NF1基因突变致儿童头颈部丛状神经纤维瘤及尼罗替尼治疗的研究进展

神经纤维瘤病(NF)是一类罕见的常染色体显性遗传性疾病,主要分为1型神经纤维瘤病(NF1)、2型神经纤维瘤病(NF2)和施万细胞瘤病3种类型,其中NF1是由位于17号染色体上的NF1基因突变所致,占所有神经纤维瘤病的96%,发病率为1/3000~1/2600,多在儿童期发病,出现逐渐加重的疼痛、畸形,甚至毁容和运动障碍,可能造成终身认知障碍、学习障碍和社交功能受损,有些瘤灶还可出现恶变,有并发其他多种肿瘤的风险。尼罗替尼作为一种二代靶向药,也被称为第二代BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂。靶向药物是目前新兴的抗肿瘤治疗手段,作用原理主要是针对肿瘤细胞上的特异性靶点,杀死肿瘤细胞,对正常细胞影响较小。由于儿童丛状神经纤维瘤患者处于生长发育阶段,所以其诊断、治疗、随访较成人更为复杂,因此,研究者通过以上治疗经验及国内外相关文献的回顾有助于提高临床对该病的进一步认识。同时,对NF1基因突变致儿童头颈部丛状神经纤维瘤患者的治疗和管理需要团队的努力,包括医学专家和患儿,鉴于这种疾病的复杂性,开发有效的治疗方法同样需要跨学科的团队合作。在过去的数十年里,虽然在研究NF1方面取得进展,但这种疾病在未来一段时间内仍将是临床一大挑战。本研究在了解NF1的诊断、治疗及随访等基础上,针对NF1基因突变致儿童头颈部丛状神经纤维瘤及尼罗替尼治疗的研究进展作一综述。

甲状腺手术中常规解剖喉返神经的临床价值

目的探讨甲状腺手术中常规解剖喉返神经对防止其损伤的临床价值。方法回顾性分析5344例甲状腺手术患者在全身麻醉下行手术治疗的临床资料,术中解剖喉返神经548例(解剖组),未解剖喉返神经4796例(未解剖组);比较两组术中喉返神经损伤的发生率有无差异。结果解剖组喉返神经损伤12例,发生率为2.2%;未解剖组喉返神经损伤512例,发生率为10.7%。两组喉返神经损伤率差异具有统计学意义(P<0.01)。结论甲状腺手术中常规解剖喉返神经能有效防止其损伤。

CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标志物的价值

目的探讨CD44作为筛选下咽癌肿瘤干细胞分子标记物的价值。方法应用流式细胞仪检测下咽癌FADU细胞系中CD44的表达;采用免疫磁珠分选技术(MACS)分选CD44+细胞,并用流式细胞仪检测其纯度;运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测CD44+、CD44-细胞的体外增殖能力,将相同数量级(1×106、1×105)的CD44+、CD44-细胞分别注射于雄性非肥胖糖尿病型/重症联合免疫缺陷(non-obese diabetic/severe combined immunodefi ciency,NOD/SCID)小鼠皮下,观察其体内致瘤能力的差异。结果下咽癌FADU细胞系中CD44+细胞占(21.1±1.56)%,免疫磁珠分选后的CD44+细胞纯度达(99.4±0.29)%。体外增殖能力研究显示CD44+细胞增殖速度明显快于CD44-细胞。NOD/SCID鼠体内致瘤实验结果显示:1×105CD44+细胞致瘤率为12.5%(1/8),1×105 CD4 4-细胞致瘤率为0(0/8);1×106 CD44+细胞致瘤率为100%(8/8),1×106 CD4 4-细胞致瘤率为5 0%(4/8);相同数量级的CD44+与CD44-两组细胞致瘤率差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,CD44+细胞组比CD44-细胞组更早成瘤,潜伏期明显缩短。CD44+细胞组所致肿瘤体积平均为(2017.81±538.50)mm3,而CD44-细胞组所致肿瘤体积平均为(1153.25±503.18)mm3,两组差异具有统计学意义(t=2.67,P<0.05)。结论下咽癌肿瘤中CD44+细胞比CD44-细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤能力,提示肿瘤干细胞可能存在于CD44+肿瘤细胞内,CD44可作为筛选下咽癌肿瘤干细胞的一个重要分子标记物。

CD44基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建CD44基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并在下咽癌FaDu细胞株上鉴定其沉默效率,为研究目的基因沉默后下咽癌肿瘤细胞致瘤性的改变提供稳定可靠的载体。方法针对目的基因CD44mRNA的序列,按照RNA干扰序列的设计原则,设计、合成4个CD44基因特异性小分子干扰iRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,将其合成短发卡hRNA(short hairpin RNA,shRNA)并退火成双链DNA,与慢病毒载体重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆。将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其感染下咽癌FaDu细胞株细胞,采用Real-time PCR检测靶基因的沉默效率。结果对LV-CD44-shRNA载体进行双酶切鉴定,证实短发夹RNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入序列正确,CD44基因RNA干扰重组慢病毒载体经293T细胞成功包装后,其病毒滴度为8E+8TU/ml。RNA干扰下咽癌FaDu细胞CD44基因后,CD44 mRNA水平显著下降,干扰效率大于70%。结论成功构建了CD44基因的shRNA慢病毒表达载体,能够在细胞水平有效沉默靶基因,为CD44基因沉默后下咽癌肿瘤细胞生物学改变的研究打下了较坚实的基础。

采用改良L型切口行甲状腺癌颈清扫术

目的探索更加美观隐蔽的甲状腺癌颈清扫术手术切口。方法将2009年1月~2012年12月在我院接受颈清扫术的72例甲状腺癌颈淋巴结转移患者采用改良L型切口进行手术。其中22例患者行甲状腺全切术+患侧I~Ⅵ区颈清扫术;另50例患者单纯行颈清扫术,清扫范围主要为I^V区淋巴结。颈清扫切口行于斜方肌表面发际前缘自乳突尖后向下行至锁骨上约1.5cm处循皮纹横行向前至颈前中部或与原甲状腺手术切口相连。其中根治性颈清扫术4例,功能性颈清扫术68例。结果72例患者共行83侧颈清扫术,均行改良L型切口。手术过程均顺利,术野暴露满意,手术时间为128~196min,平均145.3±23.8min。共11例患者出现术后并发症,其中颈部积液6例、副神经损伤3例、乳糜漏2例。无皮瓣坏死、切口感染等并发症发生。术后患者颈部切口瘢痕隐蔽,外观影响小。术后随访6个月~4年,淋巴结复发率为0.0%。结论采用改良L型切口行颈清扫术暴露满意,手术并发症少,术后切口隐蔽,是甲状腺癌颈清扫术一种较为理想的手术入路。

鸡耳蜗EFNA2基因RNAi慢病毒载体的构建及其靶基因离体沉默效率

目的构建鸡耳蜗EFNA2基因的RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,在离体培养原代鸡听神经细胞中鉴定其沉默效率。方法针对鸡EFNA2基因序列设计特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶点,构建慢病毒pFU-GW-iRNA载体,将筛选所得有效短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体在293T细胞中包装成病毒颗粒,随后将其感染离体培养原代鸡听神经细胞,最后采用Real-time PCR检测靶基因的沉默效率。结果 PCR克隆鉴定及测序结果显示所构建的shRNA慢病毒载体正确无误,包装病毒后的滴度为2.0×109 TU/ml,分别命名为LV-GFP-EFNA2-shRNA-l、LV-GFP-EFNA2-shRNA-2和LV-GFP-EF-NA2-shRNA-3。ShRNA慢病毒颗粒感染目的细胞后,EFNA2基因的mRNA表达量较阴性对照载体慢病毒感染组分别下降了76.11%、61.87%和68.44%。结论本研究成功构建了鸡EFNA2基因的RNAi慢病毒表达载体,并能在离体培养的原代鸡听神经细胞中有效沉默靶基因。

经球囊扩张管侧管通气法在无气管造口的全身麻醉患儿行气道球囊扩张术中的应用

目的 回顾性分析经球囊扩张管侧管通气法用于无气管造口的全身麻醉患儿行气道扩张术的临床效果及安全性。方法 收集2019年12月—2020年6月在上海市儿童医院择期或急诊行支撑喉镜下气道球囊扩张术的19例中度获得性声门下狭窄患儿的临床资料,根据术前有无气管造口分为气管造口组(11例)和无气管造口组(8例)。无气管造口组在给予常规气管插管麻醉后,应用与球囊扩张管侧管相连的气管导管控制通气;气管造口组则通过气管造口管理呼吸。记录两组患儿麻醉诱导前(T_(1))、球囊扩张导管置入前(T_(2))、球囊扩张导管扩张中(T_(3))、球囊扩张后恢复正常通气时(T_(4))的血流动力学指标[心率、平均动脉压(MAP)、经皮动脉血氧饱和度(SpO_(2))]和呼气末二氧化碳浓度(EtCO_(2))。记录术中、术后两组患儿不良反应(喉痉挛、支气管痉挛、术后苏醒延迟、再次气管插管或需留置气管导管)发生情况。结果 两组间患儿各时间点心率、MAP、SpO_(2)的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。两组患儿各时间点间心率、MAP、SpO_(2)的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。两组间T_(1)、T_(2)时间点EtCO_(2)的差异均无统计学意义(P值均>0.05);无气管造口组T_(3)时间点EtCO_(2)显著低于气管造口组同时间点(P<0.05),T_(4)时间点EtCO_(2)显著高于气管造口组同时间点(P<0.05)。气管造口组各时间点间EtCO_(2)的差异均无统计学意义(P值均>0.05);无气管造口组T_(3)时间点的EtCO_(2)显著低于同组T_(1)、T_(2)时间点(P值均<0.05),T_(4)时间点的EtCO_(2)显著高于同组T_(1)、T_(2)时间点(P值均<0.05)。两组均无1例患儿发生喉、支气管痉挛和苏醒延迟,无气管造口组患儿无1例需再次行气管插管或留置气管导管。结论 无气管造口的患儿在行气道球囊扩张术中,球囊扩张管的侧管可安全、有效地对无自主呼吸患儿进行全身麻醉下的控制通气。

舌骨移植喉气管成形术联合T管扩张治疗婴幼儿喉气管狭窄

目的探讨舌骨移植喉气管成形术联合T形硅胶管扩张治疗婴幼儿喉气管狭窄的疗效。方法2012~2017年我科收治喉气管狭窄婴幼儿患者7例,均采用自体舌骨移植喉气管成形术联合“T”形硅胶管扩张进行治疗。结果术后随访1~5年,6例患儿术后顺利拔除T管,其中1例因T管两端气管内肉芽生长,行二次手术,延期拔管。1例患儿术后移植舌骨坏死,再次出现狭窄。结论舌骨移植喉气管成形术联合T形硅胶管扩张治疗婴幼儿喉气管狭窄效果肯定。

防治过敏性鼻炎,你需要知道这些事

过敏性鼻炎是耳鼻喉科常见疾病之一,据不完全统计,全球有5亿人受过敏性鼻炎困扰,其在欧美地区发病率有12%~30%,我国也有高达2.4亿的过敏性鼻炎患者。那么,过敏性鼻炎是怎么回事?我们又该如何防治呢?疾病的发生与环境和食物过敏原有关过敏性鼻炎又叫变应性鼻炎,其发生和家族疾病史、接触过敏原(变应原)都有关系,比如有变态反应疾病家族史的人更容易患病。

头颈部肿瘤干细胞分子生物学标志及其筛选

头颈部恶性肿瘤生物学方面特点的研究对于其预防、早期诊断和早期治疗有着重要的理论价值.许多研究表明,包括头颈部肿瘤在内的实体瘤中存在有肿瘤干细胞.肿瘤干细胞概念的提出,揭示了靶向性或选择性杀伤肿瘤干细胞的可能,为肿瘤根治、防止复发和转移提出了新的思路.肿瘤干细胞研究的关键之一是寻找其特异性分子生物学标志.本文重点总结了肿瘤干细胞的生物学性状,已发现的头颈部肿瘤干细胞的特异性分子标志物以及分离与鉴定肿瘤干细胞的技术方法.

卡那霉素联合呋塞米致聋小鼠耳蜗螺旋神经节细胞的退化变性及其EFR3A蛋白的表达

目的 观察小鼠耳毒性药物损伤毛细胞后耳蜗螺旋神经节细胞的退化变性以及该过程中EFR3A蛋白的表达变化.方法 48只8周龄C57BL/6J小鼠采用卡那霉素联合呋塞米单次注射给药破坏耳蜗毛细胞,给药后1、5、15、30、60 d时采用免疫荧光染色、半薄切片甲苯胺蓝染色以及透射电镜等手段观察耳蜗毛细胞损伤和螺旋神经节的退化变性程度,同时通过免疫荧光和蛋白印迹等技术检测螺旋神经节细胞退化变性过程中EFR3A蛋白的表达变化.结果 联合应用卡那霉素和呋塞米可明显损伤C57BL/6J小鼠耳蜗毛细胞,毛细胞破坏后,螺旋神经节细胞出现退化变性.螺旋神经节细胞超微结构的损伤改变最早开始于给药后5d,其数量下降开始于给药后15 d.与对照组相比,EFR3A蛋白表达的明显增强出现在给药后5d,给药后15 d时其表达下降并接近正常,之后未再出现明显变化.结论 小鼠耳蜗毛细胞损伤后螺旋神经节细胞发生退化变性,其EFR3A蛋白表达升高,两者在时间上高度重合,提示EFR3A蛋白在耳蜗毛细胞破坏后螺旋神经节细胞的退化变性过程中可能发挥一定作用.

氨基糖苷类药物中毒后耳蜗螺旋神经元退行性变研究

哺乳动物感音神经性聋发生后螺旋神经退行性变的研究，对于感音神经性聋发生后耳蜗螺旋神经元退行性变的防制和干预有着重要的理论价值。本文重点总结了哺乳动物氨基糖苷类药物耳中毒动物模型的建立、耳蜗毛细胞破坏后螺旋神经元退行性变的形态变化及其发生机制等方面的研究成果。

儿童分化型甲状腺癌29例临床病例分析

目的 分析儿童分化型甲状腺癌的临床表现、治疗方法及其结果,探讨其最佳治疗方式.方法 对上海交通大学医学院附属新华医院耳鼻咽喉头颈外科1998年1月-2014年7月收治的14岁以下的29例儿童分化型甲状腺癌的临床表现、治疗方法及其结果等进行回顾性分析.结果 29例患儿中,以“发现颈部肿块”为主诉者27例;单侧甲状腺癌16例,双侧甲状腺癌13例;甲状腺实质性肿块伴多发点状钙化者21例（72.4％）;颈淋巴结肿大者24例（82.8％）,其中仅患侧肿大者9例（37.5％）,双侧均肿大者15例（62.5％）.我院初治患儿20例中,T2及其以上者18例,颈淋巴结肿大者16例.行甲状腺患侧腺叶＋峡部切除术者2例,甲状腺全切除术者18例,其中1例气管壁受肿瘤侵犯者同时行气管部分切除术;同时行颈清扫术者16例.在外院接受过原发灶手术的9例患儿中,术后出现颈淋巴结肿大者8例,伴发肺转移者6例;行颈清扫术5例,残留甲状腺切除术＋颈清扫术4例.术后行^131I治疗者总共27例.术后随访率100％,随访时间平均6年10个月（0.5 ～16.0年）,无死亡病例发生,亦无复发、局部及远处转移.结论 儿童分化型甲状腺癌侵犯性明显强于成人,甲状腺全切除术＋颈清扫术辅以术后^131I治疗可作为其基本治疗方案.

儿童颈部支气管源性囊肿的诊治

支气管源性囊肿是一种罕见的先天性疾病,源于原始前肠的发育异常,占先天性支气管肺前肠囊性畸形的20%～30%,发病部位以肺内与纵隔多见,极少出现颈部、胸壁及腹膜后。我科收治儿童颈部支气管源性囊肿6例,现总结报道如下。1资料与方法2014-04-2017-06期间我科共收治6例头颈部支气管源性囊肿患儿,其中男4例,女2例;年龄1d～3岁6个月,平均18个月。