西洋参汤对脾虚证大鼠机体的调节作用初探

目的:观察西洋参汤对脾虚证大鼠血睾酮含量的影响,探讨其治疗脾虚证的作用机理。方法:选用成年Wistar大鼠26只,随机分为4组。其中脾虚造模组8只,西洋参治疗组6只,自然恢复组6只,正常对照组6只。除正常对照组外,其余3组均按"彭式"方法建立脾虚证模型,观察动物的一般状况。西洋参汤治疗11d后,采用放射免疫分析法测定血清中睾酮(T)的含量,以此来说明对脾虚证的影响。结果:西洋参汤可使脾虚大鼠血清中睾酮的水平升高,明显高于模型对照组(P<0.05)。结论:脾虚证可导致睾酮水平下降,经用西洋参汤治疗后,激素水平可以得到恢复。

桂枝汤对痹证(胶原诱导免疫性关节炎)小鼠肠黏膜免疫系统中CD_4^+、CD_8^+T淋巴细胞及SIgA的影响

目的观察桂枝汤对痹证 (胶原诱导免疫性关节炎 )小鼠肠黏膜免疫学指标的影响。方法将80只雄性DBA小鼠随机分为 4组〔即正常组、模型组、桂枝汤高剂量组 (简称桂高组 )、桂枝汤低剂量组 (简称桂低组 )〕。模型组采用Ⅱ型胶原诱导性关节炎作为痹证模型 ,运用免疫组织化学染色法标记小鼠小肠及PP结中CD4 +、CD8+T淋巴细胞及SIgA数量 ,用图像分析仪进行统计计算其含量。 结果与正常组比较 ,模型组Ⅱ型胶原免疫后小鼠肠黏膜免疫系统中CD4 +、CD8+T淋巴细胞及SIgA数量明显减少 ,差异有显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,应用桂枝汤 (高、低剂量 )后 ,CD4 +T淋巴细胞及SIgA数量明显升高 ,但只有桂高组与模型组比较差异有显著性 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论桂枝汤可以增强痹证小鼠肠道黏膜免疫功能 ,从而可能诱导免疫耐受和免疫抑制。

桑寄生、枸杞子、桑椹对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

目的:探讨具有滋补肾阴作用的单味中药-桑寄生、枸杞子和桑椹对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理。方法:将82只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组、桑寄生组、枸杞子组、桑椹组7组。给药3个月后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量;免疫组化法检测大鼠胫骨OB和MSCOPG、RANKL蛋白表达,ELISA法检测外周血清中IL-1、IL-6含量。结果:与模型组相比,桑寄生组、枸杞子组胫骨TBV%显著增高,TRS%、TFS%、MAR明显降低,OSW、mAR无显著性差异;而桑椹组无显著性变化。桑寄生组OB和MSCOPG蛋白表达显著升高,外周血IL-1明显下降;枸杞子组OB和MSCOPG蛋白表达显著增高,RANKL蛋白表达明显降低,外周血IL-1、IL-6水平降低;桑椹组无显著性变化。结论:枸杞子的治疗作用机理是促进OB和MSCOPG蛋白表达,抑制RANKL蛋白表达,降低外周血中IL-1、IL-6水平;桑寄生的作用是促进OPG蛋白表达,降低IL-1含量。

卵巢切除所致肾虚对免疫性关节炎小鼠血清骨钙素和肿瘤坏死因子的影响

目的：探讨卵巢切除所致肾虚影响免疫性关节炎（痹证）中骨代谢的机制。方法：切除小鼠卵巢后，Ⅱ型胶原皮下注射以诱导关节炎（ＣＩＡ）；每周１次观察小鼠的关节肿胀程度；组织切片光镜下观察小鼠滑膜、关节软骨及骨的改变；放射免疫法检测小鼠血清雌二醇、骨钙素、肿瘤坏死因子的变化。结果：切除卵巢的小鼠，血中雌二醇水平明显下降，而血清骨钙素和肿瘤坏死因子的含量则显著增加；同时，滑膜组织炎症加重，软骨损伤及骨的破坏均更为严重。结论：卵巢切除所致肾虚可使ＣＩＡ的病变程度加重。

宣发膜原法对胶原诱导性关节炎大鼠免疫功能的影响

目的:探讨宣发膜原法对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗机理,为研究类风湿关节炎(RA)的发病和损伤机理提供实验依据。方法:以CIA作为RA的动物模型,给以宣发膜原方治疗,检测CIA大鼠免疫指标和病理变化。结果:治疗组大鼠病理损伤减轻,TNF-α降低,IFN-γ升高,抗CⅡ抗体降低。结论:宣发膜原法能够减轻CIA病理损伤,调节CIA大鼠免疫功能,可以用于RA治疗。

不同品系、不同性别对大鼠CIA发病情况的比较研究

目的:对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)在不同性别、不同品系(SD大鼠、Wistar大鼠、Lewis大鼠)大鼠的发病情况进行比较研究,以期寻找出一种适合制作CIA模型的大鼠品系。方法:选用6周龄SPF级SD大鼠、Wistar大鼠各80只,Lewis大鼠40只,雌雄各半。采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂混合物的方法诱导出关节炎模型。结果:(1)不同种属发病率不同;随着免疫时间的延长,发病率越高。两两比较显示,SD和Wistar大鼠与Lewis大鼠发病率有显著性差异,但SD与Wistar无显著性差异;(2)不同品系大鼠AI不同,有显著性差异;组间两两比较结果显示:Lewis比SD、Wistar大鼠AI低,有显著性差异,且SD比Wistar大鼠AI高,差异亦具有显著性。但性别对AI没有影响;(3)性别对病理积分影响无显著性,种属对病理积分影响有显著性差异。两两比较结果显示,Lewis比SD、Wistar大鼠关节病理积分低,有显著性差异,而SD与Wistar大鼠之间无显著性差异。结论:在制作痹证(RA)大鼠模型时建议首选SD大鼠,其次可以选择Wistar大鼠,雌雄均可。

左归丸对去卵巢所致大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的 :探讨左归丸对骨质疏松症的治疗作用。方法 :以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型 ,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨TBV %、TRS %、TFS %、AFS %、MAR、BFR、OWS和mAR。结果 :大鼠切除卵巢后 ,胫骨TBV %显著降低 ,TRS %以及TFS %、AFS %、MAR、BFR、OWS和mAR均显著增高 ,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症。给大鼠灌服左归丸后 ,能使上述指标发生逆转。结论

鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎大鼠血清TNF-α、IL-6以及CⅡ抗体活性的影响

目的 :观察鹿瓜多肽注射液对类风湿性关节炎 (RA)的治疗作用 ,并探讨其作用机理。方法 :以Ⅱ型胶原 (CⅡ )诱导的免疫性关节炎 (CIA)大鼠为RA动物模型 ,通过测量其关节肿胀程度及制作病理切片并在光镜下计分 ,观察鹿瓜多肽注射液对其的治疗效果 ;采用ELISA法测定大鼠血清中TNF α、IL 6以及CⅡ抗体活性 ,以探讨其作用机理。结果 :与模型组比较 ,鹿瓜多肽组大鼠踝关节肿胀程度和病理损伤计分均明显减轻。鹿瓜多肽组血清TNF α、IL 6的活性明显降低。结论 :鹿瓜多肽注射液对CⅡ诱导的免疫性关节炎有治疗作用 ,其机理可能与抑制血清TNF α、IL 6的活性有关。

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠IL—1和IL—6活性的影响

目的:探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法:以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比(TBV%)、骨小梁吸收表面百分比(TRS%)和骨小梁形成表面百分比(TFS%),采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇(E_2)含量,分别采用小鼠胸腺细胞检测法和依赖株细胞增殖反应法测定白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的活性。结果:左归丸能使胫骨TBV%显著增高,使TRS%和TFS%显著降低。大鼠切除卵巢后,E_2含量大幅度降低,而IL-1和IL—6活性显著增高。左归丸对E_2含量无显著性影响,但对IL—1和IL—6活性有明显的抑制作用。结论:左归丸能够抑制IL-1和IL-6的活性是其防治骨质疏松症的机理之一。

温补肾阳方对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

目的 :探讨温补肾阳方对骨质疏松症的治疗作用。方法 :以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为动物模型 ,采用骨组织形态计量学方法测定胫骨 TBV%、TRS%、TFS%、AFS%、MAR、BFR、OWS和 m AR。结果 :大鼠切除卵巢后 ,胫骨 TBV%显著降低 ,TRS%以及 TFS%、AFS%、MAR、BFR、OWS和 m AR均显著增高 ,从而表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松症。给大鼠灌服温补肾阳方后 ,能使上述情况发生逆转 ,即能使 TBV%显著增高 ,使 TRS%以及 TFS%、AFS%、MAR、BFR、OWS和m AR均显著降低 ,并能使之降低到与正常大鼠相当的水平。结论 :温补肾阳方对骨质疏松症具有良好的治疗作用。

滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL-1和成骨细胞IL-6表达的影响

目的:通过观察滋阴补肾法对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨髓基质细胞IL1和成骨细胞IL6表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的机理。方法:将大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、雌激素组和补肾组。摘除大鼠双侧卵巢3个月后,灌胃给予左归丸,共给药3个月。采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测骨髓基质细胞IL1和成骨细胞IL6蛋白和mRNA的表达。结果:与模型组比较,补肾组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时,其骨髓基质细胞IL1和成骨细胞IL6蛋白和mRNA的表达皆显著降低。结论:滋阴补肾法能使骨髓基质细胞IL1和成骨细胞IL6表达降低,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一。

宣发膜原方对胶原诱导性关节炎大鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-10影响的研究

目的:探讨宣发膜原方对CIA大鼠血清中TNF-α、IFN-γI、L-6和IL-10影响。方法:以CIA作为RA的动物模型,给予宣发膜原方治疗,用ELISA及放免法检测大鼠血清中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-10的含量。结果:宣发膜原方可以降低大鼠血清中IFN-γ、TNF-α和IL-6(P<0.01),升高IL-10(P<0.01)。结论:宣发膜原方能够调节CIA大鼠血清中细胞因子含量。

芎附散对脾虚痹证(类风湿性关节炎)模型的影响

目的观察芎附散对脾虚基础上诱发痹证(类风湿性关节炎)小鼠模型的影响。方法选择DBA小鼠,胶原诱导性关节炎(CIA)作为痹证模型,以大黄泻下加饥饱失常造成脾虚模型,在此基础上加以型胶原(C)诱发脾虚痹证(类风湿性关节炎)的模型,用芎附散及雷公藤多苷进行治疗。观察小鼠体重、关节肿胀程度及病理学改变,用酶联免疫吸附法测定各组小鼠血清中抗C抗体、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素-γ(IFN-γ)含量的变化。结果痹证组、脾虚痹证组动物体重减轻,关节肿胀加剧,膝、踝关节病理学改变明显,INF-α及IFN-γ含量增高,血清中抗C抗体含量升高,以脾虚痹证组明显,与痹证组比较差异有显著性意义(P<0.01),芎附散能显著减轻上述改变。结论该模型是研究痹证(类风湿性关节炎)机制较理想的动物模型之一,芎附散对该模型有明显的治疗作用。

桂枝汤对痹证小鼠T淋巴细胞的调节作用

目的 :探讨桂枝汤对痹证T淋巴细胞的调节作用。方法 :外周全血中T淋巴细胞亚群用免疫荧光标记流式细胞仪计数 ,脾脏中T、B淋巴细胞增殖功能用MTT法测定。结果 :外周全血中CD3+ T、CD4 + T、CD8+ T细胞在应用桂枝汤后数量均降低 ,脾脏来源的T淋巴细胞对丝裂原刀豆蛋白A(ConA)激活的增殖反应系数应用桂枝汤后降低 ,B淋巴细胞对丝裂原细菌脂多糖 (LPS)激活的增殖反应系数应用桂枝汤后无变化。结论 :桂枝汤能减少外周血中T淋巴细胞的数量且对脾脏中T淋巴细胞的功能具有抑制作用。

左归丸含药血清对成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2表达的影响

目的通过观察左归丸含药血清对成骨细胞白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)和环加氧酶-2(COX-2)表达的影响,探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。方法体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组:正常血清组、卵巢切除(OVX)血清组和OVX含药血清组。采用免疫组化法,检测成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2的表达。结果OVX血清组成骨细胞IL-1、IL-6和COX-2的表达明显强于正常血清组,而OVX含药血清组的表达较OVX血清组明显减弱,与正常血清组比较,则无显著性差异。结论在去势状态下,左归丸可能是通过抑制成骨细胞IL-1、IL-6和前列腺素E2(PGE2)的分泌,进而达到治疗骨质疏松的作用。

切除卵巢所致肾虚对Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠IL-2和IL-6含量的影响

目的探讨卵巢切除所致肾虚对Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎（ＣＩＡ）的影响及细胞因子的作用。方法于ＤＢＡ／１小鼠皮下注射Ⅱ型胶原制作关节炎模型；以依赖株细胞增殖反应法测定ＩＬ－２、ＩＬ－６含量。结果卵巢切除可使关节炎小鼠脾单个核细胞的ＩＬ－２和ＩＬ－６含量显著增加；同时小鼠关节肿胀程度、滑膜组织增生、软骨损伤及软骨下骨的破坏均明显加重。结论ＩＬ－２、ＩＬ－６与ＣＩＡ发病过程密切相关，卵巢切除所致肾虚可使ＣＩＡ病变进一步加重，在一定程度上反映了此法所致肾虚与ＩＬ－２。

左归丸含药血清对破骨细胞骨吸收功能的影响以及成骨细胞对其的介导作用

目的:通过观察左归丸含药血清对破骨细胞(OC)骨吸收功能的影响,以及成骨细胞(OB)对其的介导作用,探讨其治疗骨质疏松症的作用机理。方法:体外分离培养大鼠OB与OC,观察左归丸含药血清对OC所致骨陷窝数目及面积的影响,以及OB在此过程中的作用。结果:OC与骨片共同培养的第7天,OVX血清能使OC所致的吸收陷窝数目和面积明显增加;而OVX含药大鼠血清能使OC活性明显下降。当OC与OB、骨片共同培养7d后,正常大鼠血清对OC单独培养和OC与OB共同培养所形成骨吸收陷窝的数目和面积没有明显的差异,但共同培养有增加的趋势。而在OVX血清的作用下,OC与OB共同培养所形成的骨吸收陷窝与OC单独培养相比,前者显著高于后者。本实验还发现,OVX含药血清与OB、OC共同培养的骨陷窝数目及面积明显低于OVX含药血清与OC单独培养。结论:在去势状态下,左归丸含药血清不仅对OC有直接的抑制作用,且可通过OB间接对OC产生抑制作用,这可能是其治疗骨质疏松症的作用机理。

针刺“足三里”对脾虚证大鼠血清中胃泌素、皮质醇含量的影响

目的:探讨针刺“足三里”治疗大鼠脾虚证的作用机理。方法:选用成年雄性Wistar大鼠26只,随机分为4组。其中正常对照组6只,脾虚造模组8只,自然恢复组6只,针刺治疗组6只。除正常对照组外,其余3组均按“彭式”方法建立脾虚证模型。针刺“足三里”治疗11d后,断头取血,用放射免疫方法测定血清中胃泌素(Gas)、皮质醇(Cor)的含量。结果:针刺“足三里”穴可使脾虚大鼠血清中Gas、Cor的水平升高,明显高于模型对照组(P<0.05);自然恢复组与模型对照组比较血清中Gas、Cor含量没有明显变化(P>0.05);自然恢复组血清中Gas、Cor含量明显低于正常对照组和针刺治疗组(P<0.05)。结论:针刺“足三里”治疗脾虚证与其对Gas、Cor等激素水平的调节作用有关。