HI方法与市售ELISA试剂盒检测鸡新城疫病毒抗体相关性分析

为比较血凝抑制(HI)方法与市售酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测新城疫病毒(NDV)抗体的相关性,摸索符合我国免疫政策的NDV ELISA抗体检测试剂盒判定标准,使用HI方法与某国外品牌的市售ELISA试剂盒,分别对267份临床血清样品和标准阴阳性血清进行NDV抗体检测,探究两种检测方法的相关系数,并以HI方法为金标准,采用TG-ROC方法对临床样品ELISA检测结果进行分析,以确定国内免疫背景下血清样品的ELISA最佳抗体检测临界值。结果显示:市售ELISA试剂盒与HI方法检测结果具有较好的相关性,相关系数为0.9823;ELISA检测抗体效价≥8400判定为免疫合格时,其敏感性与特异性均可达到95.5%。结果表明:ELISA试剂盒与HI检测方法显著相关,特别适合大规模临床血清样品检测;但在我国免疫政策背景下,需要调低ELISA试剂盒的检测临界值。本研究进行了HI方法与ELISA试剂盒检测结果的相关性分析,分析结果为使用ELISA方法进行鸡群NDV大规模抗体检测奠定了基础。

不同新城疫疫苗及免疫程序对蛋鸡免疫效果的影响

新城疫是世界动物卫生组织规定的A类传染病，是我国规定的二类传染病，在国际贸易和动物养殖业中具有重要地位。目前针对新城疫的防制手段比较成熟，其中疫苗程序化免疫是预防的主要措施。但随着各种新型新城疫疫苗的出现，选用不同的疫苗及免疫程序将对其免疫效果产生较大影响。为此，我们选取了新城疫灭活苗、弱毒苗以及2种新城疫禽流感二联苗，设计了不同的免疫程序进行免疫效果的对比试验。

鸽新城疫一分离毒株与鸡ND lasota株之间血清学关系的研究

PPMV-1与NDV在血凝抑制试验中具有很高的交叉反应性,但也有鸽新城疫的一些分离株与NDV间也存在显著差异性的报道。本所分离到一株鸽新城疫毒株,通过血凝抑制试验对其与鸡NDlasota株间的血清学关系进行研究,两毒株亲缘值为99%,表明二者为同一血清型。

几种检测弓形虫血清抗体方法的比较分析

本文对5种弓形虫血清IgG抗体检测方法进行比较评价。5种方法平行检测了80份血清,比较各检测方法的阳性检出率,敏感性,特异性,符合率及Youden指数。结果经配对2检验,ELISA-200,IHA,MAT,SPA-ELISA 4种方法在阳性检出率、平行检测结果之间无显著性差异(P<0.05)。ELISA-200敏感性、特异性和符合率均高于90%,Youden指数(0.85)显著高于其他方法(P<0.05)。IHA,MAT,SPA-ELISA 3种方法各指标处于中等水平,各有适合的检测环境。ELISA-100与其他四种方法在检测结果上差异极显著(P<0.01),特异性(38.3%)、符合率(58.75%)及Youden指数(0.383)都显著低于其他方法。

北京地区牛口蹄疫母源抗体水平及其疫苗免疫效果的调查研究

用液相阻断 ELISA( LPB-ELISA)方法对北京地区主要牛场进行口蹄疫 ( FMD)母源抗体、免前和免后抗体水平的调查 ,以探寻牛体内 FMD抗体消长规律 ,制定合理的免疫程序 ,从而指导北京地区 FMD的免疫。结果发现母源抗体水平在 5日龄前小于 1∶ 3 2 ,5日龄开始上升 ,高水平抗体一直维持到 75日龄 ,90日龄开始回落 ;加强免疫后抗体滴度大幅度升高 ,抗体效价离散度降低 ;用 FMD疫苗免疫青年牛 1次 ,2 1 d和 5 1 d的抗体平均值都为 1∶ 2 5 6;成年母牛的分别为 1∶ 2 5 6和 1∶ 2 48;育成牛的分别为 1∶ 2 48和 1∶ 2 40。说明牛 FMD首免的适宜日期为 90日龄 ;适时的加强免疫有利于牛群抵抗 FMD;FMD疫苗对育成牛、青年牛和成年母牛都有理想的免疫效果 ,对青年牛的免疫效果最好。

猪圆环病毒2型感染对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗体液免疫的影响

本试验采用ELISA方法对单独接种猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)变异株灭活苗组(HP组,n=3)和PCV2感染且出现病毒血症后接种PRRSV变异株灭活苗组(PCV2/HP组,n=3)不同时相血清中的PRRSV抗体进行检测;并对HP和PCV2/HP组血清中PCV2特异的抗体和核酸分别进行ELISA和荧光定量PCR检测。结果表明,在首免后70dHP组血清平均抗体效价极显著高于PCV2/HP组(P<0.01);首免后56、63和77dHP组平均抗体效价明显高于PCV2/HP组。其中在首免后56和63dHP组抗体阳性率均达67%(2/3),PCV2/HP组在相应时相抗体阳性率为0;在首免后70和77dHP组抗体阳性率均达100%(3/3),PCV2/HP组在相应时相抗体阳性率仅为0和33%(1/3)。结果提示PCV2感染可在一定程度上抑制PRRSV变异株(JXA1)特异性的抗体反应。

狂犬病诊断方法研究进展

狂犬病（Rabies）是由狂犬病病毒（Rabies virus,RV）引起的人和其他温血哺乳动物的一种急性致死性疾病,是一种自然疫源性疾病,人和各种温血动物均可感染,感染谱极为广泛,包括狐、狼、鼠、浣熊、猫、蝙蝠、兔、牛、羊、马、犬等动物,以肉食的犬科和猫科动物最为易感.

2019—2021年北京市种猪场猪伪狂犬病病毒感染情况调查

为了解北京市种猪场猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对2019—2021年3个区采集的10850份血清样品进行PRV感染抗体(gE抗体)检测。结果显示:2019—2021年,北京市3个区种猪场群体表观阳性率分别为84.38%、77.78%、64.71%,群体真实阳性率分别为86.10%(95%CI:73.95%~98.24%)、79.37%(95%CI:60.39%~98.34%)、66.03%(95%CI:43.22%~88.83%),下降趋势不显著(P>0.05);个体表观阳性率分别为53.95%、41.52%、35.59%,个体真实阳性率分别为55.05%(95%CI:53.05%~57.05%)、42.37%(95%CI:40.90%~43.84%)、36.32%(95%CI:34.85%~37.79%),呈显著下降趋势(P<0.05)。育成猪、经产母猪和后备母猪个体阳性率逐年下降,而育肥猪个体阳性率逐年升高,由2019年的38.45%,提高到2021年的60.79%。结果表明,北京市种猪场PRV感染得到一定的控制,但感染情况依然严重,尤其是育肥猪,因此应继续加强免疫和监测及生物安全体系建设,逐步实现种猪场净化和根除PR的目标。

2021年北京市种鸡场禽网状内皮组织增殖病和禽白血病监测

为了解北京市种鸡场禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)和禽白血病病毒(ALV)的流行情况,采用ELISA方法,对2021年从9个区27个种鸡场采集的2660份血清和2660份蛋液样品分别进行了REV抗体和ALVp27抗原监测。监测结果显示:2021年北京市种鸡场的REV抗体和ALVp27抗原个体表观阳性率分别为33.83%和1.54%,真实阳性率分别为34.53%(95%CI:32.72%~36.33%)和1.57%(95%CI:1.10%~2.05%);群体表观阳性率分别为81.48%和29.63%,真实阳性率分别为83.14%和30.23%。除第四季度未检出REV抗体阳性外,其他季度均检出这2种病原,其中第三季度ALV个体阳性率最高(4.86%),与其他季度差异有统计学意义(P<0.05),第二季度REV个体阳性率最高(85.40%),不同季度间的REV个体阳性率差异显著(P<0.05)。祖代群和父母代群均检出REV抗体和ALVp27抗原阳性个体,且阳性率差异均有统计学意义(P<0.05)。结果表明,北京市种鸡场REV和ALV分布广泛,感染较严重,净化效果不佳,存在病原传播风险。结果提示,北京市各种鸡场应高度重视这两种疫病的防控,加快推进种群净化工作。本次监测结果为北京市REV和ALV的净化及其感染的防控提供了依据。

犬细小病毒量子点免疫层析试纸条的研制

为建立一种快速灵敏检测犬细小病毒的免疫层析方法,本研究将羧基化CdSe/ZnS量子点与犬细小病毒单克隆抗体5G7共价偶联作为捕获探针,以犬细小病毒单克隆抗体8H7、羊抗鼠IgG作为检测线、质控线制备量子点免疫层析试纸条。结果显示,该试纸条灵敏度高,最低检测限为103 TCID50/mL;特异性强,与犬瘟热病毒、犬冠状病毒、犬腺病毒1型无交叉反应;稳定性好,室温密封保存30 d,其灵敏度和特异性无变化;临床样本检测,与PCR方法符合率为94%,准确率高于商品化胶体金试纸条。综上所述,该试纸条灵敏度高、特异性强、准确率高,适用于犬细小病毒病临床快速诊断。

中国大陆地区犬瘟热流行的空间分布特征回顾性分析(2004-2014)

犬瘟热病毒属于副粘病毒科麻疹病毒属单股负链RNA病毒,具有高度传染性.自1905年犬瘟热病毒首次被法国兽医发现以来,其在全球范围内的流行一直处于活跃状态[1].与麻疹病毒属的多种病毒类似,犬瘟热病毒可以感染多种动物,如犬科动物、鼬科动物、熊科动物、猫科动物、海洋哺乳动物,甚至灵长类动物[2-6],因此犬瘟热病毒一旦侵染具有多种易感动物的区域时,很难将其彻底根除,极易造成犬瘟热的大暴发与大流行.

猪瘟病毒微滴式数字PCR方法的建立

为建立猪瘟病毒微滴式数字PCR方法,实现猪瘟病毒定量检测。本研究根据猪瘟病毒5’UTR基因的保守序列设计了引物探针,对反应条件进行了优化,同时对该方法的灵敏性、特异性、重复性进行了评估,并对临床样品进行了检测。结果显示:本方法的最低检测下限为3.2copies/μL,未发现与其他病毒有交叉反应,样本重复的变异系数为3.9%,对临床样品的检测结果与实时荧光定量PCR(GB/T 27540-2011)的检测结果完全一致。本研究建立的猪瘟病毒微滴式数字PCR灵敏度高、特异性强、重复性好,适用于猪瘟病毒的临床检测。