人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液诱导破骨前体细胞的分化成熟

目的:探讨人多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞条件培养液对破骨前体细胞RAW264.7的影响。方法:Western blotting检测可溶性核因子κB受体激活剂配体(soluble receptor activator of NF-κB ligand,sRANKL)的蛋白表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色观察RAW264.7细胞的分化成熟情况。RT-PCR法检测RAW264.7细胞TRAP和cathepsin K mRNA的表达。结果:Western blotting法证实RPMI8226细胞条件培养液中含有sRANKL。TRAP染色发现RPMI 8226细胞条件培养液能诱导RAW264.7细胞分化为TRAP阳性的多核成熟破骨细胞。人抑制性RANKL单克隆抗体拮抗30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的作用,且具有剂量依赖性。30%RPMI 8226细胞条件培养液能刺激RAW264.7细胞上调TRAP和cathepsin KmRNA表达。结论:人多发性骨髓瘤细胞RPMI 8226条件培养液中的sRANKL具有促RAW264.7破骨前体细胞分化成TRAP阳性的多核成熟破骨细胞的生物活性。人抑制性RANKL单克隆抗体阻断30%RPMI 8226细胞条件培养液中sRANKL的诱导分化作用,且具有浓度依赖性。

载脂蛋白B、E基因多态性与浙南几种常见疾病的相关性分析

目的:探讨载脂蛋白B、E(ApoB、E)基因频率与浙南地区几种常见疾病的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术,检测浙南地区41例Ⅱ型糖尿病、68例高血压病、26例冠心病、40例脑出血、40例脑梗死、23例再生障碍性贫血患者和60例正常人的ApoB、E基因的多态性。结果:Ⅱ型糖尿病组ApoB基因X+,E-等位基因频率高于正常对照组(P<0.05),再生障碍性贫血组X+,E-等位基因频率明显高于正常对照组(P<0.01)。冠心病组X+等位基因频率与正常对照组比较有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组、冠心病组和高血压病组ApoE基因ε4等位基因频率较正常组增高(P<0.05)。结论:ApoB、E基因多态性与浙南地区几种常见疾病有密切的相关性,可作为危险因子来早期预测疾病的易感人群。

骨髓瘤细胞诱导破骨前体细胞分化的分子机制探讨

目的探讨人骨髓瘤细胞RPMI8226诱导破骨前体细胞分化的分子机制。方法采用RT-PCR和Western blot-ting法检测RPMI8226细胞能表达核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κB Ligand,RANKL)蛋白和RANKL裂解酶(TACE、ADAM19)mRNA表达。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)细胞化学染色鉴定成熟破骨细胞。利用重组人RANKL蛋白(rhRANKL)、条件培养液和人抑制性RANKL单克隆抗体(RANKL mAb)参与培养,诱导RAW264.7细胞分化为成熟破骨细胞。结果 Western blotting法证实RPMI8226细胞表达跨膜型和可溶型RANKL(mRANKL,sRANKL)。RT-PCR法证明RPMI8226细胞表达RANKL、RANKL裂解酶和TRAP mRNA。TRAP染色观察RPMI8226细胞、MG-63细胞条件培养液与rhRANKL均能明显诱导RAW264.7细胞分化为TRAP阳性多核成熟破骨细胞。RT-PCR法证实此3组能刺激RAW264.7细胞上调TRAP mRNA表达。TRAP染色和TRAP mRNA表达中发现RANKL mAb能阻断RPMI8226细胞条件培养液和rhRANKL诱导的破骨前体细胞分化成熟作用。结论骨髓瘤RPMI8226细胞能表达RANKL,其条件培养液可能含sRANKL,能使RAW264.7细胞分化成TRAP阳性多核成熟破骨细胞。

槐耳浸膏对骨髓瘤细胞株PRMI_(8226)细胞的影响

目的:探讨槐耳浸膏(金克)对骨髓瘤细胞细胞株PRMI8226细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养PRMI8226细胞与1.5、3、5mg/ml的不同浓度槐耳浸膏共孵育,分别在24、36和72小时时,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)检测早期细胞凋亡情况。结果:槐耳浸膏可抑制PRMI8226细胞细胞增殖,不同浓度的槐耳浸膏对多发性骨髓瘤细胞增殖的抑制效果不同,以5mg/ml时抑制增殖效果最好。且浓度为5.0mg/ml的槐耳浸膏诱导多发性骨髓瘤细胞48小时抑制率达到高峰84%。FCM检测表明,槐耳浸膏可诱导PRMI8226细胞早期凋亡,浓度为5.0mg/ml槐耳浸膏对PRMI8226细胞处理48小时引起25.9%的凋亡率。这两种作用均随槐耳浸膏浓度和作用时间的延长而增强。结论:槐耳浸膏可在体外抑制PRMI8226细胞增殖,并促进其凋亡。

姜黄素通过上调SOCS表达抑制JAK2/STAT信号通路的机制

目的:研究姜黄素在骨髓增殖性肿瘤(MPNs)中通过调节细胞因子信号转导抑制蛋白1、3(SOCS1、SOCS3)表达抑制JAK2/STAT信号通路的机制。方法:体外培养HEL及32D细胞株,分别用40μmol/L姜黄素处理24、48 h。通过Western blot法检测JAK2/STAT信号通路及SOCS1、SOCS3蛋白表达水平;通过染色体免疫共沉淀法检测组蛋白乙酰化程度改变;通过比色法检测组蛋白去乙酰化酶(HDAC)活性。结果:体外实验表明姜黄素显著抑制HEL及32D细胞JAK2/STAT信号通路。姜黄素能够抑制HDAC活性,同时降低HDAC1、HDAC3和HDAC8表达。姜黄素通过抑制HDAC活性,进而增强SOCS1、SOCS3启动子组蛋白乙酰化程度,从而上调SOCS1、SOCS3 m RNA及蛋白表达水平。结论:姜黄素通过上调SOCS1、SOCS3表达水平抑制JAK2/STAT信号通路。作为一个相对无毒的天然小分子化合物,姜黄素联合其他抑制JAK2/STAT信号通路的药物可能有助于MPNs的临床治疗。

血液病粒细胞缺乏患者医院血流感染的回顾性临床分析

目的分析血液病粒细胞缺乏患者血流感染的危险因素、病原菌分布及耐药性,为减少其血流感染的发病率及病死率提供依据。方法对医院2009-2011年61例血液科粒细胞缺乏患者并发医院血流感染进行回顾性临床分析。结果免疫抑制剂应用、中性粒细胞<0.2×109/L、中性粒细胞缺乏时间<7d及癌症支持疗法多国学会风险指数<21分是血液病粒细胞缺乏患者医院血流感染的危险因素,其OR值分别为6.967、28.306、4.383、69.002;共检出62株病原菌,其中革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌分别占64.5%、27.4%、8.1%,最常见的病原菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及金黄色葡萄球菌,分别占30.6%、21.0%及8.1%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶检出率分别为47.4%和30.8%。结论针对各种危险因素采用有效的应对措施,可减少血液病粒细胞缺乏患者血流感染的发病率和病死率。

淋巴细胞单核细胞比值在弥漫大B细胞淋巴瘤随访中的意义

目的：探讨淋巴细胞单核细胞比值（LMR）在弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）随访中的作用。方法：2005-2015年在我院对130例原发性DLBCL患者进行一线化疗,并随访观察。结果：130例患者中有40例（30.8%）在随访时复发,中位复发时间为12.5（1~101）个月。复发时LMR的最佳界值为2.8,其曲线下面积为0.804（P=0.001）。LMR〈2.8的患者复发率较LMR≥2.8的患者明显升高,其1年内的复发率分别为26.8%和10.1%（P=0.019）;2年内的复发率分别为41.5%和14.6%（P=0.001）;5年内的复发率分别为51.2%和18.0%（P=0.000）。多因素分析发现随访时LMR和LDH与复发相关,相关系数分别为2.546和2.708。低LMR值与较短总生存期及无进展期生存有关,LMR〈2.8提示不良的预后（总生存期：P=0.000;无进展生存期：P=0.000）。结论：LMR可以作为DLBCL一线化疗后的随访指标,LMR降低提示复发可能。