阿霉素-多孔磷酸三钙陶瓷缓释体的研制及体内释药试验

目的 研制阿霉素 -多孔磷酸三钙 (A- PTCP)陶瓷缓释体 ,为骨肿瘤保肢治疗术后骨缺损的修复提供新方法。方法 制备多孔磷酸三钙 (PTCP)陶瓷 ,将阿霉素载入其中制得 A - PTCP。将 30只大白兔随机分成 A组 (2 4只 )、 B组 (6只 ) ,A组右股骨粗隆中植入 A- PTCP,B组静脉注射阿霉素。不同时期取粗隆部位的肌肉及血浆标本。用高效液相色谱法测定肌肉及血浆中阿霉素的浓度。结果 体内植入 A- PTCP后 ,阿霉素能在局部缓慢释放达 10周以上 ,局部组织药物浓度较高 ,全身药物浓度较低。结论 A- PTCP缓释体可望成为骨肿瘤保肢治疗术后骨缺损修复的一种新方法。

新生大鼠骨骺前软骨干细胞培养及细胞库建立

目的 建立新生大鼠骨骺前软骨干细胞 (precartilagious stem cells,PSCs)库 ,为 PSCs作为组织工程种子细胞修复骨骺损伤的研究奠定基础。 方法 利用磁性细胞分选系统分离纯化有成纤维细胞生长因子受体 3(fibroblast growth factor receptor3,FGFR- 3)表面标志的骨骺 PSCs。将纯化后的 PSCs体外扩增至第 3代 ,采用液氮深低温保存细胞 ,应用 RT- PCR、免疫组织化学及免疫荧光等技术定期 (2、4周 )对复苏 PSCs行生物学特性鉴定。 结果 复苏后 PSCs存活率高 (>95 % ) ,细胞生长周期稍滞后。RT- PCR、免疫组织化学及免疫荧光检测均有较强的 FGFR- 3表达。经液氮冻存的 PSCs在细胞增殖、表型特征方面无显著变化 ,基本保持了原代 PSCs的生物学特性。 结论 成功建立了新生大鼠 PSCs细胞库 ,为应用组织工程技术修复骨骺损伤的研究提供良好的种子细胞。

骨基质明胶防治人工关节无菌性松动的实验研究

目的 :探讨骨基质明胶 (BMG)防治人工关节无菌性松动的可行性。方法 :大白兔 40只 ,分成 2组。行右人工股骨头置换。一组植入BMG ,另一组不植BMG作对照。不同时期作生物力学测定、组织学检查、立体显微摄影、电子探针检查。结果 :BMG组各时期拔出强度明显高于对照组。BMG组人工关节周围成骨速度及量明显高于对照组。结论 :BMG能防止无菌性松动的发生。

藻酸盐水凝胶与前软骨干细胞构建组织工程化骺板

目的探讨藻酸盐水凝胶(alginate hydrogel,AH)与前软骨干细胞(precartilaginousstem cells,PSCs)复合物体内构建骺板样组织的可行性。方法利用多聚赖氨酸和藻酸盐制备AH。将PSCs在含有TGF-β3的藻酸盐微珠中培养,分别于7、14、21天将被诱导的PSCs包埋入AH制备成AH-PSCs复合物,未被诱导的PSCs作对照。分别将AH-PSCs自体植入大鼠背部肌肉中,定期取材测定移植物的重量、细胞数,并行组织学检查及Ⅱ型胶原免疫组化检测。结果PSCs被诱导7天组移植物大约70％能形成骺板样结构;PSCs被诱导14天组及21天组的移植物能形成软骨组织及骨组织,但无骺板样结构;PSCs未被诱导的移植物无软骨组织及骨组织形成。被诱导7天组的移植物在20周的平均重量及每个移植物所含的细胞数均大于被诱导14天组或21天组的移植物(P<0.01);被诱导7天组的移植物在20周时平均重量及每个移植物所含的细胞数均大于在4周或10周时(P<0.01)。结论TGF-β3诱导PSCs7天的AH-PSCs复合物在体内能构建骺板样组织。

载药骨基质明胶修复骨缺损及预防感染的实验研究

目的 探讨载药骨基质明胶 (BMG)修复节段性骨缺损及防治术后感染的可能性。方法 将BMG溶于头孢唑林钠溶液 ,通过真空吸附、冻干等处理 ,制得载药 BMG。测定其体内、体外释药浓度及持续时间以及载药 BMG修复节段性骨缺损的能力。结果 载药 BMG体外对金黄色葡萄球菌的抑制作用为 2 2天 ,体内为 14天。载药 BMG体内释药时 ,局部组织浓度高 ,血浆浓度低 ;局部组织早期浓度高 ,以后为稳定的低浓度释放。载药BMG具有良好的修复骨缺损的能力。结论 载药 BMG既能持续释放有效浓度的抗生素 ,又具有良好的修复骨缺损的能力 。

抗生素-多孔玻璃陶瓷(A-PGC)药物释放系统(DDS)的研制

目的研制抗生素多孔玻璃陶瓷(A-PGC)药物释放系统(DDS)为骨髓炎治疗提供一种新方法。方法将两种多孔玻璃陶瓷(PGC)浸于抗生素(含庆大霉素和头孢唑林钠)溶液,真空吸附,制得A-PGC。同法制得抗生素多孔羟基磷灰石陶瓷(A-PHA)作对照。测定其体外、体内释放抗生素的药物浓度及持续时间。结果A-PGC体外释放有效浓度的庆大霉素达42天以上,而A-PHA为28天。三种陶瓷洗脱液中头孢唑林浓度均低于庆大霉素浓度。A-PGC在兔股骨中维持有效浓度庆大霉素达8周以上且有良好的骨传导作用。结论A-PGC可望成为治疗骨髓炎的一种新方法。

载药骨基质明胶缓释体的研制与实验

目的 研制载药骨基质明胶缓释体 ,为人工关节感染和松动的防治提供新方法。方法 将BMG溶于头孢唑林钠溶液 ,通过真空吸附、冻干等处理 ,制得载药BMG。测定其体内、体外释药浓度及持续时间以及载药BMG的诱导成骨能力。结果 载药BMG体外对金葡菌的抑制作用为 2 2d ,体内为 14d。载药BMG体内释药时 ,局部组织浓度高 ,血浆浓度低 ;局部组织早期浓度高 ,以后为稳定的低浓度释放。载药BMG中掺入抗生素后不影响BMG的诱导成骨能力。结论 载药BMG既能持续释放有效浓度的抗生素 ,又具有强的诱导成骨能力 ,可望成为防治人工关节感染和松动的一种新方法。

阿霉素-多孔磷酸三钙陶瓷缓释体的研制及体内释药试验

目的：研制阿霉素多孔磷酸三钙陶瓷（ Ａ Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ）缓释体并为骨肿瘤保肢治疗术后骨缺损的修复提供新方法。材料与方法：制备 Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ陶瓷，将阿霉素载入其中制得 Ａ Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ。实验动物分成 Ａ、 Ｂ两组， Ａ 组右股骨粗隆中植入 Ａ Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ， Ｂ组静脉注射阿霉素。不同时期取粗隆部位的肌肉及血浆标本，用高效液相色谱法测定肌肉及血浆中阿霉素的浓度。结果：体内植入 Ａ Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ后，阿霉素能在局部缓慢释放达１０ 周以上，局部组织药浓高，全身药浓低。既能缓释阿霉素控制肿瘤复发，又能充填并修复骨缺损。结论： Ａ Ｐ Ｔ Ｃ Ｐ缓释体，可望成为骨肿瘤保肢治疗术后骨缺损修复的一种新方法。

人工关节磨损碎屑的研究进展

无菌性松动是人工关节置换术后最常见的并发症。近来的研究发现，磨损碎屑诱导的骨吸收是引起人工关节无菌性松动最重要的因素之一。本文论述了聚乙烯磨碎屑和金属磨损碎屑的形态特征（光镜、电镜下）以及其诱导机体产生的生物反应。磨损碎屑的特性目前尚未完全阐明。只有充分认识其特性，才能有效地鉴别磨损碎屑，更好地指导临床及人工关节的设计。

载药骨基质明胶治疗骨髓炎的实验研究

目的 :探讨载药骨基质明胶 (BMG)治疗骨髓炎的可能性。方法 :将 BMG溶于头孢唑林钠溶液 ,通过真空吸附、冻干等处理 ,制得载药 BMG。测定其体内、体外释药浓度及持续时间以及载药 BMG诱导成骨的能力。结果 :载药BMG对金葡菌的抑制作用体外为 2 2 d,体内为 14d。载药 BMG体内释药时 ,局部组织浓度高 ,血浆浓度低 ;局部组织早期浓度高 ,以后为稳定的低浓度释放。载药 BMG中掺入抗生素后不影响 BMG的诱导成骨能力。结论 :载药 BMG既能持续释放有效浓度的抗生素 ,又具有较强的诱导成骨能力 。

骨基质明胶预防人工关节无菌性松动的实验研究

目的：研究骨基质明胶（ＢＭＧ）防治人工关节无菌性松动的可行性。方法：制备兔ＢＭＣ及陶瓷人工股骨头。大白兔４０只，随机分成两组，行右人工股骨头置换，一组植入ＢＭＣ，另一组不植ＢＭＣ作为对照，并以不同时期作生物力学测定、组织学检查、立体显微摄影和电子探针检测，以了解人工关节周围的成骨情况。结果：ＢＭＧ组各时期拔出强度明显高于对照组。ＢＭＧ组人工关节周围成骨速度及骨量明显高于对照组。结论：ＢＭＧ能加速骨组织与人工关节的结合，可加速人工关节的生物学固定，防止无菌性松动的发生。

人工股骨头置换术与股骨近端防旋髓内钉治疗高龄患者转子间骨折对比研究

目的：比较人工股骨头置换术与股骨近端防旋髓内钉治疗高龄患者转子间骨折的临床效果差异,为人工股骨头置换术治疗高龄患者转子间骨折提供依据。方法：统计并分析两种手术方法的手术时间、术中出血量、术后并发症和术后髋关节功能。术后随访3个月~5年,平均26个月。结果：两种手术方法的手术时间、术中出血量比较差异有统计学意义（P〈0.05）;与股骨近端防旋髓内钉治术相比,人工股骨头置换术治疗高龄患者股骨转子间骨折术后并发症少、术后髋关节关节功能恢复更佳（P〈0.05）。结论：相对于股骨近端防旋髓内钉术,人工股骨头置换术治疗高龄患者股骨转子间骨折是一种安全、有效的手术方式。

二甲胺四环素对大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达及细胞凋亡的影响

[目的]探讨大鼠脊髓损伤后应用二甲胺四环素(minocycline)对Caspase-3表达及细胞凋亡的影响。[方法]成年大鼠脊髓损伤后应用二甲胺四环素的治疗组(A组)和应用生理盐水对照组(B组),于损伤后不同时点取材,用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,用免疫组化染色检测Caspase-3表达阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。[结果]HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变A组明显轻于B组。A、B两组均发现凋亡细胞及Caspase-3表达,神经细胞凋亡指数及Caspase-3表达均B组>A组(P<0.01)。[结论]二甲胺四环素能抑制大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达及细胞凋亡。

脉冲磁场与前软骨干细胞向成熟软骨细胞的增殖与分化:与Ihh/PTHrP信号通路活性有关吗?

背景:前期研究证实脉冲电磁场对前软骨干细胞增殖具有促进作用,但其作用机制不明确。目的:进一步探讨脉冲电磁场对前软骨干细胞增殖分化的影响,并观察其对前软骨干细胞Ihh/PTHrP信号通路活性的影响。方法:采用免疫磁珠分选法获取并纯化SD大鼠前软骨干细胞,使用频率为50MHz,电场强度为1mT的脉冲电磁场进行干预,0.5h/次,2次/d,干预2,4,6d后收集细胞,以不给予磁场刺激的为空白对照。通过RT-PCR法检测细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的基因表达水平,再通过Western-blot法测定各组细胞印度刺猬蛋白、甲状旁腺激素相关肽蛋白的表达水平。结果与结论:RT-PCR结果显示,Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达随磁场刺激时间延长而增高,且经磁场刺激前软骨干细胞的聚集蛋白聚糖明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。Western-blot结果显示,印度豪猪蛋白及甲状旁腺激素相关肽蛋白表达均随磁场刺激时间的延长增加,不同时间磁场刺激组印度刺猬蛋白表达高于空白对照组(P<0.01);甲状旁腺激素相关肽的表达量也随之上升,但当磁场刺激4,6d后的甲状旁腺激素相关肽蛋白表达与空白对照组差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。提示强度为1mT,频率为50MHz的脉冲电磁场能促进前软骨干细胞向成熟软骨细胞增殖分化,其作用机制可能与改变Ihh/PTHrP信号通路活性有关。

骨髓间充质干细胞向少突胶质细胞的定向分化

目的:神经反射通路的重建和再髓鞘化是影响脊髓损伤后恢复的一个关键性因素,而少突胶质细胞存活的多少直接影响轴突再生后髓鞘化。探讨骨髓间充质干细胞向少突胶质细胞定向分化的可行性。方法:实验于2006-09/2007-06在同济医院骨科实验室完成。①动物:2～4周龄清洁级SD大鼠5只,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法:大鼠颈脱臼法处死,无菌条件下取双侧股骨、胫骨,去除两端骨骺,暴露骨髓腔,用DMEM培养液反复冲洗,收集冲洗液,重悬细胞种植于25cm2培养瓶中,培养体系中含DMEM、体积分数为0.1的胎牛血清、终浓度为2mmol/L谷氨酰胺及100U/mL青霉素和100mg/L链霉素,采用贴壁法+胰蛋白酶消化法进行纯化。取培养至第4代的骨髓间充质干细胞,加入含有碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、胰岛素样生长因子、N2添加剂的无血清培养基进行诱导分化。③实验评估:观察诱导过程中骨髓间充质干细胞的形态学变化。半定量RT-PCR检测少突胶质细胞特异性标志物mRNA的表达。应用抗微管相关蛋白、抗神经纤维酸性蛋白、抗半乳糖脑苷脂、抗磷脂碱性蛋白抗体进行免疫细胞化学染色,检测骨髓间充质干细胞定向分化为少突胶质细胞的阳性率。结果:①骨髓间充质干细胞向少突胶质细胞诱导分化过程中的形态学变化:经诱导分化后,大部分骨髓间充质干细胞表现出少突胶质细胞的形态学特征,胞质向细胞核回缩,细胞突起向外延伸,折光性增强,随时间延长多个细胞突起相互连接形成典型的网状结构。②少突胶质细胞特异性标志物mRNA的表达:细胞诱导分化后可检测到磷脂碱性蛋白mRNA、半乳糖脑苷脂mRNA的特异性条带。③少突胶质细胞阳性率:在诱导分化条件下,半乳糖脑苷脂阳性率为65%,磷脂碱性蛋白阳性率为45%,微管相关蛋白2阳性率为10%。结论:碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子与胰岛素样生长因子联合应用,能够有效促进骨髓间充质干细胞向少突胶质细胞分化。

膝关节镜术后持续24h冰敷的疗效分析

目的:观察持续24h冰敷对膝关节镜术后患者局部消肿、止痛的疗效。方法:膝关节镜手术患者70例,随机分为冰敷组和常规组各35例,术后均给予常规护理及功能锻炼。冰敷组同时将低温软水袋(≤0°)包裹于膝关节周围,持续24h。比较2组术前后24h患肢固定点髌骨上2cm、髌骨中点和腓肠肌最粗点的周径差及静止视觉模拟疼痛评分(VAS)。结果:术后24h,膝关节固定点周径差值,冰敷组明显小于常规组;静止VAS评分明显低于常规组(P<0.05,0.01)。结论:膝关节镜术后持续冰敷治疗可以早期减轻局部肿胀和疼痛,促进康复。

人工全髋关节置换联合自体股骨头结构性植骨及转子下截骨治疗Crowe Ⅳ型髋关节发育不良的短期随访

目的探讨联合自体股骨头结构性植骨及股骨转子下截骨的人工全髋关节置换术治疗Crowe Ⅳ型髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)的短期临床效果。方法回顾性分析2010年1月至2013年12月于我院手术治疗Crowe Ⅳ型DDH的48例(48髋)病人的临床资料,手术均使用非骨水泥组配式S-ROM假体行全髋关节置换术,髋臼均行自体股骨头结构性植骨,并用2~3枚空心拉力螺钉固定,股骨均行小转子下截骨。记录术中截骨长度,术中出血量及输血例数,术中股骨远端骨折例数,术后股神经损伤及静脉血栓发生例数,术后假体松动、假体周围骨折及感染例数。比较病人术前术后的疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分、Harris评分及双下肢长度差异。结果 2例术中出现股骨远端骨折,予以钢丝捆扎术后3个月复查提示骨折端骨性愈合。3例术后出现股神经损伤症状,术后1个月复查时症状均消失。术前患肢较健肢平均短缩(6.3±0.9)cm,患髋的Harris评分为(38.6±5.3)分;术后随访2年时的患肢较健肢平均短缩(1.9±0.7)cm,Harris评分为(89.2±1.4)分;手术前后各指标差异均有统计学意义(均P<0.05)。随访期间无假体松动、感染,无假体周围骨折。结论联合自体股骨头结构性植骨及股骨转子下截骨的人工全髋关节置换术是治疗Crowe Ⅳ型DDH的一种有效的手术方式,值得进一步研究。

人转化生长因子β3基因转染KLD-12自组装纳米肽纤维支架三维培养前软骨干细胞

背景:作者前期试验证实了外源性细胞因子人转化生长因子β3具有很强的诱导前软骨干细胞向成熟软骨分化并促进其增殖的能力。国外的研究均证实了在自组装肽纳米纤维支架中三维培养有利于软骨源性干细胞的增殖与分化。目的:将人转化生长因子β3基因转染于三维培养于KLD-12肽纳米纤维支架内的前软骨干细胞中,并比较其与二维培养前软骨干细胞转染效率的差异。方法:以免疫磁珠分选法获取并纯化前软骨干细胞,将其种植于KLD-12肽纳米纤维支架内,使用xfectTM stem纳米干细胞转染试剂将人转化生长因子β3基因分别转染入KLD-12三维支架内培养的前软骨干细胞和普通二维培养基培养的前软骨干细胞,通过免疫荧光和反转录-聚合酶链反应法测定转染后48h不同组别转化生长因子β3基因的表达情况,并利用酶联免疫吸附法测定转染后不同时间细胞培养上清液中转化生长因子β3的质量浓度。结果与结论:免疫荧光结果显示,KLD-12三维支架内培养的前软骨干细胞转染后转化生长因子β3阳性细胞率明显高于普通二维培养基内前软骨干细胞(P<0.05),与反转录-聚合酶链反应法检测结果相同。酶联免疫吸附法测定结果显示,转染24h前软骨干细胞上清液中转化生长因子β3蛋白水平呈上升趋势,72h后达到峰值,随后稍下降进入平台期。提示人转化生长因子β3基因在三维培养于KLD-12肽纳米纤维支架内前软骨干细胞中的转染效率高于普通二维培养基培养的前软骨干细胞。

多种神经营养因子联合诱导培养骨髓间充质干细胞向少突胶质样细胞的定向分化(英文)

背景:轴突再生后髓鞘化是影响脊髓损伤后恢复的一个关键性因素,而少突胶质细胞存活的多少直接影响轴突再生后髓鞘化。目的:探讨骨髓间充质干细胞经神经营养因子诱导培养后,向少突胶质样细胞定向分化的可行性。设计、时间及地点:细胞分子生物学的体外实验,于2006-09/2007-06在同济医院骨科实验室完成。材料:选用2～4周龄SD大鼠5只,雌雄不拘,取其双侧股骨、胫骨骨髓,分离培养骨髓间充质干细胞。培养用诱导因子表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子为美国Invitrogen公司产品。方法:取培养至第4代的骨髓间充质干细胞,加入含有20ng/mL碱性成纤维细胞生长因子、20ng/mL表皮生长因子、N2添加剂的无血清培养基的诱导液诱导48h后,加含500ng/mL胰岛素样生长因子1、N2添加剂的分化培养液培养3d。主要观察指标:相差显微镜观察诱导过程中骨髓间充质干细胞的形态学变化。半定量RT-PCR检测少突胶质细胞特异性标志物mRNA的表达。应用神经元细胞标志物抗微管相关蛋白,星形胶质细胞标志物抗神经纤维酸性蛋白,少突胶质细胞标志物抗半乳糖脑苷脂、抗磷脂碱性蛋白抗体进行免疫细胞化学染色,检测骨髓间充质干细胞定向分化为少突胶质样细胞的阳性率。结果:①骨髓间充质干细胞向少突胶质样细胞诱导分化过程中的形态学变化:经诱导分化后,大部分骨髓间充质干细胞表现出少突胶质细胞的形态学特征,胞质向细胞核回缩,细胞突起向外延伸,折光性增强,随时间延长多个细胞突起相互连接形成典型的网状结构。②少突胶质细胞特异性标志物mRNA的表达:细胞诱导分化后可检测到磷脂碱性蛋白mRNA、半乳糖脑苷脂mRNA的特异性条带。③少突胶质细胞阳性率:在诱导分化条件下,半乳糖脑苷脂阳性率为65%,磷脂碱性蛋白阳性率为45%,微管相关蛋白2阳性率为10%。结论:碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子与胰岛素样生长因子联合应用能够有效促进骨髓间充质干细胞向少突胶质样细胞定向分化。

共同培养骨髓基质干细胞对髓核细胞增殖分化的影响

目的:针对椎间盘退行性变的组织修复目前集中于细胞移植治疗,实验在体外联合培养条件下观察骨髓基质干细胞对髓核细胞增殖分化的影响。方法:实验于2005-12/2006-09在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室和同济医院卫生部重点实验室进行。①实验方法:4月龄健康新西兰大耳白兔3只,麻醉后于髂嵴处作骨髓腔穿刺,抽吸6mL骨髓,分离骨髓基质干细胞;相同实验兔抽取骨髓后立即处死,取腰骶部脊柱之椎间盘,切开纤维环,取出髓核组织,分离椎间盘髓核细胞,同时设立单独髓核细胞培养组。②实验评估:在相同的培养条件下,定期观察两组髓核细胞在光镜下形态学变化及电镜下细胞超微结构的改变;于诱导培养7,14d通过RT-PCR法、Western blot法和免疫组化法法检测两组髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖的表达。结果:①髓核细胞大体形态学及超微结构变化:髓核细胞与骨髓基质干细胞共同培养后,髓核细胞很快就呈现为圆形或多角形,且细胞形体变大、折光性好,贴壁时间早,数量增殖快,超微结构细胞表面可见许多短而粗的微绒毛突起,胞质内有大量扩张的粗面内质网、丰富的线粒体和高尔基体,细胞合成代谢旺盛。单独培养的髓核细胞胞体小,贴壁、增殖慢,细胞器不丰富。②髓核细胞Ⅱ型胶原蛋白与聚集蛋白聚糖检测结果:RT-PCR和Western blot检测显示诱导培养7,14d骨髓基质干细胞与髓核细胞共同培养组的Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白聚糖条带均明显亮于单独髓核细胞培养组,吸光度值比较差异有显著性意义(P<0.01)。免疫组化检测显示骨髓基质干细胞与髓核细胞共同培养组中Ⅱ型胶原蛋白和聚集蛋白聚糖在细胞胞浆中的表达随时间延长而逐渐增加,2周达到高峰,单独髓核细胞培养组中此两种蛋白表达很低,且培养第7,14天无明显变化。结论:骨髓基质干细胞在体外与髓核细胞共同培养时,能激活髓核细胞并促进其增殖分化,增加髓核细胞外基质的合成。提示骨髓基质干细胞与髓核细胞联合培养有利于退变椎间盘的髓核细胞修复、再生。