Beagle犬肝微粒体中葛根素的HPLC-ESI-MS测定及代谢动力学研究

目的:建立Beagle犬肝微粒体中葛根素及其代谢物的液相色谱质谱测定方法,并对葛根素在Beagle犬肝微粒体中的代谢动力学进行研究。方法:超速离心法制备Beagle犬肝微粒体;Shimadzu-ODS色谱柱(2.0mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-水梯度洗脱,正离子模式,选择离子扫描m/z417(M+H)+(葛根素),m/z531(2M+Na)+(大豆苷元)。结果:在体外代谢系统中,葛根素在Beagle犬肝微粒体中被代谢为大豆苷元,其酶促动力学参数Vmax为(0.047±0.006)mg.min-1.g-1,Km为(1.22±0.53)mg.L-1。结论:该HPLC-MS法能够准确灵敏测定犬肝微粒体中葛根素和大豆苷元;葛根素在Beagle犬肝微粒体中被P450酶代谢为大豆苷元,同时为白葛胶囊后续研究奠定基础。

微量镓的分析方法评述及展望

由于镓是稀散金属 ,且分布分散 ,因此对于微量镓的分析测定就极为重要 .文章主要介绍了近几年微量镓的分析测定方法的进展 ,叙述了多种微量镓的分析测定方法 ,包括可见光分光光度法、荧光光度法、原子吸收光谱法、极谱法及其它等分析方法 ,对这些方法的优缺点分别归纳总结并进行了评述 .

微量锗分析测定的研究进展

介绍了近几年微量锗分析测定方法的研究进展 ,叙述了用于微量锗分析测定的吸光光度法、原子光谱分析法、极谱法及其他等分析方法 ,并分别进行了评述 ;对今后微量锗分析测定方法进行了展望。

HPLC-ELSD同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量

目的：建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法（HPLC-ELSD）同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量的方法,并对不同产地和批次的筋骨草药材进行测定。方法采用Dikma C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）；流动相A为水,B为乙腈,梯度洗脱（0～6 min,5%B；6～11 min,5%～15%B；11～17 min,15%B）；洗脱流速1 mL/min；柱温30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度103℃,以压缩空气为雾化气,气体流速1.6 L/min。结果乙酰哈巴苷在0.017～17.32μg、哈巴苷在0.003～1.62μg范围内呈良好线性关系,精密度和准确性良好。福建6个批号样品的乙酰哈巴苷和哈巴苷含量较高。结论乙酰哈巴苷和哈巴苷可作为监测筋骨草药材质量的指标性成分。

微量锗分析测定的研究进展

文章介绍了近几年微量锗分析测定方法的研究进展,叙述了用于微量锗分析测定的吸光光度法、原子吸收光谱法、极谱法及其他分析方法,并分别进行了评述;对今后微量锗分析测定方法进行了展望。

国内分析测定微量锗的研究

介绍了近几年微量锗分析测定方法的研究进展,对用于微量锗分析测定的吸光光度法、原子吸收光谱法、极谱法等分析方法进行了评述,并对今后微量锗分析测定方法进行了展望。

地黄饮子对β淀粉样蛋白_(1-42)致SH-SY5Y细胞线粒体损伤及细胞凋亡的影响

目的探讨地黄饮子药物血清对β淀粉样蛋白(Aβ)1-42致SH-SY5Y细胞线粒体损伤及细胞凋亡的保护作用机制。方法雄性SD大鼠以成人临床用药量20倍剂量地黄饮子灌胃给药,连续7 d,提取大鼠血清灭活后,制备药物血清。SH-SY5Y细胞采用5μmol/L Aβ1-42及0、1.25%、2.5%、5%、10%(V/V)等浓度药物血清共孵育。MTT法检测细胞存活率,PI/Annexin V双染流式细胞术分析细胞凋亡率,Western blot检测Bcl-2、Bax表达,ELISA检测caspase-3、caspase-9酶活性,JC-1法测定线粒体膜电位。结果地黄饮子药物血清可显著提高Aβ1-42损伤SH-SY5Y细胞的存活率,减少细胞凋亡,上调抗凋亡蛋白Bcl-2和下调促凋亡蛋白Bax表达,抑制Aβ1-42诱导caspase-3和caspase-9的激活,提高线粒体膜电位。结论地黄饮子药物血清通过保护Aβ1-42导致的线粒体损伤,抑制依赖线粒体的细胞凋亡通路激活,减少细胞凋亡,提高细胞存活率。

2-噻吩乙胺的合成

噻吩与N ,N 二甲基甲酰胺在三氯氧磷存在下反应得到 2 噻吩甲醛 ,产率为 6 2 % ;一氯乙酸和异丙醇反应得到一氯乙酸异丙酯 ,产率为 5 5 % ;2 噻吩甲醛与一氯乙酸异丙酯通过Darzens反应得到 2 噻吩乙醛 ,2 噻吩乙醛与盐酸羟胺反应得到 2 噻吩乙醛肟 ,产率为 72 % ;2 噻吩乙醛肟还原得到 2 噻吩乙胺 ,产率为 6 1%。通过质谱分析、薄层分析等方法初步证明了产物的结构。

亚硝基R盐-吐温80-盐水体系萃取分离微量钴镍

在pH为5.0～7.0的缓冲溶液中,Co(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)均与亚硝基R盐形成稳定的配合物,在吐温80-硫酸钠液-固萃取体系中,都能被吐温80固相萃取.加入HCl提高溶液的酸度,Co(Ⅱ)进入吐温80固相被萃取,而Ni(Ⅱ)留在水相不被萃取,从而实现两者的分离.通过摩尔比法和连续变化法测定了吐温80固相中,Co(Ⅱ)与亚硝基R盐形成1∶3的配合物.

微量银的分析与测定

评述了近些年来国内外对于微量银的分析测定技术,包括分光光度法、电化学分析法、原子吸收分光光度法和发射光谱法等,对当前广泛应用的技术提出了改进的意见并对这类研究的发展前景做出展望。

分光光度法测定微量镍

介绍了微量镍的测定方法,总结了分光光度法测定微量镍的现状,着重分析讨论了国内近 5年来,新显色剂的合成及应用和镍催化动力学的研究进展及前景.

UPLC-Q-TOF-MS同时测定天王补心片中丹参的主要成分

目的建立同时测定天王补心片中丹参的4种主要成分(丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹酚酸B及丹参酮Ⅰ)的UPLC-Q-TOF-MS检测方法。方法采用Waters Acquity BEH C_(18)(50mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱,流动相为乙腈-甲酸-水体系梯度洗脱,体积流量:0.4ml·min^(-1),质谱正、负离子模式扫描,进样量:2.0μl。结果 4种成分在一定范围内均呈现良好线性关系;精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率在99%~101%。结论所建立的方法简便、准确、快速,重复性好,可用于天王补心片中丹参酮Ⅱ_A、隐丹参酮、丹酚酸B及丹参酮Ⅰ的定量测定。

计算光度法同时测定锗和锡

用6mol/L的盐酸控制溶液的酸度,在十二烷基磺酸钠的存在下,锗和锡均与苯芴酮发生高灵敏显色反应,生成稳定的三元络合物,最大吸收波长分别为510nm和514nm,吸收光谱严重重叠。利用主成分回归算法无须分离可同时测定锗和锡,研究了测定的最佳条件,通过对模拟样的测定验证了该方法的可行性。

人工神经网络光度法同时测定锗、锡

用6 mol/L的盐酸控制溶液的酸度,在十二烷基磺酸钠的存在下,锗和锡均与苯芴酮发生高灵敏显色反应,生成稳定的三元络合物,最大吸收波长分别为510 nm和514 nm,吸收光谱严重重叠.利用BP神经网络算法无须分离同时测定锗和锡,研究了测定的最佳条件,通过对模拟样的测定验证了应用该方法可取得满意的结果,并且已把该方法应用于锗和锡的分离研究中.

内质网应激和自噬的交互作用及其在阿尔茨海默病进展与防治中的作用

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)中内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)的持续性激活和自噬功能障碍,导致ERS与自噬之间的交互作用由适应性、保护性,逐渐转变为持续性、破坏性,是推动AD病程进展的关键因素,由此成为AD防治的重要靶标。未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)相关信号通路在ERS与自噬交互推动AD进展中发挥核心作用。该文就ERS与自噬交互效应在AD进展防治中的作用及相关分子机制做一综述。

基于TCGA数据库分析三阴性乳腺癌预后与铁死亡相关lncRNA的关系

目的基于美国癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析影响三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)预后的铁死亡相关长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),并建立TNBC预后预测模型。方法从TCGA下载TNBC样本的转录组数据及临床信息数据。用R语言limma包筛选乳腺癌差异表达基因,survival包筛选TNBC生存时间相关基因,并与搜集到的382个铁死亡基因取交集,获得与TNBC预后相关的铁死亡基因。采用Pearson法进行共表达分析以确定与铁死亡相关的lncRNA。采用Cox回归分析来确定生存相关的lncRNA和预后因素。LASSO回归分析构建TNBC预后回归模型,受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析该模型对预后的预测价值。结果单因素Cox回归分析显示,17个差异表达的lncRNA与TNBC患者生存时间相关(均P<0.05)。采用LASSO回归分析成功构建由6个铁死亡相关lncRNA(SGMS1-AS1、AC015908.2、LINC01014、AC083967.1、TTC39A-AS1和AL353708.3)构成的TNBC风险预测模型。计算每个样本的风险评分。Kaplan-Meier法分析显示,风险评分可以有效区分低风险患者和高风险患者(P<0.05)。该模型预测TNBC患者1、2和3年总生存率的ROC曲线下面积分别为0.808、0.840和0.807。结论基于TCGA数据库共筛选出17个铁死亡相关lncRNA与TNBC预后相关。基于SGMS1-AS1、AC015908.2、LINC01014、AC083967.1、TTC39A-AS1和AL353708.3这6个铁死亡相关lncRNA构建的模型可较好地预测TNBC患者预后,提示铁死亡相关lncRNA与患者预后具有一定的相关性。

蔓荆子黄素对小鼠单核巨噬细胞增殖和凋亡的影响

目的通过蔓荆子黄素对小鼠腹腔巨噬细胞活性及RAW264.7细胞增殖和凋亡作用的研究,探讨蔓荆子黄素对单核巨噬细胞的影响。方法分别用含有不同浓度蔓荆子黄素作用于小鼠腹腔巨噬细胞与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,于24、48及72 h后采用CCK-8检测细胞活性。使用AO/EB染色观察RAW264.7细胞凋亡变化;应用流式细胞仪检测RAW264.7细胞凋亡率。通过荧光探针DCFH-DA检测RAW264.7细胞活性氧水平,使用JC-1染色标记线粒体膜电位的变化。结果 CCK-8法检测结果显示,蔓荆子黄素对小鼠腹腔巨噬细胞的细胞活性及RAW264.7细胞的增殖都有抑制作用,呈剂量与时间依赖关系,尤其对具有增殖能力的RAW264.7细胞活性抑制作用更强。AO/EB染色结果显示,RAW264.7细胞经浓度为5及10μmol/L的蔓荆子黄素处理后,细胞表现为凋亡形态;流式细胞仪检测结果显示,蔓荆子黄素诱导RAW264.7细胞Sub-G1期代表凋亡细胞的百分比增加(P<0.05)。蔓荆子黄素作用于RAW264.7细胞后,细胞内活性氧水平提高;JC-1染色结果显示,蔓荆子黄素能使RAW264.7细胞的线粒体膜电位下降。结论蔓荆子黄素能够抑制小鼠腹腔巨噬细胞与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7活性,尤其对具有增殖能力的RAW264.7细胞活性抑制作用更强,可以促进其凋亡,其作用机制与增加细胞内活性氧水平和降低线粒体膜电位有关。

基于尿液代谢组学研究肝药酶抑制剂对何首乌致肝损伤的影响-以CYP3A4为例

目的探讨CYP3A4亚型的特异性抑制剂酮康唑对何首乌致肝损伤的影响。方法将21只大鼠随机分为3组,每组7只,即正常对照组,何首乌组以及何首乌+酮康唑组。连续给药28 d。4周后收集大鼠尿液采用UPLC-Q-TOF-MS进行代谢组学研究,同时辅以血清生化指标及组织病理分析。结果血清生化指标显示与正常组相比何首乌组总胆酸和直接胆红素均显著升高,而酮康唑组总胆酸显著降低。肝脏病理结果显示何首乌组较正常组肝脏有轻到中度病理性改变,而何首乌+酮康唑组较何首乌组有所缓解。LC-MS代谢组学技术筛选到13个与何首乌致肝毒性相关的潜在生物标志物以及抑制CYP3A4后显著回调的4种生物标志物;代谢通路分析得到与何首乌肝毒性显著相关的代谢通路分别为苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成,苯丙氨酸代谢和甘油磷脂代谢,而抑制CYP3A4后影响到的通路为甘油磷脂代谢通路。结论 CYP3A4被抑制后甘油磷脂代谢的回调可能是何首乌肝毒性缓解的原因。

筋骨草属植物药理学活性及药代动力学研究进展

筋骨草属植物在呼吸系统疾病、消化系统疾病、内分泌系统疾病及肾脏疾病的治疗中应用广泛,疗效明确,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等多方面的药理活性。综述国内外筋骨草属植物的药理学活性、药代动力学特性的研究现状,为筋骨草属植物的研究开发及应用提供参考。

地黄饮子抑制能量障碍诱导的APP/PS1小鼠内质网应激及神经元凋亡的作用机制

目的：研究地黄饮子对能量代谢障碍诱导的APP/PS1转基因小鼠内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）活性转录因子4（activating transcription factor4,ATF4）/C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）信号通路激活及其引发的神经元凋亡的作用机制。方法：4月龄APP/PS1转基因小鼠120只,随机分为正常组、模型组、阳性药（安理申,1 mg·kg-1）组、地黄饮子低、中、高剂量组（1.25,2.5,5 g·kg-1）。除正常组外,其余各组均腹腔注射100 mg·kg-1剂量的3-硝基丙酸（3-NP）,正常组小鼠腹腔注射等体积的无菌生理盐水。经灌胃给予地黄饮子和安理申1周。实时荧光定量聚合酶链式方应（Real-time PCR）检测小鼠脑组织ATF4,CHOP mRNA水平。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠脑组织内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（GRP78）,ATF4,CHOP,B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2-associated X protein,Bax）蛋白表达水平。末端标记法（TUNEL）染色观察小鼠脑组织神经元凋亡,并计算凋亡率。结果：与正常组比较,3-NP诱导的能量代谢障碍可以显著增加ERS标记性蛋白GRP78表达量（P〈0.01）,提高ATF4,CHOP mRNA水平（P〈0.01）和蛋白表达水平（P〈0.01）,下调抗凋亡蛋白Bcl-2（P〈0.01）和上调促凋亡蛋白Bax（P〈0.01）,增加模型小鼠脑组织神经元凋亡率。与模型组比较,地黄饮子各剂量组能显著降低模型小鼠脑组织GRP78表达水平（P〈0.05,P〈0.01）,ATF4,CHOP基因mRNA（P〈0.05,P〈0.01）及蛋白（P〈0.05,P〈0.01）水平;能够上调抗凋亡蛋白Bcl-2（P〈0.05,P〈0.01）,下调促凋亡蛋白Bax（P〈0.05,P〈0.01）,减少脑组织神经元凋亡。TUNEL结果显示地黄饮子可以显著减少小鼠脑组织神经元凋亡率。结论：地黄饮子可以抑制能量代谢障碍导致的ERS,抑制ATF4/CHOP信号通路激活,调节凋亡相关蛋白,显著减少神经元凋亡。