黄芩苷抑制缺血性脑损伤大鼠脑组织TNF-α和AQP-4表达及减轻脑损伤的研究

目的研究黄芩苷对缺血性脑损伤大鼠抑制炎症反应、减轻脑损伤的作用机制。方法制备大鼠脑缺血损伤模型,随机分为对照组、模型组和黄芩苷治疗组,通过检测脑组织髓过氧物酶的含量,评价炎症反应的程度;通过检测脑组织伊文思蓝的含量,评价血脑屏障的破坏程度;通过ELISA法检测脑组织TNF-α的表达;通过Western blot法检测水通道蛋白-4(AQP-4)的表达变化。结果黄芩苷治疗组能明显减轻缺血性脑损伤大鼠脑组织炎症反应,减少脑梗死体积,以及降低脑组织TNF-α和AQP-4的表达水平。结论黄芩苷具有抑制缺血性脑损伤大鼠脑组织TNF-α和AQP-4的表达,减轻炎症反应和修复损伤的血脑屏障,对大鼠缺血性脑损伤有保护作用。

齐留通通过激活ERK1/2信号通路减轻大鼠脑缺血炎症反应和缺血性脑损伤

目的研究5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)抑制剂齐留通(zileuton)是否通过激活ERK1/2信号通路减轻大鼠脑缺血诱导的炎症反应和缺血性脑损伤。方法制备大鼠脑缺血模型,随机分为对照组、溶媒组、zileuton治疗组和PD98059干预组,zileuton(50 mg·kg-1)经口服给药,PD98059经脑室内给药。对大鼠神经功能损伤进行评分,测量大鼠脑梗死体积;分析大鼠缺血性脑水肿程度;检测脑组织髓过氧物酶的含量;Western blot法检测信号通路关键蛋白p-ERK1/2、t-ERK1/2的表达变化;ELISA法检测血浆TNF-α的分泌。结果 Zileuton治疗组能明显减轻大鼠神经功能障碍、脑梗死体积、脑水肿、MPO活性及TNF-α含量,且zileuton的这种脑保护作用和抗炎症作用被PD98059抑制。Zileuton可上调p-ERK1/2的表达,同时也被PD98059抑制。结论 5-LOX抑制剂zileuton通过激活ERK1/2信号通路,减轻脑缺血诱导的炎症反应和缺血性脑损伤。

PI3K/Akt通路在丙泊酚减轻大鼠脑缺血性损伤中的作用

目的研究PI3K/Akt信号通路在丙泊酚减轻大鼠缺血性脑损伤中的作用。方法制备大鼠脑缺血模型,随机分为对照组、溶媒组、丙泊酚治疗组和LY294002干预组,丙泊酚腹腔注射给药,LY294002脑室内给药。对大鼠神经功能损伤进行评分,测量大鼠脑梗死体积;分析大鼠缺血性脑水肿程度;检测脑组织髓过氧化物酶(MPO)的含量;Western blot法检测信号通路关键蛋白p-Akt、Akt的表达变化;ELISA法检测血浆TNF-α和IL-1β的分泌。结果丙泊酚能明显减轻大鼠神经功能障碍、脑梗死体积、脑水肿、MPO活性、TNF-α和IL-1β含量,丙泊酚的抗炎作用和神经保护作用被LY294002抑制。丙泊酚上调p-Akt的表达,这种作用也被LY294002抑制。结论 PI3K/Akt信号通路在丙泊酚减轻脑缺血诱导的脑损伤过程中起重要的调节作用。

黄芩苷通过抑制5-脂氧合酶活性减轻大鼠脑缺血炎症反应和脂质过氧化反应

目的：黄芩苷是否通过抑制5-脂氧合酶（5-LOX）活性减轻大鼠脑缺血损伤诱导的炎症反应和脂质过氧化反应。方法：以成年雄性SD大鼠为研究对象，线栓法阻塞大鼠大脑中动脉（MCAO）建立脑缺血模型，检测缺血脑组织髓过氧化物酶（MPO）的活性和丙二醛（MDA）的含量，免疫组织化学检测5-LOX的表达水平，免疫印迹检测NF-κB的转录活性，ELISA法检测血清5-LOX代谢物白三烯B4（LTB4）和半胱氨酸白三烯（CysLT）的含量。结果：黄芩苷减轻炎症反应的浸润和脂质过氧化反应，降低5-LOX和NF-κB的表达，减少LTB4和CysLT的产生。结论：黄芩苷可减轻脑缺血炎症和脂质过氧化反应，可能是通过抑制5-LOX活性而起作用的。

缺血预处理通过抑制炎症反应减轻缺血性脑损伤

目的：探讨缺血预处理对缺血性脑损伤的神经保护作用及其可能的机制。方法：以成年雄性SD大鼠为研究对象，短暂夹闭双侧颈总动脉制备脑缺血预处理模型，线栓法阻塞大鼠大脑中动脉建立脑缺血模型，检测大鼠神经功能损伤评分和脑梗死体积，测量缺血脑组织髓过氧化物酶（MPO）的活性，免疫组织化学法检测核转录因子-κB（NF-κB）的转录活性，免疫印迹法检测环氧合酶-2（COX-2）的表达水平，ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-a（TNF-a）的含量。结果：缺血预处理减轻神经功能损伤和脑梗死体积，减轻MPO活性，抑制NF-κB的转录活性、COX-2的表达和TNF-a的分泌。结论：缺血预处理减轻缺血性脑损伤，其神经保护作用可能与抑制炎症反应和炎症因子的表达有关。

5-脂氧合酶与缺血性脑损伤

5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)是催化花生四烯酸(arachidonic acid,AA)代谢产生5-OH-6,8,11,14-廿碳四烯酸(5-HETES)和白三烯(Leukotrienes,LTs)等类花生酸产物的关键酶。近年来研究,5-脂氧合酶与缺血性脑损伤的病理生理过程有关,并且5-脂氧合酶和很多细胞因子、炎症介质相互作用。同时发现使用选择性的5-脂氧合酶抑制剂对缺血性脑损伤有保护作用。本文就近几年关于5-脂氧合酶及其抑制剂与缺血性脑损伤关系的研究进展作一综述。

白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨PI3K/Akt信号通路在白藜芦醇减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法将48只成年SD大鼠随机分为假手术组、模型组、白藜芦醇组、LY294002组(Akt抑制剂),每组12只。利用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型,造模后24 h进行大鼠神经功能损伤评分和检测脑梗死体积、脑组织髓过氧化物酶(MPO)的活性,免疫印迹法检测脑组织p-Akt、t-Akt的表达水平,ELISA法检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果与假手术组相比,模型组大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、缺血脑组织MPO活性和TNF-α含量均明显增高(P<0.05),缺血脑组织p-Akt表达水平也明显增高(P<0.05);与模型组相比,白藜芦醇显著降低大鼠神经功能损伤评分、脑梗死体积、缺血脑组织MPO活性和TNF-α含量(P<0.05),也显著降低缺血脑组织p-Akt表达水平(P<0.05);脑室内注射LY294002,显著抑制白藜芦醇的这些作用(P<0.05)。结论白藜芦醇通过激活PI3K/Akt信号通路减轻大鼠脑缺血再灌注损伤。

黄芩苷对海人酸致痫小鼠海马白细胞介素-1β及肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨黄芩苷对海人酸诱导的小鼠癫痫持续状态后海马组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法将54只ICR雄性小鼠随机分为对照组、癫痫持续状态(SE)组、黄芩苷治疗组,每组18只。采用侧脑室注入海人酸建立小鼠癫痫持续状态模型。HE染色观察黄芩苷对小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞的形态学影响。通过RT-PCR和Western blot分别检测小鼠海马组织中IL-1βmRNA、TNF-αmRNA及IL-1β、TNF-α蛋白的表达量。结果黄芩苷明显改善了SE后小鼠海马组织的病理形态学,并且可降低IL-1β、TNF-α的表达(P<0.05)。结论黄芩苷可能通过降低癫痫鼠海马组织中IL-1β、TNF-α的表达发挥抗炎作用,从而对脑组织进行保护。

E26转录因子与基质金属蛋白酶9在脑膜瘤中的表达及相关性研究

目的研究E26转录因子(Ets-1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在脑膜瘤中的表达及相关性。方法采用免疫组织化学法检测56例脑膜瘤石膜标本(良性组39例、恶性倾向组17例)中Ets-1和MMP-9的表达,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测30例新鲜脑膜瘤(良性组22例,恶性倾向组8例)中Ets-1和MMP-9的mRNA水平。另取9例行脑外伤减压术的正常脑组织作为对照组结果正常脑组织Ets-1和MMP-9不表达或低表达,脑膜瘤中Ets-1阳性表达率48.2%(27/56),MMP-9阳性表达率62.5%(35/56);脑膜瘤恶性倾向组Ets-1和MMP-9的阳性表达率高于脑膜瘤良性组(P<0.05);Ets-1和MMP-9在脑膜瘤中的表达呈正相关(rs=0.284,P<0.05)。脑膜瘤中Ets-1和MMP-9的mRNA含量高于正常脑组织(P<0.05),脑膜瘤恶性倾向组Ets-1和MMP-9的mRNA含量高于脑膜瘤良性组(P<0.05),Ets-1和MMP-9在脑膜瘤的mRNA水平呈正相关(r=0.479、P<0.02)。结论Ets-1和MMP-9的表达与脑膜瘤恶性度有关,两者在脑膜瘤发生、发展过程中有协同作用,可作为脑膜瘤预后的潜在指标。

NMDAR_1、Caspase-3在脊髓缺血性损伤的表达特点及相关性研究

目的探讨脊髓缺血后N-甲基-D-天门冬氨酸受体1(N-methyl-D-aspartatereceptor,NMDAR1)、Caspase-3的表达变化规律及意义。方法40只新西兰大白兔采用结扎腰动脉建立脊髓缺血模型,于缺血后6h、12h、24h、48h、72h取缺血脊髓标本,运用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印记技术在基因和蛋白水平检测NMDAR1、Caspase-3在不同缺血时间的表达变化规律,同时运用免疫组织化学技术观察NMDAR1、Caspase-3在细胞中的表达定位情况;用SPSS统计分析。结果RT-PCR、蛋白印记显示缺血组与对照组比较NMDAR1、Caspase-3表达增加,并且有随缺血时间的延长表达逐渐增高的趋势,相关性分析显示NMDAR1、Caspase-3在mRNA(r=0.947,P<0.005)、蛋白(r=0.984,P<0.005)水平呈正相关;免疫组化结果发现,NMDAR1、Caspase-3主要在细胞浆中表达。结论脊髓缺血时NMDAR1、Caspase-3随缺血时间延长表达增加,NMDAR1、Caspase-3共同参与脊髓缺血性损伤过程,其表达与缺血时间有关。

丹参注射液对大鼠脑缺血再灌注肝损伤影响的实验研究

目的研究丹参注射液对大鼠缺血再灌注肝损伤的影响。方法采用Pulsinelli方法建立大鼠急性全脑缺血再灌注模型。将Wistar大鼠随机分为3组,分别为对照组(A组)、缺血再灌注组(B组)、丹参+缺血再灌注组(C组),每组各9例。分别测定3组的血清ALT、AST、LDH的含量及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),观察肝细胞形态学变化。结果治疗组血清ALT、AST、LDH含量及肝组织MDA含量明显低于缺血再灌注组(P<0.01);肝组织SOD含量明显高于缺血再灌注组(P<0.01);肝细胞形态学变化明显减轻。结论丹参可以减轻大鼠脑缺血再灌注所致的肝脏损伤,对肝细胞有一定的保护作用。

5-LOX和Caspase-1在大鼠脑缺血中的表达意义

目的研究大鼠脑缺血后5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)和Caspase-1蛋白和基因的表达情况及其相关性。方法用线栓法制备大鼠脑缺血(MCAO)模型,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化测定缺血脑组织6、12、24、48h不同时点脑皮质5-LOX和Caspase-1在基因和蛋白水平的表达。结果TTC脑片染色证实脑缺血模型建立成功,发现5-LOX和Caspase-1均在正常脑组织中少量表达,且随缺血时间延长表达量增高。结论大鼠脑缺血可诱导5-LOX和Caspase-1表达增高,二者可能参与缺血性脑损伤的形成。

高压氧及Notch信号阻断剂对大鼠颅脑损伤后海马区神经干细胞增殖分化的影响

目的观察高压氧及Notch信号阻断剂(DAPT)对大鼠颅脑损伤后内源性神经干细胞增殖分化的影响。方法100只成年健康Wistar大鼠随机平均分为假手术组、颅脑损伤组、DAPT{N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl-L-alanyl)]-Sphenylglycinet-butylester}组、高压氧组及二甲基亚砜(DMSO)组,应用改良的自由落体方法制备脑损伤模型,用免疫荧光双标记染色法观察伤后7、14、21 d及28 d大鼠海马区神经干细胞增殖分化。结果颅脑损伤组、DAPT和高压氧组海马区Brd U/nestin双标阳性细胞数,在伤后7 d为(14.2±1.3)、(11.4±1.7)个和(22.3±1.5)个,在伤后14 d为(9.6±0.7)、(6.9±2.1)个和(13.8±1.4)个,在伤后7 d较伤后14 d明显增多(P<0.05);与颅脑损伤组比较,DAPT组在伤后7 d及14 d双标阳性的细胞数明显减少(P<0.05);高压氧组在伤后7 d及14 d双标阳性的细胞数明显增多(P<0.05)。结论高压氧能促进内源性神经干细胞增殖分化,Notch信号阻断剂抑制了内源性神经干细胞增殖分化。

显微治疗56例破裂型前交通动脉瘤手术疗效分析

目的探讨破裂型前交通动脉瘤显微治疗的手术策略和预后,为破裂型前交通动脉瘤的临床治疗提供依据。方法回顾性分析该院2010年1月—2015年12月收治的56例破裂型前交通动脉瘤患者的影像学资料、诊疗经过,并发症和预后等。结果 56例前交通动脉瘤患者中动脉瘤直接夹闭49例,动脉瘤切开再夹闭3例,4例患者为复杂动脉瘤,占位效应明显,切开并切除一部分动脉瘤后夹闭动脉瘤。获随访病例53例,随访时间为3~6个月,良好43例,轻中残6例,重残4例。结论显微治疗破裂型前交通动脉瘤疗效确切,术前充分准备,术中合理使用辅助设备及娴熟的显微手术技术是手术成功的关键。

脑动脉系统组成和结构研究进展

脑的动脉系统由两个系统组成：颈内动脉系和椎一基底动脉系，他们的分支在脑底部构成一个大的动脉吻合，称为大脑动脉环，即Willis环。脑的动脉系统是供应脑组织的血管，willis环是颅内重要的动脉结构。充分了解脑的动脉走行、支配，对神经外科手术以及脑血管疾病的定位诊断具有重要意义。大脑willis环是颅内动脉瘤的好发部位，弄清该结构的组成和毗邻结构对颅内动脉瘤的手术有极大的帮助。现将脑的动脉系统的组成和结构研究进展作一综述。

炎症反应介导缺血性脑损伤的机制研究进展

脑缺血诱导的缺血性脑损伤涉及一系列复杂的病理生理机制，包括兴奋性氨基酸中毒、离子稳态的失衡、梗死周边区去极化、血脑屏障的破坏、自由基损伤、炎症反应、神经元凋亡等，这些不同的病理生理机制在缺血脑组织中呈现时间、空间变化的动态过程^［1］。大量文献表明，炎症反应是脑缺血最重要的病理生理机制之一，但其潜在的机制目前仍缺乏比较系统的认识。

一氧化氮合酶、p38MAPK、Caspase-3介导缺氧神经细胞凋亡机制的研究

目的探讨缺氧引起PC12细胞凋亡和NOS、p38MAPK和Caspase-3在缺氧后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法应用噻唑蓝（MTT）法测定缺氧对PC12细胞的生长抑制率，荧光显微镜观察缺氧对PC12细胞损伤，比色法测定PC12细胞在缺氧环境下乳酸脱氢酶（LDH）活性，流式细胞术（FCM）检测缺氧PC12细胞NT阳性细胞百分比，以及细胞周期改变和细胞凋亡率，RT-PCR半定量分析nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的表达。结果MTT法测定缺氧抑制PC12细胞生长趋势；AO荧光染色缺氧24h时PC12细胞可见凋亡小体；缺氧时间延长，LDH渗出量增多，NT阳性细胞百分比增大，S期细胞增多，细胞凋亡率升高，缺氧24h调亡率达到45．67％；PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达，iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA主要在缺氧晚期表达。结论缺氧能够引起PC12细胞凋亡现象，nNOS、iNOS分别在缺氧早期和晚期发挥神经毒性作用，NOS，p38MAPK和Caspase-3三种基因共同介导缺氧后PC12细胞凋亡。

不同程度永久性脊髓缺血动物模型的建立

腹主动脉结扎建立的脊髓缺血动物模型，存在着缺血性和淤血性并发症。我们选择性结扎兔不同水平的腰动脉，建立不同程度的脊髓缺血动物模型。

黄芩苷对小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞的保护作用

目的观察黄芩苷对小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞的保护作用，并探讨其作用机制。方法将75只ICR雄性小鼠随机分为对照组、癫痫持续状态组、黄芩苷治疗组（50、100、200mg／kg）。采用腹腔内注入海人酸（12mg／kg）建立癫痫持续状态模刑。通过苏小素-伊红（HE）染色、原位缺口末端标记法（TUNEL）染色、逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）以及Westet·nblot等方法，观察黄芩苷对癫痫鼠海马神经细胞的形态学变化、凋亡，以及海马组织中诱导犁一氧化氮合酶（iNOS）、环氧合陷-2（COX-2）mRNA和半胱氨酸生白酶（Caspase）-3蛋白表达的影响。结果黄芩忤（100、200mg／kg）可显著减轻癫痫所致的海马神经细胞的损伤，抑制神经细胞凋亡（P〈0．01），同时降低海马中iNOS、COX-2tuRNA的表达（P〈0．05），减少Caspase-3蛋白的合成（P〈0．01）。结论黄芩苷对小鼠癫痫持续状态后海马冲纤细胞具有抗炎、抗凋亡等神经保护作用，其作用机制可能与黄芩苷抑制iNOS、COX-2及Caspasc-3的表达有关。