PCR-金磁微粒层析法在叶酸代谢相关基因检测中的应用研究

目的:对PCR-金磁微粒层析法检测人叶酸代谢相关基因进行方法学评价,并初步应用于临床检测。方法:同时应用PCR-金磁微粒层析法和Sanger测序法两种方法分别检测221例临床样本的5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C位点及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G位点的基因型,并对两种方法检测的结果进行比较,以评估PCR-金磁微粒层析法的准确性、灵敏度及特异性。结果:两种方法检测同一批样本的结果完全一致,准确性达100%。PCR-金磁微粒层析法的灵敏度高,对MTHFR C677T、A1298C位点的最低检测限分别为2.5、1.25 ng·μl^-1,MTRR A66G位点的最低检测限为1.25 ng·μl^-1;特异性强,扩增试剂的扩增反应呈高度专一性。结论:PCR-金磁微粒层析法检测人叶酸代谢相关基因快速、简便,结果准确,适合应用于各级具有PCR实验室资质的医疗机构。

连云港地区28259例妊娠中期孕妇唐氏综合征血清学筛查结果分析

目的探讨利用血清标志物对连云港地区妊娠中期孕妇进行产前血清学筛查在检出唐氏综合症等先天缺陷儿中的应用价值。方法应用时间分辨免疫荧光技术对2013年1—12月来自连云港市妇幼保健院的28 259例孕15~20^(+6)周的孕妇进行血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)和游离人绒毛膜促性腺激素β亚基(free-β-human chorionic gonadotropin,Free-β-h CG)浓度的检测,结合孕周、体重和年龄等因素,通过风险评估软件进行风险评估,并对高风险孕妇进行羊水细胞染色体核型分析或超声确诊。结果筛查出高风险孕妇总计1 913例,其中1 550例筛查高风险孕妇接受羊水细胞染色体核型分析。检测结果发现21-三体综合征12例,18-三体综合征1例,其他染色体异常7例。另外,114例NTD高风险孕妇经超声诊断发现6例畸形儿。结论进行孕中期产前筛查并结合产前诊断对预防出生缺陷儿的出生、提高人口素质具有重大意义。

甲亢患者治疗前后血清FT_3、FT_4和SOD、TNF-ɑ水平的变化及临床意义

甲状腺机能亢进为临床上常见的内分泌疾病，其发病机制近年来颇受临床和科研工作者的关注。多数学者认为，与患者的自身免疫调节紊乱有关。本文报告甲亢患者治疗前后血清FT3、FT4和SOD、TNF-α水平的检测结果，并就临床价值作初步探讨，现报告如下。

Ion Torrent PGM^(TM)测序仪检测苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变

目的评价Ion Torrent PGMTM测序仪检测苯丙酮尿症(PKU)患儿苯丙氨酸羟化酶基因(PAH)突变的可行性。方法提取15例确诊为经典型PKU的患儿及其父母外周血DNA,对PAH全部外显子及外显子-内含子交界区进行PCR反应,用Ion Torrent PGMTM测序仪测序,再对检出突变的样本进行Sanger法验证。结果 Ion Torrent PGMTM平均覆盖深度为1 465倍,平均覆盖率为99.3%;共检出29个突变位点,分属17种突变,其中p.P292L为新发突变,所有检测结果均与Sanger法相一致。结论用Ion Torrent PGMTM测序仪可快速简便检测PKU患儿PAH基因突变。

连云港地区苯丙酮尿症患儿苯丙氨酸羟化酶基因突变谱的构建及其应用

目的分析连云港地区苯丙酮尿症（PKU）患儿苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变特点,构建PAH基因突变谱,探讨PKU患儿基因型与表型的关系。方法用二代测序技术分析29例PKU患儿及其父母PAH基因第1～13外显子及两侧内含子序列,用AV值评分法进行基因型-生化表型的预测。结果 29例PKU患儿的58个等位基因中共检测出50个突变,检出率为86.2%,常见突变依次为R243Q（11/50,22.0%）,R241C（4/50,8.0%）和V399V（4/50,8.0%）;R169S和P292L为新发突变;通过基因型预测的生化表型与患儿实际生化表型的一致率为80.0%,其中经典型PKU的预测一致率为83.3%,患儿治疗前血苯丙氨酸水平与AV值评分呈显著负相关（r=-0.71,P〈0.05）。结论连云港地区PKU患儿PAH基因突变谱与其他地区有差别,基因型与表型之间具有相关性,对临床治疗具有重要指导意义。

不育男性患者Y染色体AZF区域微缺失及临床表现

目的:探讨男性Y染色体上无精症因子(AZF)区域的微缺失分布及与临床关系。方法:收集本院门诊不育男性920例,正常生育男性100例,多重PCR技术对涵盖AZFa、AZFb、AZFc区域微缺失的15个STS位点进行检测,分析AZF区域微缺失分布情况。结果:920例不育患者中检出AZF区域微缺失18例(1.96%),其中AZFc区微缺失12例、AZFb区缺失4例、AZFa区缺失1例、AZFb和c区均缺失1例,共发现6种AZF缺失类型,正常生育男性中未检测到AZF区域存在微缺失;接受进一步临床检测的17例AZF区域微缺失携带男性中,无精症6例、弱精症及少弱精症9例、坏死精子症2例。结论:本次不育男性患者Y染色体AZF区存在多种类型微缺失,主要以AZFc区缺失为主。不育男性诊断或人工辅助生殖治疗前,筛查Y染色体微缺失应作为常规检查并给予足够重视。

整合性团体干预对小于胎龄儿神经发育和气质的影响

目的 探讨整合性团体干预模式对小于胎龄儿（small for gestational age,SGA）神经发育和气质的影响.方法 选择2013年8月～ 2014年2月期间高危儿门诊管理的SGA 67例,根据家长意愿分为干预组和对照组,干预组予整合性团体干预,对照组只进行常规高危儿管理.干预组于纠正6、12个月,对照组于纠正 12个月进行GESELL、婴幼儿气质量表测试.结果 纠正12个月,GESELL发育测试：干预组大运动、语言、个人-社会性行为明显优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）,适应性行为、精细动作得分无统计学意义（P＞0.05）;气质测试：节律性、趋避性、反应强度维度得分对照组高于干预组,差异有统计学意义（P＜0.05）.干预组纠正6、12个月比较,GESELL发育测试：适应性行为、大运动、精细动作、个人-社会性行为轮区得分纠正12个月较纠正6个月高,差异有统计学意义（P＜0.01）,语言分无统计学意义（P＞0.05）;气质测试：气质类型一致性较差（Kappa=0.141,P=0.304）,纠正12个月较纠正6个月易养型/中间型气质较多,难养型/启动缓慢型气质较少,在节律性、适应、心境、注意分散维度差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 整合性团体干预模式能促进小于胎龄儿神经发育,改变小于胎龄儿气质,是一项新的经济实用的早期康复干预模式,值得推广应用.

原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织Vα24NKT细胞表达研究

目的探讨V24NKT细胞在原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织中的表达意义。方法采用流式细胞术检测30例正常妊娠自行要求终止妊娠孕妇和30例原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织V24NKT细胞的表达,并进行分析比较。结果原因不明的复发性流产患者子宫蜕膜组织中V24NKT细胞比例明显高于正常妊娠者,差异有统计学意义(<0.01)。结论V24NKT细胞的高表达在原因不明的复发性流产中有着重要的意义,推测V24NKT细胞通过数量上的增加和分泌水平的变化调控妊娠的进程,而导致原因不明的复发性流产。

腹腔镜子宫切除的护理

目的 探讨腹腔镜子宫切除术的护理方法及临床价值。方法 回顾性分析膜腔镜鞘膜内子宫切除术 (CISH) 171例 ,腹腔镜辅助下阴式子宫切除术 (LAVH) 90例及剖腹子宫切除术 (TAH) 12 6例的临床资料。结果 腹腔镜子宫切除术时间短、出血量少、术后恢复快。结论 腹腔镜子宫切除术患者损伤小、痛苦轻、腹部瘢痕小。加强术后护理及观察是减少并发症的关键因素。

无痛超导可视下金属单环嵌顿取出30例

宫内节育器（IUD）因其安全有效、简便、经济、可逆等优点,被广大育龄妇女普遍接受,成为我国育龄妇女的主要节育措施。嵌顿是宫内节育器使用过程中常见的异常情况,随着宫内节育器的普及，其发生率有逐年升高的趋势。

关于优化小学生语文写作质量的教法研究

小学阶段的语文知识教学,需要教师着重培养学生的语言表达能力。通过教师长期的教学经验总结,可以发现学生的语文知识学习质量,和其写作内容品质紧密相关。所以,教师为学生们设计综合性的写作教学策略,可以使学生的语言表达更加高效,对应的语言思维理解更为清晰,从而切实提升学生的语文综合写作水平。通过教师为学生们讲解综合性的语文写作教法,可以使学生的写作质量得到全面性的优化,全面提升学生的语言表达质量。

19个STR基因座分型在741例亲子鉴定中的应用

目的探讨19个STR基因座复合扩增分型在亲子鉴定中的应用价值。方法采集741例亲子鉴定案例的1 276份样本(血液、血斑、羊水),采用Chelex-100方法提取样本模板DNA,采用Goldeneye-20A试剂盒复合扩增19个STR基因座等位基因,扩增产物经3130基因分析仪进行毛细管电泳,使用Gene Mapper v3.0软件自动分析基因型。结果在741例亲子鉴定案例中,三联体444例(59.92%),二联体297例(40.08%);认定案例共717例(95.76%),排除24例(3.24%);等位基因突变19例(2.56%),其中一步突变15例,两步突变3例,三步突变1例,v WA和FGA基因座突变率最高,均为0.565 8%,父系突变与母系突变比例为3.75∶1。结论 19个STR基因座复合扩增分型系统具有较高的非父排除效能,可满足本地区亲子鉴定的需要,但突变现象较为常见,应引起注意。

117例非综合征型耳聋患者的突变分析

目的 分析苏北地区非综合征型耳聋(non-syndromic hearing loss,NSHL)患者的基因突变情况。 方法 应用Sanger测序技术对117例NSHL患者的GJB2基因编码区、SLC26A4基因的IVS7-2A>G和2168A>G突变以及线粒体DNA 12S rRNA的1555A>G、1494C>T突变位点进行检测。对未发现突变的患者用靶向捕获联合高通量测序技术进行检测。 结果 Sanger测序共发现86例患者(73.50%)携带突变,其中GJB2基因突变61例(52.14%),包括纯合突变22例(18.80%),杂合突变39例(33.33%);SLC26A4基因突变19例(16.24%),其中纯合突变4例(3.42%),杂合突变15例(14.53%);线粒体12S rRNA基因突变6例(5.13%),均属于异质性突变。靶向捕获联合高通量测序在8例患者中共发现4例异常,包括1例RDX基因129_130del和76_79del杂合突变、1例OTOF基因1274G>C纯合突变、1例SLC26A4基因919-2A>G和IVS16-6G>A杂合突变、1例SLC26A4基因919-2A>G和A1673T杂合突变。 结论 苏北地区NSHL患者突变携带率高达73.50%,且以GJB2基因的突变最为常见。

连云港地区孕中期产前筛查血清标志物中位数的建立及临床应用研究

目的 分析连云港地区孕妇孕中期筛查结果,确立筛查标志物（AFP、freeβ-h CG）的中位数,评价筛查软件适用性。方法 利用时间分辨免疫荧光分析法,对22 342例孕15~21＋6周单胎妊娠孕妇检测血清中AFP、freeβ-h CG含量,通过Life Cycle 3.2软件进行风险计算;以Elipse统计分析模块拟合新中位数方程,比较新中位数与软件内嵌中位数,计算风险结果,比较筛查效率。结果 经比较发现,连云港地区中位数比系统内嵌中位数偏低7.56%~8.93%,存在统计学差异（P=0.000）,连云港地区freeβ-h CG中位数比系统内嵌中位数偏高13.52%~35.77%,存在统计学差异（P=0.000）。AFP各孕周中位数偏差幅度不大。随体重增加,连云港地区体重中位数与系统内嵌中位数偏差变大。新中位数方程与内嵌中位数有统计学差异（P〈0.05）,更换中位数后,筛查高风险率由7.27%降到4.88%,高风险率降低率为32.87%,筛查效率提高。结论 用数据分析软件拟合本实验室中位数方程可以提高筛查效率,此中位数方程对连云港地区产前筛查有指导意义。