虾类和蟹类过敏原的交叉反应性研究

目的:分析虾类和蟹类过敏原交叉反应性,探讨其在食物过敏症的预防、诊断和治疗中的意义。方法:采用SDS-PAGE分析虾蟹的蛋白组分,Western blot分析其过敏原组分,Western blot和ELISA抑制试验研究虾类和蟹类的过敏原交叉反应性。结果:虾类、蟹类过敏原蛋白组分相似性与其种属关系相关,相对分子量(Mr)在20 000、36 000、38 000、44 000、68 000、75 000、85 000处具有相同条带;Mr为36 000的蛋白是虾的主要过敏原,Mr为36 000、66 000、85 000的蛋白是蟹的主要过敏原;青蟹蛋白和日本沼虾蛋白对其余虾蟹过敏原有抑制作用,并且随着抑制物浓度增加抑制效应增强。结论:虾类和蟹类过敏原有相似性,其中Mr在36 000处相互之间存在较强的交叉反应。

虾类和蟹类的过敏原组分分析

目的:分析虾类和蟹类的过敏原组分。方法:聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot分析虾类和蟹类的主要过敏原组分。结果:不同种类的虾其主要过敏原组分相对分子质量(Mr)在36000附近,不同种类的蟹主要过敏原组分Mr在29000、36000、66000、89000附近。结论:不同种类的虾蟹存在共同过敏原。

牛乳清蛋白BALB/c小鼠过敏模型的建立及其优化

目的:建立牛乳清蛋白的BALB/c小鼠过敏模型,并探讨不同佐剂、免疫途径及饲料纯度等因素对建立牛乳清蛋白的BALB/c小鼠过敏模型的影响。方法:用不含牛乳及乳制品的特制饲料饲养BALB/c小鼠以乳清蛋白致敏,间接ELISA法测定特异性IgE,用荧光法检测体外激发小鼠致敏肥大细胞释放的组胺。结果:成功建立BALB/c小鼠乳清蛋白过敏模型,条件优化结果显示,氢氧化铝佐剂结合皮下注射最好地促进特异性IgE产生;用不含牛奶及其他食物过敏原的特制饲料饲养的小鼠特异性IgE的本底水平低,适于建立小鼠过敏模型,荧光法检测肥大细胞释放组胺的结果与特异性IgE检测结果一致。结论:用特制饲料饲养小鼠,氢氧化铝佐剂结合皮下注射乳清蛋白适于建立BALB/c小鼠过敏症模型,该模型可用于过敏症机理研究。

牛乳中主要过敏原组分的分离纯化及鉴定

目的:分离纯化并鉴定牛乳中引起过敏反应的主要致敏组分。方法:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS- PAGE)分析了脱脂乳和乳清的蛋白组分,用饱和硫酸铵分段盐析-DEAE离子交换柱层析纯化过敏原蛋白,脱脂乳和乳清蛋白皮下注射Balb/c小鼠获得高效价特异性IgE抗血清用于免疫印迹分析。结果:免疫印迹分析显示β-乳球蛋白(β-Lg)是引起牛乳过敏的主要过敏原,建立了牛乳过敏小鼠模型。结论:明确了牛乳过敏的主要过敏组分,对牛乳过敏症的诊断治疗以及无过敏原牛乳的制备提供了实验依据。

微生物学实验教学中开展设计性实验的做法与体会

探讨了微生物学实验教学中开展设计性实验的一些做法及其与传统的实验教学方法相比具有的优势,分析了开展设计性实验过程中有待解决的问题及体会。实践证明,设计性实验能提高学生的学习能动性,在培养学生动手动脑能力及科学思维等方面具有明显优势,是实验教学改革的一个方向。

如何在微生物检验专题实验教学中体现应用型人才培养

在食品检验、化妆品检验和环境水检测等微生物检验专题实验中采取了一些改进措施。实践证明,这些措施有助于提高学生的学习能动性,增强其动手动脑能力。

惠城区部分市售食品的微生物学质量调查

目的：了解惠城区市售食品的卫生状况。方法：于2005年1月～5月对惠城区6类食品进行了菌落总数、大肠菌群数和肠道致病菌的检测。结果：6类食品（饮料、凉拌菜、糕点、灌肠类、酱卤肉类、果脯）的超标率分别为7．70％、47．06％、13．34％、11．11％、40．00％、6．25％。除饮料和果脯外其余食品均检出致病菌，检出率为6．12％。结论：凉拌类和酱卤肉类食品的污染较严重，建议有关部门采取有效措施，加强食品卫生的监督管理，以保障食品安全。

聚硅氧烷季铵盐微乳液的织物抗菌性能研究

目的探讨聚硅氧烷季铵盐微乳液的抗菌性能。方法以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌为考核菌,采用抑菌圈法和振荡烧瓶法定性和定量检测抗菌整理剂的效果。结果聚硅氧烷季铵盐微乳液的最低抑菌浓度为2%,对金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于大肠杆菌,对酵母菌亦有较好的抑菌效果,纯棉坯布对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最佳,洗涤30次后抑菌率仍高达92.34%,保存6个月后其抑菌率仍保持99.96%。结论经聚硅氧烷季铵盐微乳液整理的纯棉坯布抗菌性能好,具有一定的抗菌耐洗性和稳定性。

鸡粪开发生产微生物肥料的探讨

探讨鸡粪作为微生物肥料载体的可行性。以干燥或发酵处理的鸡粪为载体经辐照处理后,分别接种固氮菌、解磷巨大芽孢杆菌、硅酸盐细菌和枯草芽孢杆菌制作微生物肥料。以煤渣为载体设对照组,通过测定有效活菌数和杂菌率,优化鸡粪处理的最佳方法;从保存时间、温度、光照、pH值几个因素探讨微生物肥料的稳定性。结果表明,经堆肥腐熟并辐照处理的鸡粪作载体效果最佳,固氮菌肥和硅酸盐细菌肥料的保质期在6个月,磷菌肥和枯草杆菌肥的保质期在9个月;阳光直射处保存3个月的菌肥有效活菌数低,杂菌率高,而室内暗处保存的活菌数高,杂菌率低;菌肥的保存温度超过30℃时,有效活菌数急剧下降,杂菌率上升;将菌肥的pH值调至7时,有利于提高有效活菌数。可见鸡粪可用作微生物肥料的载体,保存在避光阴凉干燥处可有效提高菌肥的有效活菌数,从而延长产品的保存期。

诊断用过敏原膜芯片的制备及其应用研究

目的:制备过敏原诊断用膜芯片并优化其实验条件,探讨其在过敏性疾病诊断中的应用价值。方法:以虾、蟹、鳖、大豆等过敏原按一定点阵排列吸附在不同膜载体(NC膜、PVDF膜)上,制作含有阳性对照和阴性对照的膜芯片,用斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)从包被液、过敏原包被浓度、二抗浓度等方面优化工作条件,并与德国Allergop-harma的过敏原检测试剂盒比较结果符合度。将包被好的PVDF膜保存在4℃冰箱中在3个月内检测其稳定性。结果:PVDF膜的效果优于NC膜,肉眼观察膜上斑点的显色即可确定相应过敏原,以试剂盒检出的阳性血清28份作比较,结果总符合率达82.1%(23/28),差异无统计学意义(P>0.05)。不同时间同批试剂重复检测结果完全一致,制备的过敏原膜芯片在4℃密封避光可稳定保存3个月。结论:建立的Dot-ELISA法膜芯片能同时检测多种过敏原,具有用血量少,成本低,操作简便,安全特异等优点,值得临床推广应用。

强化服务地方理念 凸显微生物学教学应用性

为实现应用型人才培养目标,结合惠州市产业发展的特色,以服务地方经济为导向,从重组理论教学内容、优化实践教学的项目、加强校企合作、开放实验室和提高教师社会服务能力等方面进行微生物学教学改革的尝试,提高了学生的实践能力和社会适应性,实现了专业课教学与创新创业培养的完美结合,凸显了微生物学教学的应用性。

固氮菌肥在几种蔬菜上的肥效试验

用无氮培养基以稀释倒平板法和种土法筛选自生固氮菌1株,以菌糠为载体制备固氮菌肥。研究表明固氮菌肥浸提液浓度低于50%时对小白菜种子的发芽有促进作用,而浓度高于75%的浸提液对种子有一定毒副作用。固氮菌肥肥效试验中,菠菜株高菌肥组比菌糠组和对照组分别高16.1%和49.3%,空心菜株高菌肥组比菌糠组和对照组分别高31.2%和49.4%。菠菜叶片叶绿素总含量菌肥组比菌糠组和对照组分别高28.3%和34.5%,空心菜叶片叶绿素总含量菌肥组比菌糠组和对照组分别高31.9%和45.7%。菠菜维生素C(Vc)含量菌肥组比菌糠组和对照组分别高22.8%和38.2%。空心菜Vc含量菌肥组比菌糠组和对照组分别高15.3%和35.9%。结果表明,该固氮菌肥具有良好的肥力,能较好地促进蔬菜生长,是值得推广应用的一种微生物肥料。

石墨炉原子吸收法测定补钙剂和补锌剂中痕量镉

探讨了用塞曼效应石墨炉原子吸收法测定补钙剂和补锌剂中痕量镉,研究了石墨炉升温程序及基体改进剂对测定的影响。测定结果表明,采用塞曼效应扣背景的方法,以5 μL 1 . 0g/L硝酸钯作为基体改进剂,能够提高镉对温度的稳定性和分析的灵敏度,用标准曲线法测定镉,回收率的平均值高达96%。

ABC-ELISA法检测牛乳过敏小鼠模型中的特异性IgE

目的:建立并优化一种有效检测特异性IgE的方法,以取代皮内试验快速诊断过敏症。方法:用乳清蛋白皮下注射BALB/c小鼠建立牛奶过敏模型,获得小鼠抗血清进行方法学研究。结果:乳清蛋白的最适包被量为500ng,用pH9.4的碳酸盐缓冲液作为包被液,4℃包被过夜效果最佳,选用0.2%的白明胶/1%的BSA封闭效果最好,生物素化抗鼠IgE抗体的最佳反应浓度为1∶1000。结论:建立了检测特异性IgE的生物素-亲和素系统改良的ABC-ELISA法,该法特异、灵敏、安全、简便,可用于临床诊断过敏症。

微生物学实验教学中改革实验准备的探讨

探讨了微生物学实验教学中改革实验准备的一些做法及其效果,从实验教学条件、实验室管理体制和运行机制、实验室的开放等角度分析了改革实验准备模式的一些关键因素。实践证明,让学生参与实验准备能提高学生的学习能动性,在培养学生实验室管理能力、动手能力及科研素养等方面具有明显优势,是实验教学改革的一个有益尝试。

中华鳖和中华草龟的过敏原组分分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和免疫印迹法（Western blot）分析中华鳖和中华草龟的蛋白组分和主要过敏原。结果表明,中华鳖有8个蛋白组分,相对分子质量（Mr）分布在25 000~110 000之间,主要过敏原在42 000和64 000附近,中华草龟有10个蛋白组分,Mr分布在25 000~70 000之间,主要过敏原组分Mr在36 000附近。提示中华鳖和草龟有相近的蛋白条带,在36 000和42 000之间可能有共同的过敏原,但是否存在交叉反应有待进一步验证。

家蚕的过敏原组分鉴定

目的:分析引起蚕过敏的组分。方法:利用磷酸缓冲液提取蚕茧和蚕蛹的总蛋白,用SDS-PAGE分析蚕蛋白组分,将蛋白胶转印到PVDF膜上,用蚕过敏患者的阳性血清进行IgE结合试验来鉴定蚕茧和蚕蛹的过敏原组分。结果:蚕茧蛋白可辨条带有8条,其相对分子质量分别约为18×10~3、27×10~3、30×10~3、38×10~3、42×10~3、44×10~3、51×10~3和58×10~3;蚕蛹蛋白主带有6条,其相对分子质量分别约为23×10~3、27×10~3、30×10~3、33×10~3、38×10~3和51×10~3;蚕茧和蚕蛹在相对分子质量约30×10~3和51×10~3附近有2条印迹主带。结论:提示家蚕蛋白中存在特定的过敏原。该研究为蚕过敏的诊断和治疗提供了一定的实验基础。

马齿苋对子宫兴奋作用的机理研究

马齿苋水煎液对离体小鼠子宫具有兴奋作用 .马齿苋对子宫的兴奋作用与组织胺受体有关 ,而与α受体。

微生物学教学改革的一些尝试

从知识应用的角度 ,用示例法进行微生物学教学 ,把工作经验及一些学生关注的事件引入课堂 。