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乙型肝炎病毒相关慢性肝病合并胆囊结石的危险因素分析 被引量:25
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作者 汤绍辉 黄秋燕 +1 位作者 周金梅 吴胜兰 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期485-488,共4页
目的探讨乙型肝炎病毒相关慢性肝病患者合并胆囊结石(GS)的发生率及危险因素。方法收集2009年1月-2012年12月654例慢性肝病患者的住院资料,其中慢性乙型肝炎(CHB)236例、乙肝肝硬化356例,乙肝肝硬化伴肝细胞癌(HCC)62例,以同期住院的无... 目的探讨乙型肝炎病毒相关慢性肝病患者合并胆囊结石(GS)的发生率及危险因素。方法收集2009年1月-2012年12月654例慢性肝病患者的住院资料,其中慢性乙型肝炎(CHB)236例、乙肝肝硬化356例,乙肝肝硬化伴肝细胞癌(HCC)62例,以同期住院的无肝脏疾病的患者(n=314)作为对照,分析各组患者GS发生率及危险因素。结果 CHB、乙肝肝硬化、乙肝肝硬化伴HCC患者的GS发生率分别为18.2%、29.2%、32.3%,均明显高于对照组(7.0%)。乙肝肝硬化及乙肝肝硬化伴HCC患者的GS发生率均明显高于CHB患者,但前两者差异无统计学意义。单变量分析显示,CHB合并GS患者的年龄、γ谷氨酰转肽酶(GGT)值及合并饮酒患者的比例均明显高于未合并GS患者;Child-pugh分级B级肝硬化患者的GS发生率明显高于A级(33.3%vs 21.5%),而C级(51.1%)的发生率明显高于B级;乙肝肝硬化合并GS患者的年龄,血清总胆红素(TBIL)、结合胆红素(DBIL)及非结合胆红素(IBIL)水平,以及合并腹水患者的比例明显高于未合并GS的患者;乙肝肝硬化伴HCC合并GS患者血清TBIL及IBIL水平明显高于未合并GS的患者。结论较大年龄、较高GGT水平及饮酒是CHB合并GS发生的独立危险或预测因素;较大年龄、较高血清TBIL水平及合并腹水是乙肝肝硬化并发GS的独立危险因素;较高血清TBIL水平是乙肝肝硬化伴HCC并发GS的独立危险因素。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 慢性 肝硬化 肝细胞 胆结石 危险因素
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以腹部症状为主的成人混合型过敏性紫癜1例
2
作者 刘怡 梁旭竞 汤绍辉 《临床医学进展》 2024年第11期295-301,共7页
过敏性紫癜(Henoch-Schönlein purpura, HSP)又称为IgA血管炎,是由IgA免疫复合物沉积介导的全身性小血管炎。HSP以儿童最常见,成人较为少见。临床上以皮肤紫癜最多见,可伴有关节、胃肠道及肾脏等各系统症状。当腹部症状先于紫癜出... 过敏性紫癜(Henoch-Schönlein purpura, HSP)又称为IgA血管炎,是由IgA免疫复合物沉积介导的全身性小血管炎。HSP以儿童最常见,成人较为少见。临床上以皮肤紫癜最多见,可伴有关节、胃肠道及肾脏等各系统症状。当腹部症状先于紫癜出现时,易被缺乏相关经验的临床医生误诊为急腹症、急性阑尾炎、消化道出血等疾病。现报道1例以腹部症状为主的成人混合型HSP,目的在于提高临床医生对HSP的诊治水平,避免延误患者的诊治。Henoch-Schönlein purpura (HSP), also known as IgA vasculitis, is a systemic small vasculitis mediated by IgA immune complex deposition. HSP is most common in children and less common in adults. The most common clinical skin purpura, can be accompanied by joint, gastrointestinal and kidney and other system symptoms. When the abdominal symptoms appear before purpura, it is easy to be misdiagnosed as acute abdomen, acute appendicitis, gastrointestinal bleeding and other diseases by clinicians who lack relevant experience. A case of adult mixed HSP with abdominal symptoms was reported in order to improve the diagnosis and treatment of HSP by clinicians and avoid delay in diagnosis and treatment. 展开更多
关键词 过敏性紫癜 腹部症状 混合型 成人
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替比夫定与拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效比较的Meta分析 被引量:14
3
作者 汤绍辉 吴小娟 +1 位作者 张嫚嫚 王旷靖 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期573-577,共5页
目的比较替比夫定与拉米夫定对慢性乙型肝炎患者的疗效。方法检索PUBMED、EMBASE、Web of Science、TheCochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库... 目的比较替比夫定与拉米夫定对慢性乙型肝炎患者的疗效。方法检索PUBMED、EMBASE、Web of Science、TheCochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等有关替比夫定与拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床随机对照试验,采用RevMan 4.2.10软件对入选试验进行Meta分析。结果共7项随机对照试验包含2672例慢性乙肝患者符合入选标准。Meta分析结果显示:替比夫定组的HBV DNA阴转率、HBeAg消失率、HBeAg血清学转换率、治疗应答率均明显高于拉米夫定组,RR值分别为1.46(95%CI:1.35~1.57,P〈0.00001)1、.28(95%CI:1.13~1.45,P=0.0001)1、.31(95%CI:1.14~1.52,P=0.0002)1、.31(95%CI:1.23~1.40,P〈0.00001),而病毒耐药率和病毒学突破率则显著低于拉米夫定组,RR值分别为0.58(95%CI:0.48~0.69,P〈0.00001)和0.52(95%CI:0.44~0.60,P〈0.00001)。替比夫定组的ALT复常率和一般药物不良反应率与拉米夫定组比较无统计学差异(RR=1.13,95%CI:0.99~1.27,P=0.06;RR=1.05,95%CI:1.00~1.11,P=0.07)。替比夫定组肌酸激酶(CK)升高率高于拉米夫定组,RR值为3.26(95%CI:2.28~4.67,P〈0.00001)。结论替比夫定可强效抑制乙肝病毒复制,对慢性乙型肝炎的疗效优于拉米夫定,且相对较为安全,但其引起CK值升高应予以注意。 展开更多
关键词 替比夫定 拉米夫定 随机对照试验 肝炎 乙型 慢性 META分析
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益生菌对溃疡性结肠炎诱导缓解及维持治疗疗效的Meta分析 被引量:21
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作者 汤绍辉 冯淑芬 姚艳芳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期521-525,共5页
目的评价益生菌对溃疡性结肠炎(UC)诱导缓解及维持治疗的疗效。方法检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials等外文数据库(1966-2009年8月)及中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库... 目的评价益生菌对溃疡性结肠炎(UC)诱导缓解及维持治疗的疗效。方法检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials等外文数据库(1966-2009年8月)及中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等中文数据库(1979-2009年8月)中有关益生菌对UC诱导缓解及维持治疗的临床随机对照试验,采用RevMan4.2.10软件对入选试验进行Meta分析。结果共11项随机对照试验符合入选标准,有5项纳入益生菌与安慰剂对照试验,评价临床诱导缓解率;有7项纳入益生菌与安慰剂(3项)或美沙拉嗪(4项)对照试验,评价维持治疗中的复发率(有1项试验同时入选评价诱导缓解率及维持治疗的复发率)。Meta分析结果显示:①在合用传统药物的基础上,益生菌组的临床缓解率明显高于安慰剂(OR=0.28,95%CI0.16~0.49,P<0.00001);②在UC维持治疗中,益生菌组的复发率明显低于安慰剂组(OR=0.05,95%CI0.01~0.20,P<0.0001),与美沙拉嗪组相比无统计学差异(OR=0.99,95%CI0.68~1.45,P=0.98)。结论对于活动期UC患者,在应用传统药物治疗的同时合用益生菌制剂可明显提高临床缓解率;对于缓解期UC患者,益生菌制剂可作为维持治疗药物,其疗效与美沙拉嗪相当并优于安慰剂。 展开更多
关键词 结肠炎 溃疡性 益生菌 随机对照试验 META分析
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血清GP73与AFP对肝细胞癌诊断价值的Meta分析 被引量:9
5
作者 汤绍辉 吴胜兰 +1 位作者 林正昌 张良鹏 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期747-752,共6页
目的比较血清高尔基体蛋白73(GP73)与甲胎蛋白(AFP)对肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法检索TheCochrane Central Register of Controlled Trials、PubMed、EMBase、Web of Science、Nature、Science、Springer link、中国期刊全文数据库... 目的比较血清高尔基体蛋白73(GP73)与甲胎蛋白(AFP)对肝细胞癌(HCC)的诊断价值。方法检索TheCochrane Central Register of Controlled Trials、PubMed、EMBase、Web of Science、Nature、Science、Springer link、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库2012年10月以前公开发表的中、英文文献,收集关于血清GP73以及AFP诊断HCC的相关文献,按照纳入与排除标准筛选文献并进行信息统计、科学性评估。采用Meta-Disc 1.4软件进行数据分析,通过汇总后的敏感度、特异度、似然比及受试者工作特征(ROC)曲线综合评价血清GP73与AFP对HCC的诊断价值。结果共纳入18篇文献,样本量为5279例,其中HCC 2075例,非HCC的对照组3204例。通过随机效应模型计算得出血清GP73和AFP的汇总敏感度分别为0.78(0.76~0.79)和0.55(0.53~0.57),汇总特异度分别为0.84(0.83~0.86)和0.80(0.78~0.81),汇总阳性似然比分别为5.60(4.05~7.74)和2.92(2.04~4.17),汇总阴性似然比分别为0.28(0.24~0.32)和0.58(0.51~0.67),ROC曲线下面积分别为0.8849及0.6827,Z检验显示其差异具有统计学意义(P<0.01)。结论血清GP73对HCC有较高的诊断价值,可作为替代血清AFP的重要参考指标。 展开更多
关键词 肝细胞 高尔基体蛋白73 甲胎蛋白类 META分析
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选择性血管加压素V_2受体拮抗剂治疗肝硬化腹水的Meta分析 被引量:5
6
作者 汤绍辉 张良鹏 +2 位作者 徐丽艳 张小娟 周金梅 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期574-580,共7页
目的评价选择性血管加压素V2受体拮抗剂治疗肝硬化腹水的疗效及安全性。方法检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化... 目的评价选择性血管加压素V2受体拮抗剂治疗肝硬化腹水的疗效及安全性。方法检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等关于选择性血管加压素V2受体拮抗剂治疗肝硬化腹水疗效及安全性的随机对照试验(RCT),使用RevMan5.0版软件对纳入的研究进行Meta分析。结果共9项RCT包含1884例患者符合入选标准。Meta分析结果显示:①治疗组患者体重降低幅度明显大于安慰剂组(WMD=–1.98kg,95%CI:–3.24~–0.72kg,P=0.002);治疗组患者血清钠升高幅度明显大于安慰剂组(WMD=3.74mmol/L,95%CI:0.91~6.58mmol/L,P=0.01);治疗组患者腹水恶化的比例较安慰剂组明显降低(RR=0.51,95%CI:0.34~0.77,P=0.001)。②治疗组患者尿量增加幅度明显大于安慰剂组(WMD=1437.65ml,95%CI:649.01~2226.30ml,P=0.0004);治疗组患者血肌酐与安慰剂组相比差异无统计学意义(WMD=–3.49μmol/L,95%CI:–12.54~5.56μmol/L,P=0.45)。③治疗组患者心率、收缩压、舒张压和病死率与安慰剂组相比差异无统计学意义(P〉0.05);治疗组其他不良反应发生率(P=0.003)高于安慰剂组;治疗组死亡率与安慰剂组相比差异无统计学意义(P=0.49)。结论选择性血管加压素V2受体拮抗剂可以改善肝硬化腹水和稀释性低钠血症,并且对心脏和肾脏无明显影响,不良反应相对较少,可能成为肝硬化腹水治疗的一种新选择。 展开更多
关键词 肝硬化 腹水 随机对照试验 META分析
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hAFP及hTERT双启动子调控的针对人IGF-II基因的siRNA特异性抑制人肝癌细胞生长 被引量:5
7
作者 汤绍辉 吴胜兰 +4 位作者 王旷靖 张良鹏 罗羽宏 曹明溶 周鸿科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1422-1427,共6页
目的:设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因的小干扰RNA(siRNA)序列,构建由重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法:根据siRNA设计原则,参照IGF-I... 目的:设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子II(IGF-II)基因的小干扰RNA(siRNA)序列,构建由重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控的该siRNA表达载体,观察其对肝癌细胞生长的影响。方法:根据siRNA设计原则,参照IGF-II mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染人肝癌Huh7细胞,转染24 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF-II mRNA表达量变化,筛选干扰效率最高的siRNA序列。采用PCR扩增出hAFP及hTERT启动子的核心序列,应用基因重组技术构建重组hAFP和hTERT双启动子调控的该siRNA表达载体。将上述siRNA表达载体转染Huh7细胞及L-02人正常肝细胞,观察IGF-II mRNA表达及细胞生长情况变化。结果:实时荧光定量PCR显示,siRNA3在25 nmol/L浓度时抑制效率最高,约90%。成功扩增hAFP及hTERT启动子核心序列,将其分别克隆入pGL3-Basic载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT载体;将siRNA3克隆至pGL3-hAFP-hTERT载体,构建成重组pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3表达载体。Huh7细胞IGF-II mRNA表达量显著降低,抑制效率达86%,细胞增殖受到明显抑制,G1期细胞比例显著增加;L-02细胞上述指标无明显改变。结论:成功构建双重RNA聚合酶II启动子(hAFP及hTERT双启动子)调控的针对IGF-II基因的siRNA表达载体,即pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3;该siRNA表达载体可特异性抑制IGF-II mRNA表达及肝癌细胞生长。 展开更多
关键词 hAFP hTERT双启动子 RNA干扰 人胰岛素样生长因子II 肝细胞
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益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病的荟萃分析 被引量:12
8
作者 汤绍辉 王旷靖 +1 位作者 吴小娟 张嫚嫚 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第24期2587-2592,共6页
目的:评价益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)的疗效.方法:检索PubMed、EMBASE、WebofScience、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)... 目的:评价益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)的疗效.方法:检索PubMed、EMBASE、WebofScience、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等关于益生菌制剂治疗MHE的临床随机对照试验(RCT),使用Cochrane图书馆提供的Review Manager4.3软件对入选试验进行荟萃分析.结果:共9项试验满足纳入标准而入选本研究,荟萃分析表明:与对照组相比,益生菌制剂可明显缩短数字连接试验(NCT)反应时间(WMD=13.60,95%CI:1.53-25.66,P=0.03),有效降低血氨水平(SMD=0.98,95%CI:0.25-1.71,P=0.008),减轻内毒素血症(SMD=1.03,95%CI:0.65-1.42,P<0.00001),改善ALT水平(WMD=11.72,95%CI:5.57-17.88,P=0.0002),并降低临床肝性脑病的发生率(RR=0.15,95%CI:0.05-0.41,P=0.0002).结论:益生菌制剂可改善MHE患者临床及部分生化指标,降低MHE发展为临床肝性脑病的几率,有可能成为MHE治疗的新选择. 展开更多
关键词 益生菌 轻微型肝性脑病 META分析
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大肠癌组织p14^(ARF)与p53基因变异研究 被引量:6
9
作者 汤绍辉 杨冬华 +2 位作者 黄卫 周旻 周鸿科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1191-1195,共5页
目的:观察大肠癌组织p14ARF基因遗传和表观遗传变化及p53基因突变状况,探讨两者改变的关系及p14ARF-p53通路功能破坏在大肠癌发生中的作用。方法:应用PCR、直接测序、甲基化特异PCR和RT-PCR分别检测56例原发性大肠癌及相应癌旁正常组织p... 目的:观察大肠癌组织p14ARF基因遗传和表观遗传变化及p53基因突变状况,探讨两者改变的关系及p14ARF-p53通路功能破坏在大肠癌发生中的作用。方法:应用PCR、直接测序、甲基化特异PCR和RT-PCR分别检测56例原发性大肠癌及相应癌旁正常组织p14ARF基因纯合性缺失、突变、5′CpG岛甲基化、mRNA表达及p53基因突变状况。结果:①大肠癌组织p14ARF总变异率为27%(15/56),其中1例纯合性缺失,14例5′CpG岛甲基化,未见突变发生。②15例p14ARF基因变异的大肠癌组织其相应mRNA表达阴性(13例)或低水平表达(2例),41例未发生基因变异的大肠癌组织和所有癌旁正常组织p14ARFmRNA均显示明显表达。③大肠癌组织p53突变率为48%(27/56)。④56例大肠癌组织中,12例仅发生p14ARF变异,24例仅显示p53突变,3例同时有p14ARF5′CpG岛甲基化和p53突变,17例p14ARF和p53均无变异,p14ARF-p53通路总变异率为70%(39/56),p14ARF5′CpG岛高甲基化与野生型p53状态有关(P<0·05)。⑤低分化腺癌组p14ARF变异率(44%,7/16)明显高于高中分化腺癌组(20%,8/40)(P<0·05),但两组间p53突变率无显著差异(P>0·05)。结论:①大肠癌p14ARF基因5′CpG岛高甲基化是其表达失活的主要机制;②大肠癌p14ARF基因高甲基化与p53基因突变可能是相互独立的事件,两者的失活可能各自出现于不同的大肠癌亚组中;③p14ARF高甲基化或p53突变引起的p14ARF-p53通路功能破坏在大肠癌的发生中具有重要作用。 展开更多
关键词 肠肿瘤 基因 p14^ARF 基因 p53
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人胰岛素样生长因子Ⅱ基因P1、P3启动子克隆及意义 被引量:5
10
作者 汤绍辉 杨冬华 +1 位作者 舒建昌 黄卫 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1662-1666,共5页
目的 :人胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因P1、P3启动子的克隆。方法 :根据GenBank数据库提供的IGF -Ⅱ基因DNA全序列及有关文献 ,应用巢式PCR技术从L - 0 2正常人胎肝细胞系中扩增分离出P1、P3启动子片段 ,并采用TOPOTACloningkit将... 目的 :人胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF -Ⅱ )基因P1、P3启动子的克隆。方法 :根据GenBank数据库提供的IGF -Ⅱ基因DNA全序列及有关文献 ,应用巢式PCR技术从L - 0 2正常人胎肝细胞系中扩增分离出P1、P3启动子片段 ,并采用TOPOTACloningkit将PCR产物克隆入pCR2 .1-TOPOT载体。结果 :经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定 ,克隆的IGF -Ⅱ基因P1、P3启动子片段碱基序列与GenBank数据库一致。结论 :成功克隆了IGF -II基因P1、P3启动子。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子Ⅱ 基因 启动子区(遗传学) 克隆 分子
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散发性急性戊型肝炎患者发生黄疸的危险因素 被引量:3
11
作者 汤绍辉 朱翠萍 +2 位作者 杨金英 吴胜兰 李建发 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期2393-2396,共4页
目的分析散发性急性戊型肝炎(AHE)患者发生黄疸的危险因素。方法收集467例散发性AHE患者的住院资料,通过单因素及多因素分析方法,探讨AHE患者发生黄疸的危险因素及黄疸型AHE患者为重度黄疸的危险因素。结果高浓度丙氨酸氨基转移酶、碱... 目的分析散发性急性戊型肝炎(AHE)患者发生黄疸的危险因素。方法收集467例散发性AHE患者的住院资料,通过单因素及多因素分析方法,探讨AHE患者发生黄疸的危险因素及黄疸型AHE患者为重度黄疸的危险因素。结果高浓度丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶,白蛋白(Alb)<40 g/L,凝血酶原活动度(PTA)<60%,抗戊型肝炎病毒IgM/IgG双抗体阳性是AHE患者发生黄疸的危险因素(P<0.05);高龄、Alb<40 g/L及PTA<60%是黄疸型AHE患者为重度黄疸的危险因素(P<0.05)。结论明确散发性AHE患者发生黄疸及重度黄疸的危险因素,对散发性AHE的有效诊治及预后评估具有重要的意义。 展开更多
关键词 急性戊型肝炎 黄疸 危险因素 LOGISTIC回归分析
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以问题为基础的教学法在留学生消化科实习中的应用 被引量:5
12
作者 汤绍辉 吴小娟 +1 位作者 杨晶 黄思敏 《检验医学与临床》 CAS 2012年第17期2216-2218,共3页
目的研究以问题为基础的教学法(PBL)是否对留学生教学质量的提高有促进作用,为PBL教学更好的开展提供依据。方法将PBL法引入2011级留学生在消化科的实习教学,通过出科考核成绩和调查问卷评价其教学效果。结果留学生对PBL教学的总体评价... 目的研究以问题为基础的教学法(PBL)是否对留学生教学质量的提高有促进作用,为PBL教学更好的开展提供依据。方法将PBL法引入2011级留学生在消化科的实习教学,通过出科考核成绩和调查问卷评价其教学效果。结果留学生对PBL教学的总体评价高,PBL教学能够提高留学生的学习效率、学习兴趣和综合能力。结论 PBL教学法有助于培养留学生的临床思维方式和解决问题的能力,是一种适合于消化科留学生实习的教学模式。 展开更多
关键词 PBL教学法 留学生 消化科
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乙型肝炎病毒X蛋白通过降低P4启动子甲基化水平上调人IGF-Ⅱ基因的转录 被引量:2
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作者 汤绍辉 张良鹏 +5 位作者 吴小娟 张嫚嫚 王旷靖 周鸿科 罗羽宏 曹明溶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1633-1638,共6页
目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙... 目的:构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝癌细胞株HepG2-HBx,探讨HBx对胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P4启动子甲基化水平及转录表达的影响。方法:应用基因重组技术,构建含HBx基因的重组逆转录病毒载体pBABE-puro-HBx,采用磷酸钙共沉淀法将其转染293FT包装细胞产生逆转录病毒,感染HepG2肝癌细胞,采用嘌呤霉素进行阳性克隆筛选,Western blotting鉴定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx。采用亚硫酸氢盐测序法及实时荧光定量RT-PCR检测HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化水平及P4mRNA表达水平变化。进一步将体外甲基化的人IGF-Ⅱ基因P4启动子驱动的荧光素酶报告载体pGL3-P4及含HBx基因的pCMV-tag2B-X质粒共转染HepG2肝癌细胞,采用亚硫酸氢盐测序法及双萤光素酶实验检测pGL3-P4载体上P4启动子甲基化水平及转录调控活性变化。结果:(1)经Western blotting鉴定,成功构建了稳定表达HBx蛋白的肝癌细胞株HepG2-HBx;(2)表达HBx蛋白的HepG2-HBx细胞中P4启动子甲基化CpG位点的比例(9.0%)明显低于对照细胞HepG2-control(25.0%)(P<0.01),而其P4 mRNA表达水平则为对照细胞HepG2-control的2.8倍;(3)共转染pCMV-tag2B-X质粒的HepG2细胞中pGL3-P4载体上P4启动子甲基化CpG位点的比例(60.8%)明显低于共转染对照质粒pCMV-tag2B的HepG2细胞(84.1%)(P<0.01),而前者P4启动子相对萤光素酶活性(14.12±0.89)则明显高于后者(4.61±0.76)(P<0.01)。结论:HBx蛋白可降低IGF-Ⅱ基因P4启动子甲基化水平,进而上调其转录表达。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒X蛋白 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 DNA甲基化
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人肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因P2,P4启动子克隆及序列分析 被引量:2
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作者 汤绍辉 杨冬华 +1 位作者 黄卫 舒建昌 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1635-1637,共3页
目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR... 目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR扩增L-02人胎肝细胞系(正常对照)及8例肝癌组织的IGF-ⅡP2,P4启动子,并采用TOPO TA Cloning kit将PCR产物克隆入pCR2.1-TOPO T载体。目的DNA片段和阳性重组子分别通过琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定。结果①L-02细胞及8例肝癌组织P2,P4启动子均扩增成功,长度分别为684 bp及1 246 bp;②8例肝癌组织P2,P4启动子碱基序列与L-02相应的DNA序列完全相同,未见突变、缺失等改变,经与GenBank数据库比较,结果完全一致。结论①成功克隆了IGF-ⅡP2,P4启动子;②本组肝癌组织中IGF-ⅡP2,P4启动子序列稳定,未见突变、缺失等改变,可能与IGF-Ⅱ异常表达的转录调控机制无关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 胰岛素样生长因子Ⅱ 启动子 克隆 序列分析
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肝炎后肝硬化酸碱失衡的临床特征分析 被引量:2
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作者 汤绍辉 李俊峰 +2 位作者 杨冬华 梁洁华 黄卫 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期893-895,共3页
目的探讨肝炎后肝硬化酸碱失衡的类型、特点及其影响因素,为正确认识肝硬化酸碱失衡的发生规律提供依据。方法选择住院治疗的病毒性肝炎后肝硬化患者278例进行回顾性分析,以患者的动脉血气分析及电解质资料作为判断酸碱失衡的指标,结合... 目的探讨肝炎后肝硬化酸碱失衡的类型、特点及其影响因素,为正确认识肝硬化酸碱失衡的发生规律提供依据。方法选择住院治疗的病毒性肝炎后肝硬化患者278例进行回顾性分析,以患者的动脉血气分析及电解质资料作为判断酸碱失衡的指标,结合肝功能分析其影响因素。结果①肝炎后肝硬化酸碱失衡的发生率为71.6%(199/278),其中呼碱合并代碱、单纯性呼碱、呼碱合并代酸较为常见,分别占23%、14.7%及11.5%;②呼碱为主酸碱失衡组平均PaO2、平均血清白蛋白浓度及平均血清总蛋白浓度均明显低于无酸碱失衡组(P=0.012,P=0.001,P=0.021),代碱为主酸碱失衡组平均PaO2、平均血清白蛋白浓度、平均血清总蛋白浓度及平均血钾浓度均明显低于无酸碱失衡组(P=0.024,P=0.001,P=0.017,P=0.002),代酸为主酸碱失衡组仅平均PaO2明显低于无酸碱失衡组(P=0.044)。结论①酸碱失衡是病毒性肝炎后肝硬化极为常见的并发症之一,其中以呼碱合并代碱的发生率最高;②以呼碱为主的酸碱失衡可能与PaO2、血清白蛋白与总蛋白浓度的降低有关,以代碱为主的酸碱失衡可能与PaO2、血清白蛋白与总蛋白浓度以及血钾浓度的降低均有关,以代酸为主的酸碱失衡可能仅与低PaO2有关。 展开更多
关键词 肝硬化 酸碱失衡 临床特征
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幽门螺杆菌CagA及VacA基因的研究进展 被引量:7
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作者 汤绍辉 罗和生 《世界华人消化杂志》 CAS 1999年第10期885-886,共2页
关键词 幽门螺杆菌 CAGA基因 VACA基因
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胃癌组织CDKN2A基因座p14^(ARF)基因变异及意义 被引量:1
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作者 汤绍辉 李君武 +3 位作者 罗和生 于皆平 杨冬华 舒建昌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期379-382,共4页
目的 :探讨胃癌组织p14ARF基因变异及其意义。方法 :应用PCR、PCR -SSCP、PCR甲基化分析法和RT -PCR分别检测 48例胃癌及癌旁组织中p14ARF基因纯合性缺失、突变、CpG岛甲基化及其mRNA表达状况。结果 :①胃癌组织p14ARF基因纯合性缺失率... 目的 :探讨胃癌组织p14ARF基因变异及其意义。方法 :应用PCR、PCR -SSCP、PCR甲基化分析法和RT -PCR分别检测 48例胃癌及癌旁组织中p14ARF基因纯合性缺失、突变、CpG岛甲基化及其mRNA表达状况。结果 :①胃癌组织p14ARF基因纯合性缺失率为 3 1 3 % (15 / 48) ,癌旁组织均未见纯合性缺失。② 3 3例无纯合性缺失的胃癌及癌旁组织均未见p14ARF基因点突变。③胃癌组织p14ARF基因甲基化率为 47 9% (2 3 / 48) ,癌旁组织仅 2例甲基化 ,两者差异有显著 (P <0 0 1)。④ 45 8% (2 2 / 48)的胃癌组织p14ARFmRNA无表达。 3例外显子E1β和E2共甲基化者p14ARFmRNA均无表达 (10 0 % ) ,2 0例单纯E2甲基化者仅 3例无表达 (15 % ) ,两者差异有显著 (P <0 0 5 )。结论 :胃癌中p14ARF基因失活多由纯合性缺失和 5’CpG岛甲基化所致 。 展开更多
关键词 CDKN2A P14^ARF 基因变异 胃肿瘤
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HBx蛋白对IGF-II基因P4启动子活性的影响 被引量:1
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作者 汤绍辉 曲春晖 +2 位作者 杨敏英 罗羽宏 杨冬华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期7-11,共5页
目的:构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)表达载体pEYFP-C1-X及人IGF-II基因P4启动子调控的荧光素酶报告载体pGL3-P4,并初步探讨HBx对IGF-II基因P4启动子活性的影响。方法:应用基因重组技术,将HBx基因及P4启动子分别克隆入pEYFP-C1及pGL3-Basi... 目的:构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)表达载体pEYFP-C1-X及人IGF-II基因P4启动子调控的荧光素酶报告载体pGL3-P4,并初步探讨HBx对IGF-II基因P4启动子活性的影响。方法:应用基因重组技术,将HBx基因及P4启动子分别克隆入pEYFP-C1及pGL3-Basic载体,构建重组质粒pEYFP-C1-X及pGL3-P4;将pEYFP-C1-X稳定转染HepG2细胞,进行G418筛选;将体外甲基化pGL3-P4瞬时转染HepG2-EYFP-X细胞,采用双荧光素酶实验检测P4启动子的转录调控活性。结果:(1)经酶切及测序鉴定,重组质粒中的目的片段HBx和P4启动子的大小分别为465bp及1246bp,序列与GenBank数据库一致。(2)获得了表达HBx的细胞系HepG2-EYFP-X,在荧光显微镜下呈现黄绿色荧光。(3)转染HepG2-EYFP-X细胞的甲基化P4启动子的荧光素酶活性明显高于其对照细胞HepG2-EYFP(P<0.01)。结论:HBx可增加P4启动子的转录活性。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒X蛋白 P4启动子 转录活性
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胃癌组织p16及p18基因变异 被引量:3
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作者 汤绍辉 罗和生 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第1期91-92,共2页
p16基因又名多肿瘤抑制基因(MTS1),1994年首先由Kamb et al克隆成功。此基因包含3个外显子及2个内含子,位于人9号染色体短臂2区1带(9p21),编码P16蛋白,在人类多种肿瘤中存在纯合性缺失及突变等变异,但胃癌中的改变情况国内外报道较少。... p16基因又名多肿瘤抑制基因(MTS1),1994年首先由Kamb et al克隆成功。此基因包含3个外显子及2个内含子,位于人9号染色体短臂2区1带(9p21),编码P16蛋白,在人类多种肿瘤中存在纯合性缺失及突变等变异,但胃癌中的改变情况国内外报道较少。p18基因是一个新近发现的与p15,p16基因同属一个基因家庭的抑癌基因,在结构和功能上与p15,p16基因具有高度同源性,但在多种人类癌肿中其变异少见,它在胃癌中的改变情况目前国内外尚未见报道。本研究通过PCR及银染PCR-SSCP技术检测胃癌组织p16基因外显子E1a,E1β,E2及p18基因外显子E1的纯合性缺失及突变情况。 1 材料和方法 1.1材料 43例胃癌患者的新鲜癌手术标本、相应的癌旁正常组织置-70℃冰箱中保存备用。本组病例中男27例。 展开更多
关键词 胃癌 P16基因 抑制基因 遗传学
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IGFs家族基因在肝细胞癌变中的分子机制 被引量:3
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作者 汤绍辉 《国外医学(消化系疾病分册)》 CAS 2003年第2期108-111,共4页
IGFs家族包括IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF-Ⅰ受体和 IGF-Ⅱ受体以及IGF结合蛋白。近年研究发现,IGFs家族基因异常表达在肝细胞癌发生发展过程中具有重要作用,但确切的机制尚不明确。本文从自分泌和/或旁分泌生长调控机制、抑制细胞凋亡、刺激... IGFs家族包括IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGF-Ⅰ受体和 IGF-Ⅱ受体以及IGF结合蛋白。近年研究发现,IGFs家族基因异常表达在肝细胞癌发生发展过程中具有重要作用,但确切的机制尚不明确。本文从自分泌和/或旁分泌生长调控机制、抑制细胞凋亡、刺激肿瘤血管形成三个方面探讨IGF-Ⅱ及其受体IGF-ⅠR和IGF-ⅡR在肝细胞恶性转化过程中的分子机制。 展开更多
关键词 肝癌 人胰岛素样生长因子Ⅱ 人胰岛素样生长因子Ⅰ受体 人胰岛素样生长因子Ⅱ受体 分子机制
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