治疗自身免疫性疾病多肽药物的研究进展

近年来研究发现,靶向于特异表位的多肽药物治疗自身免疫病,可避免传统药物的非特异性免疫抑制,在自身免疫病动物模型及临床试验中显示出较好的治疗效果。该文从抑制自身免疫反应的候选多肽来源及其作用机制等方面,综述了近年来治疗自身免疫病多肽药物的研究进展和趋势,为全面深入了解自身免疫病免疫耐受机制及寻求新的治疗方法提供理论依据。

咯利普兰对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的抑制作用

目的探讨磷酸二酯酶4(PDE4)抑制剂治疗急性肺损伤的作用机制。方法气道内滴入脂多糖3 mg.kg-1制备小鼠急性肺损伤模型,10 min后一次性ip不同剂量咯利普兰或地塞米松;同时设假手术和模型组。给药6 h后处死小鼠,观察肺湿重/干重比值和肺组织的病理改变;用细胞形态学方法计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和中性粒细胞;考马斯亮蓝法测定BALF总蛋白含量;髓过氧化物酶(MPO)活性测定试剂盒测定肺组织匀浆MPO活性;ELISA法测定肺组织匀浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;高效液相色谱法测定肺组织匀浆中cAMP-PDE和PDE4活性。结果小鼠气道内滴入脂多糖6 h后,与假手术组比较,模型组肺湿重/干重比值明显升高;肺组织病理观察可见肺血管和气道周围有大量中性粒细胞浸润;BALF中白细胞和中性粒细胞增多,蛋白含量增加;肺组织MPO活性、TNF-α水平、cAMP-PDE和PDE4活性升高。与模型组比较,咯利普兰(0.1,0.3及1.0 mg.kg-1)和地塞米松(0.5 mg.kg-1)可降低肺组织湿重/干重比值,降低BALF中白细胞总数、中性粒细胞数目和蛋白含量,改善肺组织病理变化,肺组织中MPO活性、TNF-α含量、cAMP-PDE和PDE4活性亦明显降低。结论咯利普兰治疗急性肺损伤的作用机制可能与抑制PDE4活性、抑制中性粒细胞黏附和趋化及降低TNF-α水平有关。

纳米药物免疫调节治疗的研究进展

近年来研究发现,纳米粒子技术平台为复杂的、难治性的自身免疫或炎症性疾病的治疗带来一场新的技术革命,纳米粒子结合特异的自身抗原能重建多种自身免疫病模型的外周免疫耐受,减少免疫病理损伤。该文从纳米粒子的理化特征、给药途径以及诱导或重建免疫耐受的作用与机制等方面,综述了近年来自身免疫或炎症性疾病纳米药物免疫调节治疗的研究进展和趋势,为寻求新的治疗方法治疗炎症相关疾病提供理论基础。

双光子激发荧光各向异性度的成像

荧光各向异性度(fluorescence anisotropy) 测量可以获得荧光分子的转动速度信息,进而了解分子质量、结构、以及与周边环境的相互作用情况. 围绕一台双光子激发扫描荧光成像系统,通过改变外光路和图像记录与处理程序,从而实现了双光子激发荧光各向异性度成像,并针对一些典型样品和体系,展示了该方法的应用. 实验中观察了FITC荧光分子、FITC结合的CD44抗体分子及与肿瘤细胞表面受体结合的FITC-CD44抗体分子. 测量结果表明,不同分子质量、不同微观环境状态下的荧光分子,其各向异性度大小不同,在各向异性度图中能够被明显区分. 荧光各向异性度成像能够定量测量样品微区的各向异性度值,并以二维图像的形式直观表达,是各向异性度测量与成像技术的良好结合.

郑州航空港经济综合实验区建设与郑汴许成长三角空间组织研究

推进城市间产业-功能合作是中原经济区核心区强化区域带动能力、应对日趋激烈的全球/区域竞争的关键。分析郑汴许三市自然地理条件、资源、产业和基础设施后指出,郑汴许成长三角形成发展的前提条件和基础已经具备,构建郑汴许成长三角具有可能性和必然性。今后三市以郑州航空港经济综合实验区为聚合中心的互利式经济合作的深入推进,将对本区域空间成长产生深刻影响。借鉴大都市区劳动空间分工理论,分析三市中心城市人口规模、郊区县市工业增加值和两种劳动空间分工形式后指出,郑汴许中心城市将加速向成熟大都市区形态演变,并对此过程中城市空间的发展趋势进行了分析。最后,在实验区"三区两廊"空间发展框架下,把实验区今后发展可能影响到的周边相邻地区纳入进来统筹考虑其空间组织,对于推动郑汴许成长三角"一个核心、三个大都市区"和"一区、一带、一廊、一通道"整体空间结构的形成、构筑郑汴许区域一体化的城市体系将发挥积极作用。

Epac/Rap1信号通路在急性肺损伤中作用的研究进展

急性肺损伤(ALI)中炎症信号通路的失调控以及炎症因子平衡紊乱是其发生和发展的重要原因。能直接被cAMP活化的交换蛋白(Epac)在调节肺部气道炎症和细胞增殖方面是一个新的效应器,新的关于cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA)非依赖性通路研究表明,cAMP/Epac/Rap1信号通路参与并行使许多类型细胞的功能,包括细胞分泌、细胞间黏附和连接、细胞凋亡、细胞增殖和分化等。cAMP能通过Epac/Rap1信号通路参与ALI的发病过程,Epac/Rap1信号通路是ALI防治的潜在靶点。本文综述Epac/Rap1信号通路在肺部相关炎症及急性肺损伤中作用机制的国内外研究进展。

淮南地区幽门螺杆菌对克拉霉素耐药性及其耐药分子机制的研究

目的探讨淮南地区幽门螺杆菌(Helimbacter pylori,Hp)对克拉霉素耐药情况及其耐药分子机制。方法用E-test和琼脂稀释法进行克拉霉素药敏试验,提取Hp基因组DNA,PCR扩增Hp 23S rRNA基因,并用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析克拉霉素耐药机制。结果淮南地区克拉霉素耐药率为9.15%(27/141),克拉霉素耐药与性别、年龄无关。PCR从Hp基因组DNA中扩增出425bp的Hp 23S rRNA基因,PCR-RFLP检测,27株耐药菌株均可被Bbsl酶切成332、93bp两个片段,未检测到被BsaⅠ酶切的耐药菌株。结论淮南地区克拉霉素耐药率较高,耐药菌株存在23S rRNA基因功能区V2143位点A-G突变。

淮南地区幽门螺杆菌iceA1、babA2基因分布及其细胞免疫功能研究

目的研究淮南地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori,Hp)iceA1、babA2基因分布特征及其细胞免疫功能。方法对244例有消化道症状者行胃镜检查,并在胃窦部取活检粘膜作Hp的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出的Hp菌株的iceA1、babA2基因,并采用生物素-链霉亲和素(biotin-sreptavidin,BSA)系统检测患者外周血T细胞亚型,ELISA法检测其细胞因子。结果244例中,检出Hp菌株185例,其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠球部溃疡阳性率分别为70.65%(65/92)、74.14%(43/58)、85.25%(52/61)及75.76%(25/33);基因测定结果显示,185株分离株中,79.46%(147/185)含iceA1基因,75.14%(139/185)含babA2基因;其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠球部溃疡iceA1、babA2基因检出率分别为66.15%(43/65)、56.92%(37/65);79.07%(34/43)、74.42%(32/43);90.38%(47/52)、88.46%(46/52);92.00%(23/25)、96.00%(24/25);差异均具显著性(P<0.01)。细胞免疫功能检测,iceA1+、babA2+患者的CD+3、CD+4、CD+4/CD+8、IL-2下降,IL-6、IL-8水平升高,差异有显著性(P<0.001)。结论淮南地区Hp感染多为iceA1+、babA2+菌株,iceA1+、babA2+Hp菌株为高毒力菌株,是致消化性溃疡的重要因素;iceA1+、BabA2+菌株可使患者细胞免疫功能下降,引起患者以Th1为主的浸润反应。

球形幽门螺杆菌vacA基因表达质粒构建及表达

目的构建球形幽门螺杆菌vacA基因的重组表达质粒,初步观察其在E.coli中的表达。方法采用亚克隆技术,用BamHⅠ和SacⅠ从重组质粒pMD-18T-vacA上切下vacA基因,插入表达载体pET32a(+)质粒,转化大肠埃希菌BL21,在氨苄青霉素阳性的LB平板上筛选阳性重组子,并经双酶切及PCR扩增鉴定。重组质粒pET32a(+)-vacA转化大肠埃希菌,(IPTG)诱导表达后进行(SDS-PAGE)电泳和凝胶扫描定量分析。结果重组质粒酶切和PCR鉴定与预期结果相符,成功构建携带vacA基因的重组原核表达质粒pET32a(+)-vacA。核酸序列测定及同源性分析证实,表达质粒pET32a(+)-cagA中所含vacA基因与GenBank中的vacA序列同源性达到99.2%。vacA基因在大肠埃希菌中诱导表达后获得约156 kD蛋白,蛋白含量占全菌体蛋白含量15.5%。结论成功构建球形H.pylori vacA基因重组表达质粒,并获得高效表达,为研究该基因蛋白的生物学特性及DNA疫苗研制奠定了基础。

消化性溃疡与幽门螺杆菌L型感染相关性研究

目的 探讨消化性溃疡 (PU)与幽门螺杆菌 L型 (HP- L )感染的关系。方法 取 386例 PU患者胃窦、胃体及十二指肠粘膜组织 ,常规切片后以革兰氏染色和免疫组化染色镜检 HP- L 型细菌 ,并计算检出率。结果 HP- L 型检出率为 5 3.37% ,其中革兰氏染色和免疫组化染色检出率分别为 5 6 .73%、5 4 .2 9% ,差异无显著性(P>0 .0 5 ) ;胃溃疡、十二指肠溃疡 HP- L 型检出率分别为 5 8.33%、5 5 .5 0 % ,差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;男女患者HP- L 检出率前者 (6 1.18% )明显高于后者 (38.17% ) (P<0 .0 1) ;30岁以下、30岁～、4 0岁～、5 0岁～患者 HP- L检出率依次为 32 .0 5 %、4 1.94 %、5 9.18%、71.79% ,差异显著 (P<0 .0 1)。结论 PU患者 Hp- L型感染率较高 ,且男性高于女性 ,HP- L型检出率随年龄增长而增高。 PU患者 HP- L型变异可能是导致溃疡迁延不愈。

淮南地区学生幽门螺杆菌感染情况

目的 了解淮南地区学生幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染情况,为防治消化系统疾病提供依据。方法 采用ELISA法检测淮南地区不同教育层次学生血清抗H.pylori-IgG水平。结果 共采集学生血清标本1 091份,H.pylori-IgG阳性率为46.0％;幼儿、小学生、中学生和大学生的阳性率依次为28.3％,38.7％,52.6％,59.0％,差异有显著性(P<0.01);矿区、城、乡学生血清抗H.pylori-IgG阳性率分别为64.3％,32.8％,45.6％,差异有显著性(P<0.01);幽门螺杆菌感染者以无症状为主,仅少数出现腹痛、腹胀、反酸及呕吐等症状。结论 H.pylori感染在该地区学生中较为多见,且感染率随年龄增长而增加,矿区、农村较城市多见。

日本血吸虫表位肽-DNA颗粒性疫苗对小鼠免疫应答的影响

采用已构建的日本血吸虫Si22．6抗原CTL、Th和B细胞表位肽-DNA颗粒性疫苗（PDDV）及其混合疫苗免疫C57BL／6小鼠。36只小鼠随机均分6组，即18K对照组（[K]18-空质粒PDDV）、PBS对照组、C组（C-PDDV）、T组（T-PDDV）、B组（B-PDDV）和C-T-B组（C-PDDV、T-PDDV和B-PDDV等量混合），每鼠分别在第0、3和6周麻醉下经尾脊部皮下注射100μlPDDV（含10μgDNA和28μg肽），对照组注射等量的空质粒DNA和[K]18肽或PBS。末次免疫后7d，脱颈处死，制备脾细胞悬液，经日本血吸虫成虫抗原（SWA）刺激后根据，^3H标记的胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR）检测脾细胞增殖反应，ELISA法检测脾细胞培养上清中γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素-4（IL-4）的含量。EUSA结果显示，T组小鼠脾细胞中IFN-γ的含量[（76．0±11．2）ps／ml]，高于PBS[（13．0±2．1）pg／ml]和18K对照组[（14．0±3．2）pg／ml]（P〈0．01），T组和C—T-B组小鼠脾细胞中IL-4的水平分别为（152．0±21．1）和（86．0±12．2）pg／ml，高于其他组（P〈0．01或P〈0．05）。T组小鼠脾细胞经SWA刺激后，增殖反应明显高于PBS和18K对照组（p〈0．01）；而C-T-B组小鼠脾细胞的增殖反应与PBS和18K对照组相比．差异无统计学意义（P〉0．05）。说明T-PDDV和C-T-B混合PDDV诱导的免疫应答强于单价的C-PDDV和B-PDDV。

挑战与冲突下的景区修建性详细规划对策探析——以临潭县冶木峡景区为例

以临潭县冶木峡景区招标项目的旅游修建性详细规划为例,以景区发展的外部环境和内部条件的分析和评价为基础,通过对规划中面临的挑战和冲突的把握和认识,经过多次"头脑风暴"的不断搜寻、验证和思考,逐步明确为若干个相对清晰的规划目标和规划理念。并从景区发展的总体定位、空间结构、用地竖向、道路系统、传统建筑风格与风貌、生态环境保护等方面,针对上述挑战和冲突,提出了规划对策。最后,针对景区修建性详细规划中面临的普遍问题,提出通过"规划预研究"的形式解决景区上位规划和相关规划缺失的矛盾;并对设计中对待传统文化和建筑风格的基本态度提出了看法。

球形幽门螺杆菌vacA基因的克隆及序列测定

目的:克隆球形幽门螺杆菌(HpC)vacA基因全长片段,并进行序列分析。方法:采用亚抑菌浓度的抗生素作用,使幽门螺杆菌(Hp)标准株NCTC11637发生球形变异,收集球形Hp。从HpC基因组DNA中特异扩增出vacA基因片段,扩增的目的片段经纯化回收后克隆到pMD-18T中,转化人大肠杆菌JMl09。阳性重组质粒用PCR及双酶切鉴定,并进行序列测定。结果:从HpC基因组DNA中扩增出3 888 bp的vacA基因,构建重组质粒pMD-18T-vacA,酶切产物的大小与预期相符。测序结果显示,HpC与已公布的Hp vacA基因序列的同源性达99.8％。结论:成功地对HpC、vacA基因进行体外扩增及构建原核重组质粒pMD-18T-vacA,并经酶切及序列分析所验证,证明HpC含有完整的vacA基因,其可能与Hp的致病性有关。

急性肺损伤发病机制的研究进展

急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征发病机制复杂,病死率高,是临床常见的危重症。各种肺内外因素引起多种炎性介质的释放,参与炎症的细胞和细胞因子成为研究的热点,这些细胞和细胞因子、炎症介质构成的炎症反应和免疫调节的"细胞网络"和"细胞因子网络"在其发病过程中发挥重要作用。以下将对近年来参与急性肺损伤的主要炎症细胞及炎症因子的研究进展做一综述。

患者胃肠引流液中幽门螺杆菌的检出及VitC含量测定

目的探讨胃肠引流液中幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)的检出率及患者VitC水平。方法用PCR技术、细菌培养、快速尿素酶试验检测胃肠引流液中的Hp,用反相液相色谱法检测患者胃肠引流液及血浆中VitC含量。结果282例患者胃肠引流液中Hp检出率为411%(116/282),PCR、细菌培养及快速尿素酶试验阳性率分别为429%(121/282)、113%(32/282)、411%(116/282)。胃溃疡、十二指肠溃疡、复合溃疡、胃癌、急性肠梗阻、急性胆囊炎及门静脉高压合并食管胃底静脉曲张患者Hp检出率分别为546%(30/55)、522%(24/46)、583%(7/12)、482%(27/56)、222%(8/36)、276%(16/58)、211%(4/19),差异具显著性(P<001)。胃溃疡、十二指肠溃疡、复合溃疡、胃癌Hp阳性患者与Hp阴性患者血浆及胃肠引流液VitC浓度相比,差异均具有显著性(P<001)。结论胃肠引流液中可检出Hp,且能分离培养出活菌;PCR技术是一种敏感、有效的检测胃引流液中Hp的方法。Hp感染人体后引起胃肠引流液及血浆中VitC含量的减少,可能与胃十二指肠疾病的发生有关。

新农村建设背景下的河南省“区域城镇”模式探讨

借鉴工业化国家战后城镇化过程中所表现出的新特点和暴露出的问题,指出城镇化模式因城镇化水平而变,忽视农业和乡村发展如何与工业化和城镇化相伴而进的城镇化,代表的是一种"工业文明"而非"生态文明"的城镇化模式.结合河南省城乡发展情况指出,新型的城镇化发展需要投入相当数量的公共财政资金建设和发展乡村,并要以城乡统筹发展的开放性思维,从要素重组和功能提升的角度,重新寻找城镇化的动力和发展路径.在将"区域"视为一种在更大尺度上协调城乡不同建设活动的背景的情况下,提出把城乡社区一起,建设成为一个可持续发展的有机整体——"区域城镇"的初步思维框架,并针对河南省不同地区的情况,提出"区域城镇"的3种表现形式.最后,对新农村建设的规划编制模式转变提出了建议.

淮南地区矿工幽门螺杆菌感染及其危险因素的调查

目的探讨淮南地区矿工幽门螺杆菌(Hp)感染状况及其危险因素调查。方法采用问卷方式调查矿工基本情况,用ELISA方法检测796名矿工血清抗Hp-IgG,对其中抗Hp-IgG阳性的368名矿工行胃镜检查,进行病理分型,并用Warthin-Starry银染色检测Hp感染。结果1)796例受检者,血清抗Hp-IgG阳性689例,阳性率为86.6%;Hp感染与年龄、日体力劳动时数、同胞数量、喜吃辛辣食物与吸烟等显著相关,与饮水、居住环境、文化程度无关;2)368例Hp-IgG阳性者经胃镜病理诊断患慢性胃炎112例,萎缩性胃炎78例,胃溃疡96例,十二指肠溃疡63例,其他19例,其Hp感染率分别为76.8%(86/112)、83.3%(65/78)、91.7%(88/96)、93.7%(59/63),差异有显著性(χ2=19.38,P<0.01);轻度浅表性炎症49例,中、重度浅表性炎症63例,萎缩性炎症78例,炎性坏死124例,腺体不典型增生35例,其Hp感染率分别为77.6%(38/49)、88.9%(56/63)、89.7%(70/78)、93.5%(116/124)、51.4%(18/35),差异亦有显著性(χ2=43.26,P<0.01)。结论淮南地区矿工中存在较高的Hp感染率和相关胃肠疾病发生率,且Hp感染率及疾病发生率与年龄、日体力劳动时数、同胞数量、喜吃辛辣食物及吸烟等显著相关,Hp感染的的严重度与胃粘膜炎症的程度及病理类型密切相关。

蠕虫免疫调节分子的抗炎作用与机制

新近研究发现,一些蠕虫来源的免疫调节分子可预防或治疗小鼠模型中多种自身免疫性疾病和过敏性反应。本文综述了多种蠕虫来源的免疫调节分子及其在小鼠模型中的抗炎效应和作用机制。

淮南地区幽门螺杆菌感染情况及其相关疾病的调查

目的探讨淮南地区 H.pylori 感染状况及其与相关疾病的关系。方法用 ELISA 方法检测608人血清抗 H.pylori-IgG,对其中有消化道症状的244例行胃镜检查,并各取胃窦粘膜3块分别进行病理组织学检查及快速尿素酶、改良 Giemsa 染色找 H.pylori 菌。结果①608份血清 H.pylori-IgG 抗体阳性率为52.6％(320/608),儿童和成人分别为42.2％(98/232)和59.0％(222/376),差异具显著性(x^2=16.2,P<0.01);无消化道症状组为35.2％(128/364),有消化道症状组为78.7％(192/244),差异亦具显著性(x^2=111.00,P<0.01);②3岁～、8岁～、13岁～、18岁～、20岁～、30岁～、40岁～、50岁～抗 H.pylori-IgG 阳性率分别为17.8％、36.8％、48.5％、53.1％、53.9％、56.3％、62.4％、64.0％,差异显著(x^2=49.98,P<0.01)。③有症状组中,48例儿童(72.72％)患浅表性胃炎,H.pylori 感染率为81.3％(39/48),2例胃溃疡、6例十二指肠溃疡患者均感染 H.pylori;成人患者中,浅表性胃炎、萎缩性胃炎、十二指肠炎、胃溃疡、十二指肠溃疡H.pylori 感染率分别为90.6％、92.3％、72.7％、95.6％、96.9％,差异具显著性(x^2=11.47,P<0.05)。④H.py-lori 感染的儿童及成人胃粘膜的炎症程度、中性粒细胞增多、嗜酸性粒细胞增多及淋巴滤泡形成的比例,均明显高于 H.pylori 阴性的儿童及成人胃粘膜。儿童胃粘膜淋巴滤泡的形成较成人明显增多(x^2=19.33,P<0.01),而成人则在胃粘膜肠化、萎缩的发生率较儿童更明显。结论 H.pylori 感染在本地区较为多见,且感染率随年龄增长而增加;胃、十二指肠疾病的发生,尤其是胃溃疡、十二指肠溃疡的发生与 H.Pylori 感染似有一定关系;儿童及成人感染 H.pylori 后,胃粘膜呈现不同的组织病理学改变。