咪鲜胺、氟环唑及其混配对水稻纹枯病室内毒力及田间防效

为筛选出对水稻纹枯病高效的新配方药剂及剂量,以咪鲜胺和氟环唑混配进行室内抑菌活性、持效期和田间药效测定。采用孙云沛法进行室内联合毒力测定,结果表明,供试的5种混配组合对水稻纹枯病菌的联合毒力均表现为增效,综合联合毒力、成本和持效期等因素,选择30%咪鲜胺·氟环唑微乳剂(2∶1)为最佳田间应用配比。田间药效试验亦表明,30%咪鲜胺·氟环唑微乳剂(20%+10%)158~180g/hm2的用量对水稻纹枯病有较好的防治效果。

CRF单克隆抗体和多克隆抗体制备及其在睡眠剥夺模型大鼠脑内的变化

目的:制备并鉴定促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)的单克隆抗体(mAb)和多克隆抗体(pAb),并研究其在睡眠剥夺模型大鼠脑内的变化。方法:用CRF分别与牛血清白蛋白(BSA)和牛甲状腺球蛋白(BTG)交联,制成免疫原和检测用的包被抗原。将BSACRF分别免疫新西兰大白兔和雌性BALB/c小鼠,制备其mAb和pAb,经ELISA和免疫细胞化学染色等方法进行鉴定,并用所获抗体观察CRF在正常成年大鼠睡眠剥夺48h后脑内的变化。结果:所获得的CRFpAb和9株mAb具有较高的效价、特异性及亲和力。其中,pAb和2株mAb(1D10,2F4)可用于免疫组织化学染色。睡眠剥夺48h后下丘脑室旁核、杏仁核中央亚核、终纹状核卵圆亚核等核团高表达CRF样阳性产物,而对照组相关核团内则极少或未出现。结论:①成功地获得可用于免疫组化染色的CRFmAb和pAb。②提示CRF在中枢神经系统对睡眠剥夺造成的应激反应的调节过程中具有重要的意义。下丘脑室旁核、杏仁中央核和终纹床核是脑内相关调节环路的一部分。

GAP-43原核表达载体的构建、表达及抗GAP-43单克隆抗体的制备

目的 :原核表达神经生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3) ,并制备抗GAP 4 3的单克隆抗体 (mAb)。方法 :从含有GAP 4 3cDNA的质粒中 ,用PCR扩增GAP 4 3cDNA的全长编码序列 ,克隆入表达载体pGEX 4T 1中 ,构建GAP 4 3的高表达工程菌 ,并以IPTG诱导表达目的蛋白。通过亲和层析法纯化表达的GST GAP 4 3融合蛋白 ,并以此为抗原制备mAb。结果 :酶切鉴定证明 ,获得含有目的基因片段的重组质粒。表达的GST GAP 4 3融合蛋白以可溶性的形式存在。ELISA检测表明 ,获得的抗GAP 4 3mAb效价为 1∶10 8,其IgG的亚类为IgG2a,亚型为κ型。用Westernblot检测大鼠脑匀浆蛋白 ,在相对分子质量(Mr)为 5 0 0 0 0处有一条特异性带。用此mAb进行荧光免疫法检测表明 ,在致敏豚鼠的肺切片中 ,有GAP 4 3阳性的神经纤维。结论 :所获抗GAP 4 3mAb的特异性强、效价高 ,对进一步研究GAP 4 3在神经系统中的作用提供了有用的试剂。

浅谈高职教育工学结合、能力本位的课程开发

课程建设与改革是提高教学质量的核心,目前高职教育的课程改革与开发如火如荼,已成为当前高职教育教学改革的热点、焦点、难点和重点。从课程开发的必要性、相关概念及内涵以及开发中注意的问题几个方面探讨了工学结合、能力本位的课程开发问题。

当前职业教育发展中存在的若干问题及对策

当前,我国职业教育迎来了春天,但由于历史和现实多方面的原因,职业教育仍面临诸多问题。我们应该紧密结合职业教育“十一五”规划,突破瓶颈。要对当前职业教育发展的基本情况有清醒的认识,要对当前职业教育的主要问题及根源有明确的了解,要对职业教育的出路有深入的思考。

加强区域战略性新兴产业人才队伍建设的思考——以湖南省为例

战略性新兴产业是经济绿色转型的关键,其关键是科技进步和人才支撑。要实现经济发展的预期目标,湖南省必须通过实施区域人才开发战略,包括进行人才培养,制定人才吸引政策和保障措施、营造内部人才发展空间等,建设一支强有力的人才队伍。

校企合作开发课程中存在的问题及对策

校企合作开发课程是高职教育教学改革的必然选择,但存在着政策上缺乏支持、个体上缺乏主动意识、质量上难以达到预期目标等问题。要促进校企合作开发课程,需从高职院校、企业、课程专家和政府四个方面采取相应措施。

高等职业教育课程教学改革问题探讨

教学改革是高等职业教育课程改革系统工程中的重要组成部分,其中,尤为重要的是要让教师拥有科学的教学理念,创新教学模式,掌握有效的教学策略和技术,积极实施课程教学改革,从而实现高素质技能型人才的培养目标。

对“转型期”高职院校内部管理运行机制的思考

当前,我国高职教育发展处于市场化和大众化的背景之下,高职院校内部管理运行机制发生了根本性变化。高职院校必须实行以市场为导向的现代管理体制,构建科学的内部管理运行机制。

浅谈高职院校决策机制建立的必要性和原则

随着高职教育的快速发展,加强高职院校内部管理,尤其是决策机制的建立,对高职院校生存与发展起着极为关键的作用。分析高职院校决策机制建立的必要性及必须遵循的原则,来促进决策活动沿着正确的途径进行,从而形成科学的决策机制。

湖南省高职院校学生“入口”问题及其对策思考

高职生源的减少是即将摆在各高职院校面前不可回避的问题,目前已经有一些高职院校在学生的"入口"上出现了难题,文章针对该问题以湖南省为例提出应对措施,旨在促进高职教育的健康稳定发展。

亚洲玉米螟越冬幼虫主要寄生性天敌及病原菌致死率的考察

对我国主要玉米产区亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis越冬代幼虫天敌和病原菌的寄生情况进行了调查。通过2年秋季采集14个省,20个点共计14984头玉米螟越冬幼虫,在室内(26±1)℃,RH(70%±10%),光周期16L:8D的环境中饲养。明确了主要病原菌苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis和白僵菌Beauveria bassiana及主要寄生性天敌昆虫腰带长体茧蜂Macrocentrus cingulum、玉米螟厉寄蝇Lydella grisescens和大螟钝唇姬蜂Eriborus terebranus在各地的寄生率。各地越冬幼虫平均感染苏云金芽孢杆菌死亡率为36.2%,感染白僵菌死亡率为14.4%。苏云金芽孢杆菌和白僵菌的感染率在东北春玉米区年度间有波动,而在夏玉米及其它玉米产区,苏云金芽孢杆菌的感染率显著高于白僵菌。腰带长体茧蜂和玉米螟厉寄蝇在各地普遍分布,为优势寄生性天敌昆虫,寄生致死率分别为7.0%和5.1%。大螟钝唇姬蜂仅在北方春玉米区的海伦、沈阳、应县和夏玉米区的保定等少数地区发生,且寄生率<1.0%。与天敌昆虫寄生死亡率相比,感染病原菌的死亡率显著较高,但年度间波动较大。由此可知,苏云金芽孢杆菌和白僵菌是玉米主产区亚洲玉米螟越冬幼虫的主要致死因子,且具有波动性;腰带长体茧蜂和玉米螟厉寄蝇是相对稳定的致死因子,大螟钝唇姬蜂具有区域特异性。

大鼠侧脑室置管方法的改良

国际上公认的实验动物脑室内给药方法是先在侧脑室内埋置固定于颅顶的套管,5～10 d后待动物从埋管过程造成的应激反应恢复后再经内管给药,这可以去除插管过程造成的应激对实验结果的干扰.但目前此种方法所用的管道系统多依赖进口,价格昂贵,且为一次性使用,其代价是很多国内实验室难以承受的.故国内神经生物学实验中动物脑室内给药的方法多为在颅骨钻孔后以微量注射器或玻璃微电极直接插入脑室内即刻给药,这种方法显然是有缺陷的.为克服这一问题,我们研究出了重复使用进口管道系统的方法,自行设计了置管时将管道固定在立体定向仪上的装置以取代国外公司昂贵的相关产品并可适用于国产定向仪.实验结果证实了这种方法是可行的.本文对这一实验方法的改造进行了详细的描述.

IgG刺激诱发的小胶质细胞Toll样受体4表达及细胞因子分泌

目的:了解在体外培养条件下免疫球蛋白G(IgG)刺激对小胶质细胞表达Toll样受体4(TLR4)和分泌细胞因子的作用。方法:用不同浓度的IgG(2mg/L、20mg/L、200mg/L)及脂多糖(LPS)(10mg/L)刺激原代培养的大鼠小胶质细胞,24h后以免疫荧光染色观察TLR4的表达,ELISA法检测培养上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的含量。结果:IgG直接作用于体外培养的小胶质细胞后,以剂量依赖的方式引起TLR4的表达和TNF-α的分泌,但未检测到IFN-γ含量的变化。作为阳性对照的LPS引起了小胶质细胞TLR4表达,并诱导了TNF-α及少量IFN-γ的分泌。结论:同种IgG刺激可使体外培养的小胶质细胞大量表达TLR4,可能通过MyD88依赖途径导致炎性细胞因子分泌。结果提示至少在中枢神经系统的固有免疫反应中,TLR4可能发挥识别病原体之外的蛋白分子,例如IgG的作用。

浅层巩膜静脉烧烙法诱发大鼠慢性高眼压的研究

目的 :证明大鼠基础眼压的昼夜节律并建立稳定的大鼠慢性高眼压模型 .方法 :健康雌性SD大鼠 4 0只 ,建立模型前早晚各测眼压一次 ,连续测量 1wk ,之后将 4 0只大鼠完全随机分为对照组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、模型Ⅲ组 ,每组 1 0只 .对照组只打开球结膜 ,巩膜静脉不做处理 ;模型Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅲ组分别烧烙 1 ,2 ,3条浅层巩膜静脉 ,术后即刻、术后 30min ,1h ,1 2h ,1d ,1wk ,4wk ,8wk分别测量各组眼压 ,并于术后观察术眼的局部表现 .大鼠眼压用TONO PEN测量 .结果 :大鼠白天正常眼压界于 1 .0 6kPa～ 1 .99kPa之间 ,平均眼压值为 (1 .4 6± 0 .2 5 )kPa ;夜间正常眼压界于 1 .73kPa～ 2 .6 6kPa之间 ,平均眼压值为 (1 .86± 0 .2 3)kPa .大鼠夜间平均眼压高于白天 (P >0 .0 1 ) .术后 8wk对照组平均眼压值为 (1 .6 8± 0 .2 5 )kPa ,模型Ⅰ组平均眼压值为 (1 .6 5±0 .2 6 )kPa ,模型Ⅱ组平均眼压值为 (4 .0 4± 0 .2 1 )kPa,模型Ⅲ组平均眼压值为 (4 .1 2± 0 .1 9)kPa .术后 8wk各组平均眼压值 ,对照组与模型Ⅰ组间以及模型Ⅱ组与模型Ⅲ组间平均眼压值没有差别 (P >0 .0 5 ) ,前两组与后两组分别进行比较 ,平均眼压值差别显著 (P >0 .0 1 ) .模型Ⅲ组术后有 3只眼出现角膜大泡、热伤性白内障等并发症 .结论 :

电针“足三里”对大鼠脊髓背角内ERK1/2磷酸化水平的影响

目的:探讨针刺镇痛机理。方法:将动物随机分为5组:正常对照组、单纯电针组、福尔马林组、福尔马林加同侧电针组和福尔马林加对侧电针组。造模方式为大鼠右足后垫皮下注射4%福尔马林溶液100μL。电针刺激“足三里”穴,疏密波,频率2～15Hz,强度2～3mA,持续30min。1.5h后麻醉处死动物,制片观察。结果:正常对照组脊髓后角浅层仅见个别腰段脊髓磷酸化ERK1/2(pERK1/2)阳性细胞(6.45±1.05)个;单纯电针组在电针同侧的脊髓背角有少量阳性细胞出现(14.07±3.19)个;福尔马林模型组的同侧脊髓背侧角浅层有大量阳性细胞被激活(26.57±4.93)个,主要分布于Ⅰ和Ⅱ0层;模型加同侧电针治疗组阳性细胞数(20.79±5.21)个与福尔马林模型组比较有减少的趋势,但统计学差异无显著意义;模型加对侧电针治疗组的炎症侧脊髓背角的阳性细胞数(14.75±3.03)个较福尔马林模型组显著减少(P<0.05)。结论:电针抑制脊髓后角ERK1/2信号分子的磷酸化,可能与其镇痛效应的发生机制有关。

磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶1/2在正常小鼠脑内的免疫细胞化学定位

细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)1/2是重要的信号转导分子。现已知在正常动物的中枢神经系统内有其活化形式即磷酸化的ERK1/2(pERK1/2)分子的存在,但其在小鼠脑内的分布目前还没有全面的观察。本研究用免疫组织化学技术(ABC法)研究了pERK1/2样免疫反应阳性产物在脱臼处死的正常小鼠全脑内的分布。结果发现pERK1/2在正常小鼠脑内有广泛的表达,阳性产物主要存在于神经元,亦见于个别白质内的胶质细胞,脑膜及室管膜细胞也有表达。强阳性表达的核团主要有:岛皮质、视听皮质、边缘前皮质、扣带前皮质、海马垂直部、弓状核、蓝斑和小脑Purkinje细胞;中等阳性表达的核团主要有:感觉运动皮质、外侧隔区、内侧杏仁核、皮质杏仁核和外侧杏仁核、丘脑室旁核前部、视交叉上核、穹隆下器、终板血管器、前腹侧视前核和下丘脑背内侧核;弱阳性表达的核团主要有:视上核、下丘脑室旁核大细胞部、下丘脑后区、顶盖前区、室周灰质腹外侧柱、A5区、孤束核和延髓腹外侧网状结构等。本文结果观察到pERK1/2在正常小鼠脑内广泛存在,提示pERK1/2作为重要的信号转导分子,可能参与许多脑区在正常状态下的功能活动,揭示其分布特点为了解其在脑内的多样性功能提供了形态学依据。

白细胞介素-1β及其Ⅰ型受体mRNA在大鼠颈动脉体中的表达

目的研究白细胞介素-1β(IL-1β)及其Ⅰ型受体(IL-1RI)mRNA在大鼠颈动脉体中的表达。方法原位分子杂交、免疫荧光双重染色和Western blotting。结果原位分子杂交结果显示,IL-1RI mRNA阳性信号出现在颈动脉体球细胞中;免疫荧光双重染色结果显示,IL-1β表达在颈动脉体球细胞中;Western blotting结果进一步证明,IL-1β阳性反应条带出现在18 kD处,与其分子量一致。结论大鼠颈动脉体球细胞不仅表达IL-1RI,而且也表达其配体IL-1β。

雌激素对去卵巢大鼠中缝核簇5-羟色胺能神经元的影响

目的:通过观察雌二醇对去卵巢大鼠中缝核簇5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)免疫阳性物质表达的影响,探讨围绝经期潮热发病机制。方法:实验于2003-09/2004-01在解放军第四军医大学神经生物研究所形态学实验室完成。成年雌性SD大鼠18只,解放军第四军医大学实验动物中心提供,体质量200～250g。清洁级动物,许可证号为SCXK(军)2002-005。采用酶联免疫吸附试验测定血清激素水平,用免疫组织化学方法和图像分析技术观察大鼠中缝核簇5-HT样阳性物质的表达。结果:5-HT样阳性反应产物在大鼠中缝背核、中缝正中核表达较多,去卵巢组大鼠中缝背核、中缝正中核5-HT样阳性细胞数(82.5±17.7)及吸光度(5.12±0.46)都低于假去势组(164.1±15.4,5.90±0.51)(P<0.05),去卵巢雌激素组大鼠中缝背核、中缝正中核5-HT样阳性神经元(149.5±13.4)及吸光度(5.80±0.41)都与假去势组类似,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:雌激素可改变大鼠中缝背核、中缝正中核5-HT样阳性物质表达,从而影响其神经元的功能,导致绝经期潮热发生。

Ets-1和VEGF在实验性糖尿病视网膜中的共表达(英文)

目的:阐明VEGF和Ets-1在糖尿病大鼠视网膜内的表达特点和分布特点。方法:腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠模型。STZ注射后4wk处死动物,分离各组视网膜总蛋白进行Western blot分析。将眼球固定后制成14μm厚的冰冻切片进行Ets-1和VEGF免疫荧光双标检测。结果:Ets-1和VEGF在糖尿病大鼠视网膜内表达均显著增强,而且Ets-1和VEGF在视网膜内的分布特点相似,几乎在视网膜各层均共表达。结论:Ets-1可能对VEGF诱导的糖尿病视网膜病变有促进作用。