2006～2010年武汉同济医院呼吸道苛养菌的耐药性分析

目的了解2006～2010年武汉同济医院呼吸道标本中苛养菌的分离情况及耐药性,为临床合理用药提供依据。方法对2006年～2010年呼吸道标本分离的肺炎链球菌、流感嗜血杆菌以及卡他布兰汉菌,用Kirbry-Bauer法进行药敏试验,E-test法检测肺炎链球菌对青霉素的敏感性。以头孢硝噻吩纸片测定β-内酰胺酶。结果共收集到肺炎链球菌503株,流感嗜血杆菌658株以及卡他布兰汉菌142株。5年总的青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)为22.5%(113/503),其中青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)为4.7%。肺炎链球菌对克林霉素及红霉素高度耐药,尤其是儿童分离株敏感性不足10%;但对莫西沙星及左氧氟沙星敏感性良好,达90%以上,未出现耐万古霉素肺炎链球菌。流感嗜血杆菌对复方磺胺甲噁唑的敏感率最低,仅40.6%;对氨苄西林的敏感性也只有60%左右。但对头孢呋新、头孢噻肟、阿奇霉素、环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性均在85%以上。卡他布兰汉菌产β-内酰胺酶率高达98.6%。以上苛养菌对各种抗菌药物敏感性均呈逐年下降趋势。结论大多数抗菌药物对呼吸道苛养菌仍然保持较好的抗菌活性,但青霉素类抗菌药物对上述3种细菌不敏感率已超过30%,尤其是卡他布兰汉菌。应加强细菌耐药性监测并根据药敏结果合理选用抗菌药物进行治疗。

微粒子化学发光法检测抗环瓜氨酸肽抗体诊断试剂的诊断效能评价

目的评价1种新的微粒子化学发光法(CMIA)抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)试剂的诊断性能。方法用雅培AR-CHITECT CMIA法抗CCP抗体试剂检测554例样本的抗CCP抗体,评价其诊断性能。结果 450例类风湿性关节炎(RA)患者中397例抗CCP抗体阳性,诊断灵敏度为88.2%。104例对照样本中12例抗CCP抗体阳性,诊断特异度为88.5%。类风湿因子(RF)和抗角蛋白抗体(AKA)对RA的诊断灵敏度分别为80.2%(361/450)和60.3%(210/348),特异度分别为56.7%(59/104)和96.9%(94/97)。抗CCP抗体含量大于19.3U/mL时,诊断RA的灵敏度和特异度分别为77.1%和95.3%。结论 CMIA法抗CCP抗体对RA的诊断性能优于RF和AKA。抗CCP抗体含量较高时,对RA的诊断特异度更高。

采用ELISA差减分析法探讨武汉地区中老年患者IEM HBsAg的携带状态

目的探讨武汉地区中老年患者血清免疫逃逸变异表面抗原(IEM HBsAg)携带状态。方法以2种不同抗HBsmAb包被,采用酶联免疫吸附法(ELISA)对1641例中老年既往HBV感染者的血清标本进行检测,并以中和实验及广谱IEMHBsAg试剂对单一阳性者血清HBsAg检测的特异度进行验证。结果所建立的G6-ELISA与E2-ELISA具有大致相同的稳定性、特异度与灵敏度,对该组血清检测的阳性率分别为29.37%、29.01%。6例G6-ELISA单一阳性血清中,抗HBs、抗HBe、抗HBc、HBeAg及HBV DNA阳性例数分别为3、1、6、1、2例,抗HBs中和实验阳性率为100.00%,平均中和率81.14%。雅培化学发光试剂复核此6例均为阳性结果。结论结合文献与该课题组既往研究分析,该组中老年患者中存在少量呈优势表达的IEMHBV感染者。

IBT和CLIFT法检测抗dsDNA抗体的效用评估及流程的优化

目的分析免疫印迹法（IBT)和绿蝇短膜虫间接免疫荧光法（CLIFT)在抗dsDNA抗体检测中应用，评估检验效能，优化系统性红斑狼疮（SLE)的临床诊断流程。方法选取2016年4月至2016年12月住院患者361例，分为SLE组（A组）、非SLE自身免疫病组（B组）、非自身免疫病组（C组），并选取50例健康体检者作为健康体检组（D组），采用IBT和CLIFT法分别检测抗dsDNA抗体的着色值和滴度，同时采用间接免疫荧光检测抗核抗体均质型（ANA)滴度。按IBT?法（着色值6-11判为阳性）和IBT②法（着色值6-11判为阳性）进行判读。结果灵敏度IBT?>CLIFT>IBT?,特异度CLIFT>IBT?>IBT?,阴性预测值CLIFT>IBT?>IBT?,阳性预测值CLIFT>IBT?>IBT?;在SLE中CLIFT法具有更好的诊断效能；A组、C组和D组中IBT法着色值和CLIFT法滴度具有相关性，而在B组中无相关；IBT法与ANA—致性较差，而CLIFT法与ANA具有较好的一致性。结论IBT①法更适合抗dsDNA抗体的筛查；CLIFT法对SLE的诊断效能明显优于IBT法；SLE中可以根据IBT法着色值大小去推测CLIFT法滴度的可能高低，但IBT法不能直接用于疾病诊断效用的评估和疾病活动的观察。

微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体的对比分析与研究

目的比较微柱凝集和聚凝胺法的灵敏度和重复性,为不规则抗体的检测更新方法。方法使用微柱凝集和聚凝胺法检测不规则抗体,对比观察2种方法检出的阴、阳性结果和重复检验的准确性,从而选择灵敏度高和重复性好的方法满足临床输血需要。结果从18 000例住院患者中用微柱凝集筛选出不规则抗体阳性19例,阳性率为0.105%,其中D抗体7例,E抗体5例,C抗体3例,Ec抗体3例,Ce抗体1例;用聚凝胺法检测不规则抗体,仅有阳性为2例,阳性率为0.011%,2种方法比较差异有统计学意义(P<0.05);重复性检验:微柱凝集(19/19)和聚凝胺(2/2)均为100%,2种方法差异无统计学意义(P>0.05)。结论用微柱凝集检测不规则抗体能显著提高抗体的检出率,可避免漏检而降低输血反应的发生率。

5种结核杆菌抗体检测试剂对肺结核的诊断效能评价

目的评价5种结核抗体检测试剂盒在肺结核诊断中的诊断效能。方法采用酶联免疫吸附法和胶体金法以上海奥普(奥普)、天津中新科炬(中炬)、杭州艾康(艾康)、韩国SD(SD)和北京万泰(万泰)5种不同试剂检测97例肺结核患者、62例非肺结核患者和100例健康人血清中的结核抗体。结果奥普、中炬、艾康、SD、万泰5种试剂盒的灵敏度分别为78.4%、78.4%、90.7%、69.1%和67.0%;特异度为88.9%、71.0%、80.2%、99.4%和95.1%;阳性预测值分别为80.9%、61.8%、73.3%、98.5%和89.0%;阴性预测值分别为87.3%、84.6%、93.5%、84.3%和82.8%;临床诊断符合率分别为84.9%、73.7%、84.2%、88.0%和84.6%;ROC曲线下面积分别为0.833、0.731、0.844、0.851和0.821。结论奥普、艾康、SD和万泰的诊断效能类似,均优于中炬。

ELISA法检测乙肝标志物影响因素的探讨

目的 探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙肝血清标志物的影响因素。方法 用ELISA法检测5项乙肝血清标志物，对影响检测结果的几个重要因素进行统计分析。结果 5项乙肝标志物的孔间差变异系数（CV）为5％～25％，常规质控CV为18％～65％，阳性／阴性对照CV为4％～31%。用ELISA法和微粒子酶免分析（MEIA）法分别检测抗HBc，其结果有极显著性差异（p＜0.01）。在HBBAg、抗HBe检测中周围孔和中央孔吸光度（A）值比较，P＜0．01和P〈0．05。终止反应后随比色时间的延长A值逐渐下降，并且HBeAg浓度越高其A值下降越快。不同稀释方法检测抗HPc，各组间A值比较差异有统计学意义。随样品与加入酶结合物间隔时间的延长，假阳性率逐渐增加。结论 ELISA检测结果的可靠性主要受试剂质量（尤其是抗HBe、抗HBc）和检测过程中操作误差的影响；质控物浓度的高低可以影响常规质控CV的大小。

健康成年人和儿童外周血淋巴细胞亚群参考区间的建立

目的建立健康成年人和儿童外周血淋巴细胞亚群百分率参考区间。方法使用荧光抗体,分别对100例不同年龄、性别的健康成年人和100例健康儿童外周血淋巴细胞亚群进行标记,采用美国BD公司的FACSCalibur型流式细胞仪进行检测并分析结果,使用SPSS17.0进行统计学处理。结果 1~5岁健康儿童总调节性T淋巴细胞(总Treg)、天然调节性T淋巴细胞(天然Treg)、诱导调节性T淋巴细胞(诱导Treg)、活化总T淋巴细胞(活化总T)、活化杀伤性T淋巴细胞(活化Ts)、纯真辅助性T淋巴细胞(纯真Th)、记忆辅助性T淋巴细胞(记忆Th)、CD8+CD28+/CD8+、CD4+CD28+/CD4+、B1淋巴细胞(B1)、转化B淋巴细胞(转化B)的95%参考范围分别为(3.41±0.81)%、(1.59±0.48)%、(1.80±0.47)%、(8.05±3.61)%、(13.81±6.86)%、(70.19±6.35)%、(29.90±6.36)%、(76.48±11.45)%、90.90%~100.00%、(10.05±3.76)%、(3.59±1.70)%。对18~65岁健康成年人分别按年龄性别制订了相应的参考范围。结论在相同地域,相同种族,可以建立健康成年人和儿童外周血淋巴细胞亚群的正常参考区间。

湖北省某三甲医院呼吸内科护理风险管理效果分析

目的:探讨湖北省某三甲医院呼吸内科运用风险管理措施改进护理工作质量并实现安全护理,增强护理人员风险防范意识和抗风险能力,提高病人满意度。方法:对2010年1月-2013年12月湖北省某三甲医院呼吸内科护理风险数据进行描述性统计,并将2012年1月前后的数据进行t检验对比分析,得出实施护理风险管理前后的护理工作改进情况。结果:呼吸内科护理风险事件发生率逐年减少,护理风险事件多集中在技术操作和非技术操作两方面,病房护理工作质量在实施护理风险管理后显著提高,护理不良事件有持续下降的趋势。结论:持续加强风险管理有助于不断改进护理工作质量,增强护理人员辨识风险、控制风险的能力,减少病房护理不良事件的发生,完善管理制度和建立标准流程。

雅培i4000化学发光分析仪肝炎标志物分析性能评价

目的评价美国雅培i4000化学发光微粒子免疫分析仪(CMIA分析仪,简称i4000分析仪)对肝炎血清标志物的分析性能。方法使用i4000分析仪进行HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV检测,根据美国临床和实验室标准化协会颁布的EP系列文件对仪器分析性能进行评价。结果 i4000分析仪模块一及模块二检测上述6个项目的批内及批间不精密度(CV%)均符合厂商要求;模块一检测HBsAg的线性范围为0.04～286.18IU/mL(r2=0.9662),模块二线性范围为0.04～259.3IU/mL(r2=0.9768);模块一检测HBsAb线性范围为0.18～1016.39mIU/mL(r2=0.9857),模块二线性范围为0.28～1055.67mIU/mL(r2=0.9870)。HBeAb检测临界值标本稀释度为1:59.65,(临界值±20%)标本阳性、阴性结果出现频率均大于0.95。雅培i2000分析仪与i4000分析仪模块一、二HBsAg检测结果r2值分别为0.9910、0.9961,HBsAb检测结果r2值分别为0.9835、0.9891。ELISA与CMIA检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV结果符合率为100%。HBeAg、HBeAb、HBcAb及抗HCV检测下限分别为0.33、3.6、0.95、0.7NCU/mL。结论 i4000分析仪检测肝炎血清标志物的精密度、线性范围、临界值重复性、比对结果、检测下限均达到要求,能满足临床需求。

我国“十四五”期间医疗救治体系现代化与临床科室建设主要内容与思考

在“十四五”期间,居民面临的健康风险因素愈发增多,各层次的健康需求将会不断增加,疾病谱发生变化,新发传染病频发、多发,对现代医疗救治体系与重点临床科室提出了新的更高要求。作者围绕医疗救治体系构建和相关临床医学学科建设两大重点内容,就健全完善“十四五”期间国家公共卫生安全管理与医疗救治体系建设重点领域与相关路径进行了探索与思考。

系统性硬化症患者血清IL-33的表达及与TGF-β的相关性

目的探讨白介素33(IL-33)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(s ST2)及转录生长因子1(TGF-β1)在系统性硬化症患者中的表达及其相关性。方法应用ELISA检测25例系统性硬化症患者、25例体检健康者血清中IL-33、s ST2以及TGF-β1的表达,采用免疫组织化学技术检测IL-33在系统性硬化症患者皮损和正常皮肤组织中的表达差异。结果与健康人对照组相比,系统性硬化症患者血清中IL-33及TGF-β1的表达水平显著升高(P<0.05),且系统性硬化症患者中IL-33浓度与TGF-β1的表达水平呈正相关(P<0.05);免疫组织化学结果提示IL-33在系统性硬化症患者的皮损组织中表达增多;而s ST2的表达水平在系统性硬化症患者及健康人对照组中差异无统计学意义。结论系统性硬化症患者外周血IL-33浓度升高,与TGF-β1的表达相关,提示IL-33可能通过TGF-β1的调控,在炎症和纤维化过程中发挥重要作用。

伴肺纤维化的MPO阳性ANCA相关性血管炎的临床研究

目的探讨伴随肺纤维化的髓过氧化物酶(MPO)阳性抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎患者临床特征及实验室指标间的相关性。方法将33例MPO阳性ANCA相关性血管炎患者分为伴肺纤维化改变的A组和不伴肺纤维化改变的B组,并以14例结缔组织病相关肺间质纤维化患者作为疾病对照组,12例健康体检者作为健康对照组。分析上述患者的临床资料及实验室指标。结果 B组患者血肌酐水平与疾病对照组及健康对照组相比均显著升高,A组患者血肌酐水平与疾病对照组及健康对照组相比具有一定程度升高,但差异无统计学意义;A组、B组以及疾病对照组患者血纤维蛋白原(FIB)、D二聚体(D-D)、超敏C反应蛋白(hsCRP)的水平均较健康对照组显著升高(均P<0.05),且在A组中,MPO的表达水平与FIB值呈正相关(r=0.64,P<0.05)。结论在肺纤维化疾病中,早期监测ANCA对于ANCA相关性血管炎的诊断具有一定临床价值,且ANCA靶抗原MPO水平在反映血栓形成风险中具有一定临床意义。

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎患者血清RF水平检测与BVAS相关性分析

目的检测抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎(AAV)患者血清中类风湿因子(RF)的表达,并讨论RF与2003版伯明翰血管炎活动性评分(BVAS2003)量表的相关性。方法收集华中科技大学同济医学院附属同济医院2017年3~9月确诊的76例AAV患者,全部研究对象于空腹抽取静脉血,应用酶联免疫吸附试验测定血清中IgM-RF,IgG-RF和IgA-RF的水平,同时采用免疫比浊法分析C反应蛋白(CRP)的浓度,利用BVAS2003量表对所有AAV患者进行评分。结果 36.8%的AAV患者血清中IgG-RF为阳性,且IgG-RF阳性患者CRP浓度较IgG-RF阴性患者明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),血清IgG-RF水平与BVAS2003分值呈正相关(r=0.26,P<0.05)。结论 AAV患者血清IgGRF滴度与疾病活动度具有相关性,提示IgG-RF水平可用于AAV疾病的活动度评估。

全自动流式点阵免疫发光法测定抗MPO和抗PR3抗体的性能评估

目的评估全自动流式点阵免疫发光法(MBIA法)测定抗髓过氧化物酶(MPO)和抗蛋白酶3(PR3)抗体的检测性能。方法按照美国临床实验室标准化委员会(CLIS)EP15-A3文件进行精密度验证,按照EP28-A3文件验证参考区间。比较MBIA法和ELISA法检测抗PR3和抗MPO结果,结合间接免疫荧光法(IFT)评价不同方法对抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)相关性血管炎(AAV)的诊断效能。结果 MBIA法检测抗PR3和MPO抗体批内、批间不精密度分别为3.65%、4.10%和2.28%、3.32%,小于厂家声明允许不精密度批内4.70%、批间8.60%,符合要求。MBIA和ELISA两种方法检测抗PR3和抗MPO的阳性、阴性、总符合率分别是40.00%、90.89%、90.72%和80.49%、97.65%、96.10%。MBIA法和ELISA法的敏感性、特异性以及阳性预测值分别是53.85%、91.69%、67.31%和55.38%、79.71%、46.45%。与IFT结果结合后,阳性预测值可分别提高至83.56%、73.48%。结论 MBIA法检测性能符合要求,其诊断AAV的效能要优于ELISA法,与IFT法结果结合可提高对AAV诊断的阳性预测值。

浅论市政工程施工中的软基加固技术

在市政道路建设中,软土地基加固技术属于路基处理的主要技术,关系到市政道路建设的整体质量和路面使用寿命的延长。在这方面,本文主要采用文献检索法来检索有关市政道路,软土地基建设等方面的内部研究报告,科学论文,书籍杂志,论文等,并且系统地进行了相关研究。梳理和总结。结果对技术在市政道路软弱加固中的应用进行了深入的研究和讨论。

Mutation Analysis of IgVH Gene in B-Cell Chronic Lymphocytic Leukemia

Summary: The variable heavy chain region (VH) genes of 3 untreated patients with B cell chronic lymphocytic leukemia (B CLL) were cloned and analyzed. The VH family used was VH3 11, VH3 72 and VH3 33. More than 2 % difference from the corresponding germline gene was detected in all the 3 obtained potential functional genes (average 16.7). Mutation pattern analysis indicated evidence of antigen selective pressure observed in 1 of 3 cases. Our findings suggested that the tumor cells originate from post GC cells.

A群脑膜炎球菌荚膜多糖排溢法ELISA的建立及初步应用

目的建立A群脑膜炎球菌荚膜多糖(Group A meningococcal polysaccharide,GAMP)排溢法ELISA,并进行验证及初步应用。方法采用改良过碘酸盐氧化法制备抗GAMP-HRP。以抗GAMP单克隆抗体包被酶标板,抗GAMP-HRP作为酶标抗体,建立检测GAMP的排溢法ELISA。采用棋盘滴定法确定包被抗体及酶标抗体的最佳工作浓度,并对其特异性、敏感性及重复性进行验证。采用建立的排溢法ELISA检测GAMP-TT系列层析样品中的GAMP抗原活性,并与传统一步法ELISA及二步法ELISA进行比较。结果建立的排溢法ELISA的包被抗体最佳浓度为20μg/ml,酶标抗体最佳工作浓度为1∶128。该方法的特异性良好,敏感性与一步法和二步法相当,批内和批间变异系数与一步法相当;该方法检测GAMP-TT层析样品中的GAMP抗原活性的结果与二步法ELISA基本一致。结论排溢法ELISA的操作步骤与一步法ELISA大致相似,但较二步法ELISA显著简化,其对一步法ELISA中Hooks效应的纠正效果与二步法ELISA相同。

神经外科重症监护病房医院感染的临床调查

目的了解神经外科重症监护病房(NICU)医院感染病原菌的种类、感染部位的分布及病原菌的耐药性,为医院感染的预防与控制提供参考。方法以回顾性分析的方法,对2006年1月-2007年12月入住医院NICU有明确医院感染的患者临床资料进行分析。结果共检出医院感染病原菌325株,G-杆菌占46.8%,G+球菌占43.1%,真菌占10.2%;G-杆菌以铜绿假单胞菌为主,占17.2%,G+球菌以金黄色葡萄球菌为主,占20.0%,真菌以白色假丝酵母菌为主,占5.5%;病原菌检出以下呼吸道为最高,占59.7%,其次为脑脊液占22.5%;金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物除复方新诺明耐药率在9.2%较低外,其余均>50.0%,铜绿假单胞菌除对亚胺培南耐药率在30.8%,其余也均>50.0%。结论NICU医院感染以金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌为主已经呈现多药耐药,加强专科ICU建设和医院感染的认识,针对NICU的特点,采取相应预防措施,控制和减少感染的发生。

神经外科重症监护病房颅内感染的临床调查

目的了解神经外科重症监护病房（NICU）颅内感染病原菌种类和耐药性，为颅内感染的预防与控制提供参考。方法以回顾性分析的方法，对2003年1月-2007年12月入住医院神经外科重症监护病房有明确颅内感染患者的临床资料进行分析。结果共检出颅内感染的病原菌183株，其中G^＋球菌125株，G^-杆菌48株，真菌10株；排前6位的病原菌分别为：凝固酶阴性葡萄球菌（17．4％）、表皮葡萄球菌（15．8％）、金黄色葡萄球菌（10．3％）、肠球菌属（6．0％）、鲍氏不动杆菌（5．4％）、大肠埃希菌（4．3％）；凝固酶阴性葡萄球菌的耐药率除万古霉素（O）和庆大霉素（18．3％）较低外，其余常用抗菌药物均〉30．0％，鲍氏不动杆菌除对舒巴坦（18．2％）和亚胺培南（18．2％）外，其余均〉36．0％。结论调查结果显示，神经外科重症监护病房颅内感染以革兰阳性球菌多见，并已经呈现多药耐药性，加强专科ICU建设和对颅内感染的认识，针对NICU特点，控制与减少颅内感染的发生。