大数据背景下神经系统变性病教学探索与实践

随着信息技术与教育的深度融合发展,新的教育理念和教学方法不断涌现。在大数据基础上,以神经系统变性病这类疑难病为例,对传统神经病学教学模式进行创新优化,建立以“学生为中心,能力为导向”的新型教学模式,根据教学内容,结合疾病特点,运用“慕课”“雨课堂”等多种教学平台,借助视频号、病例分享公众号等多种媒体平台,结合查找各大医学网站、资源库、数据库等方式,实现了一种数字化、信息化的教学模式,有效提升学科教学中知识传播的表达力和知识创新的穿透力,充分调动学生的主观能动性,促进学生对于知识的了解、掌握、思考和创新,从而由浅入深地逐渐认清疾病的本质,全方位地认识和掌握疾病,进而取得良好的教学效果。

复智散对抗Aβ25-35神经细胞毒性机制的研究

目的 研究自制中药复智散对 Aβ2 5 - 35神经毒性作用的影响及相关机制。方法 测定 Aβ2 5 - 35及复智散孵育下 SH- SY 5 Y神经母细胞瘤株的 MTT值 ,利用 Western Blot法检测 CREB、Bcl- 2、Cyt C的表达。结果 Aβ2 5 - 35致培养神经细胞存活率下降、CREB和 Bcl- 2表达下调、Cyt C表达增加 ,复智散促进神经细胞存活、上调CREB和 Bcl- 2、减少 Cyt C释放入胞浆。结论 复智散通过对 CREB、Bcl- 2和 Cyt C的影响对抗 Aβ2 5 - 35的神经细胞毒性效应。

复智散对淀粉样β蛋白25-35神经细胞毒性效应的影响及其机制(英文)

背景:淀粉样β蛋白是老年斑的核心成分,其毒性片段淀粉样β蛋白25-35近年广泛用于实验研究中。已往研究表明自制中药复智散可促进培养神经细胞存活,可能具备治疗阿尔茨海默病的效用。目的:研究复智散对抗淀粉样β蛋白25-35对培养神经细胞的毒性作用及其发挥这一作用的可能途径。设计:以细胞为研究对象,重复测量设计。单位:一所大学医院的神经内科和一所大学医院的脑老化重点实验室。材料:实验于2002-06/2003-04在宣武医院北京脑老化重点实验室完成。人多巴胺能神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞。淀粉样β蛋白25-35片段。中药复智散文火煎制,留取上清冷冻抽干配成浓度为0.5g/mL的贮存液备用。抗体:cAMP应答元件结合蛋白、B淋巴细胞白血病-2基因产物中的Bcl-2、细胞色素C由宣武医院北京脑老化研究实验室制备。方法:用不同剂量的淀粉样β蛋白25-35单独或与复智散共同孵育SH-SY5Y细胞,与空白对照组相比,测定在不同孵育条件下培养神经细胞的噻唑蓝代谢率。利用Western-blot法测定复智散单独孵育、淀粉样β蛋白25-35单独孵育及两者共同孵育条件下与空白对照相比蛋白质表达的变化。主要观察指标:各实验组与空白对照组相比的噻唑蓝代谢率。与神经细胞存活及死亡相关蛋白cAMP应答元件结合蛋白。

凋亡相关蛋白在阿尔茨海默病病理改变中的作用

目的研究凋亡相关蛋白在阿尔茨海默病病理改变中所起的作用。方法选取3月龄P8品系快速老化小鼠(SAMP8)6只、6月龄SAMP8小鼠12只、6月龄抗快速老化系1小鼠(SAMR1)6只,将其分为四组:A组为6月龄SAMR1小鼠6只、B组为3月龄SAMP8小鼠6只,均作为对照;C组为6月龄SAMP8小鼠6只(假治疗组),O组为6月龄SAMP8小鼠6只(药物组)。O组腹腔注射Obatoclax 0.2 mL,C组注射等量生理盐水;连续干预14 d。使用Morris水迷宫实验测试小鼠的认知功能;免疫组化法测定海马B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、异常磷酸化tau(p-tau)蛋白、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。结果与A组比较,B、C、O组Morris水迷宫实验的潜伏期明显延长、穿越平台次数明显减少(P<0.05);与第一次比较,O组第二次Morris水迷宫实验的潜伏期明显延长、穿越平台次数明显减少(P<0.05)。与C组比较,O组Bcl-2蛋白的阳性细胞计数显著增加(P<0.05);Caspase-3平均光密度值(IOD值)和阳性细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05);p-tau蛋白的IOD值和阳性细胞计数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论随生存时间延长SAMP8小鼠出现记忆力减退趋势。在认知变化过程中Bcl-2是一个关键成分,记忆力减退可能不是通过Caspase-3和p-tau途径发挥作用。

复智散对神经细胞凋亡的影响

目的应用Aβ25～35孵育SH-SY5Y神经母细胞瘤株制作细胞损伤模型,以研究复智散对Aβ25～35细胞损伤模型凋亡相关指标的影响。方法将制备好的SH-SY5Y细胞分为正常对照组、单纯应用复智散孵育组、Aβ25～35细胞损伤模型组、复智散与Aβ25～35共同孵育SH-SY5Y细胞组。采用异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)标记的AnnexinⅤ及碘化丙锭双染流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率,并利用荧光探针JC-1测定线粒体膜电位,统计分析不同组间神经细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化情况,以确认药物的保护作用。结果单纯应用复智散孵育组神经细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化与正常对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05);Aβ25～35细胞损伤模型组培养的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降,凋亡率增高(P<0.05);复智散与Aβ25～35共同孵育组神经细胞线粒体膜电位上调,细胞凋亡率降低,提示复智散对培养的SH-SY5Y细胞具有保护作用。结论复智散可拮抗Aβ25～35降低培养神经细胞线粒体膜电位、增加凋亡率的不良效应,具有神经细胞保护功能。

复智散对SH-SY5Y细胞生存状态的影响

目的 研究中药复智散对神经细胞生存状态的影响。方法 用不同浓度的复智散孵育神经母细胞瘤株SH SY5Y细胞 ,利用MTT法测定细胞存活率 ,制定量 -效关系曲线 ,寻找最佳药物浓度 ;用Aβ2 5 35孵育SH SY5Y细胞制作细胞损伤模型 ,加入复智散孵育模型细胞 ,测定MTT代谢率、神经细胞的胞体面积和轴突长度。结果 复智散可增进SH SY5Y细胞的存活、胞体扩展及轴突生长 ,抵制Aβ2 5 35的毒性效应。 结论 复智散可促进神经细胞生存 ,具有明确的保护神经细胞的作用。

复智散对神经细胞胞体面积和轴突长度变化的影响(英文)

背景:自制中药复智散经已往的实验证实可延缓大鼠的自然老化过程提示该药可能具有对抗衰老作用。目的:观察复智散培养神经细胞最佳有效浓度对神经母细胞瘤株SHSY5Y细胞形态学改变的影响。设计:重复测量设计。材料:实验于2002-06/2003-04在首都医科大学宣武医院北京脑老化重点实验室完成。自制中药复智散(菖蒲、远至等6味中药组成)由哈尔滨医科大学第一临床医学院神经科王德生教授和上海东方医院神经科徐晓云教授共同组方,淀粉样β蛋白25-35片段,SH-SY5Y神经母细胞瘤株。方法:用不同浓度的复智散孵育神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞,利用噻唑蓝比色法测定细胞存活率,制定量-效关系曲线,寻找最佳药物浓度;6孔板培养细胞分为正常对照组、淀粉样β蛋白25-3525μmol/L组、淀粉样β蛋白25-3525μmol/L+复智散45×10-3g/L组和复智散45×10-3g/L组,孵育24h,观察细胞形态学改变,测定神经细胞的胞体面积和轴突长度。主要观察指标:①各组SH-SY5Y细胞噻唑蓝代谢率的变化。②各组神经细胞胞体面积及轴突长度。结果:①复智散可增进SH-SY5Y细胞的存活,最佳有效浓度为45×10-3g/L。②SH-SY5Y细胞胞体面积和轴突长度:淀粉样β蛋白25-3525μmol/L组明显低于正常对照组犤(505.5±122.36),(599.8±141.25)μm2;(26.0±13.97),(36.5±15.58)μm,(t=3.903,3.447,P=0.000)犦。复智散45×10-3g/L组与淀粉样β蛋白25-3525μmol/L+复智散45×10-3g/L组均明显高于淀粉样β蛋白25-3525μmol/L组犤(918.3±178.34),(896.6±257.14),(505.5±122.36)μm2;(96.8±43.31),(88.3±30.23),(26.0±13.97)μm,(t=10.922,14.172,P=0.000)犦。结论:在淀粉样β蛋白25-35损伤条件下复智散依旧有促进培养神经细胞存活的作用,表现在增进细胞胞体面积的增长和轴突的延伸方面。

快速老化小鼠模型NgR、磷酸化Tau蛋白表达情况及其关系的研究

目的利用Nogo受体(NgR)拮抗剂NEP1-40研究P8品系快速老化小鼠(SAMP8)鼠脑中NgR与磷酸化Tau蛋白(p-Tau)表达情况,探讨NgR可能作用。方法 6月龄抗快速老化系1 (SAMR1)雄性小鼠为对照组(A组),3月龄SAMP8鼠(B组),6月龄SAMP8鼠为假治疗组(C组)和治疗组(N组),每组6只。C组小鼠腹腔注射0.9%生理盐水0.2 mL、N组小鼠0.2 mL NEP1-40各14 d。治疗前后分别采用Morris水迷宫试验监测小鼠行为学改变,利用免疫组化染色检测神经细胞内p-Tau和NgR表达的变化。结果 B、C、N组与A组比较,水迷宫试验潜伏期明显延长、穿越平台次数明显减少(P <0.05);N组第二次与第一次水迷宫实验比较,潜伏期明显缩短、跨越平台次数明显增多(P <0.05)。神经元胞浆、突起NgR阳性棕黄色颗粒状结构与细胞膜关系密切,C组海马NgR阳性细胞计数和光密度值较A组和N组明显增多(P <0.05)。C组p-Tau阳性细胞沉积较A组和N组明显增加(P <0.05)。结论 SAMP8鼠随月龄增大,学习记忆能力减退,NgR及p-Tau在海马沉积增多明显,与小鼠老化程度相一致。NgR拮抗剂NEP1-40可能是通过下调NgR表达、减少下游p-Tau表达量,改善小鼠学习及记忆能力。

大鼠脑缺血后IL-17 mRNA的表达

目的 通过对 SD大鼠脑缺血后白细胞介素 - 17(IL - 17) m RNA表达的研究 ,探讨 IL - 17在脑缺血中的作用。方法 采用原位杂交和组织化学方法检测实验性大鼠脑缺血后 IL - 17在大脑组织中的表达。结果 (1)脑缺血侧 IL - 17m RNA表达较对照组明显增高 ;(2 ) IL - 17m RNA表达数量随时间延长和损伤面积扩大而增加 ;(3)脑缺血后随时间延长 ,T细胞在脑内数量增加。结论 IL - 17m RNA表达主要参与大脑损伤后期反应过程。

脑梗死患者与其血浆同型半胱氨酸水平及MTHFR基因关系的研究

目的 探讨脑梗死(CI)患者与其血浆同型半胱氨酸(homocystine,HCY)水平及N5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因的关系。方法 应用高效液相色谱仪和电化学检测法测定1998-02-2001-02收治的84例CI患者和78名正常老年人血浆总HCY水平,运用多聚酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测MTHFR基因多态性,同时测定血浆叶酸及维生素B12水平。 结果 CI患者血浆总HCY水平显著高于正常对照组;MTHFR基因型有3种,即纯合子(T/T)型、杂合子(T/C)型、纯合子(C/C)型。3组基因型和等位基因频率相比,差异均无显著性;CI组血浆叶酸及维生素B12水平明显低于正常对照组(P<0.05)。 结论高HCY血症可能是CI患者发病的一个新危险因素。

中国汉族人群中白细胞介素-1β基因、载脂蛋白E基因多态与阿尔茨海默病的关联

目的:研究中国汉族人群中白细胞介素-1β基因(IL-1β)和载脂蛋白E(ApoE)基因多态在阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)患者中的分布情况。方法:随机选取76例AD患者和80例对照人群,用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性方法,分析受检者的IL-1β,ApoE基因型。结果:IL-1βB1基因型在两组中差异无显著性区别。占主导地位是IL-1βB1等位基因(80.3%)。ApoEε4等位基因(22.4%)在AD患者组中过表达。ApoEε4等位基因不影响IL-1β基因型或等位基因的分布频率。具有ApoEε4等位基因的AD患者的IL-1β基因型(B1/B1,B1/B2,B2/B2)分别为34,16,2例;具有ApoEε4等位基因的对照组人群的IL-1β基因型分别为38,18,4例;不具有ApoEε4等位基因的AD患者IL-1β基因型(B1/B1,B1/B2,B2/B2)分别为14,10,0例;不具有ApoEε4等位基因的对照组人群的IL-1β基因型分别为12,8,0例。结论:中国人AD与ApoEε4等位基因过表达密切相关,IL-1βB1等位基因的出现不能被用来作为区分AD和健康对照人群的标志。

大鼠脑缺血后胶质细胞向树突状细胞转化的研究

目的:探讨树突状细胞(dendriticcells,DC)是否参与脑缺血损伤过程及在缺血脑组织中DC的来源。方法:用线栓方法封闭大鼠右侧大脑中动脉制作动物模型。用免疫组化方法检测脑缺血1h到第6天时,缺血脑DC(OX62+)的存在,以及胶质细胞/巨噬细胞(OX42+)转化成DC(OX62+),同时检测活化后的DC样细胞表达主要组织相容性复合分子Ⅱ(MHCⅡ)情况。结果:脑缺血半球和假手术半球比较,在1hDC数量增加(t=7.143,P<0.001),在脑缺血组中,缺血脑半球与非缺血脑半球比,DC的数量也增多(t=4.968,P<0.01)。脑缺血第6天缺血组与假手术组进行比较,DC表达MHCⅡ(OX62+OX6+)显著差异,每100mm2脑组织切片中OX62+OX6+细胞数量比为(53±3)比(33±2)个(t=2.975,P<0.05)。脑缺血半球在1h到第6天OX42+转变成OX62+OX42+细胞逐渐增加,脑缺血第6天脑缺血半球与非缺血半球比t=9.875,P<0.001。脑缺血损伤面积与以每100mm2脑组织片为单位的OX62+数量呈正相关(R2=0.8914,P<0.001)。结论:脑缺血后,脑缺血组织中DC的数量增加,DC数量增加与脑伤面积呈正相关,提示DC参与了脑缺血过程,大鼠脑缺血后从胶质细胞向DC样细胞转化是脑内DC的来源之一。

盐酸法舒地尔试验治疗脊髓小脑性共济失调的研究

目的研究评价Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔试验治疗脊髓小脑性共济失调的疗效。方法将符合入选标准的30例脊髓小脑性共济失调患者,随机分成治疗组和对照组。治疗组7例,对照组23例,对照组仅用维生素B族或未用药治疗,治疗组静脉输注盐酸法舒地尔60 mg,每日1次,30 min滴完,连续给药10~14天。治疗期间,观察病情变化,统计临床症状发生发展情况。结果治疗组临床症状好转率85.71%,对照组好转率13.04%。显示治疗组的疗效显著优于对照组。结论应用盐酸法舒地尔治疗组显示出良好的临床疗效,可明显改善临床症状。盐酸法舒地尔治疗脊髓小脑性共济失调可能有效。

脑室内注射β淀粉样蛋白造成大鼠大脑皮层KIF家族基因表达变化

目的探询脑室定向注射淀粉样蛋白对大鼠大脑皮层神经元驱动蛋白超家族(KIFs)基因表达的影响。方法脑室定向注射淀粉样蛋白诱导大鼠产生类似阿尔茨海默病的症状。水迷宫实验验证大鼠记忆损伤程度;胆碱乙酰基转移酶(ChAT)基因的RT-PCR扩增证实大鼠大脑皮层胆碱能神经元损伤。实时荧光PCR方法检测大鼠大脑皮层神经元驱动蛋白(kinesin)、KIFlb、KIFlc、KIF3a、KIF3c与KIF4基因的表达。结果水迷宫实验与ChAT表达检测表明动物模型制备成功。实时荧光PCR结果显示,淀粉样蛋白脑室内注射造成大鼠皮层KIFs基因表达的普遍上升。结论淀粉样蛋白造成的皮层胆碱能神经元损伤很可能与其兴奋性毒性有关。

肌营养不良蛋白聚糖复合物在RT4细胞中的表达

目的 观察大鼠神经鞘瘤细胞 (RT4)中肌营养不良蛋白聚糖复合物的表达状况。方法 常规培养RT4细胞 ,应用免疫荧光染色、蛋白电泳、免疫印迹等方法观察肌营养不良蛋白聚糖复合体在 RT4细胞中的表达并鉴定分子量。结果 肌营养不良蛋白聚糖复合体表达于 RT4细胞的细胞膜上。结论 肌营养不良蛋白聚糖复合体对于

脑出血周围组织神经微丝和胶质纤维酸性蛋白的变化

目的 通过对人脑出血周围组织神经微丝(NF)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)计数与计量观察,研究其病理发展过程。方法用58例脑出血解剖标本,在血肿周围多方位自血肿壁向外连续取材1.0-2.0cm。采取免疫组化方法观察NF和GFAP的变化。结果NF损伤程度在血肿周围、双侧皮层、双侧海马区随血肿形成时间延长而加重;GFAP染色强度随血肿形成时间延长而减弱。结论 血肿周围神经元和星形胶质细胞的细胞骨架损伤在脑出血后1周内进行性加重。

磁共振检测脑出血的敏感性及梗死后T1高信号病例分析

目的评价磁共振序列检测脑出血的敏感性,鉴别及分析梗死后T1WI高信号病例。方法33位磁共振常规序列怀疑、不能除外脑出血的患者分别追加磁共振FFE T*2WI及CT扫描。判别不同磁共振序列及CT对脑出血的诊断价值。并且对梗死后短T1病例进行鉴别及分析。结果28例为经CT或病史确诊为脑出血,所有出血病例在FFE T*2WI上的表现为:血肿周围区呈现清晰的低信号带,5例为非出血病例,T1WI呈现高信号,FFE T*2WI无颅内出血的低信号表现,与CT结果一致。产生梗死后T1高信号的病变可包括:不完全性脑梗死和皮质层状坏死。结论FFE T*2WI可以敏感的检测到脑出血并排除T1高信号的假阳性出血病例,与常规磁共振序列组合可以进行较为正确的临床分期。

TIA患者再发缺血性脑血管事件的危险因素分析

目的:探讨短暂性脑缺血发作(TIA)后再发缺血性脑血管事件的危险因素。方法:回顾性分析TIA患者,对住院期间再发缺血性脑血管事件患者的临床资料进行评价。结果:共纳入308例TIA患者,平均住院时间为13 d,24例(7.79%)住院期间再发缺血性脑血管事件,其中复发性TIA 18例,脑梗死5例,复发性TIA伴脑梗死1例,单因素和多因素分析均表明原发性高血压、轻偏瘫对再发缺血性脑血管事件有一定的预测作用(P<0.05)。结论:TIA患者住院期间再发脑梗死和(或)复发性TIA与轻偏瘫和高血压相关。