌尿道疾病(FLUTD)的发病规律,本调查收集大庆地区4家宠物医院在2019年1月—2020年12月期间704例有完整病史、临床检查、血液和尿液分析结果的病例,对其病因、患猫年龄、发病季节、品种、性别和去势(绝育)情况、体重、食用粮、共同居住猫数量、发病史、临床症状和血液生化检查结果进行统计分析。结果显示,引起猫FLUTD的病因主要包括猫自发性膀胱炎(FIC,n=351,49.9%)、尿石症(UC,n=227,32.2%)、细菌性膀胱炎(BC,n=70,9.9%)、尿道阻塞(UO,n=52,7.4%)和膀胱肿瘤(BT,n=4,0.6%);1~6岁猫多发(n=649,92.2%);春季和冬季(发病率分别为43.6%和22.7%)是高发季节;短毛猫易发(n=606,86.1%);公猫发病率(n=478,67.9%)明显高于母猫(n=226,32.1%),尤其是去势公猫(n=265,37.6%);各诊断结果组间体重差异不显著(P>0.05);食用干粮猫的患病率(n=393,55.8%)高于食用湿粮的猫(n=160,22.7%)和干湿混合粮的猫(n=151,21.5%);饲养单猫占比较高(n=438,62.2%);FIC、UC和UO患猫复发率较高;FLUTD患猫临床表现出尿频、尿闭和血尿症状较明显,其中UO和BT患猫的尿闭症状较明显。本调查704例FLUTD患猫中,313例患猫(44.5%)发生了急性肾损伤(AKI),BT、UC和UO患猫发生AKI的占比较高(分别为100%、75.3%和67.3%),共占调查样本总体AKI数量的67.1%(210/313)。结果表明,大庆地区FLUTD的主要原因是FIC和UC,但年龄、季节、品种、性别、去势(绝育)情况、体重、食用粮、共同居住猫数量、发病史、临床症状和血液生化检查结果也对该病的发生有影响,梗阻性因素(BT、UO和UC)是猫发生AKI的风险因素。

面向复杂产品结构优化设计的标准伴随技术研究

本文重点分析了复杂产品结构优化设计业务涉及到的相关标准分布情况。为保证在结构优化时标准中的条款规则能够直接指导结构优化业务活动,对标准本身开展结构化制作,并推送到个人工作台中进行应用。避免了开展结构优化设计不易找到标准中具体对应条款的现象,提高结构设计业务效率,提升了标准的管理水平。

基于DRG对肝胆胰疾病医院感染的疾病负担评价

目的旨在利用疾病诊断相关组(diagnosis-related groups,DRG)评估肝胆胰疾病医院感染负担,并探讨针对肝胆胰疾病患者的医院感染防控方案。方法采用回顾性分析,笔者医院2023年1至9月全部出院患者的DRG和医院感染相关资料进行比较分析。评估发生医院感染患者与未发生医院感染患者的平均住院天数及费用,分析医院感染患者的疾病负担。结果研究纳入出院患者共10306例,主要分布于肝、胆、胰疾病及功能障碍组,其中发生医院感染的病例达32例,占全部医院感染患者的27.6%。医院感染明显增加了肝胆胰疾病患者的住院时间和费用,尤以药品和耗材费用增幅显著。医院感染病例主要集中在HS11、HS21、HS233个编码组中,且呼吸系统是医院感染的高发部位之一。结论医院感染显著加重了肝胆胰疾病患者的疾病负担。针对呼吸系统加强院内感染的防控措施,有助于降低该病患者发生医院感染的风险。

乙型肝炎病毒感染患者HBV pgRNA变化及其影响因素分析

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染导致的慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)是一个全球重大公共卫生问题^([1])。HBV感染患者发生肝纤维化、肝硬化和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的风险大大增加^([2])。肝细胞中的HBV共价环状闭合DNA (covalently closed circular DNA,cccDNA)作为HBVRNA编码的最重要模板,不仅是病毒复制的开始,也是持续感染和复发的关键因素。目前的治疗方法对cccDNA的影响较小,且cccDNA的长期存在是HBV难以被治愈的重要原因^([3])。

硒中毒雏鸭血清和组织中NO含量及NOS活性的研究

为了探讨硒中毒的毒理机制 ,选择健康雏鸭作实验动物 ,通过饲料中添加 8mg·kg-1的硒 ,复制雏鸭硒中毒模型 ,应用硝酸还原酶法测定血清和组织中NO含量及NOS活性的动态变化。试验结果表明 ,与对照组相比 ,中毒组雏鸭血清和组织中NO含量及NOS活性均显著升高 (P <0 .0 5 ) ,且有时间—效应关系。从而提示硒中毒可诱导NOS活性增强 ,致使机体内NO含量升高 ,机体内源性NO水平过高 ,则产生细胞毒性作用 ,进而对机体的物质和能量代谢及组织细胞的结构和功能产生一系列的损伤。这可能是硒中毒的毒理机制之一。

荷斯坦奶牛酮病对抗氧化系统影响的研究

为了探讨酮病对抗氧化系统的影响 ,以荷斯坦奶牛为实验动物 ,应用酮粉法和改良式水杨醛比色法随机检测结果 ,一组为 1 0头阳性牛 ,另一组为 1 0头对照牛。应用DTNB显色法测定血清中GSH Px活力 ,应用黄嘌呤氧化法测定血清中T SOD活力 ,应用硫代巴比妥酸法测定血清中MDA含量。结果表明 ,酮病奶牛血清中GSH Px活力极显著降低 (P <0 .0 1 )、T SOD活力显著降低 (P<0 .0 5) ,血清中MDA含量显著增高 (P <0 .0 5)。因此酮病影响奶牛抗氧化系统 。

硒对汞致抗氧化系统损伤的拮抗作用

选用健康雏鸡 2 5 0只作实验动物 (对照组、中毒组、3个水平的硒保护组 ) ,研究汞对血液、组织中 GSH-Px活性和 L PO含量的影响以及硒与汞之间的相互作用效应。实验结果表明 :汞可显著降低血清、组织中 GSH- Px活性 (P<0 .0 1) ,引起动物组织器官脂质过氧化 ,致使血清、组织中 L PO含量显著增高 (P<0 .0 1) ,且有时间 -效应关系。从而说明汞能降低机体的抗氧化功能 ,损伤抗氧化系统 ;

防治奶牛乳房炎中药乳膏剂的研制与质量鉴定

研究氮酮在中药乳膏剂中的最适添加量,测定中药乳膏剂的稳定性及安全性,为临床提供安全有效药物奠定试验基础。应用色谱法对不同氮酮添加量乳膏剂中咖啡酸体外透皮量进行测定,通过稳定性试验、安全性试验对乳膏剂质量进行测定。中药乳膏剂中咖啡酸的透皮量未随着氮酮量的增加而增加,经最小二乘法拟合发现其最适添加量为4.33%;通过稳定性试验(离心试验、耐寒耐热试验与加速试验)未见中药乳膏出现分层破乳、霉败以及色泽、均匀性改变等现象;通过安全性试验(皮肤刺激性试验和过敏性试验)未见豚鼠出现红斑、水肿等皮肤过敏现象。中药乳膏剂中透皮剂氮酮的添加量为4.33%;此中药乳膏剂具较高的稳定性及安全性,为理想的防治乳房炎外用制剂。