异位表达LncRNA PVT1/EIF4A1促进胃癌细胞增殖迁移的作用研究

目的探索长链非编码RNA人浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)协同真核翻译起始因子4A1(human eukaryotic translation initiation factor4A1,EIF4A1)促进人胃癌细胞SGC-7901增殖与迁移能力的作用。方法使用Western Blot检测EIF4A1、real time-PCR检测PVT1在胃癌细胞(SGC-7901、NCI-N87、MGC-803、BGC-823)和正常胃黏膜细胞(GES-1)中的表达量。单独或共同过表达胃癌细胞SGC-7901中的PVT1和EIF4A1,EIF4A1的蛋白表达量使用免疫印迹法检测,PVT1的表达水平使用real time-PCR检测,采用划痕实验和Transwell实验检验细胞的迁移能力,采用MTT实验和平板克隆形成法检验细胞的增殖情况,采用免疫印迹法检测E-cadherin,N-cadherin,smad3和TGF-β蛋白表达量。结果以正常胃黏膜细胞作为对照,筛选有统计学差异的PVT1和EIF4A1的本底表达量低的胃癌细胞(P<0.05)。单独或共同过表达胃癌细胞中PVT1和EIF4A1后,共同过表达组平板克隆形成数为492±8.72,单独过表达PVT1组平板克隆形成数为251±1.53,单独过表达EIF4A1组平板克隆形成数为228±1.52,对照组平板克隆形成数为205±2.08。在MTT实验中,共同过表达组OD值高于单独过表达组和对照组。Transwell结果显示共同过表达组迁移细胞数为308±29.10,单独过表达PVT1组迁移细胞数为222±14.42,单独过表达EIF4A1组迁移细胞数为206±10.58,对照组迁移细胞数为169±18.04。划痕实验结果提示共同过表达组伤痕愈合速率高于单独过表达组和对照组。免疫印迹结果说明共同过表达组E-cadherin低于单独过表达组和对照组,共同过表达组N-cadherin、smad3和TGF-β高于单独过表达组和对照组。以上结果均具有统计学差异(P<0.05)。结论过表达PVT1和EIF4A1可以协同促进SGC-7901细胞的增殖能力,并通过改变EMT相关蛋白的表达促进胃癌细胞SGC-7901的迁移能力。

HPV16 E6-295T/G和E6-350T/G变异位点影响IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的研究

目的探讨HPV16(Human Papillomavirus Type 16)E6-295T/G和E6-350T/G变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。方法在宫颈癌细胞C33A(HPV阴性)中分别转染真核表达载体295G/350G-GV230、295T/350G-GV230和295T/350T-GV230作为实验组,以NC-GV230作为对照组。通过免疫组织化学法、Western blot方法检测HPV16 E6295T/G、350T/G不同变异位点对IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9蛋白质表达的影响。通过IBM SPSS Statistics 26软件对实验结果进行统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义,免疫组织化学法定量采用image J软件进行阳性细胞计数。结果Western blot结果显示,免疫分子干扰素κ(Interferon Kappa,IFNκ)的表达,HPV16 E6-295G/350G变异组较HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组降低(P<0.01,P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的免疫分子主要组织相容性复合体I类(Major Histocompatibility Complex Class I,MHC-I)的表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05)。HPV16 E6-295G/350G变异组的信号转导子和转录激活子1(Signal Transducer and Activator of Transcription 1,STAT1)表达显著低于HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G组(P<0.05,P<0.01)。变异组HPV16 E6-295G/350G与HPV16 E6-295T/350T原型组和HPV16 E6-295T/350G变异组相比,干扰素调节因子9(Interferon Regulatory Factor 9,IRF9)表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论HPV16病毒E6蛋白质可以降低IFNκ、MHC-Ⅰ、STAT1和IRF9的蛋白质表达水平,E6基因T295G/T350G变异降低这些分子的表达作用最强。

CDH18基因对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

目的 研究Ⅱ型钙粘蛋白18(Cadherin 18,CDH18)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌SiHa、HeLa和C33A细胞增殖和迁移能力的影响。方法 采用qRT-PCR、Western blot实验检测宫颈癌组织和细胞中CDH18的mRNA和蛋白质表达水平;分别构建过表达和敲低CDH18基因表达的质粒;在稳定转染质粒的宫颈癌细胞中,利用CCK-8、Transwell和划痕实验分析过表达及降低CDH18基因对SiHa、HeLa和C33A细胞增殖和迁移的影响。结果 高危型HPV阳性的宫颈组织和细胞中CDH18蛋白质和mRNA表达水平均显著低于正常宫颈组织和细胞(P<0.01),差异具有统计学意义;CCK-8、Transwell及划痕实验结果显示:过表达CDH18基因促进SiHa、HeLa和C33A细胞的增殖和迁移能力(P<0.01);敲低CDH18基因抑制了SiHa、HeLa和C33A细胞的增殖和迁移能力(P<0.05)。结论 CDH18基因在高危型HPV阳性宫颈癌组织和细胞中低表达,在高危型HPV阴性宫颈癌组织细胞中高表达;其过表达能够促进宫颈癌细胞的增殖和迁移。

LncRNA PVT1在胃癌中的研究进展

长链非编码RNA浆细胞瘤变异易位体1(Long Non-Coding Ribonucleic Acid Plasmacytoma Variant Translocation 1,LncRNA PVT1)是一种在多种肿瘤中异常表达的LncRNA,与肿瘤的发生、侵袭、患者预后等密切相关。近年来,越来越多的研究表明LncRNA PVT1在胃癌中发挥重要作用。本文将聚焦于LncRNA PVT1在胃癌发生发展及治疗过程中的最新研究进展,探讨并展望其在胃癌的发展及治疗中的价值与可能性。

中国画对陶瓷装饰的影响

笔者旨在深入分析中国画对陶瓷装饰的深远影响。通过梳理中国画与陶瓷装饰的历史脉络,结合具体的艺术作品,笔者探讨了中国画在陶瓷装饰中的艺术表现、文化内涵以及审美价值。研究发现,中国画不仅丰富了陶瓷装饰的艺术形式,还提升了其文化内涵,使陶瓷艺术成为中华文化的重要载体。

孔径与压铆力对单铆搭接接头残余应力与剪切性能的影响

铆接是飞机结构装配的重要连接方式,飞机结构失效大多发生在连接孔处,因此对铆接接头质量进行综合评估非常重要。以单铆搭接接头为研究对象,通过有限元仿真分析与拉伸剪切实验研究了不同压铆力与孔径铆接工艺参数组合下的铆接接头孔周残余应力分布和剪切性能。有限元分析结果表明,增大压铆力可以显著扩大孔周的纵向残余压应力分布区域,并使最大纵向残余拉应力位置远离孔边缘;而孔径仅对纵向残余压应力分布区域的影响较为显著。拉伸剪切实验表明,单铆搭接结构的失效形式均为铆钉沿剪切面的瞬时断裂;在孔径为4.20 mm时采用压铆力为21 kN成型的铆接接头的剪切性能最佳,其平均峰值载荷为4.09 kN,与孔径为4.04 mm和压铆力为15 kN参数组合下成型的铆接接头相比,平均峰值载荷提升了约9.36%。增大孔径能够提高单铆搭接接头的剪切性能,但会减小孔周的纵向残余压应力分布区域,给铆接接头的疲劳寿命带来不利影响;适当增大压铆力不仅能扩大残余压应力分布区域,还能提高接头的剪切性能。

HPV16 E6-295T/G、E7-647A/G多态性位点在子宫颈鳞状细胞癌中的分布及对IRF9的影响

目的分析HPV16 E6-295T/G、E7-647A/G多态性位点在子宫颈鳞状细胞癌、CIN1中的分布及其在维吾尔族与汉族之间分布的特点,探讨其对IRF9表达的影响。方法运用TCGA数据库及GEPIA数据库分析子宫颈癌组织中IRF9的表达及其与子宫颈癌肿瘤分级的关系;收集67例维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌标本、21例维吾尔族CIN1标本,68例汉族子宫颈鳞状细胞癌标本和28例汉族CIN1标本,从收集的标本中提取DNA,PCR扩增E6和E7基因,PCR产物纯化后测序。将HPV16感染阳性标本进行免疫组化检测。结果维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌标本中E6-295T/G、E7-647A/G变异分别为31例(46.27%)和7例(10.45%),CIN1标本中变异均为7例(33.33%)。汉族子宫颈鳞状细胞癌标本中E6-295T/G、E7-647A/G变异分别为12例(17.65%)和37例(54.41%),CIN1变异分别为8例(28.57%)和13例(46.43%)。维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌中E6-295T/G的变异率高于汉族,汉族子宫颈鳞状细胞癌中E7-647A/G的变异率高于维吾尔族,差异有统计学意义(P<0.05)。CIN1标本中两民族间E6-295T/G和E7-647A/G的变异,差异无显著性(P>0.05)。免疫组化结果显示,IRF9在子宫颈鳞状细胞癌中的表达高于CIN1(P<0.05),子宫颈鳞状细胞癌标本中E6-295G/E7-647A变异组IRF9的表达高于E6-295T/E7-647G变异组和E6-295T/E7-647A未变异组(P<0.05)。E6-295T/E7-647G变异组与E6-295T/E7-647A未变异组的IRF9蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。结论维吾尔族子宫颈鳞状细胞癌中HPV16 E6-295T/G变异高于汉族,汉族E7-647A/G变异高于维吾尔族。HPV16 E6-295T/G变异的子宫颈鳞状细胞癌组织中IRF9蛋白表达水平增高,可能在子宫颈癌的发生中起作用。

基于生物信息学分析EDIL3基因在宫颈癌中的表达及临床意义

目的探讨表皮生长因子样重复序列和盘状蛋白I样结构域3(EDIL3基因)在宫颈癌中表达及其对宫颈癌细胞SiHa、HeLa迁移的作用。方法运用GEPIA、UALCAN、OncoLnc数据库分析EDIL3基因mRNA在宫颈癌组织中的表达水平、基因启动子甲基化状态和预后的意义;采用免疫组织化学染色、Western blot、qRT-PCR分别检测宫颈癌组织和细胞中EDIL3蛋白及EDIL3基因mRNA表达水平;构建EDIL3-pcDNA3.1过表达质粒,转染分为实验组(转染过表达EDIL3-pcDNA3.1质粒)和对照组NC(转染空质粒),transwell实验检测宫颈癌细胞SiHa、HeLa的迁移。结果生物信息学数据库分析显示EDIL3基因mRNA在宫颈癌组织中低表达并且存在启动子高甲基化(P<0.05),在宫颈癌不同分期中EDIL3基因的表达无差异(P>0.05),EDIL3高表达与宫颈癌患者不良预后相关(P<0.05);免疫组织化学染色、Western blot、qRT-PCR与数据库分析结果一致,在宫颈癌组织和细胞中EDIL3基因均低表达(P<0.05),且其表达水平与HPV感染无明显相关性(P>0.05);Transwell实验显示过表达EDIL3后增强宫颈癌细胞SiHa、HeLa的迁移能力(P<0.05)。结论EDIL3基因在宫颈癌组织和细胞中低表达并不受HPV感染的影响,而EDIL3高表达影响患者预后且促进宫颈癌细胞SiHa、HeLa的迁移能力。

新疆维吾尔自治区妇女宫颈感染人乳头瘤病毒16型E4和L2的遗传变异分析

目的探讨人乳头瘤病毒16(HPV16)E4、L2基因变异及氨基酸变化,分析HPV16的进化特征。方法从医院收集40例HPV16感染阳性的宫颈脱落细胞样本和40例宫颈组织细胞样本,提取样本的病毒DNA,对40例宫颈脱落细胞的DNA进行HPV16 E4和L2 Sanger测序及对40例宫颈组织细胞DNA高通量测序,构建HPV16 E4和L2基因系统进化树,分析HPV16 E4和L2基因的变异特征。结果有72个HPV16 E4变异样本,10个核苷酸变异位点(4种错义变异和7种同义变异),74个HPV16 L2变异样本,40个核苷酸变异位点(23种错义变异和18种同义变异)。宫颈癌(CC)中T4177C、A4288C、A4654C变异频率明显高于非宫颈癌,差异有统计学意义(P<0.05)。结论①新疆维吾尔自治区主要流行病毒株为欧洲株,少数为亚洲株。②HPV16 L2基因中T4177C、A4288C、A4654C在宫颈癌中的变异频率高于非宫颈癌,且G4181A与亚洲株相关。

人类抗砷相关基因hARRG cDNA抗砷功能的研究

目的探讨人类抗砷相关基因hARRGcDNA对砷化物的抵抗作用。方法将人类抗砷相关基因hARRGcDNA基因开放阅读框克隆于真核表达载体pcDNA4/HisC中。通过磷酸钙共沉淀方法将带hARRGcDNA基因开放阅读框的表达质粒与空pcDNA4/HisC质粒分别转染到人正常肝L鄄02细胞中,细胞分别用2、4、6、8、10μmol/LNaAsO2染毒,根据染砷细胞存活数确定hARRGcDNA的抗砷性。结果生物信息学分析hARRG蛋白为膜外蛋白,转染含hARRGcDNA基因开放阅读框的pcDNA4/HisC质粒在砷环境中细胞存活数目多于未带hARRG基因开放阅读框的空质粒。结论hARRGcDNA基因具有一定的抗砷作用。

砷对细胞和生物作用的研究进展

砷化物对于生物是有毒物质,可以导致细胞的染色体异常和基因突变。砷化物还可以改变某些基因的功能,诱导癌症的发生。生物接触砷化物后,细胞内一些基因表达发生了改变。研究表明原核生物及真核生物对砷化物的作用都产生了分子水平的应答。通过研究砷化物与基因相互作用的关系,对于揭示细胞和生物同砷化物的分子作用机制,阐明各种细胞和生物的抗砷分子机制有重要意义。另外,目前发现三氧化二砷能通过不同细胞信号传导途径诱导细胞凋亡。

砷化物对人类金属硫蛋白-3cDNA基因表达的影响

目的探讨砷化物对人类正常肝细胞金属硫蛋白MetallothioneinMT-3cDNA基因表达的影响。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞MT-3基因的表达。结果成功克隆MT-3cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人16号染色体16q13区段,跨膜信息分析发现MT-3基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02细胞在染砷早期MT-3基因表达增高。结论该研究发现人类MT-3基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。

一条人类砷相关新cDNA基因的克隆及功能预测

目的探讨砷化物与基因的相互作用,克隆砷相关基因,利用生物信息学分析克隆基因。方法利用SMART方法构建cDNA文库,杂交筛选并克隆基因,生物信息学对克隆基因进行结构和功能的分析。6μmol/LNaAsO2处理人正常肝L鄄02细胞2h,抽提RNA做基因芯片杂交。结果成功克隆一条新cDNA基因,生物信息学分析发现7到456有一个完整的ORF,在编码起始区有典型的Kozak序列,编码149个氨基酸的蛋白质。核酸同源性比对发现与人类1p36.2鄄36.3染色体DNA序列同源性达98%,编码蛋白质同Alu亚家族SB序列同源性达85%。染砷细胞基因芯片杂交发现克隆基因表达增高。结论克隆了人类砷相关基因,该基因编码蛋白质与Alu亚家族SB序列同源性高。

留学生《Biochemistry》网络试题库建设的探索与实践

目的:探索留学生《Biochemistry》网络试题库建设的现实意义。方法:以留学生《Biochemistry》教学大纲为指导原则,邀请有多年留学生教学经验的生物化学教研室教师一同建立题库建设小组,编写试题,通过集体备课审核和校对题库内容,并建立网络试题库,并以二维码形式发放试题,应用于课堂随堂测试、课下练习、章节测试和期末考试,并在留学生中发放《关于Biochemistry留学生试题库建设的问卷调查》,最后分析网络试题库的使用情况及考试结果。结果:共建设了11个章节,2122道题的A1、A2型题库。将题目根据内容分为容易、一般和较难3个等级,各等级试题比例分别为44%、37%和19%;问卷结果提示试题库的建设对留学生学习《Biochemistry》这门课程有所帮助;对比分析2020级和2019级《Biochemistry》期末考试成绩,使用网络试题库后2020级各成绩等级学生人数均优于2019级。结论:留学生《Biochemistry》网络试题库的建设有利于提高留学生的考试成绩,为提高留学生教学质量,提高执业医师资格考试通过率奠定了基础。

人类金属硫蛋白-1F cDNA基因与砷化物相互作用的研究

目的探讨砷化物作用于人类正常肝细胞后金属硫蛋白-1F cDNA基因表达的变化。方法利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞金属硫蛋白-1F基因的表达。结果成功克隆金属硫蛋白-1F cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人染色体16q13区段, 跨膜信息分析发现金属硫蛋白-1F基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02 细胞在染砷早期金属硫蛋白-1F基因表达增高。结论发现人类金属硫蛋白-1F基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。

维吾尔族子宫颈鳞癌患者血浆中MGMT基因启动子甲基化分析

新疆是全国各省区子宫颈癌死亡率居前六位且唯一处于西北边疆的地区,维吾尔族妇女患病率为459～590/10万,病死率约16/10万,显著高于汉族及其他民族。O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（O6-methylguanine-DNA methyl-transferase，MGMT），

基因表达系列分析(SAGE)技术在肿瘤研究中的应用

基因表达系列分析 (serialanalysisofgeneexpression ,SAGE)是一项高效、快捷、低成本的研究生物基因表达水平的方法 ,广泛用于各种肿瘤的分析研究。SAGE技术对于全面分析肿瘤组织基因表达谱、寻找肿瘤特异性表达新基因、发现肿瘤组织特异标志物和揭示肿瘤发病的分子机制发挥重要的作用。随着“肿瘤基因组解剖工程”(CGAP)的进行 ,CGAPSAGE可以通过网站分析和展示SAGE数据 ,并自动的将基因名称和SAGE转录物水平联系起来。因此 ,这为SAGE技术深入和广泛研究肿瘤提供了方便。

综合治疗63例退行性腰椎椎管狭窄症临床观察

目的:退行性腰椎椎管狭窄症采用综合治疗方法的临床观察。方法:对63例退行性腰椎椎管狭窄症门诊病例采用中药药物离子透入、电针及穴位注射、中药辨证内服综合方法治疗。结果:全部病例均随访1年以上,显效26例,占41.2%。有效29例,占47.1%。无效8例(有3例仅治疗1个疗程)占12.7%,总有效率为88.3%。结论:退行性腰椎椎管狭窄症应用综合疗法治疗,疗效满意。

DNA甲基化在基因表达调控中的作用

DNA甲基化是基因表达的重要调控方式 ,甲基化与癌症的发生有关 ,现已发现抑癌基因启动子高度甲基化后 ,可使这些基因表达受抑 ,同癌症的发生关系密切。随着DNA甲基化抑制剂的使用 。

子宫颈癌端粒酶活性分析

目的 探讨新疆维吾尔族子宫颈癌端粒酶的活性。方法 采用 TRAP- PCR- EL ISA法和 TRAP- PCR-电泳法 ,对新疆维吾尔族子宫颈癌组织和正常组织进行了检测。结果 子宫颈癌组织中端粒酶活性的阳性检出率为 88.2 % ,而正常子宫颈组织中为 9.5 % ,癌组织较正常组织端粒酶活性明显增高。结论 子宫颈癌各病理指标临床分期均可检测出端粒酶活性 ,此现象反映了癌发展过程中的早期变化。同其他民族的子宫颈癌研究结果相同。端粒酶活性在维吾尔族子宫颈癌中也表现增高 ,因此 ,也可作为该民族子宫颈癌的一个标志物。另外 ,用 TRAP- PCR-EL ISA较 TRAP- PCR电泳法敏感性强。