应用宏基因组二代测序诊断肺脓肿病原4例并文献复习

目的:探讨宏基因组二代测序(mNGS)技术诊断肺脓肿病原的价值。方法:回顾性分析2019年8月至2021年8月温州医科大学附属第二医院育英儿童医院儿童呼吸科住院的4例肺脓肿患儿的临床资料和mNGS结果,并对相关文献进行复习。结果:4例患儿均为男性,年龄2月龄至11岁,有咳嗽、发热,发热持续时间10.5 d(6~17 d),其中例4伴呼吸困难、胸痛。4例均经胸部CT诊断为肺脓肿,例4为两侧肺脓肿。例1-3支气管肺泡灌洗液(BALF)mNGS分别检出肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、普雷沃菌,例4外周血mNGS检出约翰逊不动杆菌和人葡萄球菌。例1 BALF培养出肺炎链球菌,余3例均阴性。患儿经静脉抗菌药物治疗平均11.75 d(9~14 d)后病情好转,出院后口服抗菌药物序贯治疗,门诊随访8~12周,复查影像学显示肺脓肿吸收完全。共检索到7篇成人应用mNGS诊断肺脓肿病原的文献,未检索到儿童相关文献。结论:mNGS因其独特的技术优势,敏感性高,并能检出厌氧菌及罕见病原,可为儿童肺脓肿病原诊断提供新的手段,从而指导临床抗菌药物治疗。

温州地区住院儿童下呼吸道腺病毒感染的流行特征及与气象因素的相关性

目的:研究温州地区住院儿童下呼吸道腺病毒(HAdV)感染的流行病学特点及与气象因素的相关性。方法:回顾性分析2008年1月至2017年12月因急性下呼吸道感染在温州医科大学附属第二医院育英儿童医院住院儿童的呼吸道病毒抗原检测数据,分析呼吸道HAdV感染的流行特征;同时提取2008年1月至2017年12月温州地区气象资料,包括每旬平均气温、平均湿度、总降雨量、降雨天数、平均风速。采用广义相加模型(GAM)进行单因素和多因素回归分析HAdV流行与气候因素的相关性。结果:2008年1月至2017年12月进行呼吸道病毒抗原检测的鼻咽吸取物和痰液标本89898份,HAdV阳性1974例(2.2%),其中<1岁339例;1~3岁615例;3~5岁597例;5~18岁423例。儿童HAdV感染检出例数和检出率都是5~7月达到峰值。基于GAM模型分析发现:气温越高,HAdV检出率越高(P=0.015)。而风速越低,检出率越高。随风速增高,检出率降低的幅度逐渐减小(P=0.003)。结论:温州地区下呼吸道感染住院儿童HAdV感染高峰季节在春末、夏初。气温和风速是影响下呼吸道HAdV感染的主要气象因素。

TLR2和NOD2在金黄色葡萄球菌肺炎小鼠中的表达

目的观察小鼠肺部感染金黄色葡萄球菌后肺组织模式识别受体TLR2及NOD2的表达,探讨其在金黄色葡萄球菌肺炎中的作用。方法 30只C57BL/6J小鼠,随机分为两组,对照组小鼠滴鼻接种无菌磷酸缓冲盐溶液,金黄色葡萄球菌肺炎组小鼠滴鼻接种5×108CFU/50μl。滴鼻接种72h后,获取肺组织标本,HE染色观察病理形态学改变,免疫组化和Western blot法检测TLR2及NOD2蛋白的表达变化,QRT-PCR法检测TLR2和NOD2 mRNA的表达。结果金黄色葡萄球菌滴鼻接种72h后,小鼠肺组织TLR2和NOD2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),并且上调TLR2和NOD2 mRNA表达(P<0.01)。结论金黄色葡萄球菌感染能上调小鼠肺组织TLR2和NOD2的mRNA及蛋白表达。

互联网+翻转课堂教学模式在儿科临床带教中的应用

目的探讨互联网+翻转课堂教学模式在儿科临床带教中的应用价值。方法选择2017年1月—2018年12月带教过的80名住院医师规范化规培学员,20位临床带教医师采用互联网+翻转课堂教学模式指导学生。带教医师和规培生对此教学方法填写调查问卷。结果学生赞成互联网+翻转课堂临床教学法的占95%,带教医师赞成这种临床教学法的占100%。结论互联网+翻转课堂的临床教学方法,符合儿科住院医师规范化培训临床带教的要求,在教学中注重培养和提高学生的自主学习能力,有利于对知识的掌握和运用。

抗TLR2抗体抑制小鼠金黄色葡萄球菌肺炎炎症反应

目的:探讨抗TLR2抗体抑制TLR2信号通路对小鼠金黄色葡萄球菌(SA)肺炎炎症反应的影响。方法:将60只C57BL/6J小鼠,随机分为:正常组、SA肺炎组和抗TLR2抗体组,分别按接种后3、8 d各分2小组。正常组小鼠滴鼻接种无菌PBS,SA肺炎组小鼠接种SA菌悬液,抗TLR2抗体组小鼠先尾静脉注射抗TLR2抗体,再接种SA菌悬液,在预定时间点处死小鼠,取肺泡灌洗液(BALF)计算载菌量、白细胞数及中性粒细胞比值,用酶联免疫吸附法测定BALF及血清KC、IL-10含量,HE染色观察肺部病理变化及免疫组化检测肺组织TLR2表达。结果:滴鼻接种后第3天,与正常组比较,感染SA后小鼠BALF及血清中KC、IL-10表达明显升高,HE病理改变明显。抗TLR2抗体组小鼠较SA肺炎组BALF载菌量高,白细胞计数及中性粒细胞比值降低,BALF和血清KC表达水平降低,而IL-10无明显差异,HE病理评分降低。滴鼻接种后第8天,抗TLR2抗体组小鼠HE病理评分明显低于SA肺炎组,而BALF载菌量无明显差异。结论:抗TLR2抗体可抑制小鼠SA肺炎炎症介质的释放,减少炎症细胞浸润,从而减轻肺部炎症反应。

儿童肺炎支原体肺炎临床路径实施效果评价

目的：评估肺炎支原体肺炎（MPP）临床路径的实施效果。方法采用回顾性研究方法，分析并比较采用临床路径治疗的145例和非临床路径治疗的45例MPP患儿在住院时间、住院费用、治愈率等方面的差异，并探讨临床路径的变异情况。结果临床路径组的住院时间为9 d（6~10 d），短于非临床路径组的10 d（7~12.5 d），差异有统计学意义（P=0.003）；治愈率93.8%，高于非临床路径组的84.4%，差异有统计学意义（P=0.043）；住院费用为4696.5元（3608.3~5677.6元），高于非临床路径组的3175.3元（2490.8~4585.0元），差异有统计学意义（P〈0.001）。临床路径变异率48.3%（70/145）。结论实施MPP临床路径可提高治愈率，缩短住院时间，但该路径在临床实施过程中变异率较高，仍需加以完善并推广使用。

姜黄素对肺炎链球菌诱导BEAS-2B细胞SLPI、TNF-α和IL-1β表达的影响

目的:探讨姜黄素(Cur)及其衍生物Y20和6B对肺炎链球菌(SP)诱导的BEAS-2B细胞分泌型白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)表达的调节及可能机制。方法:建立体外SP感染模型,采用q PCR检测对照组、感染组以及Cur、Y20和6B处理组在感染1、3、6和9 h SLPI及感染3、6和9 h TNF-α和IL-1β的mRNA水平,ELISA法检测TNF-α和IL-1β的蛋白分泌水平,Western blot实验检测各时点Toll样受体2(TLR2)和磷酸化核因子κB(NF-κB)p65的蛋白水平。结果:q PCR结果显示,Cur、Y20和6B药物处理组SLPI的mRNA表达较SP感染组增加(P<0.05),TNF-α和IL-1β的mRNA表达较SP感染组明显下降(P<0.05);ELISA结果显示,感染不同时点的TNF-α和IL-1β含量在药物处理组中均下降(P<0.05);Western blot结果显示,SP感染3、6和9 h在药物处理组中TLR2和p-NF-κB p65的蛋白水平较感染组下降(P<0.05)。结论:在不同感染时间,Cur、Y20和6B促进SP感染的BEAS-2B细胞SLPI表达,减少TNF-α和IL-1β分泌,其机制可能与抑制TLR2表达、下调NF-κB转录活性有关。

小儿IM患者细胞免疫的变化及更昔洛韦的干预

目的研究传染性单核细胞增多症(IM)患儿的外周血T细胞亚群的变化及更昔洛韦的干预作用。方法选取2010年1月至2014年1月期间温州医科大学附属育英儿童医院儿科收治的82例传染性单核细胞增多症患儿作为研究对象,将患儿随机分为两组,其中41例患儿在对症治疗基础上使用α-干扰素(IFN-α)治疗,为对照组,另外41例在对症治疗基础上应用IFN-α和更昔洛韦治疗,为观察组。选取同一时期的健康儿童50例作为空白组,比较各组外周血淋巴细胞亚群分布的变化。比较观察组和对照组患儿的EB病毒壳抗原IgM抗体(EB-VCA-IgM)转阴率、治疗有效率和不良反应发生率。结果与空白组相比,观察组和对照组患儿治疗前CD3^+和CD8^+比例升高,CD4^+比例和CD4^+/CD8^+降低,差异均具有统计学意义(F值分别为7.098、8.678、5.789、6.987,均P<0.05)。治疗后,观察组的CD3^+和CD8^+比例低于对照组,CD4^+比例和CD4^+/CD8^+高于对照组,差异均具有统计学意义(t值分别为7.61、8.12、10.12、5.77,均P<0.05)。观察组和对照组患儿治疗1个月和3个月的EB-VCAIgM转阴率均具有统计学差异(χ~2值分别为5.917和10.686,均P<0.05),治疗7天和6个月的EB-VCA-IgM转阴率具无统计学差异(χ~2值分别为0.988和0.534,均P>0.05)。观察组治疗有效率100.00%,对照组92.68%,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率9.76%,对照组4.88%,差异无统计学意义(χ~2=1.712,P>0.05)。结论与健康儿童相比,传染性单核细胞增多症患儿的T细胞比例增加,CD4^+/CD8^+下降,细胞免疫出现异常。更昔洛韦的应用可以抑制病毒复制,促进细胞免疫功能的恢复,改善临床疗效。

儿童细菌性脑膜炎100例病原分布及耐药分析

目的了解细菌性脑膜炎（BM）患儿致病菌分布、耐药情况和临床特点。方法回顾性分析2004年3月至2015年3月脑脊液（CSF）培养阳性BM患儿的临床资料,并按年龄分新生儿组（0-28 d）、婴儿组（-1岁）、儿童组（≥1岁）,按发病时间分早年组（2004年3月—2010年3月）和近年组（2010年4月—2015年3月）,按临床病因分为外伤手术继发感染组和对照组进行比较分析。结果共100例患儿,检出102株病原菌,革兰阳性菌62株（60.8%）,革兰阴性菌40株（39.2%）。主要致病菌依次为肺炎链球菌（33株）、大肠埃希菌（22株）、无乳链球菌（10株）。近年组无乳链球菌所占比例为18.8%（9例）,高于早年组的1.9%（1例）,差异有统计学意义（χ-2=6.406,P=0.011）。外伤手术继发感染组凝固酶阴性葡萄球菌比例高于对照组,差异有统计学意义（χ-2=6.631,P=0.010）。药敏分析发现,对照组中60.0%大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,外伤手术继发感染组的唯一1例大肠埃希菌ESBLs阴性。两不同病因组中肺炎链球菌对万古霉素、利奈唑胺均敏感。外伤手术继发感染组肺炎链球菌对青霉素耐药率为66.7%,对照组为45.8%,两组间差异无统计学意义（P〉0.05）。无乳链球菌均发生在对照组,对青霉素、利奈唑胺均敏感,而万古霉素敏感率仅为70%。新生儿组、婴儿组和儿童组并发症发生率分别为55.0%（22/40）、78.6%（33/42）和33.3%（6/18）,差异有统计学意义（χ-2=11.848,P〈0.05）。三个年龄段最常见的急性期并发症分别为脑室扩张（40.9%）、硬膜下积液（45.5%）、脑积水（40.0%）。治愈35例,好转出院41例,未愈自动出院22例,死亡2例。结论儿童BM病原菌以肺炎链球菌、大肠埃希菌、无乳链球菌为主,近年无乳链球菌感染有所增加,不同年龄组的并发症有所不同。

儿童金黄色葡萄球菌播散感染14例临床分析

目的总结儿童金黄色葡萄球菌播散感染(DSAI)的临床特点及治疗。方法回顾分析2006年1月至2013年12月住院治疗的14例DSAI患儿的临床表现、治疗及转归资料。结果 14例DSAI患儿均为社区获得性感染,起病中位年龄15个月(6 d^13岁),男女各半;患儿均有发热,除发热外的首发症状为皮肤软组织感染6例,肢体、关节肿痛5例;白细胞计数、C反应蛋白明显升高。化脓性感染部位为皮肤软组织者12例(85.7%)、肺部12例(85.7%)、骨骼4例、关节3例、中枢神经系统3例、心包1例;其中皮肤软组织合并肺部感染10例(71.4%)。9例行皮肤软组织脓肿切排术,3例行关节清创后封闭负压引流(VSD)术,3例行骨髓炎病灶清除后VSD术,3例行胸腔闭式引流术。所有患儿均使用万古霉素和/或利奈唑胺抗感染,5例辅以利福平,11例联合丙种球蛋白调节免疫治疗。12例(85.7%)临床治愈及好转。结论皮肤软组织、骨骼及关节感染是DSAI的主要诱发因素;在应用有效抗生素基础上,辅以丙种球蛋白可能有更佳效果。

我院2013年住院患儿超说明书用药情况调查

目的:回顾性调查2013年温州医科大学附属育英儿童医院住院患儿超说明书用药情况,为了解全国儿科超说明书用药现状和制订超说明书用药政策提供数据支持。方法:分层随机抽取我院2013年住院患儿的用药医嘱和出院带药医嘱,依据药品说明书判断是否为超说明书用药,并分析超说明书用药类型及各科室超说明书用药情况等。结果:共抽取住院患儿443例,分析医嘱4 373条,涉及315种药物,按病例数、医嘱分类超说明书用药发生率分别为95.26%和40.48%;超说明书用药类型主要为日总量超说明书(24.65%)、单次剂量超说明书(21.52%)和频次超说明书(15.92%)。结论:温州医科大学附属育英儿童医院住院患儿超说明书用药较常见,反映出儿科临床医师用药不规范及药品说明书中儿科用药信息严重缺乏。

SUMO修饰在细胞凋亡中的调控作用

小泛素样修饰物(small ubiquitin related modifiers,SUMOs)修饰是一种类泛素蛋白质翻译后修饰形式,SUMO特异性蛋白酶(sentrin-specific proteases,SENPs)家族介导去SUMO化修饰。细胞凋亡是发生肿瘤、神经系统退行性疾病、心肌病等的重要机制。细胞凋亡发生过程受信号通路精确调控,而近年研究报道SUMO修饰在调控凋亡信号通路中扮演重要角色。现就SUMO修饰在凋亡信号通路中的最新研究进展做一综述。

姜黄素对肺炎链球菌感染的抗炎和抑菌作用

目的研究姜黄素(Cur)及其衍生物6B、Y20对肺炎链球菌(streptococcus pneumonia,SP)最小抑菌浓度及对其致病因子Nan A、NF-κB表达调节,探讨Cur、6B、Y20对SP抑菌作用及减少SP感染炎性反应的作用机制。方法利用微量浓度稀释法联合血琼脂平板涂布法检测Cur、6B、Y20对SP的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值;培养人支气管上皮(BEAS-2B),建立体外SP感染模型,分为空白对照组、SP感染组、Cur+SP组、6B+SP组、Y20+SP组。CCK8法测试细胞存活率,ELISA法检测Nan A、TNF-α等的蛋白含量,用Western blot法检测NF-κB的表达。结果 Cur、6B、Y20在高浓度有抑菌作用;随SP感染时间的延长,药物处理组细胞存活率较SP感染组相比增高(P<0.01);与空白对照组比较,SP感染组中Nan A、NF-κB、TNF-α表达增加;与SP感染组比较,Cur、6B、Y20药物预处理组NF-κB、Nan A表达降低(P<0.05),TNF-α等表达水平较模型降低(P<0.01)。结论 Cur、6B、Y20高浓度有抑菌作用,并可通过下调SP表面毒力因子Nan A的表达,减轻SP的毒力作用,并通过抑制NF-κB转录激活,减少下游炎性因子表达,减轻SP引起炎症损伤。

PCR-毛细电泳片段分析法检测毛细支气管炎病原的临床价值探讨

目的探讨PCR-毛细电泳片段分析法(PCR-CEFA)检测毛细支气管炎病原的临床应用价值。方法选取2018年1至12月温州医科大学附属第二医院、育英儿童医院儿科收治的因毛细支气管炎住院的≤24个月且喘息次数≤2次的患儿932例,采集患儿鼻咽分泌物,采用PCR-CEFA检测呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(RV)、流感病毒(Flu)、副流感病毒(HPIV)、腺病毒(ADV)等8种病毒核酸;直接免疫荧光法(DFA)检测RSV、HPIV、Flu、ADV抗原;并收集患儿性别、年龄、既往喘息史、湿疹史、哮喘家族史、家族过敏性疾病史、总IgE、血嗜酸性粒细胞计数(B-Eos)等资料。比较两种方法、不同年龄组患儿病毒检出率及RSV组与RV组患儿流行病学资料及实验室检查结果。结果PCR-CEFA病毒检出率为88.2%,高于DFA的33.6%,差异有统计学意义(P<0.01)。PCR-CEFA对RSV、HPIV、Flu、ADV的检出率均高于DFA,差异均有统计学意义(均P<0.01)。以DFA为参照,PCR-CEFA检测RSV、HPIV、Flu、ADV的特异度均达80%以上。≤12月龄患儿RSV检出率高于>12~24月龄患儿,RV、ADV、HBoV检出率均低于>12~24月龄患儿,差异均有统计学意义(均P<0.05)。RV组患儿年龄、B-Eos升高比例均明显高于RSV组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论与DFA比较,PCR-CEFA病毒检出率更高,病毒检测种类更多,具有良好的特异度,有利于早期明确毛细支气管炎病原。

住院儿童重症肺炎390例死亡危险因素分析

目的了解温州某地区儿童重症肺炎死亡的危险因素。方法回顾性分析2018年1月至2019年12月在温州医科大学附属第二医院住院的儿童重症肺炎病原,并收集患儿的基本信息、临床表现、实验室检查、影像学结果、治疗方案及短期预后情况。根据预后情况构建二分类Logistic回归模型,分析儿童重症肺炎死亡的危险因素。结果收集重症肺炎患儿613例,剔除数据不完整的病例,共入组390例。其中男性患儿233例(59.7%),月龄中位数为9.0个月。213例(54.6%)有基础疾病,260例(66.7%)入住儿科重症监护室,32例(8.2%)死亡。254例(65.1%)至少检出1种病原,135例(34.6%)细菌培养阳性,118例(30.3%)检出呼吸道病毒,48例(12.3%)检出肺炎支原体。存活组和死亡组差异有统计学意义的指标包括基础疾病、发热、发绀、降钙素原、谷丙氨酸转移酶、乳酸脱氢酶、入住儿童重症监护室和需要机械通气等。多因素Logistic回归分析结果显示:需要机械通气(OR=7.78,95%CI:2.83,22.00)和基础疾病(OR=5.28,95%CI:1.65,23.20)是重症肺炎儿童死亡的危险因素。结论需要机械通气和有基础疾病是重症肺炎儿童死亡的危险因素。

儿童肺炎支原体肺炎的影像学表现

肺炎支原体是儿童社区获得性肺炎的常见病原。儿童肺炎支原体肺炎的影像表现多种多样，临床儿科医师对其形成原因的认识尚不充分。现总结该病的胸部X线平片、胸部CT及胸部磁共振成像（MRI）的常见影像学表现，从患儿年龄、病程、临床表现及病情严重程度等角度分析与其的联系。

整合医学理念在儿童重症肺炎治疗中的应用

重症肺炎的治疗是需要整合医学理念和辩证思维分析的综合治疗。首先需要对呼吸、循环、脑功能、内环境进行综合评估,明确患者的危重程度,并进行相应的处理。需要利用临床、实验室指标等综合判断病原,进行更有针对性的抗感染治疗。治疗过程中要重点关注通气和缺氧的改善、水电平衡的维持、治疗后的再评估和中医药的合理应用。

儿童蠊缨滴虫肺部感染一例

患儿女,10岁,因“发热20 d,咳嗽3d”,于2015年8月入温州医科大学附属育英儿童医院.患儿20 d前无明显诱因出现发热,体温39.0℃左右,最高达40.2℃,热型不定,热高时伴畏寒、寒战.外院胸部CT显示异常,结核菌素试验（PPD）阳性,拟诊左肺下叶感染,肺结核首先考虑;给予异烟肼、利福平、吡嗪酰胺等治疗,患儿体温仍有反复.入院3d前患儿出现阵发性咳嗽,伴咳少量白色黏痰,有腹痛,部位不定,无胸痛.患儿既往体健,否认结核接触史,已接种卡介苗,父母以收废品为生,家族中无类似病史,无结核病史.

儿童医院获得性肺炎病原学及耐药现状

医院获得性肺炎（hospital acquired pneumonia，HAP）是指患者入院时不存在、也不处于潜伏期而在入院48h后发生的感染性肺炎，其中包括医院内感染而于出院48h内发生的肺炎。

鲍曼不动杆菌外膜蛋白研究进展

鲍曼不动杆菌是医院获得性感染主要致病菌之一，其外膜蛋白是指肽聚糖外脂质双层中间镶嵌的一些特殊的蛋白质。CarO、33-to-36-kDa、OprD等外膜蛋白丢失与细菌耐药有关，而OmpA外膜蛋白是重要的致病因素。其研究技术分为提取、分离和鉴定3个方面，超声物理法、双向凝胶电泳、质谱技术及免疫印迹是目前常用技术。