腹腔镜下左半肝切除术

术者简介中山大学附属第一医院肝外科主任医师,博士研究生导师美国得克萨斯大学西南医学中心访问学者主要从事肝胆肿瘤的基础和临床研究,以第一/通信(含共同)作者身份发表SCI论文33篇;主持国家和省部级科研基金项目共8项广东省医学会肝胆胰外科学分会副主任委员广东省医学会肝癌分会委员广东省健康管理学会消化内镜MDT专业委员会副主任委员。

肝癌组织中调节性T细胞浸润与门静脉癌栓形成及其与预后的关系

目的探讨肿瘤组织中调节性T细胞(Tregs)浸润与患者临床病理特征的关系及其对患者预后的影响。方法免疫组织化学法检测76例肝癌患者肿瘤和癌旁组织中Tregs浸润情况,分析Tregs高表达、低表达与患者临床病理特征之间的关系,采用Kaplan-Meier生存分析法评估Tregs浸润对肝癌患者预后的影响。结果肿瘤组织中Tregs浸润与患者性别和门静脉癌栓显著相关(P<0.05),而与肝内多发瘤灶、HBV感染、血清AFP水平、肿瘤大小、肝硬化、肿瘤包膜完整性、Edmonson分级等无相关性(P>0.05)。Tregs低表达组DFS和TS均显著高于Tregs高表达组(P=0.012和P=0.022)。生存分析显示,肝内多发病灶、包膜有无、门静脉癌栓形成(PVTT)和瘤内Tregs浸润显著影响患者无瘤生存率(P<0.05),其他因素如年龄、性别、乙肝状态、AFP水平、Child-pugh分级、肝硬化有无、Edmonson分级、癌旁和瘤内CD4+、CD8+T细胞浸润等均对患者DFS无显著影响(P>0.05)。上述因素中,仅PVTT和瘤内Tregs浸润显著影响患者总体生存率(P<0.05)。多因素风险模型分析,包膜完整与否(OR=1.816,95%CI:1.084-3.041,P=0.023)和瘤内Tregs浸润(OR=1.931,95%CI:1.153-3.233,P=0.012)是影响患者DFS的独立预后因素;瘤内Tregs浸润(OR=1.843,95%CI:1.073-3.166,P=0.027)是影响患者OS的独立预后因素。结论肿瘤组织中Tregs高表达的肝癌患者预后不良,Tregs高表达有可能促进PVTT形成,Tregs有可能成为肝癌免疫治疗的作用靶点。

小剂量环磷酰胺通过抑制调节性T细胞提高小鼠肝癌阿霉素化疗效果

目的探讨小剂量环磷酰胺是否可以提高小鼠肝癌阿霉素化疗效果,并对其机制进行探讨。方法建立C57BL/6J小鼠皮下肝癌模型,待肿瘤长至100～150 mm^3体积大小时备用。10只小鼠随机分为2组,对照组不处理,观察组以2 mg/只的剂量腹腔注射环磷酰胺(CTX),4天后以流式细胞仪检测小鼠脾脏CD4^+、CD8^+T细胞和CD4^+CD25high Treg淋巴细胞比例。32只小鼠随机分为4组:①对照组(PBS);②环磷酰胺组(CTX);③阿霉素组(DOX);④环磷酰胺+阿霉素组(CTX+DOX);观察小鼠皮下肿瘤生长情况和小鼠的生存期。结果应用小剂量CTX后荷瘤小鼠脾脏CD4^+和CD8^+T淋巴细胞的浸润分别由17.62%、16.03%上升到24.54%和25.41%(P<0.05),而Treg则由用药前的11.92%降低为用药后的5.36%(P<0.05)。CTX组肿瘤生长和对照组相比无统计学差异(P>0.05)。DOX组、CTX+DOX组肿瘤生长均显著受到抑制,以CTX+DOX组更为显著(P<0.05)。DOX组生存期显著改善(P=0.027),联合应用CTX后生存期亦有显著提高(P=0.018)。结论小剂量CTX可以抑制小鼠脾脏Treg浸润,改善机体免疫微环境,并可以增强肝癌阿霉素化疗的效果。免疫化疗治疗晚期肝癌具有一定的应用前景。

区域性灌注化疗时5-FU的血液和肝脏组织药物浓度分布特征

目的研究经肝动脉和门静脉等不同途径区域灌注化疗时5-FU在大鼠血液和肝脏组织中的浓度分布和消除过程,为临床肝脏肿瘤化疗提供参考。方法经颈静脉注射5-FU或分别经肝动脉及门静脉插管区域灌注,剂量为20mg/kg体重。采用高效液相色谱法测定血浆及肝脏组织中5-FU的含量。进一步计算5-FU在肝脏和血浆中的药动学数据和穿透比率及治疗优势度。结果外周静脉注射时,肝脏组织的药物峰浓度(Cmax)和药物时量曲线下面积(AUC)分别为13.79±4.56μg/g,342.20±108.20μg·min/g;血浆Cmax和AUC分别为36.85±5.96μg/ml,842.00±158.00μg·min/ml。肝动脉灌注5-FU时,肝脏组织药物Cmax和AUC分别为29.58±4.30μg/g,794.60±115.40μg·min/g;血浆Cmax和AUC分别为24.39±4.63μg/ml,639.70±133.80μg·min/ml。门静脉灌注时,肝脏组织药物Cmax和AUC分别为28.21±4.46μg/g,733.60±180.3μg·min/g;血浆Cmax和AUC分别为21.02±4.06μg/ml,529.80±111.50μg·min/ml。结论与外周静脉注射全身化疗比较,区域性肝动脉或门静脉灌注化疗可显著提高肝脏组织中的药物浓度,同时减少化疗药物在外周血中的分布,可作为临床肝癌化疗的较好治疗措施。

ErbB2诱导的肿瘤形成和侵袭有赖于FAK功能

目的:探讨FAK功能在ErbB2诱导肿瘤形成和侵袭过程中的作用。方法:采用FAK-/-和FAK+/+细胞感染含ErbB2逆病毒颗粒,使ErbB2在FAK-/-和FAK+/+细胞中过量表达,通过比较FAK-/-ErbB2和FAK+/+-ErbB2在细胞生存、细胞侵袭、体内成瘤等项指标来观察FAK的功能。结果:感染后,ErbB2受体在FAK-/-和FAK+/+细胞中稳定表达和激活。ErbB2诱导的锚定依赖性细胞生存、细胞侵袭以及体内肿瘤形成等方面均有赖于FAK功能。结论:FAK在调节ErbB2诱导的细胞生存、肿瘤形成和侵袭等方面起着重要的作用,其机制可能涉及到ErbB-FAK-Src-MAPK分子信号转导途径。

AFP-L3阳性肝细胞癌患者肿瘤分期和外周血淋巴细胞亚群的研究

目的:分析小扁豆凝素结合型甲胎蛋白(AFP-L3)阳性的肝细胞癌患者肿瘤分期及外周血淋巴细胞的改变,探讨AFP-L3水平与肿瘤分期及免疫状态的关系。方法:采集60例肝细胞癌患者外周血,检测AFP及AFP-L3含量。根据外周血AFP-L3比例将60例原发性肝细胞癌患者分为2组:AFP-L3(+)组和AFP-L3(-)组。流式细胞术检测外周血中各淋巴细胞亚群(NK、CD4+、CD8+、CD4/CD8、Treg)的比例。结果:AFP-L3(+)组患者UICC分期Ⅲ+Ⅳ期为29例,AFP-L3(-)组为7例;AFP-L3(+)组患者BCLC分期C+D期为20例,AFP-L3(-)组为3例。AFP-L3(+)组患者发生血管侵犯为17例,远高于AFP-L3(-)组(1例)。AFP-L3(+)组患者外周血中NK细胞比例及CD4/CD8比值下降,CD8+T和Treg细胞显著比例上升。结论:外周血AFP-L3阳性的肝癌患者容易发生血管侵犯,且分期较差,可能与淋巴细胞亚群发生变化、免疫系统受到抑制有关。

SLC22A1低表达与肝癌患者的不良预后相关:303例报告

目的评估SLC22A1在肝癌患者中的表达及其对预后的影响。方法使用303例肝癌（HCC）和匹配的癌旁肝组织（ANLTs）标本构建组织芯片并进行免疫组化染色（IHC）,两名病理医生对SLC22A1的表达进行评分。评分范围为1到12分,总分〉6为高表达组,总分≤6为低表达组。分析SLC22A1表达量与患者的临床病理特征的关系。结果所有ANLTs的IHC评分均为12分,肝癌中仅29例（9.6%）为12分。根据患者HCC的IHC评分将其分为两组：59%（180/303）为低表达组（评分≤6）;41%（123/303）为高表达组（评分〉6）。低表达组的无瘤生存率（DFS）和总体生存期率（OS）均显著低于高表达组。低表达组的1、3、5年DFS分别为43%,31%和27%,高表达组为58%,47%和43%。低表达组的1、3、5年OS分别为66%,38%和32%,高表达组为80%,57%和50%。SLC22A1的低表达与肿瘤直径,BCLC分期,肿瘤分化和AFP水平相关（P〈0.05）。SLC22A1低表达是影响总体生存的独立预后因子（HR,1.454;95%CI,1.050-2.013）。结论 SLC22A1低表达是肝细胞癌的恶性特征和潜在不良预后的标志。

原发性肝癌组织双向电泳技术优化

【目的】优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术。【方法】对双向电泳实验中的关键环节:样本处理、上样方法、聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较。【结果】采用7mmol/L尿素、2mol/L硫脲、40g/LCHAPS、100mmol/LDTT、5g/L(pH3-10)IPGbuffer,1mmol/LPMSF作为裂解液,丙酮沉淀蛋白,主动水化上样法,聚焦电压达到140kV可以得到分辨率高、重复性好的结果。【结论】上述改良提高了2-D图谱中蛋白位点的分辨率和重复性,为原发性肝癌组织的蛋白质组学研究奠定了基础。

肝脏分隔及门静脉右支结扎术后肝内门静脉侧支血管开放与肝组织增生关联分析

【目的】探讨肝实质分隔和门静脉右支结扎术后肝内门静脉侧支血管开放对残余肝组织增生水平的影响。【方法】回顾性分析2013年4月至2022年6月在中山大学附属第一医院行肝实质分隔和门静脉右支结扎术的肝细胞癌患者的临床资料。根据患者一期术后肝内门静脉开放侧支血管的数量分为3组:未开放组,开放血管1条组和开放血管≥2条组。首先分析3组在术前、术中及术后肝功能、肝组织增生情况、二期手术情况等方面的分布差异,进一步采用多重线性回归分析探讨影响一期术后肝内门静脉开放侧支血管数量不同的因素。【结果】合计37例实施了肝实质分隔和门静脉右支结扎术肝癌患者最终纳入本研究。3组术前情况差异均无统计学意义(P>0.05)。3组患者肝实质分隔方式存在差异,采用微波消融分隔肝实质法的患者开放血管≥2条的比例大于肝实质离断法的患者(57.14%vs.42.56%,P=0.031),而3组在手术时间、失血量、输血量水平等指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。3组患者每日残余肝组织增长体积[侧支血管≥2 vs.侧支血管=1 vs.侧支血管=0,(14.25±8.81 vs.20.65±9.85 vs.30.10±19.31)mL;P=0.018],差异有统计学意义。3组行二期切除者的比例无差异(P=0.363),但侧支血管开放≥2条者手术间隔天数显著长于未开放或只开放1条者[(16.31±5.44 vs.10.30±3.40 vs.12.78±3.35)d;P=0.023]。采用多重线性回归分析,逐步法纳入性别、年龄、术前肝功能分级、门静脉高压、肿瘤数目等相关因素,结果发现肝实质分隔方式是唯一影响肝内门静脉侧支血管开放数目的因素(P=0.031),微波消融和肝脏离断分隔肝实质后形成的肝内门静脉侧支血管数目分别为[2.0(1.5)vs.1.0(1.0)条,P=0.031]。【结论】肝实质分隔及门静脉右支结扎术后肝内门静脉侧支血管开放数目与肝组织增生水平负相关,采用肝实质离断分隔肝实质形成的侧支血管数目较少。

多灶肝细胞癌异质性的多组学研究与临床意义

超过一半的肝细胞癌(HCC)患者在就诊时肝内已出现多发病灶,临床上针对多灶HCC的治疗手段十分有限且疗效不佳。多灶HCC中肿瘤的高度异质性是导致治疗失败的重要原因。越来越多的研究采用多组学测序,探索多灶HCC中不同病灶间的基因水平和转录水平的异质性,包括肿瘤克隆进化以及基因突变、拷贝数变异、结构变异、RNA表达、肿瘤免疫微环境特征等的异质性。肿瘤克隆进化导致的药物靶点分布以及免疫微环境的特征可精准预测多灶HCC患者对靶向药物和免疫治疗的疗效。因此,全面、准确地评估多灶HCC的多组学异质性对实施精准治疗至关重要。

抑制Treg联合瘤内转染Ad.GM-CSF增强阿霉素治疗肝癌效果的实验研究

目的:探讨抑制调节性T细胞(Treg)联合瘤内转染Ad.GM-CSF增强阿霉素治疗肝癌效果的可行性,并对其机制进行探讨。方法:建立C57BL/6J小鼠皮下肝癌模型,待肿瘤长至100-150mm3时随机分为6组,每组12只:(1)对照组(PBS);(2)环磷酰胺组(CTX);(3)阿霉素组(DOX);(4)Ad.GM-CSF组;(5)CTX+DOX组;(6)CTX+DOX+Ad.GM-CSF组。末次治疗后第5d每组处死其中4只小鼠,取脾脏测定CTL活性;取肿瘤组织行病理检查;每组另外的8只小鼠用于观察皮下肿瘤生长和小鼠生存期。结果:CTX可以显著增强DOX对肿瘤生长的抑制作用(P<0.05),延长小鼠生存期[(62.13±4.21)dvs(79.88±9.00)d,P<0.05],而联合应用Ad.GM-CSF可显著增强该效果[(79.88±9.00)dvs(106.13±5.23)d,P<0.01]。同其它组相比,CTX+DOX+Ad.GM-CSF组小鼠瘤体内可见大量肿瘤细胞坏死,CD8+T细胞浸润显著增加,而小鼠脾脏CTL杀瘤活性显著增强(P<0.05)。结论:以阿霉素为治疗基础的化疗联合抑制Treg并瘤内转染Ad.GM-CSF的免疫治疗具有协同抗肝癌作用,免疫化疗治疗晚期肝癌具有一定的应用前景。

经皮消融治疗早期肝癌的临床进展

1983年日本学者杉甫信之率先采用超声引导经皮穿刺酒精注射治疗肝癌,开拓了肝癌消融治疗序幕.20多年来,化学消融(无水酒精、醋酸)、热消融(射频消融、微波消融、激光消融、高强度聚焦超声)和冷冻消融等各种消融治疗措施相继出现,丰富了肝癌的综合治疗手段,对于改善肝癌患者的生存质量、提高生存率起到了重要作用.

肝纤维化评价指标预测肝癌患者肝切除术后肝功能衰竭

【目的】天冬氨酸转氨酶-血小板比率指数(APRI)与肝脏纤维化-4指数(FIB-4)等指标已被证实可用于无创性评估肝纤维化、肝硬化程度,对肝细胞癌(HCC)患者肝切除术预后评估有较高的准确性。本研究旨在探讨APRI与FIB-4对HCC患者肝切除术后发生肝功能衰竭(PHLF)的预测能力。【方法】回顾性分析426例在我院接受肝切除术的HCC患者的临床资料。收集患者肝切除术前2周内的实验室数据,计算APRI、FIB-4、Child-Pugh评分。采用受试者工作特征(ROC)曲线确定APRI、FIB-4、Child-Pugh评分的AUC值和最佳临界值。采用单因素和多因素Logistics回归分析确定PHLF的独立危险因素,对比APRI和FIB-4对PHLF的预测能力。【结果】本研究中共有11.3%(48/426)患者发生PHLF。多因素分析显示:大范围肝切除术(≥3个肝段切除)、失血量>400 mL,TBIL、PLT、纤维蛋白原以及APRI、FIB-4均为PHLF的独立危险因素;ROC曲线分析显示:APRI(AUC=0.816)和FIB-4(AUC=0.728)对PHLF的预测能力均优于Child-Pugh评分(AUC=0.566)P均<0.001。【结论】术前APRI与FIB-4都是HCC患者肝切除术后发生PHLF的独立预测因子并有良好的预测价值。

吞噬细胞运动蛋白1的相关研究进展

吞噬细胞运动蛋白1（engulfment and cell motility 1， ELMO1），是进化上非常保守的一种蛋白质，主要介导细胞的吞噬、移动和形态改变。ELMO1对于维持生物体的稳态具有重要意义，其异常表达与糖尿病性肾病、微生物感染、恶性肿瘤的临床分期和预后密切相关。业已证实 ELMO1是糖尿病性肾病的敏感基因之一，还与肿瘤细胞的侵袭、转移有关。本文就 ELMO1与微生物感染、糖尿病性肾病的发生、发展和肿瘤的关系作一综述。

长链非编码RNA-uc003 ykw.1在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的检测长链非编码RNA-uc003 ykw.1 (lncRNA-uc003 ykw.1)在肝细胞癌组织中的表达并探究其对预后的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测74对肝细胞癌组织及癌旁组织中lncRNA-uc003 ykw.1的表达,将病例分为高表达和低表达组,分析其与临床指标的关系,Kaplan-Meier曲线分析其预后,COX比例风险模型进行预后的单因素分析和多因素分析。结果肝细胞癌中lncRNA-uc003 ykw.1表达量显著小于癌旁组织(P<0.05),lncRNA-uc003 ykw.1的表达与肿瘤最大直径、早期复发相关(P<0.05),单因素和多因素分析均表明lncRNA-uc003 ykw.1低表达是肝细胞癌患者预后不佳的独立预后因素。结论 lncRNA-uc003 ykw.1有望成为预测肝细胞癌预后的重要指标。

原发性肝癌转化及围手术期治疗中国专家共识(2024版)

我国目前仍有超过一半的肝癌患者在初诊时即为中晚期,丧失手术切除机会,而部分可手术患者术后复发转移率高,导致患者总体生存较差.随着外科手术技术的革新、系统治疗和局部治疗手段的丰富和进步,通过多模式综合治疗策略为肿瘤转化提供可能、使患者获得手术切除机会,同时有效降低术后复发转移率,从而实现患者长期生存获益.此外,近年来研究者对转化及围手术期治疗过程中手术时机的选择、病灶评估、疗效预测、并发症处理等方面进行了进一步有益探索.在原有共识的基础上修订并更新形成《原发性肝癌转化及围手术期治疗中国专家共识(2024版)》,提出了在肝癌转化治疗和围手术期治疗领域的治疗策略和实施过程需要解决的问题,以期为推动该领域研究和临床实践奠定基础.

河南豫西某钼矿床水文地质特征浅析

通过分析矿区水文地质特征、地下水基本特征、计算露采矿坑涌水量并与矿区历史排水量和条件相同邻近矿区相对比等,得出矿区无大的地表水体,矿床充水为裂隙充水,水文地质条件简单的结论。

关于反循环钻进工艺实践应用中若干问题的探讨

对反循环钻进施工工艺在实践应用中遇到的钻进深度、在松散层中应用、大直径桩孔施工等问题进行了分析、探讨,提出优化方案,对反循环钻进施工工艺进行了改进,并给出了在施工实践中的体会和经验。

创设小学数学教学情境的有效策略

《义务教育数学课程标准》（2011年版）在课程目标中明确提出：＂体会数学知识之间、数学与其他学科之间、数学与生活之间的联系,运用数学的思维方式进行思考,增强发现和提出问题的能力、分析和解决问题的能力。＂那么,教师应如何在数学课堂教学中落实这一新理念呢？

让数学教学插上生活的翅膀

现阶段的小学生聪明、好动,容易获取社会各方面的信息,但独立性较差,上课时注意力常常不集中。而数学又是一门比较抽象的学科,在一堆数据符号面前,如果学习内容不够新鲜、生活化,学生就会产生一种厌学的情绪,他们的数学能力、生活能力等就不能得到培养和提高。《义务教育数学课程标准（2011年版）》指出：“数学教学要紧密联系学生的生活实际,从学生的生活经验和已有的知识出发。”