上呼吸道益生菌Biohalo23用于呼吸道感染及中耳炎的专家共识——现有循证科学依据及未来研究建议

呼吸道菌群决定着宿主是否成为呼吸道感染易感体质,并与宿主免疫系统共筑成人体对抗感染的第一道防线。呼吸道菌群特征的塑造与生命早期的无症状病毒暴露、生命早期呼吸道感染、过敏体质以及孕期或生命早期的抗生素暴露息息相关,这些因素也是日后形成反复呼吸道感染或过敏体质的重要因子。近年来,有许多研究试图探索人体微生态干预对调节宿主免疫及预防呼吸道感染的效果,但由于研究之间存在非同质化且不一致的再现性,使医生对于推荐益生菌给患者持有不同的见解。益生菌成品研究作为近几年学术界推荐的科研循证方法,是推动益生菌产业良性发展的有效方法,研究结论更符合真实世界使用结果,利于医生临床使用和消费者选择参考。鉴于中国和欧洲真实世界中的上呼吸道益生菌Biohalo23临床实践经验与患者的积极正向反馈,本专家组认为,具有循证科学依据并在多项研究中取得一致及积极临床研究结果的上呼吸道益生菌Biohalo23,可被视为医生在标准药物治疗基础上推荐给需要的患者以提高呼吸道感染相关生活质量并减轻呼吸道感染易感负担的“工具”,同时也鼓励医生关注呼吸道微生态在医学应用发展的新研究领域,以及呼吸道菌群干预可提供更佳疾病管理的巨大潜力。

益生菌成品循证研究对提升新质生产力的全球策略启示

当前,公众养生保健方式多样化且便捷化,健康意识不断增强,推动了保健食品行业向上发展。益生菌作为增长最迅速的细分领域之一,已成为保健食品行业的焦点。为推动益生菌产业新质生产力和行业健康发展,本文从监管引导、行业协会推动、激发市场潜能、打造新场景新业态以及公众需求导向等方面入手,提出了提升益生菌基础研究、提高生产质量、加强成品循证研究等发展策略,以期为推动我国益生菌产业高质量发展提供借鉴。

菌落PCR和质粒PCR对转化菌的筛选

目的为建立简便、可靠转化菌的筛选方法。方法应用菌落 PCR和重组质粒 PCR方法对转化菌进行筛选和DNA序列分析。克隆载体和表达载体筛选及鉴定采用与载体多克隆插入位点序列互补的通用引物或免疫球蛋白家族特异性引物。阳性菌落和质粒 PCR产物通过酶消化后作为模板进行自动测序。结果菌落 PCR和质粒 PCR技术可作为基因克隆筛选和鉴定的方法。结论菌落 PCR和质粒 PCR方法简便、快速、可靠 ,其产物可作为模板直接用于序列分析。

骨髓瘤蛋白(IgDλ)独特型单克隆抗体的制备

本文用从1例骨髓瘤患者(IgDλ)尿中提取的λ链作为抗原,免疫Balb/c小鼠,通过两次融合,分别经3～4次克隆后获得86株分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,经鉴定其中15株为抗独特型McAb。其中12株仅与同源性λ链和IgD反应,不与正常人λ链,k链,IgG、IgA、IgM、IgD、IgE及白蛋白(HSA)和一系列副球蛋白反应.间接免疫荧光法证明,抗独特型McAb与骨髓瘤患者外周血淋巴细胞和骨髓细胞阳性率高达23%,不与正常人群外周血淋巴细胞和骨髓细胞反应,其中部分McAb与实验室培养的浆细胞瘤株呈现阳性反应.

抗白血病患者IgM同种型和独特型McAb识别抗原表位的分析

本文应用间接ELISA试验,混合ELISA夹心试验,ELISA抑制试验对抗B-CLL患者血清IgM同种型和独特型McAb的特异性和亲和力进行了分析。并采用ELISA双抗体相加试验,检测了McAb识别抗原的表位。试验结果表明,14株McAb中10株为抗独特型McAb,4株为抗同种型McAb。对ELISA双抗体相加试验测得结果经微机集群处理分析,可将4株抗同种型McAb分成2组,10株抗独特型McAb分成4组。ELISA相加试验结果与间接混合ELISA抑制试验结果一致。结果提示,14株McAb至少可以识别6个不同的抗原表位。

应用武—系列单克隆抗体研究癫痫患者淋巴细胞亚群的变化

本文借助单克隆抗体系列检测了30例癫痫患者外周血中T淋巴细胞亚群,B细胞和单核巨噬细胞。结果表明,患者T_3和T_4细胞百分率均低于正常人,T_8细胞百分率增高,T_4/T_8比值明显降低。B细胞和单核巨噬细胞数未见明显改变,提示本病存在细胞免疫功能异常。同时证明用两种单克隆抗体系列检测结果无显著性差异。

抗慢性B淋巴细胞白血病患者IgM单抗相对亲和力的分析

本文采用间接ELISA法检测了11株抗B-CLL患者IgM腹水和杂交瘤上清McAb的相对亲和力。结果提示,各株McAb结合抗原的相对亲和力不同。根据50％最大结合浓度分为两组。其中4株杂交瘤上清McAb与纯化腹水McAb测得结果基本吻合。实验结果为合理地选用这些单抗提供了重要依据。

移植排斥反应的免疫生物学及其药理学调控

同种异体器官移植是对受体免疫系统敲一警钟。异体组织抗原激活受体免疫系统引起排斥反应。器官移植的外科问题目前已基本得到解决,进一步改善移植物功能存活率和延长受者生命的希望寄托到免疫学研究的进展。

骨髓瘤白血病患者外周血细胞表面标志的表达

本文应用一系列抗细胞表面抗原单抗,抗SmIg同种型和独特型单抗检测了正常人群和骨髓瘤白血病患者PBMC表面抗原,SmIg及其同种型和独特型决定簇的表达。结果表明,骨髓瘤、白血病患者外周血T淋巴细胞亚群比例失调。8例ALL中6例患者细胞表达T淋巴细胞表面标志,3例CLL和3例HCL中分别有2例患者PBMC表达B淋巴细胞表面标志。抗独特型单抗与同源患者PBMC呈阳性反应,与正常人群和非同源患者PBMC大多数呈阴性反应。

一例骨髓瘤患者骨髓细胞体外长期培养

本文对1例骨髓瘤患者的骨髓细胞在体外进行了长期传代培养,探讨了各种白血病细胞系培养上清液对细胞生长的调控作用。对培养的细胞进行了形态学、生物化学、免疫学特征和超微结构研究及药敏试验。结果证明6种细胞培养上清液均对细胞的生长有促进作用。培养的骨髓细胞具有恶性细胞的生物学特征,可能为B细胞系恶性细胞。

抗人IgM单克隆抗体的制备及其特征研究

以人IgM作为抗原免疫Balb/C小鼠,采用杂交瘤技术获得5株分泌抗人IgM单抗的杂交瘤细胞株.通过酶联免疫吸附试验、免疫双向扩散试验证明:该组单抗仅与人IgM起反应,而不与其他各类免疫球蛋白反应。间接免疫荧光试验证明:该组单抗测得不同人群外周血淋巴细胞阳性数与用抗B细胞单抗和直接免疫荧光法测得的结果接近.免疫转印试验证明抗体作用的分子量为50～70kd(dalten法定单位为u,换算系数0.9921,下同).提示为IgM.本文还对单抗应用价值进行了讨论。

B淋巴细胞恶性肿瘤独特型-抗独特型研究现状

根据Jerne的网络学说,免疫球蛋白(Ig)的可变区可诱导抗独特型抗体的产生。抗Id抗体能与相应抗原结合调整免疫系统,保持其内环境的相对稳定性。近年来实验证明,不仅Ig分子,B细胞的抗原受体有Id,而且T细胞抗原受体和T细胞分泌的辅助和抑制因子也有Id,他们均有抗原特异性Id和交叉反应Id。这些Id的表达均受基因调控。

免疫调节剂和细胞因子在临床医学中的应用研究

细胞因子和免疫调节剂是介导细胞间相互作用的多肽激素,血细胞生成生长因子是其中的一个亚组,后者根据其在骨髓培养中的作用又称为集落刺激因子( colony-stimulating factors,CSFs).CSFs是由不同的细胞形成的有生物活性的一类糖蛋白,在血液生成系统和免疫系统起信号传递作用,促进由骨髓中造血新生的各类前体血细胞在有其他因子的协同下,发育成长形成相应的细胞集落或克隆(图1).它们可参与机体的生理过程或调控病理过程,干扰素(IFN-α)

理肠四方对溃疡性结肠炎大鼠组织细胞因子TNF-α IL-6 IL-8 IL-10的影响

目的 :通过观察理肠四方对溃疡性结肠炎大鼠组织细胞因子TNF -α、IL -6、IL -8、IL -10的影响 ,比较四方疗效大小 ,并分析其作用机理。方法 :应用 2 ,4一二硝基氯苯 (DNCB)免疫加醋酸局部灌肠法建立UC大鼠模型 ,将 98只健康SD大鼠 (雌雄各半 ) ,按雌雄随机分 7组 ,分别为乌梅丸组、白头翁汤组、参苓白术散组、痛泻要方组、SASP组、模型组和正常组 ,分别观察治疗后大鼠结肠粘膜组织匀浆促炎因子IL -6、IL -8、TNF -α和抗炎因子IL -10的变化 ,并进行统计学比较。结果 :造模后细胞因子IL -6、IL -8、TNF -α均升高 (P <0 .0 1) ,而IL -10降低 (P <0 .0 1) ,理肠四方各治疗组、SASP组与模型组比较有显著意义 (P <0 .0 1)。结论 :理肠四方均有上调抗炎细胞因子 (如IL -10 ) ,下调促炎细胞因子 (如IL -6、IL -8、TNF -α) ,从而使溃疡性结肠炎大鼠免疫功能恢复正常 ,达到治疗的目的。经两两比较后 ,乌梅丸疗效最好 ,白头翁汤次之 ,参苓白术散与SASP组疗效相当 ,而痛泻要方疗效稍差。该实验也提示我们在临证治疗UC时仍要辨证施治。

MTT比色法检测IL－2和杀伤细胞活性的研究

本文采用ＭＴＴ比色法测定了ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞培养上清ＩＬ－２活性及ＬＡＫ细胞介导对体外培养的白血病细胞株的杀伤活性。结果表明ＬＡＫ细胞和ＴＩＬ细胞培养上清有较高的ＩＬ－２活性，可用于支持培养ＩＬ－２依赖株的生长；ＬＡＫ细胞对体外培养的白血病细胞株有明显的杀伤作用。其杀伤效应随效靶比例增加而增高；同时亦证明：活的白血病细胞数与ＭＴＴ甲赞形成产物呈直线相关性，提示通过ＭＴＴ法测定ＯＤ值能较好地反映活细胞数目及细胞毒效应。

神通营养液JYD对小鼠脾细胞IL—2诱生及血清TNF水平的影响

本文研究了神通营养液ＪＹＤ对ＮＩＨ小鼠脾细胞ＩＬ－２的诱生及血清肿瘤坏死因子水平的影响，实验结果表明，ＪＹＤ对免疫功能低下ＮＩＨ小鼠脾细胞ＩＬ－２诱生能力和血清肿瘤坏死因子水平具有提高作用。ＪＹＤ大剂量组比小剂量组作用更为明显。结果提示ＪＹＤ对由药物或吸烟引起的免疫功能低下有调节作用。

理肠中药方对溃疡性结肠炎大鼠结肠细胞凋亡及其调控基因表达的影响

目的:观察理肠中药方对溃疡性结肠炎大鼠结肠细胞凋亡及其调控基因Bcl-2,Bax,Fas蛋白表达的影响,分析其作用机制. 方法:应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)免疫加醋酸局部灌肠法建立UC大鼠模型,将98只健康SD大鼠(雌雄各半), 按雌雄随机分7组,分别为乌梅丸组、白头翁汤组、参苓白术散组、痛泻要方组、SASP组、模型组和正常组, 分别观察治疗后大鼠结肠黏膜的结肠细胞凋亡及其调控基因Bcl-2,Bax,Fas蛋白表达的变化. 结果:模型组与正常组比较AI升高(P<0.01,t=3.835),治疗后AI下降,各组与模型组比较有显著性差异(P<0.05, q=4.210 vs 痛泻要方组或P<0.01,q=5.973 vs 乌梅丸组,q=5.986 vs 白头翁汤组,q=5.905 vs 参苓白术散组,q=5.889 vs SASP组).与正常组比较均无显著性差异(P>0.05,q=3.972 vs 乌梅丸组,q=3.523 vs 白头翁汤组,q=3.694 vs 参苓白术散组,q=3.549 vs 痛泻要方组,q=3.727 vs SASP组),理肠中药方、SASP组五组间比较,均无显著性差异(P>0.05,F=2.96),正常组Bcl- 2/Bax>1,细胞较少发生凋亡,而二者比较,有显著意义(P<0.01,t=3.956 vs 模型组).理肠中药方、SASP组五组Bcl-2/Bax>1,模型组Bcl-2,Bax,Fas与正常组比较, 有非常显著意义(P<0.01,t=4.573,4.826,4.758),且模型组Bcl-2/Bax<1细胞凋亡占优势,各治疗组与正常组无统计学意义(P>0.05,F=2.69),而与模型组比较有显著意义(P<0.05,q=4.98 vs乌梅丸组,q=4.77 vs白头翁汤组,q=4.68 vs参苓白术散组,q=4.56 vs痛泻要方组,q=4.64 vs SASP组),各中药组Bcl-2,Bax,Fas蛋白阳性率均与SASP组疗效相当(P>0.05,F=3.19,3.05, 2.97),理肠四方各组比较,Bcl-2,Bax,Fas蛋白阳性率亦无明显差异(P>0.05). 结论:细胞凋亡及其调控基因Bcl-2,Bax参与UC的形成,中药及SASP均有良好的治疗效果.

乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠组织细胞因子的干预效应

目的:观察中草药乌梅丸对溃疡性结肠炎大鼠组织促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6,8和抗炎细胞因子白细胞介素10的影响,并比较乌梅丸与柳氮磺胺吡啶治疗效果。方法:实验于2002-10/2003-03在湖北中医学院中心实验室完成。①选用健康SD大鼠56只,雌雄各半。按雌雄随机分4组:正常组、乌梅丸组、柳氮磺胺吡啶组、模型组,每组14只(雌雄各半)。应用2,4-二硝基氯苯免疫加醋酸局部灌肠法建立溃疡性结肠炎大鼠模型,除正常组外,其余组均造模。②乌梅丸组:给予配制的乌梅丸液(中草药乌梅丸为本院自制,成分:乌梅16g,细辛6g,干姜10g,黄连16g,当归4g,附子6g,蜀椒4g,桂枝6g,生晒参6g,黄檗6g。按传统方法配制成含生药浓度分别为515g/L的水煎剂)3mL灌胃,1次/d;柳氮磺胺吡啶组:给予柳氮磺胺吡啶混悬液3mL在造模后灌胃,1次/d;模型组和正常组:均以蒸馏水3mL灌胃,1次/d。各组均给药15d。③然后于第16天,采用酶联免疫吸附法检测结肠组织白细胞介素6,8,10,肿瘤坏死因子α含量。④计量结果差异比较采用t检验、方差分析(q检验)。结果:由于每组大鼠在灌胃前随机抽取2只进行病理检查以及部分标本采集不合格,正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、乌梅丸组分别脱失2,4,5,3只,最终进入结果分析以上各组大鼠分别为12,10,9,11只。①大鼠结肠组织白细胞介素6,8,肿瘤坏死因子α含量:模型组均明显高于正常组(P<0.01),柳氮磺胺吡啶组和乌梅丸组明显低于模型组(P<0.01),乌梅丸组明显低于柳氮磺胺吡啶组(P<0.01)。②大鼠结肠组织白细胞介素10含量:模型组明显低于正常组(P<0.01),柳氮磺胺吡啶组和乌梅丸组明显高于模型组(P<0.01),乌梅丸组明显高于柳氮磺胺吡啶组(P<0.05)。结论:乌梅丸有上调抗炎细胞因子白细胞介素10,下调促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6,8的作用,使溃疡性结肠炎大鼠免疫功能恢复正常,达到治疗的目的;乌梅丸对溃疡性结肠炎干预效果优于柳氮磺胺吡啶。

理肠四方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TNF-αmRNA表达的影响

目的:观察理肠四方对溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠组织细胞因子TNF-αmRNA的表达的影响,比较四方疗效大小, 并分析其作用机制. 方法:应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)免疫加醋酸局部灌肠法建立UC大鼠模型,将98只健康SD大鼠(雌雄各半),按雌雄随机分7组,分别为乌梅丸组、白头翁汤组、参苓白术散组、痛泻要方组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组、模型组和正常组,分别观察治疗后大鼠结肠黏膜TNF-αmRNA的表达变化,并进行统计学比较. 结果:造模后细胞因子TNF-αmRNA的表达升高(模型组与正常组平均吸光度比较P<0.01,t=4.128 vs正常组),理肠四方各治疗组、SASP组与模型组比较有显著意义(P<0.01, q=12.37 vs乌梅丸组,q=9.52 vs白头翁汤组,q=8.79 vs参苓白术散组,q=8.54 vs痛泻要方组,q=8.92 vs SASP组),但除乌梅丸外,理肠四方之间比较无明显差异. 结论:经两两比较后,乌梅丸疗效最好,白头翁汤、参苓白术散、痛泻要方与SASP组疗效相当.表明理肠四方可下调促炎细胞因子TNF-α,从而使溃疡性结肠炎大鼠免疫功能恢复正常,达到治疗的目的.

钙和鸡冠花黄酮提取物对大鼠废用性骨质疏松的作用

目的 探讨钙和鸡冠花黄酮提取物对废用性骨质疏松大鼠的作用 ,为骨质疏松的防治提供依据。方法 选用健康SD大鼠 40只 ,雄性。随机分为 5组 ,第 1、 2组分别为正常对照和阳性对照 ,灌胃蒸馏水 5ml/(kg·d) ,第 2～ 5组制造废用性骨质疏松大鼠模型 ,第 3、 4、 5组为预防组 ,分别灌胃等量鸡冠花提取物 ,碳酸钙 ,鸡冠花提取物加钙溶液。实验 8周后 ,测骨密度 (BMD) ,股骨CT值 ,测血清MDA、SOD及 2 4h尿钙、羟脯氨酸 (HOP)、尿肌酐含量等。结果 阳性组与正常对照组比较股骨重、灰分重、CT值、血清钙下降 ,尿钙、尿HOP升高 (P <0 0 5或0 0 1) ,预防组与阳性组比较股骨重、CT值显著增加 ,碳酸钙组、鸡冠花加钙组灰分重显著增加 (P <0 0 5)。与阳性组比较各预防组血清钙增加 ,尿钙、尿HOP减少 (P <0 0 5或 <0 0 1)。鸡冠花组、鸡冠花加钙组与阳性组比较股骨BMD、血清SOD升高 ,MDA降低 ,单纯补钙组仅BMD升高 (P <0 0 5或 <0 0 1)。结论 鸡冠花提取物、钙对废用性骨质疏松大鼠骨质代谢均有促进作用 ,两者合用具有更好的预防效果 。