全球兽药产业发展现状

兽药产业是促进养殖业健康发展的基础性产业,在保障动物源性食品安全和公共卫生安全等方面具有重要作用。为了解全球兽药行业发展状况,对全球兽药产业结构、发展现状和研发投入等进行了综述分析。受全球动物疫病频发、政府支持力度加大、公众对动物源食品卫生安全要求提高、宠物市场快速增长等因素影响,全球兽药产业市场规模快速增长,2015—2021年全球兽药总销售额从357.16亿美元增长到477.83亿美元,复合增长率为3.70%;全球兽药产业发展高度集中,北美洲、欧洲和亚洲掌控了全球80.52%的兽药市场;兽用生物制品市场份额占比持续增长,从2005年的25%增加到2020年的30%,而兽用化学药品市场份额却呈下降趋势,从63%降到59%;全球兽药产业结构逐步调整,宠物行业兽药销售额逐步上升,已接近食品动物份额;兽药研发投入持续加大,全球兽药行业专利授权数量2019年后呈现快速上升趋势。本文通过分析全球兽药产业结构及发展变化趋势,了解制约产业发展的因素及当前面临的形势和挑战,以期为我国兽药行业的高质量发展提供新思路和新举措。

禽流感病毒M基因的重组慢病毒构建

旨在建立针对禽流感病毒(AIV)的实验室快速分子检测方法。构建重组慢病毒作为分子检测方法中的阳性对照品,采用PCR扩增技术获得AIV M基因的保守区片段,并构建pLVX-M-IRES-ZsGreen1重组慢病毒穿梭载体;将鉴定成功的重组穿梭质粒与骨架质粒pMD2.G和psPAX2共转染293T细胞,获得携带AIV M基因保守区的重组慢病毒;将重组慢病毒感染293T细胞,观察其荧光表达情况,收集、浓缩病毒液并测定其滴度;用AIV实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测方法检测M基因。结果表明:携带AIV M基因的重组慢病毒成功拯救,且其病毒滴度高、安全性强,可作为分子检测方法的阳性对照标准品。综上,本研究成功构建了AIV M基因的重组慢病毒,可高效包装出含有M基因保守区的慢病毒颗粒,为后续AIV分子检测试剂盒的研制提供参考。

动物疫病活载体疫苗研究进展

活载体疫苗是以细菌或病毒作为载体表达外源抗原和治疗因子的载体系统,具有安全性高、毒力返祖风险低、成本低,可诱导免疫机体产生高水平的体液免疫、细胞免疫或黏膜免疫等优点,是目前最具发展潜力的基因工程疫苗之一,在动物疫病防控领域应用较多。病毒载体包括DNA病毒(如腺病毒、腺相关病毒和痘病毒等)和RNA病毒(如新城疫病毒、流感病毒等);细菌载体包括减毒致病菌与非致病菌两类,主要包括乳酸菌、沙门氏菌、大肠杆菌等。活载体疫苗常用的抗原呈递策略有载体-宿主平衡致死系统、微生物表面展示系统。多种疫苗载体的开发及抗原呈递策略的选择,使得活载体疫苗的使用价值最大化。不同载体疫苗在预防疫病方面均有不同优缺点,应根据实际情况选择最优最适合的活载体疫苗。本文综述了动物疫病防控领域的病毒和细菌活载体疫苗研究进展及其抗原呈递方式,以期为活载体疫苗的进一步研究提供参考。

猫冠状病毒病诊断技术研究进展

猫冠状病毒病是由猫冠状病毒(feline coronavirus,FCoV)感染引起的一种以上呼吸道、肠道和胸腹膜炎症为主的猫传染性疾病,主要通过粪口途径传播,在全世界均有流行,目前无有效疫苗和特效治疗药物。其中由猫传染性腹膜炎病毒引发的猫传染性腹膜炎致死率极高,且不易诊断和预防,已成为病死率最高的猫病毒性疾病之一。猫冠状病毒病的临床诊断和大部分实验室检测技术均不具有特异性,对于区分猫肠道冠状病毒和猫传染性腹膜炎病毒感染还存在一些困难。目前,基于PCR技术的RT-PCR和RT-qPCR特异性相对较高,RT-LAMP和RT-RAA等新技术的开发和应用可逐步填补临床快速检测的空白。本文通过对猫冠状病毒病诊断技术研究进展进行综述,以期为建立猫冠状病毒病快速诊断方法和制定诊断技术标准奠定基础。

赤羽病病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速、灵敏的赤羽病病毒(Akabanediseasevirus,AKAV)核酸检测方法,以AKAV S基因为靶基因,设计特异性引物和Taq Man探针,通过优化反应体系和条件,建立了AKAV荧光定量RT-PCR检测方法,随后开展了敏感性、特异性及重复性评估,并利用该方法与AKAV检疫行业标准推荐方法同时对临床采集的80份牛羊血液样品进行检测,以检验方法的临床应用效果。结果显示:本研究建立的检测方法敏感性较高,最低检测限为13.4 copies/μL;特异性良好,与口蹄疫病毒、牛冠状病毒、牛结节性皮肤病病毒、牛病毒性腹泻病毒、传染性牛鼻气管炎病毒、蓝舌病病毒、牛白血病病毒等均无交叉反应;组内试验变异系数为0.93%~2.47%,组间试验为1.25%~2.76%,重复性良好;利用建立的方法从80份临床样品中检出AKAV阳性样品21份,该检测结果与AKAV检疫行业标准推荐方法的符合率为98.75%。结果表明,本研究建立的AKAV荧光定量RT-PCR检测方法敏感性高,特异性及重复性好,适用于赤羽病临床检测,为赤羽病病原学监测和诊断技术标准开发提供了技术支撑。

GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒的病原特性分析

为了解GI-19型(QX型)鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)的病原特性,筛选6株GI-19型IBV进行EID_(50)测定以及鸡胚致病力和雏鸡致病性试验,并应用高通量测序技术进行基因组测序,分析病毒基因组和主要结构蛋白编码基因生物特性。结果显示:IBV/Chicken/Hubei/S1402/2021分离株对鸡胚有致病性,导致鸡胚表现胚体蜷缩、矮小等典型病变特征,经SPF鸡胚传代至第5代,表现较为稳定的EID_(50)(10^(-5.33)/0.1 mL),但其对雏鸡无致病性;IBV/Chicken/Sichuan/C1452/2021分离株对鸡胚没有致病性,但将其接种1日龄雏鸡,可导致雏鸡出现33.33%(5/15)的发病率,引起的典型病变为雏鸡肾脏尿酸盐沉积。对6株GI-19型IBV分离株的基因组和主要结构蛋白编码基因进行系统进化分析和生物特性分析,发现IBV/Chicken/Hubei/S1402/2021分离株与其他分离株存在明显差异,且在1a和1b基因区域存在重组现象。结果表明:我国流行的部分IBV毒株对鸡胚和雏鸡的致病性存在差异;IBV毒株S1基因的变异可能会影响其致病力,而N基因的变异可能会影响其感染细胞的能力。本研究分析了部分GI-19型IBV毒株的病原学特征,为揭示IBV的致病机理和免疫机制奠定了基础,为制定鸡传染性支气管炎防控策略提供了依据。

儿科重症护士核心能力与职业认同感相关性研究

目的调查儿科重症护士核心能力及职业认同感现状,为培训和提升儿科重症护士的专科技能提供实证依据;同时,探究儿科重症护士核心能力和职业认同感的相关性,为医院管理者进行护理管理提供指导,采取针对性的培训方案来提高儿童重症专科护士的核心能力,同时提升其职业认同感水平,稳定队伍提供更优质的护理服务。方法采用中国注册护士核心能力量表和护士职业认同评定量表,对江西省儿童医院的120名儿科重症护士进行匿名电子问卷调查。结果儿科重症护士核心能力总分为(147.13±33.62)分;儿科重症护士职业认同总分为(108.33±15.59)分,儿科重症护士核心能力与职业认同呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿科重症护士的核心能力及职业认同均处于中等水平,管理者应关注儿科重症护士的核心能力与职业认同,可以通过提升儿科重症护士核心能力,让儿科重症护士的职业认同感获得同步提升,稳固儿科重症护理队伍。

日本脑炎病毒NS1蛋白致脑血管内皮细胞损伤研究

[目的]本试验旨在探究日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV)非结构蛋白NS1的生物学功能。[方法]将JEV NS1基因克隆到pFastbac1载体并将其转化至感受态DH10Bac得到重组杆粒,将重组杆粒转染sf9细胞产生重组杆状病毒,通过病毒感染High5细胞成功表达了JEV NS1。在人脑微血管内皮细胞(HBMEC)培养液添加外源NS1蛋白,通过光学显微镜观察细胞形态,利用共聚焦显微镜观察JEV NS1蛋白对HBMEC表面唾液酸修饰的影响,IFA检测细胞中组织蛋白酶L的表达;小鼠经尾静脉注射JEV NS1及其N207糖基化位点突变体蛋白NS1 N207Q,分别于24、48和72 h通过伊文思蓝(EB)染色检测2个蛋白对小鼠的血脑屏障(BBB)通透性的影响。[结果]JEV NS1蛋白通过下调人脑内皮细胞表面的唾液酸修饰和上调组织蛋白酶L表达损伤内皮糖萼;动物试验表明NS1蛋白能够破坏小鼠的血脑屏障;NS1 N207Q蛋白处理对细胞表面唾液酸修饰的影响不显著,体内处理对小鼠的血脑屏障无明显损伤。[结论]JEV NS1蛋白具有损伤人脑微血管内皮细胞的生物学功能,突变N207位点可导致其损伤功能减弱,可为JEV亚单位疫苗候选抗原的优化提供新思路。

1例早产儿急性肾损伤行连续动-静脉血液滤过治疗的护理

血液净化技术（CBP）在临床的应用越来越广,成人治疗中已广泛应用于非肾脏疾病领域,国内在儿科的应用起步稍晚,尤其是运用于早产儿的抢救治疗中相对更少。1985年Ronco等已成功把连续性动-静脉血液滤过（CAVH）技术应用于儿科急性肾功能衰竭（ARF）治疗,现今该技术已成为危重病救治过程中的辅助治疗措施。血液净化技术模式选择依据患者疾病病因及个体因素而有不同的选择,

基于在线协作文档程序的自主排班模式的应用观察

目的:探讨多人实时同步在线自主排班的临床应用效果。方法:选取江西省某三级甲等专科医院2个儿童外科科室的护士为研究对象,使用WPS多人实时在线协作文档进行自主排班管理。运行观察1年后,对护士长实施前后的排班耗时及2个儿童外科护理单元的33名护士的满意度进行调查分析。结果:相较于传统的分权式排班,护士长自主排班耗时更长,差异有统计学意义(P<0.05),护士对自主排班模式的满意度以及对调班的灵活性与传统分权式排班模式比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:自主排班模式体现了更为人性化的护理管理,充分调动了护士的工作积极性,提升了护士的满意度。

禽产气荚膜梭菌研究进展

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,CP)是重要的食源性病原体之一,可对人类和动物健康造成严重威胁。CP在家禽中主要引起禽坏死性肠炎,严重影响了全球肉鸡贸易与生产。关于禽CP的研究当前主要集中于检测及分型方法、疫苗和耐药性方面。目前禽CP疫苗多处于实验室研发阶段,因此禽CP感染的防治主要依靠抗生素,而抗生素的频繁使用又导致了菌株耐药性问题,防治效果有限。因此,CP耐药性研究以及临床诊断技术完善及疫苗研发推进迫在眉睫。本文简述了CP的病原特点、致病机理及禽间的优势流行分型,梳理了禽CP不同检测方法的优点及分型方法,阐述了禽CP耐药现状以及疫苗研发方向及进展,提出了禽CP感染辅助防治措施,以期为CP感染防控提供参考。

以色列施耐德儿童医学中心学习报告

我于2018年8月8日搭乘飞机平安降落在以色列,从那一刻起,我的异国他乡学习之旅拉开了序幕。历时近3个月的观摩学习,我感触颇多,总结如下。位于特拉维夫市佩塔提克瓦区的以色列施耐德儿童医学中心(Schneider Children’s Medical Center)由美国纽约的欧文及海伦·施耐德赞助创建于1991年10月29日并因此得名。该中心是在综合研究了以色列医疗系统和国家儿科医疗需求的基础上建立的,是特拉维夫大学萨克勒医学院的附属医院。

2020—2022年我国部分地区牛赤羽病回溯性监测与分析

为了解赤羽病近几年在我国的流行状况和分布特征,采用竞争ELISA检测方法,对2020—2022年采集自我国12个省份150个场点的1327份牛血清样品进行赤羽病病毒抗体回溯性监测与分析。结果显示:赤羽病病毒抗体场群阳性率达67.3%,个体阳性率达41.5%;从空间上看,赤羽病流行呈现明显的“南高北低”特点,尤其以炎热、潮湿的广西和广东流行率最高,说明赤羽病在我国呈区域性流行态势;从时间上看,赤羽病流行没有规律的时间变化特点。本研究初步摸清了近几年赤羽病在我国部分地区的流行情况,并提出了针对性建议,为我国赤羽病防控提供了数据支撑和参考。

禽传染性支气管炎概述

禽传染性支气管炎(IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种禽类传染病,主要造成禽呼吸系统和泌尿生殖系统病变。IBV具有高度传染性,可引起雏鸡死亡,肉鸡增重减缓,蛋鸡产蛋下降。IBV易发生变异,血清型和基因型众多,不同基因型毒株之间存在较大的抗原差异,导致疫苗及药物研发存在较大难度,给该病防治带来一定挑战。多种血清学和分子生物学技术已用于IBV检测,如酶联免疫吸附试验、反转录聚合酶链式反应、重组酶介导扩增技术等。针对新型IBV仍需研究敏感性、特异性好的检测方法及开发安全性高、免疫效果好的新型疫苗。本文围绕IB的病原学、流行病学以及病毒分型方法、变异机制及检测方法等进行综述,以期为该病后期研究提供参考。

机械通气治疗重症手足口病合并神经源性肺水肿的气道管理

手足口病（HFMD）是一种主要由科萨奇病毒A16（CA16）和肠道病毒71（EV71）经多种途径传播而引起的以发热和手足口部皮疹为临床特征的儿童急性传染病[1]。重症病例多由EV71感染引起,可出现脑炎、脑脊髓炎、神经源性肺水肿（NPE）、循环障碍等,致死原因主要为NPE和重症脑干脑炎。一旦出现NPE,需呼吸机辅助通气治疗,

Clade 2.3.2e H5亚型禽流感DNA疫苗的免疫保护效力研究

为研制和更新针对H5亚型禽流感病毒(AIV)流行株的DNA疫苗,本研究将新近分离的H5亚型AIV Clade2.3.2e分支代表株A/Duck/Anhui/S1246/2015 (DK/AH/S1246/15)密码子优化的HA基因定向克隆至载体pCAGGS中构建重组质粒pCA-S1246,将该质粒转染293T细胞。利用间接免疫荧光和western blot检测,结果显示, HA蛋白可以在293T细胞中正确表达。将15μg、 30μg和60μg的p CA-S1246质粒分别免疫3周龄的SPF鸡, 3周以后以相同的剂量加强免疫后1周,检测其HI抗体平均效价分别可达1∶56、 1∶16和1∶37;加强免疫1周后用105EID50的DK/AH/S1246/15进行攻击时,免疫组的保护率为100%。本研究为DNA质粒pCA-S1246作为防控Clade.2.3.2e AIV的候选DNA疫苗株提供了实验依据。

H7N9禽流感DNA疫苗的免疫保护效力研究

为检测H7N9禽流感病毒(AIV) DNA疫苗的免疫保护效力,本研究将H7N9禽流感疫苗株A/Chicken/Guangxi/SD098/2017 (H7N9)[CK/GX/SD098/17 (H7N9)]的HA基因密码子优化后,定向克隆至载体pCAGGS中构建重组质粒pCA-SD098。将pCA-SD098转染至293T细胞后,采用间接免疫荧光(IFA)和western blot检测,结果显示,HA蛋白可以在293T细胞中正确表达。分别利用15μg和20μg重组质粒pCA-SD098免疫3周龄SPF鸡,3周后以相同的剂量和方式加强免疫,加强免疫一周后通过鼻腔分别感染105EID50的同源高致病性AIV (HPAIV)CK/GX/SD098/17 (H7N9)和异源低致病性AIV (LPAIV) A/Chicken/Chongqing/SD057/2017 (H7N9)[CK/CQ/SD057/17 (H7N9)],攻毒10 d内记录免疫鸡发病和死亡情况,检测免疫鸡HI抗体水平,并于攻毒后第3 d、第5 d和第7 d无菌采集所有鸡的喉头和泄殖腔拭子,采用红细胞凝集试验(HA)检测病毒的滴度。结果显示,重组质粒pCA-SD098免疫后可以诱导SPF鸡产生较高水平的HI抗体,15μg pCA-SD098剂量免疫鸡后能够完全抵御H7N9 HPAIV的致死性攻击,20μg pCA-SD098剂量可以有效阻断H7N9 LPAIV的感染。攻毒后,所有免疫鸡无发病、无死亡、无排毒,本研究为质粒pCA-SD098作为防控H7N9禽流感的候选DNA疫苗提供了实验依据。

等温扩增技术概述及其在动物病原检测中的应用

等温扩增技术是一种可以在恒定温度下进行体外核酸扩增的技术,近几年其研究热度很高。本文从技术原理、优缺点及在动物病原检测应用等方面,对环介导等温扩增技术(LAMP)、重组酶等温扩增技术、依赖核酸序列扩增技术(NASBA)、交叉引物等温扩增技术(CPA)和赖解旋酶等温扩增技术(HDA)等5种常见等温扩增技术进行了综述。LAMP技术操作简单,不依赖特殊设备,但引物设计较为复杂,研发多重LAMP检测方法有很大困难。重组酶等温扩增技术不受场地条件约束,扩增时间短,但容易造成气溶胶污染,因此一般用于实验研究。NASBA技术扩增效率高,不易产生污染,但成本偏高,操作相对复杂,在目前疫病检测研究中的应用逐渐减少。CPA技术操作相对简单,灵敏度高,特异性好,但结果判断受主观因素影响易造成假阳性或假阴性。HDA技术引物设计相对简单,但反应体系较为复杂,因此不适合扩增长序列。不同的等温扩增技术需要根据实际需求和场景条件来选择。等温扩增技术作为一种新兴技术具备许多优点,但仍需要不断改进,未来与微流体芯片、纳米金、CRISPR等技术联合应用,将会实现更加快捷、准确、简便的检测,从而为动物疫病检测提供更好的服务。

中国煤炭开采技术现状分析

随着中国经济和科技发展,煤炭开采机械化取得了重大进展。通过对中国煤炭开采技术的分析,指出了中国煤矿未来发展的趋势,以期促进相关工作的发展。