ZNF185基因的克隆及在小鼠睾丸中的定位

目的:克隆ZNF185基因并检测ZNF185在小鼠睾丸中的定位。方法:从小鼠睾丸中提取RNA,经RT-PCR,再对目的片段进行克隆和鉴定;提取小鼠肝、睾丸与卵巢组织的蛋白质,进行Western blot分析;制备小鼠睾丸冰冻切片,应用免疫荧光技术分析。结果:(1)ZNF185基因克隆完全正确。(2)Western blot显示,睾丸中的ZNF185含量最多。(3)免疫荧光显示,ZNF185定位于睾丸间质细胞和精子,在睾丸间质细胞表达较弱,而在圆形精子和成熟精子高表达。结论:成功克隆了ZNF185基因,并初步探明了ZNF185在小鼠睾丸中的定位。

山东稀有濒危植物的区系特征研究

山东稀有濒危植物有58科、79属、86种(包括国家级17种和省级69种),其中以温带性质的种类为主,但所属科、属的分布区类型说明与热带区系有密切关系。其中中国-日本成分41种,占48.24%;其次为中国特有成分19种,占22.35%;山东特有分布的种类较少。

GDNF家族及其受体

胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对多巴胺能神经元、运动神经元、感觉神经元等多种神经元均具有营养及损伤后修护作用。GDNF的神经营养作用主要是通过胶质细胞源性神经营养因子受体-α(glial cell line-derived neurotrophic fac- tor receptors-α,GFRα)亚基和受体酪氨酸激酶Ret亚基两类受体亚基介导。

应重视高校教师的教学反思

有调查表明，高校教师教学反思的观念比较淡薄，教学反思行为处于随机、零散的状态，缺乏计划性和持续性，相当一部分教师对自己的教学行为没有进行过积极的理性思考。这种现象应该引起高校教师和教育管理部门的重视。

银杏叶总黄酮对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响

目的银杏叶总黄酮具有诸多药用价值,文中通过其对体外培养的人肝癌细胞株HepG2的增殖与凋亡的影响,探讨银杏叶总黄酮的抗肿瘤活性及其作用机制。方法不同浓度的银杏叶总黄酮体外作用于人肝癌细胞株HepG2不同时间,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测银杏叶总黄酮对HepG2细胞增殖的影响,以脱氧核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法观察银杏叶总黄酮对HepG2细胞凋亡的影响。结果人肝癌HepG2细胞经银杏叶总黄酮处理一定时间后,增殖比率明显下降(P<0.01),且具有剂量依赖效应;细胞凋亡明显增加(P<0.01),也具有剂量依赖效应。结论银杏叶总黄酮对人肝癌HepG2细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。

CyclinB1、CDK1在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期蛋白CyclinB1和细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1表达及其临床病理学意义.方法:应用免疫组织化学SP法对52例食管鳞癌(组织学Ⅰ级8例,Ⅱ级20例,Ⅲ级24例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移32例;原位癌16例,侵袭性癌36例包括浸润至黏膜下层、肌层、全层)及其配对的癌旁正常组织进行CyclinB1、CDK1的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系.结果:食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的阳性表达高于癌旁正常食管黏膜组织,2组差异都有统计学意义(71.2%vs2.0%,65.4%vs3.9%,均P<0.05).食管鳞癌组织中CyclinB1、CDK1的表达都与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及淋巴结转移有关(均P<0.05).CyclinB1阳性表达强度与CDK1的阳性表达强度之间呈正相关(r=0.697,P<0.05).结论:CyclinB1、CDK1的高表达会促进食管鳞癌的发生与发展.而且食管鳞癌中CyclinB1与CDK1的表达密切相关,可作为食管鳞癌生物学行为预测的参考指标.

银杏叶总黄酮对人肝癌HepG2细胞增殖的影响及其分子机理的研究

目的:探讨银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2的增殖抑制作用及其对Bcl-2基因mRNA水平的影响。方法:采用MTT法检测银杏叶总黄酮对HepG2细胞增殖的影响,提取Bcl-2基因的mRNA,以RT-PCR方法研究银杏叶总黄酮对Bcl-2基因表达的影响。结果:银杏叶总黄酮使人HepG2细胞增殖率明显下降,且呈剂量依赖效应;Bc1-2基因mRNA水平随银杏叶总黄酮浓度升高而降低。结论:银杏叶总黄酮对人HepG2细胞增殖有抑制作用,并能下调癌基因Bcl-2的表达,从而起到抗肿瘤的治疗作用。

Rack1在大鼠子宫中的表达

目的：探讨有活性的激酶C受体（Rack1）与胚胎着床及蜕膜化的关系。方法：建立大鼠早期妊娠、假孕、延迟着床和人工诱导蜕膜化模型，收集各种模型的子宫材料，利用免疫组化方法检测Rack1在大鼠子宫中的表达。结果：Rack1在妊娠第6～9天的子宫蜕膜上呈强表达；假孕第6～9天和延迟着床的大鼠子宫腔上皮下基质中无明显的免疫信号，而延迟着床激活胚胎周围的腔上皮下基质中有强的免疫信号。蜕膜化子宫中整个蜕膜区呈强的免疫染色信号。结论：Rack1蛋白的表达与胚胎着床及蜕膜化过程密切相关。

形成性评价在医学留学生细胞生物学教学中的应用

目的:探讨形成性评价在医学留学生细胞生物学教学中的应用效果。方法:以潍坊医学院2014级留学生为研究对象,设形成性评价为改革组,传统的终结性评价为对照组,通过分析期末考试成绩及调查问卷问题,对比两组的教学效果。结果:改革组平均成绩较高。调查问卷结果发现,形成性评价能够调动学生的积极性、提高学生的学习效率、提高分析问题解决问题的能力。结论:形成性评价能够有效提高课程教学效果,更加适合留学生教学。

小鼠gdnf基因在真核细胞NIH-3T3中的表达

为了得到超量表达胶质细胞源神经营养因子(glial cell line-derived neuotrophic factor,GDNF)的NIH-3T3细胞株,用于制作精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)培养的饲养层,通过RT-PCR方法成功地从幼年小鼠睾丸中克隆了gdnf基因,构建了真核表达载体pcDNA3.1-gdnf,并用其转染NIH-3T3细胞.对筛选出的阳性细胞克隆进行的免疫荧光染色、RT-PCR和Western blotting的结果表明,获得了超量表达gdnf基因的NIH-3T3细胞株,这为精原干细胞的培养奠定了基础.

基于“对分教育”的应用型医药人才培养模式探索与实践

应用型医药人才是医药企业转型和升级的骨干力量。通过剖析我国医药人才培养中的"点""线""面""核""场"等问题,依据"对分教育"理念,从核心素养、知识建构和创新实践三个方面构建适应我国国情的应用型医药人才培养模式。该模式以"凝聚合力,内化外显,源在基础,贵在创新"为原则,推动医药人才与产业发展融合,实现高水平应用型医药人才培养的目标。

松科植物气孔器形态特征的扫描电镜观察

应用扫描电子显微镜,对山东松科(Pinaceae)3个属5种植物叶片气孔器亚显微形态结构进行了观察与研究.从形状上看,赤松气孔器呈近圆形;雪松呈椭圆形;白皮松,华山松和白扦呈长椭圆形.从排列方式上看,雪松和华山松呈单列型;赤松,白皮松和白扦呈双列型.从保卫细胞与副卫细胞之间的关系看,均为平列型.结果表明,松科植物叶片的气孔器差异显著,可为植物形态研究及植物分类提供重要依据.

银杏叶槲皮素对人肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨银杏叶黄酮单体成分槲皮素体外对人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。方法将银杏叶黄酮单体成分槲皮素作用于体外培养的人肝癌细胞HepC2,MTT法检测其对HepG2细胞增殖的影响,缺口末端核苷标记(TUNNEL)法检测其对HepG2细胞凋亡的影响。结果银杏叶黄酮单体成分槲皮素使体外培养的人肝癌细胞HepG2的增殖效率下降,使凋亡细胞数增加(P<0.01),两者均呈剂量依赖效应。结论银杏叶黄酮单体成分槲皮素具有与银杏叶总黄酮相似的作用,对体外培养的人HepG2细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。

细胞生物学教学改革实践的思考

医学院校基础学科的教学具备一定的特殊性,教学内容和相关学科存在部分交叉、重复,对学生兴趣的培养具备一定的挑战性,双语教学的实践也面临了不少问题有待解决。在教学改革的各实践阶段,针对性的解决问题并注意总结,才能切实提高细胞生物学教学的质量。

大鼠胚胎肝干细胞标记物的筛选

目的筛选大鼠胚胎肝脏组织特异性表达的mRNA,寻找肝干细胞的特异性标记物。方法取成年大鼠肝脏2个、2周胚龄大鼠胚胎肝脏2个作为标本。提取标本的RNA,反转录合成cDNA,再体外转录合成cRNA,同时进行标记。将cRNA纯化后进行杂交、洗涤、染色,对芯片进行扫描。将基因芯片数据进行处理与分析,筛选出目的基因。免疫组化方法检测各相关蛋白在胚胎肝脏组织中的表达。结果筛选出787个在大鼠胚胎肝脏组织中高表达的差异表达基因,涉及8个类别。免疫组化检测发现,高迁移率族蛋白A1(HMGA1)在2周胚龄多数胚肝胎细胞中表达阳性,阳性信号多分布于细胞质。结论大鼠胚胎肝脏组织发育相关的差异表达基因筛选可采用基因芯片,HMGA1是大鼠胚胎肝干细胞特异性标记物。

基于创新能力培养的研究生细胞生物学课程改革探索

在细胞生物学课程改革中探索研究生创新能力培养,从优化教学内容、强化实践能力、改革教学方法和完善考试评价等多方面进行探索与实践。

人乳腺组织中乳铁蛋白基因cDNA的克隆与序列分析

通过RT-PCR技术从人乳腺癌组织中扩增出长度为2259 bp的人乳铁蛋白cDNA,PCR产物经凝胶回收纯化后,克隆在pMD 18-T载体的T位点。测序结果和序列分析显示,与GenBank中收录的人、小鼠、奶牛和山羊的乳铁蛋白cDNA序列的同源性分别为99．73％,82．19％,81．79％和87．28％。其中与人乳铁蛋白cDNA 序列相比,发现有5个碱基因等位基因间的突变而发生变异,1个碱基发生了未知的突变,表明已成功的扩增、克隆了人乳铁蛋白基因cDNA序列,此基因序列的GenBank登录号为AY165046。

实验动物学实验教学改革初探

实验动物学是一门应用性很强的学科,实验教学的地位尤为重要。笔者就近年来带教的实践,从实验内容、师资队伍、教学方法、动物福利、教学评价等方面初步探讨实验动物学的实验教学改革,旨在提高教学质量。

过量酒精致睾丸损伤后的自然修复及其与生精周期的关系

目的 探讨大鼠睾丸在过量酒精损伤后的自然恢复及其与生精周期的关系。方法 用白酒灌胃制备睾丸毒性损伤模型。停止灌酒 1～ 2个生精周期后检测睾丸的组织学、精子质量及血清性激素的含量。结果 酒精使大鼠睾丸有明显的形态学改变 ,精子质量降低 (P <0 .0 1) ,性激素水平下降。经过 2个生精周期的恢复各项指标有了明显的改善 (P >0 .0 5 )。结论 酒精对睾丸的损伤是可逆性的 ,但恢复的时间比损伤时所用时间要长。

银杏叶总黄酮对人肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2增殖与凋亡的影响。方法将银杏叶总黄酮作用于体外培养的人肝癌细胞HepG2,MTT法检测其对HepG2细胞增殖的影响,缺口末端核苷标记(TUNNEL)法检测其对HepG2细胞凋亡的影响。结果银杏叶总黄酮对体外培养的人肝癌细胞HepG2的增殖效率下降,使凋亡细胞数增加(P<0.01),且呈剂量依赖效应。结论银杏叶总黄酮对体外培养的人HepG2细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。