离子交换树脂法规模化生产乳源酪蛋白糖巨肽及其对流感病毒的血凝抑制活性

目的:优化规模化生产乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)的工艺条件,并探讨其对流感病毒的血凝抑制能力。方法:以阴离子交换树脂为分离介质,唾液酸含量为产品的活性检测指标,分别从上样体积、上样流量、洗脱液浓度、洗脱液体积和树脂使用周期5个工艺条件,在前期小试和中试的基础上,考察从乳清粉中规模化生产CGMP;同时利用血球凝集抑制试验验证产品CGMP对流感病毒的抑制活性。结果:优化的CGMP产品技术路线为上样体积3BV、上样流量0.8 L/min、洗脱体积1BV、洗脱液浓度0.6 mol/L、树脂适宜使用周期4次。该工艺条件下处理乳清粉溶液体积为108 L(2160 g)、树脂36 L,得到CGMP产品21.183 g,得率为0.981 g/100 g,产品纯度为89.032%,回收率为51.972%,唾液酸含量为21.503 g/100 g,蛋白CGMP产品对流感病毒A(H1N1)和流感病毒B的最低抑制质量浓度分别为1.0000,1.2500 mg/mL。结论:利用优化的技术路线生产获得CGMP产品的纯度和唾液酸含量均优于市售商品CGMP,且对流感病毒有明显的抑制作用。

乳清蛋白粉与豆乳不同质量比对凝固型沙棘酸奶品质的影响

以1 L鲜牛乳质量为基准,向其中加入乳清蛋白粉(WPP)、豆乳、沙棘果汁及菌种,混合发酵制备凝固型沙棘酸奶,探究WPP与豆乳不同质量比(WPP与豆乳总质量100 g,A组4∶0,B组3∶1,C组2∶2,D组1∶3,E组0∶4,F组不添加WPP和豆乳,G组不加沙棘果汁、WPP和豆乳)对凝固型沙棘酸奶理化特性、微观结构、质构特性及感官品质的影响。结果表明:B、C、D、E组酸奶发酵时间约为5 h,A、F、G组酸奶发酵时间约为6 h;各组酸奶脂肪含量差异不大,E组酸奶蛋白质含量最高,为4.55%;A组酸奶的持水力最高,为98.02%±0.05%;C组酸奶(硬度0.45 N±0.03 N,胶着性0.47 N±0.02 N,咀嚼性6.32±0.41,黏附性0.57 N·s±0.07 N·s)的质地和微观结构最佳,且C组在贮存3 d时的感官评分最高,为88.8。

从人体肠道菌群及脂代谢的角度比较水苏糖与益生菌纠正肠道失衡的能力

人体肠道菌群与健康息息相关,一旦肠道菌群失调会导致肠道功能紊乱,引发多种肠道疾病。本实验通过不同肠道疾病人群服用水苏糖、复合益生菌(compound probiotics,CPb)和合生元MF-13,利用Ion Torrent PGM™测序平台等手段,重点关注粪便中肠道菌群结构以及胆固醇和胆汁酸含量的变化,探讨3种微生态制剂干预过程中志愿者肠道菌群结构和脂代谢的变化情况。结果显示,不同肠道疾病人群经微生态制剂干预后,分析获得1067个操作分类单元(operational taxonomic units,OTU);优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes),二者占到了总序列数的91.65%,其中拟杆菌门(Bacteroidetes)约占总序列数的70.10%,其门下的拟杆菌属(Bacteroides)和普雷沃氏菌属(Prevotella)为优势菌属,分别占总序列数的33.1%和33.8%。在门水平上,水苏糖能促进拟杆菌门而抑制厚壁菌门菌群的增殖,CPb对各菌门丰度变化趋势的影响不明显,MF-13对变形菌门和放线菌门菌群的增殖有促进作用;3组微生态制剂干预前后菌属丰度变化结果显示,水苏糖引起便秘和失眠样本中的萨特菌属的丰度明显降低,CPb引起腹泻样本中萨特菌属显著降低;MF-13引起Parabacteroides的丰度升高。通过对肠道菌群多样性分析发现,仅Chao1指数在MF-13干预组在干预前期明显升高,其他多样性指数无明显性变化。对肠道菌群结构变化进行聚类和无度量多维标定(non-metric multi-dimensional scaling,NMDS)分析,结果显示大部分样本在微生态制剂干预过程中菌群结构都产生变化,各群体间菌群结构有相互交叠的趋势。利用Metastat统计学分析个体之间存在显著差异的肠道菌群,发现各微生态制剂干预前后整体OTUs丰度无明显变化,在志愿者个体之间差异较大。MF-13对肠道胆固醇和胆汁酸的排出有显著促进作用(P<0.05)。结论:水苏糖对志愿者肠道菌群结构的影响显著,而CPb和MF-13的影响不显著,但MF-13能够促进肠道胆固醇和胆汁酸的排放,有利于肠道胆固醇的代谢,但干预的持续性不明显。

新工科背景下“发酵工程”课程思政典型案例教学

“新工科”建设是为了培养创新能力、实践能力和具备国际竞争力的高素质复合型人才,来满足未来新兴产业的需求。在此背景下,文章以“发酵工程”课程为例,以学生为中心,融合课程思政,加强思政教育。通过充分挖掘“发酵工程”课程思政元素,以“工业微生物菌种选育”、“发酵动力学分析及应用”和“制药行业主流产品的生产-青霉素发酵”3个典型教学案例,探讨思政典型案例教学的实现途径,为生物制药专业相关课程思政教学提供参考。

白地霉S13固态发酵白酒条件优化

为提高固态发酵法酿造白酒中的总酯含量和出酒率,本试验以前期研究保存的白地霉(Geotrichum candidum)S13及白酒曲为试验菌种,以总酯含量和出酒率为检测指标,采用单因素、响应面试验对固态发酵法酿造白酒发酵条件进行优化。结果表明,最优发酵条件为发酵时间26 d,初始pH值6.2,白地霉接种量14%、发酵温度28℃,白酒曲添加量0.5%。在此优化条件下,白酒澄清透明,无杂质沉淀,口感醇厚绵甜,香味协调,总酯含量为2.12 g/L,出酒率为20.42%,酒精度达到56%vol,感官评分为82.7分。

天然添加剂在肉类制品中的应用

介绍了肉类制品中常用的天然添加剂着色剂、增稠剂、调味剂、抗氧化剂、防腐剂等几个大类。并详细介绍天然添加剂所包括的常见品种及其应用概况。

流式细胞术分析与评价酸奶菌种对模拟胃酸和胆汁盐的耐受力

研究传统酸奶菌种对人体胃酸和胆汁盐的耐受性,对评价酸奶的益生性具有重要意义。实验选取普通酸奶中的嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌作为研究对象,模拟胃肠环境以探讨所选两种菌株在不同pH值和不同质量浓度脱胆盐下的耐受力,用流式细胞仪(FCM)结合羧基荧光素二醋酸酯(5-(6)-carboxyfluorescein diacetate,5(6)-cFDA)和碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料评价其活力。结果表明:pH2.0时,菌体细胞活性较低,其活细胞标记率仅为41.8%,在pH3.0、4.0、5.0、6.0、7.0时,活细胞标记率越来越高,对其抑制性的影响逐渐减弱;在1g/100mL的脱胆盐(DBS)中,活细胞标记率为48.7%,而在0.5、0.25、0.1、0.05g/100mL的DBS中时,活细胞的标记率越来越高;同时比较FCM与平板菌落计数法检测菌体细胞的耐受水平。实验证实酸奶菌种能耐受pH值为5.0～7.0的胃酸和0.05～0.5g/100mL的DBS;FCM检测的菌体细胞的状况更能恰当地反映发酵酸奶品质的优劣。

5(6)-cFDA标记乳酸菌细胞的影响因素

选用常规发酵乳菌种,探讨不同溶剂、不同浓度的羧基荧光素二醋酸酯(5-(6)-Carboxyfluorescein diacetate,5(6)-cFDA)标记乳酸菌细胞的影响因素。结果显示:水、PBS和二甲基亚砜(DMSO)配制的5(6)-cFDA标记初期,细胞标记率分别为94.8%、95.2%和99.77%,放置30d后细胞标记效果分别下降到51.53%、55.6%和96.7%;每毫升菌悬液加60μL的5mg/mL 5(6)-cFDA(相当于终浓度为6.52×10-7mol/L),其荧光强度与5(6)-cFDA浓度成正比,且标记效果最理想。实验还证实了1×106～1×107cells/mL是流式细胞仪检测细胞活性较适合的浓度,且标记率较高;在pH7.0的条件下对细胞活性和发光强度影响最小,其标记率达到98.3%。

功能性低聚糖的发展及其生理功能

主要概括了功能性低聚糖在国内外的发展现状以及对人体的主要益生功能,以期为功能性低聚糖的深入研究和在生产中的应用提供一定的参考。

乳酸菌胞外多糖的结构及益生功能研究进展

综述了乳酸菌胞外多糖的化学组成、结构以及对人类的益生功能。乳酸菌胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)是一种高分子聚合物,它的生物活性依赖其结构和性质,揭示其结构与功能的关系是目前研究的热点。本文综合国内外的研究报告,概述了乳酸菌胞外多糖的结构特性和益生功能,对其他生物活性物质的研究具有重要意义。

响应面法优化德氏乳杆菌保加利亚亚种NCFB2772发酵生产胞外多糖的培养条件优化

在单因素试验的基础上,采用响应面分析法,优化初始pH值、接种量、发酵温度3个主要培养条件对徳氏乳杆菌保加利亚亚种NCFB2772(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus NCFB2772,L.b NCFB2772)高产乳酸菌胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)的影响。结果表明,初始pH6.5、接种量4.5%、发酵温度42℃、L.b NCFB2772合成EPS的量达到最大(907.8mg/L)。各因素对响应值的影响可用回归方程Y=-287.08+39.83C1+11.44C2+18.54C3表示。

高校生物化学实验教学改革初探

实验教学的改革和创新永无止境。本文通过分析传统的生物化学实验教学存在的问题,从培养学生的创新能力和探索精神出发,提出生物化学实验教学改革的对策与措施,冀望提高生物化学实验教学质量。

橘皮黄色素的提取工艺优化及比较

采用浸渍法和索氏提取法提取柑橘皮中的黄色素,确定其最佳工艺条件。结果表明,浸渍法的最佳工艺条件是:以95%乙醇为提取剂,50℃浸渍3次,每次5h,共需15h;以相同的提取溶剂和稀释倍数,采用索氏提取法,在95℃水浴温度下,只需回流2h,就能优于浸渍法的提取效果。

L.burlgaricus NCFB2772高产胞外多糖营养条件的优化

为了提高德氏乳杆菌保加利亚亚种NCFB2772(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus NCFB2772,L.burlgaricus NCFB2772)胞外多糖(EPS)的产量,在该菌株高产EPS发酵条件优化前期研究的基础上,进一步从基础培养基的筛选、碳氮源的优化和促生长因子三方面对该菌株高产EPS的营养条件进行优化。结果表明:在筛选的基础培养基MRS2中添加20 g/L的果糖、10 g/L的蛋白胨(进一步优化二者之比为1.5∶1.0)、6%的苹果汁,L.burlgaricus NCFB2772产EPS的量(854.5 mg/L)和活菌数(未显示)都达到最高,比优化前EPS的产量(460 mg/L)提高了近1倍。

茵陈酸奶的工艺研究

以鲜乳和茵陈为主要原料,在单因素试验的基础上,从蔗糖添加量、鲜乳添加量和茵陈汁添加量三方面进行优化,确定茵陈酸奶最佳工艺参数:茵陈汁添加量5%,蔗糖添加量6%,鲜乳添加量90%。

HPLC测定中添加剂前处理方法的探讨

探讨了HPLC测定酸奶中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的前处理方法,选用在文献中曾用的4种化学沉淀剂,通过实验与传统的蛋白质沉淀剂相对比后,得出无水乙醇可替代质量浓度106 g/L亚铁氰化钾溶液-219 g/L乙酸锌溶液的结论。采用C18反相柱,以甲醇∶乙酸铵(质量浓度1.54 g/L)=5∶95为流动相,紫外检测器在230 nm处检测。通过对两种乳制品的对比实验,用无水乙醇沉淀蛋白质效果好,测定结果与传统方法最相近,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的相对标准偏差分别是1.091%,1.314%,1.019%,平均加标回收率分别是98.7%,102.7%,98.4%。实验结果表明,该方法操作简便、快速,精密度和准确度较好。

拟南芥PHOT1基因的超表达载体构建及遗传转化

蓝光受体向光素PHOT1和PHOT2以光强依赖方式介导植物向光性反应、叶绿体运动、气孔开放、叶片的伸展及定位生长等许多生理反应,并且在不同的生理反应过程中,PHOT1和PHOT2可能采用不同的信号路径实现其功能互补。为更深入地研究其介导的下胚轴向光弯曲反应机制,构建了拟南芥PHOT1基因超表达载体,测序正确后,利用农杆菌介导花序转化法,分别转入拟南芥野生型gl1及其phot2突变体中,利用潮霉素B对转基因株系进行了初步筛选,并对T3代纯合转基因植株的PHOT1表达量进行了RT-PCR分析,筛选出了比对照gl1植株高16倍左右的PHOT1-OX株系,比对照phot2突变体植株高约12倍的phot2PHOT1-OX株系,为进一步对PHOT1基因功能进行研究提供良好材料。

气相色谱法测定白酒中的甲醇和杂醇油

采用GDX-102气相色谱玻璃填充柱直接进样、氢火焰光度检测器（FID）测定,建立了一种用气相色谱法测定白酒中甲醇和杂醇油含量的分析方法。精密度的相对标准偏差（RSD）：甲醇是2.03%、异丁醇是2.35%、异戊醇是1.05%,检出限：甲醇是0.00005g/100mL、异丁醇是0.00004g/100mL、异戊醇是0.00002g/100mL,样品加标平均回收率在91.7%-97.3%之间,并且甲醇及杂醇油浓度在0.00-1.00g/L内有很好的线性范围,相关系数均在0.9990以上,实验结果表明该方法简便、快速、准确,适用于白酒中甲醇和杂醇油的同时分析测定。

如何在药物制剂实验教学中培养学生的创新能力

为了培养学生的实验技能和创新能力,分析了传统实验教学中存在的问题,对现行药物制剂实验教学进行改革并实践。实践证明现行实验教学模式充分调动了学生的学习主动性,提高了实验操作技能和创造思维能力,而且培育了学生团队合作意识,取得了较好的教学效果。

提高分子生物学教学效果的探索与实践

结合笔者教学实践,总结了几点提高分子生物学教学效果的建议。