基于CRISPR/Cas系统的纸基分析在快速检测食源性致病菌中的应用

由食源性致病菌引起的食品安全事件严重影响人类健康,开发针对食源性致病菌的快速检测技术十分必要。成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及相关蛋白(CRISPR-associated protein,Cas)是原核生物的适应性免疫系统,具有特异性识别并切割核酸序列的功能。纸基分析方法作为一种简便性好、成本低廉的分析检测工具,在快速检测领域展现出良好的前景。因此,将CRISPR/Cas系统的高效识别能力和纸基分析方法的简便性相结合可实现对食源性致病菌的快速灵敏检测。本文简要介绍了CRISPR/Cas系统用于核酸检测的概况,对第二类单Cas效应蛋白系统的特点及原理进行概述,重点综述基于CRISPR/Cas系统的试纸分析、侧向流动分析和纸基微流控装置在检测食源性致病菌方面的应用,并讨论了CRISPR/Cas系统结合纸基分析建立检测方法的优势、当前的挑战及未来的发展前景。

重组荔枝类甜蛋白的高效表达、纯化及活性鉴定

荔枝类甜蛋白(litchi thaumatin-like protein,LcTLP)是导致部分人群过量食用荔枝引起机体炎症反应的主要原因之一,为深入探究其引起的机体炎症机制,揭示其晶体结构与促炎活性位点等生物学特性,需获得大量高纯度LcTLP。然而现有报道中鲜见大量获取高纯度可溶性LcTLP的提取方法,因此该研究对LcTLP基因进行密码子优化后构建了表达载体pCold-NusA-LcTLP,并成功表达了可溶重组蛋白NusA-LcTLP。通过亲和层析与凝胶过滤层析两步纯化法,最终得到的重组蛋白产量可达36.26 mg/L,纯度达90%以上,表明该纯化方案可高效制得高纯度重组LcTLP。经RAW264.7细胞炎症活性验证,重组LcTLP在1、2μg/mL时刺激细胞NO分泌量分别为12.75、14.68μmol/L,为空白组的2.91、3.36倍,验证了重组LcTLP具有一定的促炎活性。该表达载体与纯化方案高效表达得到了可溶性重组LcTLP,为后续深入研究LcTLP在细胞生命活动中的功能机制奠定了基础。

硫转移剂应用与改善催化裂化烟气蓝烟拖尾情况总结

中国石油天然气股份有限公司兰州石化分公司1.2 Mt/a重油催化裂化装置因原料性质变化导致再生烟气中SO_(x)含量上升,外排烟气蓝烟拖尾现象愈发严重。为改善烟羽外观、避免外排废水TDS(溶解性固体总量)超标并降低湿法脱硫塔操作负荷,开展了运用增强型RFS09硫转移剂并优化装置操作、消除外排烟气蓝烟拖尾的工业试验。结果表明:当原料硫质量分数为0.4%~0.7%、硫转移剂藏量占系统藏量的3.5%时,蓝烟拖尾现象得以控制,脱硫塔入口烟气SO_(2)的质量浓度稳定控制在500 mg/m^(3)以下、碱液消耗量降低48.5%、外排废水TDS由41400 mg/L降至6400 mg/L,废水COD(化学需氧量)减小,烟气中的硫大幅向气体产品中转移。增强型RFS09硫转移剂的应用对产物分布、产品性质和装置运行均无负面影响。该工业试验也进一步表明:增强型RFS09硫转移剂能很好地实现催化裂化再生烟气污染物源头减排,并减少二次污染。

文化自信视域下湖南民族民间音乐课程数字化开发研究

我国的民族音乐内容丰富多彩,是中国传统文化传承的重要媒介与载体。数字化背景下,音乐院校以及在一线的教育工作者要在数字化与音乐课程的融合上加大力度、深入探究,湖南民族民间音乐课程数字化开发的价值巨大,加快推进民间音乐课程的数字化进程,提出相关开发策略。

硬质黏土耙齿水下快速切削试验研究

疏浚工程中遇到的疏浚土质变得越来越复杂,尤其在深水航道耙吸挖泥船施工中遇到的坚硬的黏性土标贯击数达到20击,与以往航道疏浚工程中黏土的坚硬状态有明显区别。为了研究硬质黏土的耙齿挖掘机理,对标贯击数18击、21击及25击的硬质黏土在不同切削速度、切削深度工况下耙齿切削阻力的变化规律进行了水下快速切削试验。试验通过在耙齿上布置切削阻力传感器的方式,得到耙齿在不同切削工况条件下的水下切削阻力,分别分析了切削速度、切削深度及黏土的标贯击数对耙齿切削阻力的影响规律,为硬质黏土耙头的设计提供了理论支撑。

miR-142在儿童自身免疫性甲状腺疾病中表达及与Th17/Treg失衡关系的研究

目的 探究微小RNA-142 (microRNA-142,miR-142)在儿童自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thvroid disease,AITD)中表达及其与辅助性T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)失衡的关系。方法 前瞻性选取2019年1月—2022年12月住院治疗的89例AITD患儿为研究对象,包括48例Graves病患儿(Graves disease,GD;设为GD组)和41例桥本甲状腺炎患儿(Hashimoto thyroiditis,HT;设为HT组),另选取55例同期体检的健康儿童为对照组,比较各组血清miR-142、甲状腺球蛋白抗体(antithyroglobulin antibody,TG Ab)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(antithyroperoxidase antibody,TPOAb)、Th17/Treg及白细胞介素-17 (interleukin-17,IL-17)表达差异。结果 GD组和HT组miR-142、TPOAb、TGAb、Th17、Th17/Treg、IL-17表达高于对照组,Treg水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,GD组miR-142与TPOAb、TGAb、Th17、Th17/Treg、IL-17呈正相关(分别r=0.711、0.728、0.785、0.716、0.709,P<0.001),与Treg呈负相关(r=-0.725,P<0.001);HT组miR-142与TPOAb、TGAb呈正相关(分别r=0.752、0.717,P<0.001)。结论 miR-142在儿童AITD中高表达,且其表达可能与GD患儿Th17/Treg失衡有关。

BIM在大型工业厂房管综数字深化设计中的应用研究

大型工业厂房涉及专业多、管线交错复杂,质量要求高,利用BIM技术对场内空间错综复杂管线搭建模型,查看各专业管线相对关系协调性,优化管线布置;通过BIM模型数据上传平台输出二维码或网页链接用于数据共享,便于多方人员直观了解设计意图;将厂房各专业设计模型整合到一个共享的建筑模型空间中,管线与管线、管线与建筑结构、设备与管线间的空间关系三维可视化,解决结构及机电管道之间的碰撞问题,做出净高分析,实现BIM管线数字深化设计优化,协助顺利通过质量验收,节约施工成本,提高现场施工效率。

基于形成性评价的儿科学本科专业学生儿童重症医学科岗位胜任力提升研究

文章选取2022年1月至2022年12月在西南医科大学附属医院儿童重症医学科分批实习的儿科学本科专业学生为研究对象,对其进行3个月的培训,期间采用形成性评估量表每月对学生进行形成性评价,并对培训前后的学生考核成绩、教学效果、教学满意度进行调查,以探究基于形成性评价提升儿科学本科专业学生儿童重症医学科岗位胜任力的效果,结果显示,培训后学生在儿童重症医学科的理论知识、人文素质及操作技能方面的考核成绩均显著提高,且培训后的教学效果显著优于培训前,教学满意度也高于培训前(P<0.05)。

兔骨髓间充质干细胞心脏移植治疗扩张型心肌病的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)心脏移植后对兔扩张型心肌病(dilated cardio-myopathy,DCM)心功能、心肌结构及心内膜单相动作电位(monophasic action potential durations,MAP)的影响。方法新西兰兔分为正常对照组(n=12),DCM实验组(n=13),DCM对照组(n=13),DCM模型通过静脉注射阿霉素诱导。DCM实验组移植骨髓MSCs,DCM对照组注射培养基,移植后4周采用超声心动图和MAP参数评价心功能和电生理的改变;并取移植区心肌组织行免疫荧光染色以观察移植细胞的增殖分化情况,另选部分心肌组织做HE染色和透射电镜查看心肌组织形态学改变。结果与正常组相比,DCM各组心功能明显受损、MAP时程延长、心肌细胞变性坏死,且实验组受损较对照组轻;移植的细胞有肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)和缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)的表达。结论体内移植骨髓MSCs后在一定程度上可改善DCM心功能,使病损心肌组织病变减轻,并可能抑制心电紊乱的进一步发展。

兔骨髓间充质干细胞体外分离培养及冻存研究

目的:寻求体外培养、冻存、复苏兔骨髓间充质干细胞(mensechymalstemcells,MSCs)的方法,为兔MSCs进一步的实验研究打下基础。方法:取新西兰白兔胫骨穿刺获取骨髓液,以贴壁筛选法分离、纯化、培养和扩增获得MSCs,并行液氮冻存,通过倒置显微镜观察其生物学表现。结果:MSCs为贴壁生长,形态为均匀成纤维细胞样,增殖能力强,传代及冻存后细胞仍然保持其生物学特性。结论:MSCs可采取贴壁筛选法进行较好的纯化和扩增,并可长期保存于液氮中,在一定的条件下可复苏存活。

儿童暴发性心肌炎的诊断与治疗

目的探讨儿童暴发性心肌炎的临床表现和治疗方案,以提高对该病的认识。方法回顾性分析6例暴发性心肌炎患儿的临床表现、辅助检查结果、诊治情况及转归结局。结果 5例患儿以心外症状起病,2例误诊,经治疗后存活3例,死亡3例,存活患儿心功能正常,无严重心律失常。结论早期识别,积极处理,包括早期应用肾上腺皮质激素、丙种球蛋白或临时起搏治疗可提高治愈率,改善预后。

儿童阵发性室上性心动过速的急诊治疗体会

目的探讨儿童阵发性室上性心动过速(PSVT)的早期识别和治疗方法。方法对该院2000年1月至2010年12月收治的46例儿童PSVT的临床资料进行回顾性分析。结果婴儿PSVT发作时心率为200～300次/min,以精神萎靡,烦躁、呕吐、面色苍白为主要表现;儿童PSVT发作时心率为170～260次/min,以心悸、胸闷、乏力、面色苍白为主要表现。针对心功能情况选择普罗帕酮、三磷腺苷、毛花甙C或胺碘酮复律成功。结论早期识别并及时采取合理药物治疗方案可有效终止PSVT的发作。

骨髓间充质干细胞移植对扩张型心肌病兔心功能及结构重构的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)体内移植后对扩张型心肌病(DCM)兔心功能及结构重构的影响。方法采用新西兰白兔26只经多柔比星(ADR)诱导DCM模型,再将建模成功的动物随机分为实验及对照组。实验组每只移植(4～6)×106个MSCs,对照组注射培养基。移植后4周采用超声心动图检测其心功能和透射电镜观察其心脏超微结构变化。采用SPSS14.0软件进行统计学分析。结果对DCM兔行病理检查,发现用ADR后心肌间质水肿,肌纤维空泡变性、坏死。电镜下肌原纤维减少,线粒体增大增多,线粒体内嵴断裂。移植骨髓MSCs后,实验组左室收缩末期内径(LVDD)较对照组降低,左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)升高,二组比较有显著性差异(Pa<0.05),实验组病理损害较对照组轻。结论体内移植骨髓MSCs可改善DCM兔心功能,并抑制其结构重构的进展。

氯沙坦干预心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡机制的研究

目的探讨氯沙坦干预心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 24只8周龄SD大鼠随机分为对照组、心力衰竭组及干预组各8只,心力衰竭组采取腹腔注射阿霉素的方式建立模型,干预组在注射阿霉素的同时给予喂服氯沙坦干预,并分别检测各组凋亡指数及促凋亡蛋白Bax和抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平。结果心力衰竭组及干预组细胞凋亡指数均明显高于对照组,但干预组凋亡指数较心力衰竭组明显减低,两者比较有统计学意义(P<0.05);心力衰竭组及干预组Bax、Bcl-2表达均高于对照组,但干预组与心力衰竭组比较其Bax显著降低而Bcl-2显著升高。结论氯沙坦能抑制心肌细胞凋亡,这一作用可能通过上调Bcl-2的表达及下调Bax的表达得以实现。

介入封堵儿童动脉导管未闭疗效分析

目的:探讨介入治疗儿童动脉导管未闭(Patent ductus arteriosus,PDA)的临床疗效。方法:回顾分析2007年11月-2010年12月在本院作经皮PDA封堵的63例病人资料,着重分析动脉导管的测量、手术方法、临床疗效。结果:典型PDA经胸超声测量值与造影后X线测量值差异无统计学意义,但在小型和大型PDA中两者差异有统计学意义;所有病人中61例封堵成功,其中7例植入弹簧圈,其余54例采取蘑菇伞堵闭器封堵成功。结论:经皮PDA封堵术安全有效,术中注重患者的个体情况,注意操作细节,能更好地避免并发症,提高成功率。

差热分析法测定净化汽车尾气催化剂的催化性能

用催化剂净化汽车尾气是汽车尾气净化中的一个重要方法。由于用于各种不同场合固体催化剂的组成、选料和制备工艺的不同,其催化性能和抗毒化性能都差别很大。在测定催化剂的性能方面,目前还没有一个统一的方法和标准。采用差热以及其它热分析方法测定催化剂的催化性能和抗毒化等性能,乞今国内未见有报导。本文对此进行了研究并获得了较好的效果。一、测定的条件试验众所周知,差热分析是在程序控温(包括升温、降温、恒温等)条件下测定试样相对于参比物的热效应的变化。催化反应,一般是指催化剂本身不反应,仅仅起到改变反应历程从而改变反应速度的一类反应。汽车所排尾气中主要的有毒气体是一氧化碳,未燃尽的碳氢化合物和氮氧化物。

儿童发作性睡病误诊分析

目的:探讨儿童发作性睡病误诊原因。方法:回顾分析7例儿童发作性睡病误诊病例的一般资料、临床表现、实验室检查、治疗及随访情况。结果:7例中误诊为癫痫4例、病毒性脑炎2例、癔症1例,全部患儿睡眠脑电图监测显示平均睡眠潜伏期均<5min,至少2次直接进入快速眼动期睡眠,予口服盐酸派醋甲酯治疗,病情均有不同程度好转。结论:误诊原因为对本病认识不足。

热毒宁联合更昔洛韦治疗小儿传染性单核细胞增多症疗效观察

目的:观察热毒宁联合更昔洛韦治疗小儿传染性单核细胞增多症的疗效。方法:将40例小儿传染性单核细胞增多症随机分为治疗组及对照组,各20例,治疗组在更昔洛韦静脉滴注基础上加用热毒宁注射液静脉滴注,对照组单纯使用更昔洛韦治疗,疗程10～14d。结果:治疗组总有效率为95%,对照组总有效率为70%,在热程,咽峡炎(咽痛、扁桃体渗出物)改善,异型淋巴细胞恢复至<10%的时间方面,治疗组明显短于对照组。结论:热毒宁联合更昔洛韦治疗小儿传染性单核细胞增多症可提高疗效。

LaNi_5贮氢性能的测定

基于人们对氢能开发的渴望,近十几年来许多国家对贮氢材料的研究十分活跃.目前已经找到贮氢性能较好的化合物有LaNi_5、FeTi和Mg_2Ni等,其中以LaNi_5的性能更为优越一些.本文对LaNi_5的炼制与鉴定、贮氢性能(主要是释氢过程)的测定以及对标志贮氢特性的热力学和动力学参数的求取进行了探讨,以期为无机或高等无机的实验提供参考.

MgO-MgCl_2-H_2O体系的凝固过程

用X射线衍射和差热分析方法研究MgO、MgCl_2与H_2O的凝结物,摩尔比分别为5:1:13、3:1:11、5:1:11.39和3.75:1:12.25四种配凝体系,在不同凝结时间内的相组成与相含量。两种实验方法的结果表明:不同配比时其凝固过程的相组成不同;5Mg(OH)_2MgCl_28H_2O晶相可以是稳态,也可以是亚稳态,这与配凝体系中有无胶凝物质或其他物质的存在有关。他是强度的主要相。