HPLC法测定板栗种仁中原儿茶酸的含量

目的建立测定板栗种仁酸水解前后原儿茶酸含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(体积比为8.0∶92.0∶0.1),检测波长为259 nm,流速为0.8 mL.min-1,柱温为25℃。结果测定酸水解前板栗种仁中原儿茶酸含量质量分数为8.12×10-3%;酸水解后原儿茶酸含量质量分数为1.82×10-2%。结论HPLC法可用于板栗种仁中原儿茶酸的含量测定;板栗种仁提取物经过酸水解后的原儿茶酸含量有较大增加。

链霉菌Streptomyces sp. CPCC 200497次级代谢产物bohemamines的分离和鉴定

目的对醌霉素产生菌——Streptomyces sp.CPCC 200497产生的次级代谢产物进行深入研究。方法将Streptomyces sp.CPCC 200497进行固体发酵,用高效硅胶板薄层色谱、中低压制备色谱和高效液相色谱等方法对发酵培养物的乙酸乙酯提取物进行分析和纯化;通过质谱和NMR等对获得的单体化合物进行结构鉴定。结果从Streptomyces sp.CPCC 200497发酵物的乙酸乙酯提取物中发现了两个吡咯里西啶类生物碱,分别为bohemamine和bohemamine B。结论从醌霉素产生菌Streptomyces sp.CPCC 200497中首次分离得到bohemamine类化合物,并通过1D和2D-NMR对化合物的核磁数据进行了准确归属,为国内首次对该类化合物的分离鉴定进行报道。

板栗种仁酸水解物化学成分的分离与鉴定

目的更好地开发利用板栗(Castanea mollissimaBlum)种仁。方法对板栗种仁的体积分数为95%的乙醇提取物进行酸水解,水解物采用硅胶柱色谱?氧化铝柱色谱、凝胶柱色谱和重结晶等方法进行分离;根据理化性质和NMR谱数据并参考文献鉴定其结构。结果分离鉴定了10个化合物,分别为对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,1)、原儿茶酸(protocatechuic acid,2)、没食子酸(gallic acid,3)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,4)、β-谷甾醇(β-sitosterol,5)、α-菠甾醇(α-spinasterol,6)、齐墩果酸(oleanane acid,7)、2α-羟基齐墩果酸(maslinic acid,8)、α-香树脂醇(α-amyrin,9)、单棕榈酸甘油酯(glycerolmonopalmitate,10)。结论化合物6、8为首次从栗属植物中分离得到;化合物9为首次从板栗中分离得到。

榴菌素产生菌——链霉菌CPCC 200532中fogacin的分离鉴定

目的对Streptomyces sp.CPCC 200532产生的榴菌素类似物进行分离鉴定。方法 Streptomyces sp.CPCC 200532发酵培养物经乙酸乙酯萃取后,用硅胶板薄层色谱和高效液相色谱对萃取物进行分析;通过质谱和NMR等对榴菌素类似物进行结构鉴定。结果从Streptomyces sp.CPCC 200532中发现了一个榴菌素类似物,结构与fogacin一致。结论从榴菌素产生菌中首次分离得到化合物fogacin;与榴菌素A相比,fogacin显示微弱的抗枯草芽孢杆菌和白色念珠菌活性。

板栗种仁的化学成分(Ⅲ)

目的分离并鉴定板栗种仁的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、氧化铝柱色谱和重结晶等多种分离方法对板栗种仁的95%(φ)乙醇溶液回流提取物进行分离,并通过NMR、ESI-MS和TLC等多种方法对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果分离得到6个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲酸(p-hydroxy benzoic acid,1),原儿茶酸(protocatechuic acid,2),没食子酸(gallicacid,3),胡萝卜苷亚油酸酯(daucosterol-6′-linoleate,4),麦角甾-6,22-二烯-3β,5α,8α-三醇(ergost-6,22-diene-3β,5α,8α-triol,5),3′,3″-di methoxylarreatricin(6)。结论其中化合物4-6为首次从栗属植物中分离得到。

链霉菌CPCC 203577产生的napyradiomycins的分离与鉴定

目的对一株具有抗菌活性的链霉菌CPCC 203577产生的次级代谢产物进行系统研究。方法采用ISP2琼脂平板发酵培养链霉菌CPCC 203577,乙酸乙酯提取发酵培养物,获得粗提物;粗提物经反相色谱柱、凝胶色谱柱、制备型TLC和半制备HPLC等分离纯化获得目标化合物纯品;MS和NMR等确定化合物结构;琼脂稀释法测定抗菌活性。结果从链霉菌CPCC 203577中分离鉴定了含萘醌并吡喃母核的3个已知化合物,3-chloro-6,8-dihydroxy-8-α-lapachone(1)、16-dechloro-16-hydroxynapyradiomycin C2(2)和napyradiomycin A2(3)。化合物1具有较强的抗革兰氏阳性细菌活性,最低抑菌浓度(MIC)值为4~8μg/ml;化合物2和3没有抗菌活性。结论链霉菌CPCC 203577具有丰富的次级代谢产物合成能力,产生napyradiomycins类化合物。

链霉菌Streptomyces sp.CPCC 200497产生的主要次级代谢产物——醌霉素的鉴定

目的对链霉菌CPCC 200497产生的抗菌活性次级代谢产物进行研究。方法对CPCC 200497发酵液乙酸乙酯提取物进行TLC、HPLC和MS分析,发现目标化合物,采用色谱方法分离纯化目标化合物,以高分辨质谱和NMR分析对目标化合物进行结构鉴定,并进行抗菌活性测定。结果从CPCC 200497发酵培养物中发现并鉴定主要次级代谢产物——醌霉素A和C组分,它们显示强烈的抗革兰阳性菌活性,特别是对MRSA和VRE耐药菌株的活性强于万古霉素;CPCC 200497还产生其他次级代谢产物。结论醌霉素具有显著的抗耐药菌等生物活性,有望成为抗耐药菌药物开发先导化合物;CPCC 200497产生的其他次级代谢产物有待继续挖掘。

链霉菌CPCC 200510产生的大黄酚及其类似物的鉴定

目的链霉菌具有丰富次级代谢产物合成能力,对链霉菌CPCC 200510 产生的色素类次级代谢产物进行研究。方法对该菌株的次级代谢产物进行乙酸乙酯提取、ODS色谱柱分离、半制备 HPLC 分离纯化、NMR 结构解析和生物活性检测。结果得到 6 个黄色化合物,分别为 1,8-二羟基-3-甲基蒽醌(大黄酚,1)、2-乙酰-1,8-二羟基-3-甲基蒽醌(2)、2-乙酰-1,8-二羟基-3-羧甲基蒽醌(3)、1,2,8-三羟基-3-甲基蒽醌(4)、1-(7-乙酰-8-羟基苯并[de]色烯-2-基)-2-丙酮(5)和1-(8-羟基-2-甲基苯并[de]色烯-7-基)乙酮(6),为一组生物合成相关的芳香聚酮类化合物。其中,1 ~ 3 为链霉菌 CPCC 200510 产生的主要组分。生物活性测定表明,1 ~ 3 具有抗肿瘤细胞或抗病毒活性。结论链霉菌 CPCC 200510 有望作为大黄酚类化合物的微生物产生菌。

珍贵束丝放线菌产生的新代谢产物1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯

目的发现珍贵束丝放线菌ATCC 31565产生的新代谢产物。方法TLC和LC-MS等分析珍贵束丝放线菌ATCC 31565培养物的乙酸乙酯提取物,发现目标化合物。采用MCI色谱柱和半制备HPLC等分离纯化目标化合物。对目标化合物的NMR等数据进行分析,确定其化学结构。结果从珍贵束丝放线菌ATCC 31565中发现了一个化学结构为1-羟基-4-O-鼠李糖-2-萘甲酸甲酯的新化合物,并将其命名为珍贵酚。结论推测珍贵酚是1,4-二羟基-2-萘甲酸(甲萘醌的生物合成前体物)和L-鼠李糖这两个初级代谢产物的脱水缩合产物再经过甲酯化形成的。

链霉菌Streptomyces sp.CPCC 204095产生原黄醇酮C的固态发酵及制备

目的以链霉菌Streptomyces sp.CPCC 204095为产生菌,建立小规模发酵培养及分离纯化制备原黄醇酮C的方法。方法HPLC测定原黄醇酮C发酵效价;利用改进的发酵培养基配方对链霉菌Streptomyces sp.CPCC 204095进行固态发酵培养,经乙酸乙酯提取、正相硅胶色谱柱和反相ODS色谱柱分离纯化制备原黄醇酮C。结果采用改进的发酵培养基配方(葡萄糖4 g/L,麦芽提取物25 g/L,酵母提取物4 g/L,黄豆饼粉6 g/L,琼脂粉15 g/L,pH自然),原黄醇酮C发酵效价达到300 mg/L;从5 L发酵培养基出发,经发酵培养和分离纯化后,收获原黄醇酮C样品656 mg,HPLC检测纯度91%。结论建立了一种简便高效的原黄醇酮C小规模发酵和制备工艺流程,为开展原黄醇酮C化学衍生物和生物活性等研究奠定了基础。

实验室小规模微生物琼脂平板发酵培养操作模式优化

微生物发酵主要分为固态和液态两种模式，在实验室和工业生产中，固态和液态发酵培养均具有广泛的应用。在科研单位微生物实验室中，琼脂平板（或培养皿）和摇瓶分别是微生物固态与液态发酵培养的常用器皿；琼脂培养基平板不仅可以用于制备液态发酵的起始种子或孢子悬液，更可以为科研单位微生物实验室提供一定数量的发酵培养物，用于分离纯化或积累目标样品化合物。

天麻水提取物的化学成分研究

通过大孔吸附树脂、MCI树脂、正相硅胶、Sephadex LH-20、制备薄层色谱和反相HPLC等多种色谱分离方法相结合,从天麻水提物中分离得到23个化合物;借助多种波谱学分析方法鉴定他们的结构为:4-羟基-3-(4-羟基苄基)苄基甲醚(1),4-(甲氧甲基)苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),4-羟基-3-(4-羟基苄基)苯甲醛(3),4-(4-羟基苄基)-2-甲氧基苯酚(4),4,4'-亚甲基双(2-甲氧基苯酚)(5),L-苯基乳酸(6),3-甲氧基-4-羟基苄基乙醚(7),对羟基苯甲醇(8),对羟基苄基甲醚(9),对羟基苄基乙醚(10),对羟基苯甲醛(11),对羟基苯甲酸(12),对甲氧基苯甲酸(13),天麻素(14),4-(乙氧甲基)苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15),对醛基苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(16),对甲苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(17),甲基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(18),5-羟甲基糠醛(19),派立辛(20),派立辛B(21),派立辛C(22)和薯蓣皂苷元(23)。其中化合物1和2为新化合物,化合物3～7,18和23为首次从该属植物中分离得到,并首次报道化合物4的碳谱数据。

一种检测安丝菌素效价的生物检定方法——木霉平板法

本文报道一种安全高效的安丝菌素生物检定方法。对1株安丝菌素敏感的真菌进行了ITS序列系统进化树分析,确定其属于木霉属,并将其命名为木霉CPCC 400749。采用PDA培养基制备了木霉CPCC 400749检定平板并用于测定安丝菌素效价,测定结果与HPLC分析方法得到的数值基本一致。本文报道的安丝菌素生物检定方法具有安全高效特点,有望用于高通量筛选束丝放线菌安丝菌素高产菌株。

慈竹茹中木脂素类化学成分的研究

通过硅胶、大孔树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20和HPLC等多种色谱分离方法相结合,从慈竹茹Sinocalamusafinis茎的乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分中分离得到15个化合物;借助理化性质和波谱学数据分析,鉴定其结构为(+)-(1S,2R)-1,2-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,3-丙二醇(1),苏式-愈创木基甘油-β-O-4'-松柏基醚(2),赤式-愈创木基甘油-β-O-4'-松柏基醚(3),(+)-(7S,8R,8'R)-5'-甲氧基落叶松树脂醇(4),(+)-(7S,8R,8'R)-5,5'-二甲氧基落叶松树脂醇(5),(±)-秃毛冬青素Ⅰ(6),(-)-丁香树脂酚(7),(-)-杜仲树脂酚(8),(-)-(8R,8R')-4,4'-二羟基-3,3',5,5'-四甲氧基木脂烷-9,9'-二醇(9),(-)-开环异落叶松树脂酚-9,9'-缩丙酮(10),(+)-珍珠花树环木脂醇(11),2,6-二甲氧基吡喃-4-酮(12),β-谷甾醇(13),4-羟基桂皮酸(14)和2,6-二甲氧基对苯醌(15)。这些化合物均为首次从慈竹属植物中分离得到,其中化合物12为新天然产物。

济南游动放线菌CPCC 200056产生的3-去甲创新霉素发现与鉴定

创新霉素是我国科学家于20世纪70年代从游动放线菌中发现的一个具有含氮、含硫杂环新骨架的抗生素,曾作为抗菌药物进行了应用开发等研究。本研究采用ISP2固体培养基对创新霉素产生菌——济南游动放线菌CPCC 200056进行了发酵培养、乙酸乙酯萃取、TLC和LC-MS分析,发现了第一个天然的创新霉素类似物组分。经分离纯化和NMR解析,确定该类似物为3-去甲创新霉素(3-demethylchuangxinmycin),为新天然产物。与创新霉素相比,3-去甲创新霉素的抗菌活性比创新霉素显著降低。3-去甲创新霉素的发现不仅丰富了对创新霉素构效关系的认识,而且为研究创新霉素生物合成机制提供了线索。