秀珍菇子实体发育相关消减杂交cDNA文库的构建与分析

秀珍菇(Pleurotus pulmonarius)经冷刺激后可以诱发子实体的形成。为了更好地了解秀珍菇在冷刺激后子实体发育的机理,本文利用抑制性消减杂交技术构建了cDNA文库。基于该文库,共检测到185条高质量的EST差异序列。根据序列比对分析,136条序列与已知基因同源,49条序列属功能未知。生物信息学分析显示136条序列按功能分属于23个大类。这些研究为秀珍菇变温结实的分子机理探究提供理论基础。

两个香菇品种在冷藏过程中营养成分及相关酶类变化研究

对两个香菇主栽品种浙香6号和939在冷藏过程中总糖含量、蛋白含量、多酚氧化酶和蛋白酶变化趋势和规律的测定结果:在整个冷藏过程中,参与鲜菇褐变的多酚氧化酶的活性浙香6号同比均明显高于939,且在0~25天始终保持较高活性;对营养和风味品质的维持有较大关系的蛋白酶的活性,浙香6号先升后降,在3天时达到峰值,显著高于939。通过早期干扰蛋白酶活性变化,可对浙香6号鲜菇在长远运输中营养和风味品质的维持起较大作用,使25天时商品性状良好,35天时仍符合销售标准。

工厂化栽培白色和黄色金针菇不同生长阶段的胞外酶活性比较

以工厂化栽培的白色和黄色金针菇品种为研究对象,对发菌初期、发菌中期、满瓶期、原基期、采收期等5个不同生长阶段的胞外酶活性进行检测。结果:白色品种在整个过程中漆酶活性显著高于黄色品种,白色品种的碱性和中性蛋白酶活性也高于黄色品种。通过相关矩阵分析,白色和黄色品种的羧甲基纤维素酶与半纤维素酶活性存在显著正相关,中性蛋白酶与碱性蛋白酶活性存在正相关;中性蛋白酶和碱性蛋白酶与羧甲基纤维素酶和半纤维素酶活性也存在正相关;白色品种的酸性蛋白酶与碱性蛋白酶活性存在正相关。

不同栽培原料配方及装瓶容重对金针菇生长发育的影响

为了开发新型金针菇栽培基质原料,优化基质配方和用量,研究了不同碳源、氮源基质原料配方以及不同装瓶容重对金针菇菌丝及子实体生长发育的影响。结果表明,7种参试的碳源主料培养基中,以玉米芯为碳源主料的培养基效果最优,金针菇的产量和生物学效率分别为150.6 g·瓶-1和51.2%,显著高于其他6个配方;以豆秆屑为碳源主料的培养基配方可以获得较理想的产量,菌丝生长速度与长势、子实体生长发育数量与长度等性状均表现良好,具有较高开发价值。6种参试的氮源辅料培养基配方中,以菜籽饼配方产量最高,达到186.0 g·瓶-1,高于麸皮、米糠等常规氮源辅料;啤酒渣配方平均单瓶产量157.5 g,是一种可用于金针菇栽培的良好氮源基质原料,而油茶饼不适于作为金针菇栽培的氮源基质原料。培养基装瓶容重对金针菇产量和生物学效率具有较大的影响,该试验最佳装瓶容重为740 g·瓶^(-1)。

金针菇生长发育期间相关胞外酶的活性变化研究

以白色金针菇菌株为材料,研究其生长发育过程中羧甲基纤维素酶、半纤维素酶、漆酶、酸性磷酸酶和中性蛋白酶活性的变化规律。结果表明,整个生长发育期间胞外酶活性变化具有明显的阶段性。羧甲基纤维素酶菌丝营养生长阶段活性较低,现蕾后活性急剧增强,达到11.43 U;半纤维素酶高峰出现于采收期,达到8.13 U;漆酶在菌丝营养生长阶段活性较高,原基形成后迅速下降到0.15 U;中性蛋白酶菌丝营养生长阶段活性比较稳定,现蕾前相对较低,子实体生长阶段酶活性明显增强;酸性磷酸酶活性随着菌丝培养呈下降趋势,但生殖生长期迅速升高。

金针菇基因组SSR位点分析及标记开发

以金针菇(Flammulina velutipes)基因组序列为基础,对其SSR位点进行分析,设计16对引物对其中16个SSR位点进行标记设计,并对6个商业化的金针菇品种进行筛选。统计结果表明,金针菇基因组有1279个位点,SSR位点密度为35.53/Mb,并以三核苷酸基序为主,重复数≥10的SSR(即高频)基序数目总计246个,占所有SSR位点的19.23%。设计的16对SSR标记均能扩增条带,多态率仅为18.75%。

秀珍菇菌株主要农艺性状比较及ISSR分子标记鉴定

考察15个秀珍菇（Pleurotus geesterani ）菌株的主要农艺性状,并从14个引物中筛选出7个 ISSR 引物对其基因组DNA进行 PCR 扩增,分析其 DNA序列多态性。结果表明,参试秀珍菇 P02、P03、P04号菌株原基形成时间最短,接种34 d后开始现蕾；“农秀1号”最适出菇温度为20＆#177;2.0℃,P05、P14可以在较高温度出菇；“农秀1号”、P02、P03、P04产量较高。参试秀珍菇菌株遗传相似系数为0.66~1.00；采用UPGMA分析表明,在0.87处可将这15个秀珍菇菌株分成3类。

双孢蘑菇SSR分子标记开发及其在遗传多样性分析中的应用

采用Primer5．0软件设计引物，共设计有效扩增SSR引物112对，经筛选，其中97对在39份双孢蘑菇基因组中扩增出明显差异条带，25对在As2796单孢分离子代群体中表现出多态性，19对引物在单孢分离子代中遵循孟德尔自由分离定律。进一步研究表明共检测到67个等位基因，平均每个位点2．68个，平均Nei’s基因多样性指数为0．5023。8份双孢蘑菇品种的遗传相似系数变化范围为0．3363—0．8641，平均值为0．5385；基于Nei’S遗传相似系数的UPGMA聚类分析，在遗传距离0．46处，8个双孢蘑菇品种（系）分为2个类群，亲缘关系的远近与其种质来源有一定的相关性。这些潜在的多态性SSR的开发为双孢蘑菇遗传多样性分析、图谱构建提供了更丰富的候选分子标记基础，为进一步进行双孢蘑菇新品种的选育和种质资源的分析评价及管理提供了遗传依据。

杏鲍菇单核体菌株及其杂交后代筛选和鉴定

通过对杏鲍菇单核菌丝显微观察、拮抗、ISSR分子标记分析,研究单核体菌株的合理选配及杂种优势。结果显示,2个亲本的8个不同交配类型可以分为两类,一类为亲本ZAASPe003的单核体菌株T1、T2、T3、T4,另一类为亲本ZAASPe007的单核体菌株T5、T6、T7、T8。通过对8个交配类型单核体单×单杂交,经镜检后获得12个杂交组合。通过亲本菌株及其杂交后代菌丝体生长速度与生长势比较,发现杂交后代菌丝体T2T6菌株平均生长速度最快,达到0.443cm/d;应用ISSR分子标记技术,其中7个引物能扩增出条带清晰且具多态性的带谱,共扩增单核体DNA片段61条,杂种双核体DNA片段71条。根据ISSR分子标记分析比较亲本和杂交新组合图谱,发现杂交新组合图谱出现"互补型条带"。

棉籽壳、玉米芯及麸皮的重要营养成分与重金属含量分析

在国家食用菌产业技术体系相关综合试验站的协助下,陆续收集了100多份来自全国各金针菇主产区应用或具有潜在应用价值的栽培原料和生产性应用配方材料,陆续开展含水量,营养元素碳、氮、磷、钾、钙和重金属镉、汞、铅含量的分析。本文介绍棉籽壳。

优质厚实香菇品种选育及工厂化周年栽培技术研发初报

开展以突破南方夏季高温期优质香菇工厂化生产为核心的优质厚实型香菇新品种选育和周年高效栽培技术研究,初步选育出适于工厂化栽培的香菇新菌株L901和L615,其平均每棒总产量(三潮菇)分别达750克和700克;通过工厂化富氧出菇技术集成应用,夏季高温期栽培的香菇菇盖厚实、菇柄较短、柄盖比小,优质菇率均达70%以上。并探索提出"1+N双百共富"香菇工厂化生产模式,即亩产百吨菇、百万产值,企业与菇农同发展共富裕的香菇工厂化生产模式。

阿克苏干旱地区林果园套种黑木耳技术

为了充分利用阿克苏丰富的林果枝条资源、良好的生态和水资源条件,在浙江省重点研发计划项目的支持下,首次以核桃、红枣、香梨、苹果和杨树等林果枝条为栽培原料,在阿克苏干旱气候条件下的林果园中进行黑木耳套种试验。结果表明,核桃、红枣、香梨、苹果和杨树等林果枝条均可用于黑木耳栽培,多种林果枝条混合利用有利于提高产量。阿克苏地区的防护林、种植8年内的核桃和苹果园、行距大于4米的红枣与梨园,以及清洁宽敞的家庭庭院都是适宜的栽培场所。其主要技术为:秋栽黑木耳菌棒在日最高气温降至30℃左右时进行,春栽黑木耳菌棒在日均气温回升到10℃以上时排场出耳;催芽期除增加光照和昼夜温差外,需采取喷雾化水、覆盖遮阳网等措施提高和保持小环境空气湿度,促进耳芽形成与发育;育耳期根据气温变化和耳片生长情况,按照"干干湿湿"的原则进行喷水管理。

工厂化金针菇菌渣隧道式发酵栽培双孢蘑菇试验

近年来,我国金针菇、杏鲍菇等食用菌工厂化生产快速发展,相关数据显示,至2012年11月,全国食用菌工厂化生产企业数量达788家,年总产量达到152万吨。按食用菌产量与菌渣比1︰1.0～1.1计,全国年产生菌渣量超过160万吨。当前大多数企业将菌渣作为灭菌用的燃料自身消化,或出售给有机肥生产企业制作有机肥料;而有些企业,由于利用效率不高。

不同光质的LED光源对工厂化金针菇菌株生长的影响

金针菇（Flammulina velutipes）味道鲜美，营养丰富，是著名的食药两用菌，有“益智菇”等美称，在我国广泛栽培。相关研究表明，光线对食用菌子实体的形成和发育有很重要的影响，只有较少数的食用菌品种如双孢蘑菇、大肥菇等能在完全黑暗的条件下产生出正常的子实体，大部分食用菌在子实体生长阶段需要一定光照才能正常生长。

双孢蘑菇培养料简易通气一次发酵技术试验

培养料发酵是双孢蘑菇栽培工艺中的重要环节,培养料发酵质量的好坏直接关系到双孢蘑菇的产量和质量,甚至栽培的成败。我国当前双孢蘑菇培养料一次发酵过程中,由于存在料堆偏大、翻堆松料不彻底等问题,使料堆供氧不足而引起培养料厌氧发酵的现象十分普遍,是导致双孢蘑菇培养料低质量的主要原因之一。

利用金针菇菌渣培养双孢蘑菇的配方及发酵技术试验

开展基于金针菇菌渣的不同双孢蘑菇培养料配方及发酵技术试验,结果表明:金针菇菌渣和稻草的混合配方的产量均高于常规稻草和纯菌渣配方,其中以金针菇菌渣和稻草比为1︰1的配方产量最高,比常规稻草配方增产19.7%。金针菇菌渣在经过二次发酵后能直接用于栽培双孢蘑菇,由于菌渣持水能力弱、易失水,需注意调节和保持合适的基料含水量,以获得稳定、理想的产量。

三个秀珍菇菌株生产性比较试验

秀珍菇（Pleurotus pulmonarius）又名珊瑚菇、珍珠菇、袖珍菇、迷你蚝菇等,是近十多年发展起来的新兴食用菌种类。由于秀珍菇朵小形美,质地细嫩,鲜甜爽口,营养丰富,风味独特,深受消费者欢迎。自20世纪90年代末秀珍菇商业化开发栽培以来,市场不断扩大,生产得到快速稳步发展（[1]）。据统计,2007年全国秀珍菇总产量为17．4万吨，至2014年达33．1万吨，占同期国内食用菌总产量的1％左右，在我国所有栽培菇种中排名第15位Ⅲ，己成为我国食用菌产业发展的新增长点。目前已有不少菌株在生产企业中应用及相互引用。

不同钙源和添加量对金针菇生长和产量的影响

通过在金针菇培养料中添加5种钙源和4档量,测定其pH变化、菌丝生长速度、菌丝长势和子实体产量,结果为添加1%~2%的轻质碳酸钙和添加1%~2%的贝壳粉有助于提高金针菇的产量和质量,效果最好。

桃树枝栽培黑木耳比较试验

自国家实施天然林保护工程以来，黑木耳的栽培原料紧缺问题日益凸显，己成为制约黑木耳产业发展的瓶颈。另一方面，随着人民生活水平的提高，桃等水果类经济作物的种植面积日益扩大，一棵桃树每年修剪枝条的湿重可达10--25kg，这些枝条一般都是作焚烧处理，不仅污染环境，也容易引发火灾。我们从保护环境、提高农副产品资源利用率、开发黑木耳栽培原料、降低生产成本的角度，

矿物质Ca元素对金针菇菌丝生长的影响

矿物质元素Ca对金针菇生长和发育具有重要作用。通过添加不同浓度CaSO4探究Ca元素对金针菇菌丝生长及胁迫响应相关酶活性的影响。结果显示:5~20 g/L CaSO4添加至母种培养基可促进菌丝衍生及粗壮,以15g/L为佳;添加25g/LCaSO4仅促进菌丝变粗壮。酶活研究显示,随着CaSO4添加量提高,POD和SOD酶活性随之增强,添加25 g/L CaSO4可致上述2种酶活性显著增强。研究获得金针菇CaSO4添加量的最佳值和临界值,为金针菇栽培提供Ca元素添加方案,为后续Ca对金针菇菌丝生长机制的阐述提供生理学基础。