Nurr1通过抑制小胶质细胞NF-κB发挥抗炎作用

目的探索在细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠小胶质细胞(BV2细胞株)炎症反应中,核受体相关蛋白1(Nurr1)是否通过抑制NF-κB的表达及核转位发挥抗炎作用。方法培养小鼠BV2小胶质细胞株,将细胞分为Ctrl组、LPS组、C-DIM12(Nurrl特异性激动剂)组、siRNA干扰组、LPS+C-DIM12组。利用CCK-8检测LPS和C-DIM12的最适作用浓度,用Western blot观察NF-κB和Nurr1的表达变化,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液中炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平,用免疫荧光观察siRNA干扰或C-DIM12激活Nurr1表达活性后,NF-κB及p-IκB在BV2细胞中的表达水平。结果LPS刺激BV2细胞后,NF-κB表达提高,炎症因子IL-1、IL-6、TNF-α释放量增加(P<0.05)。C-DIM12激活Nurr1后,免疫荧光染色技术和Western blot实验结果都显示NF-κB的表达显著下降,而小干扰RNA(siNurr1)沉默Nurr1表达后,NF-κB表达增加。在LPS激活的小胶质细胞中,NF-κB二聚体分子的结合分子p-IκB的磷酸化蛋白水平相对于对照组显著升高,而C-DIM12激活Nurr1后,p-IκB水平显著下降。结论Nurr1可以通过抑制小胶质细胞NF-κB表达水平并阻止NF-κB核位移发挥抗炎作用。Nurr1可能是一个新的潜在的治疗中枢神经系统炎症相关疾病的靶点。

虚拟仿真技术在神经生物学教学方法的设计与评估

神经生物学作为研究神经系统结构和功能的学科,对于学生理解大脑和神经系统的运作机制至关重要。本文探讨了虚拟仿真技术在神经生物学教学方法的设计与评估,以提高学生的学习体验和知识掌握程度。首先,介绍虚拟仿真技术在教育领域的应用潜力。其次,探讨虚拟仿真技术在神经生物学教学方法的设计,包括虚拟实验和模拟演示以及虚拟现实案例和情境设计。然后,讨论虚拟仿真技术在神经生物学教学方法的评估框架,包括学生问卷调查、知识测试、实验技能评估和学习成绩分析。最后,探讨虚拟仿真技术在神经生物学教学方法面临的挑战和未来发展方向。

溶血素 E基因原核表达载体的构建与蛋白诱导表达

目的构建大肠杆菌(Escherichia Coli,E.coli)溶血素E(Hemolysin E)基因的重组质粒pCZN1-hlyE,诱导表达目的蛋白。方法通过NCBI数据库检索获取E.coli Hemolysin E基因序列(NC_000913.3),采用基于PAS(PCR-based Accurate Synthesis)的全基因合成法,设计全长拼接引物,合成目的基因,并成功构建重组质粒pCZN1-hlyE。将构建好的pCZN1-hlyE重组质粒转入大肠杆菌TOP10菌株中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导Hemolysin E基因的表达,生成Hemolysin E毒力蛋白。结果经SDS-PAGE凝胶电泳,Western blot分析鉴定目的蛋白Hemolysin E分子量为28.72 kDa,与Hemolysin E基因核酸序列经DNAMAN软件分析所得蛋白分子量一致。结论被诱导表达的Hemolysin E蛋白存在于菌体裂解液上清中,并纯化制备重组蛋白。

绿色给水排水系统设计与实践

以"贵安新区生态文明创新园"给水排水系统设计为例,详细地阐述了绿色给水排水系统的设计理念、项目创新及新技术应用、系统设计方案等,希望能为推动我国绿色给水排水系统设计提供一定的参考。

通沟污泥全周期处理处置技术体系研究

通沟污泥是排水管网疏浚养护过程中产生的高含水率固体废弃物,对其进行妥善处置成为城市水环境安全的重点难点之一。由于目前已开展的相关研究工作有限,因此研究构建通沟污泥全周期处理处置技术体系十分必要。通过梳理上海、北京等地通沟污泥处理处置现状,借鉴相关应用投产案例,分析通沟污泥处理处置方面存在的共性问题,从通沟污泥产量预测、处理处置工艺选择、设施规模及选址确定、“三废”治理4个方面构建通沟污泥全周期处理处置技术体系。并以福建省泉州市为例,对通沟污泥全周期处理处置技术体系进行应用分析,以期提供规划设计思路,实现通沟污泥的减量化、无害化和资源化。

历史文化街区保护规划中市政给水排水管道适应性规划策略

通过对国内相关规范进行解读,对经典更新改造案例进行踏勘,与专家学者、规范主编人员、规划建设及管理部门负责人等进行多方座谈,最后将理论成果和实施经验进行梳理、总结。提出历史文化街区内市政给水排水管道,可以通过采用区内自用原则,取消不必要的管道,多元化排除雨水,优化管道敷设形式,采用新材料、新设备,综合利用其他空间等方式节省建设空间。同时,结合工程实例,提出综合采用上述方法后,给水管道(d≤200 mm)与其他管线及建(构)筑物之间的最小水平净距可达到0.3 m,雨、污水管道(d≤1 000 mm)与其他管线及建(构)筑物之间的最小水平净距可达到0.2 m。希望该研究可以为今后国内历史文化街区保护规划的编制与实施提供借鉴与支撑。

狭小空间下市政设施更新改造对策探究

在向存量模式转型发展的今天,我们需要利用有限的土地和资源,满足并提升现代人们的生活品质。然而在一些老旧城区、受保护的历史街区,因街巷空间狭小,无法按照现有规范标准进行市政设施的布设。那么如何在有限的空间内补足市政设施"短板",改善人居生活环境,面临诸多问题和挑战。从狭小空间的含义和特点入手,深入分析了狭小空间下市政设施改造的问题,并通过专家访谈和对南、北方典型地区的考察调研,论述了我国在狭小空间下市政设施更新改造的对策,并提出了相关建议。

城市新区再生水工程规划技术要点分析

再生水作为一种典型的非常规水资源,其开发利用对于水资源短缺城市具有非常重要的意义。因此以淮北南部某新区再生水工程规划为例,探讨了城市新区再生水规划的设计要点及思路,重点研究了不同再生水替代比例的大小对再生水系统的影响和多因素评价法在再生水规划中的应用,并进行了经验总结与分享。

两种根癌农杆菌储铁蛋白功能的鉴定和体外自组装

【目的】验证根癌农杆菌(Agrobacterium fabrum,以前也叫Agrobacterium tumefaciens)两种储铁蛋白——饥饿细胞的DNA结合蛋白(DNA-binding protein from starved cells, Dps)和细菌铁蛋白(bacterioferritin, Bfr)的编码基因atu2477和atu2771的功能。确定Bfr编码基因的开放阅读框。研究末端融合、血红素和个别关键氨基酸突变对Bfr功能和体外自组装的影响。探讨两种储铁蛋白的可能应用潜力。【方法】通过质粒将编码储铁蛋白的基因重新引入根癌农杆菌储铁蛋白缺失突变体中,回补储铁蛋白,验证回补的储铁蛋白编码基因是否能表达出具有储铁能力的储铁蛋白。用非变性凝胶电泳分离细胞粗提液中的蛋白质,铁特异性染色的方法鉴定电泳分离的蛋白质中是否有储铁蛋白。将不同的肽或蛋白质融合到储铁蛋白的末端,通过异源过量表达和纯化储铁蛋白的重组蛋白,用非变性凝胶电泳分析这些重组蛋白在体外的自组装。用血红素重构处理和氨基酸定点突变的方法研究血红素和个别关键氨基酸对Bfr功能和体外自组装的影响。【结果】非变性凝胶电泳和铁特异性染色结果显示,在根癌农杆菌的野生菌株、其相关突变体以及对应的回补菌株中,均仅检测到Bfr的表达,未检测到Dps的存在。当分别回补能编码161个和169个氨基酸Bfr的基因后,发现野生型菌株中的Bfr与回补编码161个氨基酸Bfr的回补菌株一样大。多肽和蛋白质的末端融合对Bfr的功能和自组装有一定影响,但不会使Bfr完全失去功能和自组装能力。结果还表明,血红素和预测可络合血红素铁的Met60的替换也只影响Bfr的功能和自组装,并未使Bfr功能完全丧失。【结论】根癌农杆菌主要通过Bfr存储铁元素。bfr基因的开放阅读框(open reading frame, ORF)以少见的UUG为起始密码子,编码产生包含161个氨基酸的蛋白质,而非169个氨基酸。根癌农杆菌的dps基因在本文的测定条件下均处于不表达状态。根癌农杆菌的Bfr和Dps蛋白均比较稳定,能够承受末端的多肽或蛋白质融合,不会使蛋白质的结构完全破坏,因此,经适当改造后具有开发应用的潜力。

“双碳”背景下低碳污泥处理处置技术路线优化探索

通过对以厌氧消化(路线1)、好氧发酵(路线2)、干化焚烧(路线3)为核心的主流污泥处理处置技术路线及其优化提升方案的碳排放量进行核算,探究了污泥处理处置低碳发展路径。研究表明,路线1A“厌氧消化+脱水+土地利用”和路线1B“热水解+厌氧消化+脱水+土地利用”主要碳排放类型为加热热耗;路线2A“脱水+好氧发酵+土地利用”和路线2B“深度脱水+好氧发酵+土地利用”主要碳排放类型分别为CH_(4)逸散、药剂投加;路线3A“脱水+半干化+焚烧+建材利用”和路线3B“改性分离+脱水+半干化+焚烧+建材利用”主要碳排放类型为药剂、辅料消耗,针对主要碳排放类型制定优化对策可降低相应单元的碳排放量。此外,厌氧消化前置热水解单元、干化焚烧前置污泥改性分离单元后,均具备明显降低碳排放量的优势,减碳幅度分别约58%、63%;好氧发酵前置深度脱水单元的碳排放量受脱水药剂的影响较大,且减碳优势不明显。

闽南沿海城市污水厂污泥产率及产量研究

为科学预测污泥量,助力形成设施完备、运行安全的污泥无害化资源化处理体系,对闽南沿海某市29座城镇生活污水厂经验污泥产率影响因素及产率、产量发展趋势进行了系统研究。29座污水厂总设计处理规模123×10~4 m^(3)/d,主流工艺包括(改良)氧化沟、AO或AAO、CASS等。随着污水提质增效的推进,市域经验污泥产率由2020年的1.11 tDS/10~4m^(3)增长至2021年的1.25 tDS/10~4 m^(3),但仍略低于全国城市平均水平(1.62 tDS/10~4 m^(3))。受闽南区域特点影响,污泥产率与进水BOD5及气温的相关性不显著;中型规模污水厂(改良)氧化沟工艺污泥产率最高,且中型规模污水厂污泥产率整体大于小型和大型污水厂;平均污泥产率逐年小幅上涨,但考虑闽南地区特点,远期污泥产率仍可能低于北方城市。建议类似地区污泥设施规划设计重点考虑大中型污水厂需求,并为污水提质增效、初雨截流、出水提标改造等因素充分预留缓冲,弹性应对气温、降水等冲击,统一谋划,分期实施;统一明确污水厂出厂污泥要求,以保障污泥处理处置系统安全运行。

微生物燃料电池与好氧堆肥协同处理餐厨垃圾

实验主张将餐厨固体垃圾和餐厨废水分开处理,并研究微生物燃料电池(MFC)作为餐厨废水和堆肥渗滤液处理工艺的可行性,通过调节不同的有机负荷,分析其生物产电的潜力和处理效率。对于餐厨废水而言,3 000 mg/L是较为理想的处理浓度,输出电压最高,始终维持在0.5 V以上;高于此浓度时电压输出特性与底物浓度呈现反相关,输出电压略低于0.5 V。极化曲线,电化学阻抗分析等也都表明3 000 mg/L是较为理想的处理浓度。而且在各种浓度下经MFC处理后的餐厨废水去除率均在90%左右,出水COD均低于400 mg/L。至于堆肥渗滤液,虽然在产电性能、去除效果上较餐厨废水稍差一些,但整体上与餐厨废水呈现出相似的规律。以上结果表明,餐厨垃圾中的废水可以通过MFC有效的去除和实现能量的回收。

反例微视频教学法在“微生物学实验”课程中的实践研究

"微生物学实验"是生物类相关专业的一门必修课程,该课程的开展对提高学生实验技能和理解微生物学知识原理至关重要。因此,不断探索和改进实验课程教学方法、减少学生的错误实验操作、提高实验课堂教学效率是任课教师的基本任务。反例微视频教学法是将传统的案例教学法、反例教学法和当下流行的微课程相结合的一种教学方法。本文阐述了该教学法的原理、基本操作流程、课堂应用效果和存在的问题。该教学法的实施能较好地提高实验课堂效率,大幅减少学生错误实验操作的次数,值得在本科生物类实验课堂中进行推广。

蛋白激酶C相互作用蛋白1基因敲除诱导神经元氧化应激

目的 研究蛋白激酶C相互作用蛋白1(PICK1)敲除对神经元氧化应激反应的影响,从而明确PICK1在神经元氧化应激反应中的作用。方法 剪取小鼠尾巴1 cm,匀浆后提取DNA和蛋白质,利用PCR和Western blot鉴定野生型小鼠和PICK1敲除鼠的基因型。利用ELISA检测试剂盒,检测野生型和PICK1敲除小鼠脑组织中活性氧簇(ROS)和谷胱甘肽(GSH)的水平。硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)是氧化损伤标志因子,利用Western blot及免疫荧光染色方法,检测小鼠脑内Nitrotyrosine与神经元的标记物MAP2。结果 成功鉴定出野生型鼠、PICK1基因杂合子小鼠和纯合子小鼠。PICK1敲除小鼠脑内的氧化应激因子ROS (P<0.05)和Nitrotyrosine水平显著升高(P<0.05),而抗氧化应激因子GSH明显下降(P<0.05)。Nitrotyrosine与MAP2免疫荧光共染结果显示,PICK1敲除的小鼠中神经元细胞存在氧化损伤。结论 PICK1基因敲除导致了小鼠神经元的氧化应激反应,提示PICK1可能是抑制神经元氧化应激的一个靶点。

新形势下城市排水防涝规划编制与实施探讨

针对城市内涝灾害及水环境保护问题,从排水防涝系统规划角度出发,总结相关项目经验,研究统筹推进洪涝治理与水环境保护的排水防涝系统规划编制思路、体系及方法。提出了建立“总+分”的多层次城市排水防涝规划体系,将加快补齐污水系统补短板与城市内涝治理系统耦合,协同解决城市内涝和污水补短板问题。总结提出了“分析成因—解决难题—谋划布局—保障实施”的排水防涝系统规划的技术路线,可为各大城市推进城市内涝治理及污水提质增效行动提供设计经验。

既有城市住区海绵化改造模式探讨

引言当前我国已进入存量更新时代,提高人们生活品质和满足人民追求美好生活的夙愿是国家发展的必然方向。政府一直大力支持和推进老旧小区的更新改造,然而老旧小区往往问题繁杂。在财政投入有限的情况下,改造重点多以建筑本体改造、增加停车位等保障基本生活需求为主,对于居住区室外环境的改善往往心有余而力不足。