脊髓坏死面积的测量方法介绍

将Photoshop7.0图像处理软件应用于脊髓损伤后坏死面积的测量,并与图像分析软件Quantimet570的传统测量方法进行比较。显微镜采集成年大鼠损伤脊髓的HE染色组织切片的数字化图像,运用Photoshop软件选取坏死区域并测其面积。另用Quantimet570软件测量同一切片同视野经Camera Lucida描绘的坏死区线图的面积,两种测量方法所得坏死区面积无显著性差异。因此,同Quantimet570软件相比,Photoshop7.0图像处理软件测量脊髓损伤后坏死区面积的功效相当,并具有功能强大、简便、快捷、直接及无需额外辅助设备的特点。

西安地区儿童肺炎支原体感染的流行病学分析

目的 探讨西安地区儿童呼吸道肺炎支原体（MP）感染的流行病学特征.方法 应用MP快速培养检测法对西安地区2007年5 598例急性呼吸道感染患儿的咽拭子标本进行MP培养检测.结果 1047例MP检出阳性,阳性检出率为18.70%.各年龄组患儿MP阳性检出率基本相同,不同季节MP阳性检出率不同.结论 MP为西安地区儿童呼吸道感染的主要病原体之一,各年龄组儿童普遍易感,第四季度MP感染率较高.

EGCG对过氧化氢所致神经元过氧化损伤的保护作用

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酚(EGCG)对过氧化氢(H2O2)所致神经元过氧化损伤的保护作用。方法分离胚胎18d大鼠大脑皮质神经元,原代培养2d后分为4组:①正常细胞对照组;②药物对照组(正常细胞内加EGCG);③氧化损伤组(正常细胞内加H2O2);④损伤后药物治疗组(氧化损伤30min后加入EGCG)。各组细胞再培养36h后,进行神经元形态观察、细胞活性MTT分析及细胞中丙二醛(MDA)含量的检测。结果氧化损伤组神经元多崩解成碎片,突起不完整,细胞活性显著降低,MDA含量显著升高。而在损伤后药物治疗组,神经元胞体立体感较强,多数突起完整。细胞活性显著增高,而MDA含量则显著下降。结论EGCG可抑制羟基自由基的产生。

儿童特发性血小板减少性紫癜病因学的初步研究

应用 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 技术对３２ 例急性特发性血小板减少性紫癜（ Ｉ Ｔ Ｐ） 患儿的外周血进行了人细小病毒 Ｂ１９（ Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９） 、 Ｅ Ｂ 病毒（ Ｅ Ｂ Ｖ） 、巨细胞病毒（ Ｃ Ｍ Ｖ） 及乙型肝炎病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 系列检测。结果：病例组 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阳性８ 例（２５ ．０ ％ ） ，与正常对照组比较有显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。 Ｅ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 阳性２ 例， Ｃ Ｍ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 阳性３ 例， Ｈ Ｂｓ Ａｇ 和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 同时阳性２ 例，４种病毒的总阳性率为４６ ．９ ％ （１５／３２ 例） 。提示：近半数儿童 Ｉ Ｔ Ｐ 病例的发生可能与上述病毒感染有关，而 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ 较其他病毒与 Ｉ Ｔ Ｐ 的关系更为密切。

运用图像处理软件将同视野两种单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法研究

探讨以计算机图像处理技术将普通荧光显微镜采集的同视野单标记免疫荧光图像合成为双标记图像的方法。应用AdobePhotoshop7.0和ImageJ两个图像处理软件,将普通荧光显微镜采集的同视野单标记荧光图像叠加处理成双标记荧光图像,并同激光扫描共聚焦显微镜获得的同一双标记免疫荧光图像进行比较。普通荧光显微镜采集的单标记荧光图像在分辨率及清晰度上逊于激光扫描共聚焦显微镜采集的单标记图像,但显示的脊髓室管膜细胞形态更为完整,细胞突起较长且更连续。因此,在没有激光扫描共聚焦显微镜时,可用AdobePhotoshop7.0或ImageJ图像处理软件将普通荧光显微镜采集的同视野两种单标记免疫荧光图像合成为保持原有特点、简便而清晰的双标记荧光图像。

再生障碍性贫血患者血清IL-8和IFN-α水平的检测

目的 探讨再生障碍性贫血 (AA)的细胞免疫状态及白细胞介素 8(IL - 8)和干扰素α(IFN α)在AA免疫发病机制中的作用。方法 应用夹心酶联免疫吸附试验检测 5 0例AA患者及 30名正常人血清中IL - 8和IFN α水平。结果 AA、急性AA(AAA)及慢性AA(CAA)患者血清中IL - 8和IFN α水平均明显高于正常对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;AAA组二者水平又明显高于CAA组 (P <0 .0 1)。对AA组IL - 8和IFN α水平作直线相关分析显示 ,二者呈显著正相关 (r =0 .70 3,P <0 0 1)。结论 AA患者存在细胞免疫功能紊乱 ,IL - 8和IFN α的过量分泌可能在AA ,特别是AAA的发病机制中起一定的作用。

脉搏血氧饱和度仪对肺炎患儿呼吸功能的监测

脉搏血氧饱和度仪对肺炎患儿呼吸功能的监测第四军医大学西京医院焦西英，钱新宏，李如英，杨ｈ，汪萍无创性脉搏血氧饱和度仪（简称脉搏血氧仪，ＰｕｌｓｅＯｘｉｍｅｔｅｒ）是８０年代呼吸功能监测的重要进展之一［１］。它能无创、准确、连续监测脉搏及血氧饱和度（Ｓ...

Minocycline对Lactacystin大鼠模型黑质胶质活化和多巴胺神经元生存的干预作用

目的:观察米诺环素(Minocycline,Mino)对Lactacystin(Lac)模型黑质内胶质细胞反应和多巴胺神经元的干预作用。方法:成年SD大鼠30只随机分为对照、Lac1 W、Lac3 W、Lac5 W、Lac+Mino5 W组,进行Lac动物模型制备和Mino给药处理,通过免疫组织化学和Western blot方法,观察iba1(小胶质细胞标志物)、GFAP(星形胶质细胞标志物)、TH(多巴胺能神经元标志物)的表达水平或阳性细胞数量变化,分析评价黑质内胶质细胞反应和多巴胺神经元生存状态。结果:Lac处理模型黑质内胶质细胞呈现动态活化反应。与生理盐水对照组相比,Lac处理均诱导iba1和GFAP表达水平升高,iba1在Lac3 W组显著升高、并持续高水平至Lac5 W(P<0.05)。GFAP表达在Lac1 W已显著升高、维持至Lac3 W和Lac5 W(P<0.05)。伴随胶质细胞的显著活化反应,黑质内TH阳性神经元数量急剧减少(P<0.01)。与Lac5 W组相比,Lac+Mino5 W组呈现对iba1和GFAP阳性胶质细胞的抑制效应、并提高黑质内TH阳性细胞数量,具有统计学意义(P<0.05)。结论:小胶质细胞抑制剂米诺环素给药处理可能通过干扰胶质细胞的异常活化反应、发挥对Lac损伤模型黒质多巴胺能神经元的一定保护作用。

小儿重症棉酚中毒的抢救与护理

通过对临床较少见的18例重症棉酚中毒患儿的抢救及护理,总结了高浓度较长时间静脉补钾的具体治疗方案及护理要点。并针对该病患儿多有神志和对称性软瘫等改变,提出了护理中应采取的预防合并症、恢复肢体功能的有关原则。心理护理方面,针对患儿对输液和服药产生恐惧心理和反抗情绪,以及家长的悔恨和对后遗症的担忧,均简述了处理的方法。

大鼠脊髓切断术后神经纤维残留量与运动功能恢复的关系

目的 观察成年大鼠下胸段脊髓切断术后是否出现神经纤维残留 ,以及神经纤维残留量与后肢运动功能恢复的关系。 方法 取 12只成年大鼠 ,以尖刀片沿椎管骨壁横切下胸段脊髓。术后定期观察截瘫后肢运动功能恢复情况 ,8周处死动物 ,灌注后取损伤部位及其上下节段脊髓 ,矢状冰冻切片 ,抗神经丝抗体免疫组织化学染色 ,光镜下观察有无残留神经纤维 ,计算机技术重建脊髓横断面 ,确定残留纤维的部位及其所占脊髓横断面的比例 ,并分析残留纤维数量与后肢运动功能恢复程度的相关性。 结果 42 %动物出现程度不等的后肢运动功能恢复 ,其脊髓横切处腹侧或腹外侧有数量不等的神经丝免疫反应残留纤维 ,并与后肢运动功能的恢复呈正相关关系。 结论 以尖刀片横切大鼠脊髓的常用方法 ,易造成脊髓神经纤维的残留 ,少量残留纤维即可引起后肢运动功能相当程度的恢复。因此 ,在评价脊髓损伤后的功能恢复时 ,必须首先确定损伤是否完全。

Nogo-A在成年大鼠脑内神经元的分布

目的研究Nogo_A阳性神经元在正常成年大鼠脑内的分布。方法免疫组织化学方法(ABC法)。结果Nogo_A在正常大鼠脑内的神经元和纤维有广泛的表达,出现在许多核团,主要在1.前脑的大脑皮质、嗅觉系统、海马、隔区、基底神经节、丘脑、下丘脑和视前区等部位;2.脑干的视听觉、体躯感觉、内脏觉核团、运动核团以及网状结构等;3.小脑Purkinje细胞和深核。阳性反应物主要见于神经元的胞浆和突起内,在脑室系统的嗅球室管膜、侧脑室和第三脑室部分室管膜细胞及其突起内也有表达。结论Nogo-A在脑内神经元的广泛存在提示其在正常状态下的脑功能中可能起重要作用。

巢蛋白在成年C57小鼠和SD大鼠中枢神经系统中的分布及比较

目的 观察巢蛋白 (nestin)在成年C5 7小鼠和SD大鼠中枢神经系统中的分布 ,探讨并比较神经干细胞在两种啮齿类动物中分布的异同。 方法 采用免疫组织化学ABC法和间接免疫荧光法 ,显示含神经干细胞特征性的标志物巢蛋白的阳性结构在上述两种啮齿类动物中枢神经系统中的分布。 结果 在成年C5 7小鼠中枢神经系统中 ,巢蛋白在整个脑室系统周围均有表达 ,免疫阳性结构位于室管膜细胞胞体及其突起 ,并呈现由吻端向尾端渐次减少的趋势。在成年SD大鼠的脑室系统中 ,巢蛋白主要分布在侧脑室外侧壁及其周围脑区。此外 ,在两者的齿状回、穹窿下器、最后区等脑结构中也有巢蛋白的表达。成年C5 7小鼠中枢神经系统中巢蛋白的表达 ,无论在免疫阳性结构的数量上还是在染色强度上都明显多于和强于成年SD大鼠。 结论 巢蛋白在成年C5 7小鼠中枢神经系统中的广泛脑区均有表达 ,而在成年SD大鼠中仅见于有限的脑区 ,提示成年C5 7小鼠中枢神经系统可能具有较强的神经可塑性和损伤修复能力。

纤维蛋白胶包裹嗅神经鞘细胞促进脊髓轴突再生的实验研究

目的 观察纤维蛋白胶 (FG)包裹嗅神经鞘细胞 (OECs)植于成年大鼠脊髓全横断断端间隙内对损伤轴突再生的促进作用。 方法 成年雄性SD大鼠 16只 ,行脊髓T11节段全横断术。FG OECs组于间隙内移植FG包裹的OECs ,FG对照组移植等量的FG ,OECs对照组移植等量DF12 OECs悬液 ,单纯全切对照组未做任何移植 ,每组动物 4只。术后 2周处死动物 ,脊髓损伤区冰冻水平切片 ,荧光显微镜下观察OECs的存活及迁移 ,并行抗神经丝 (NF)和生长相关蛋白 4 3(GAP 4 3)抗体免疫组织化学染色。 结果 OECs及单纯全切对照组脊髓两断端连接较差 ,而FG对照组及FG OECs组两断端连接良好。FG、OECs及单纯全切对照组损伤区可见少量NF及GAP 4 3免疫反应纤维 ;FG OECs组间隙内OECs大量存活 ,并迁移至两侧脊髓实质内 ,大量NF及GAP 4 3免疫反应纤维通过间隙。 结论 FG包裹的OECs可在成年大鼠脊髓全横断断端间隙内存活并迁移至脊髓实质内 。

2006年西安地区儿童肺炎支原体感染的流行病学分析

目的探讨2006年西安地区儿童呼吸道肺炎支原体（MP）感染的流行病学状况。方法应用MP快速培养法对西安地区2006年1月～12月5250例急性呼吸道感染患儿的咽拭子标本进行MP培养检测。结果5250例急性呼吸道感染患儿的咽拭子标本中MP培养阳性1289例，总阳性率为24．55％。其中〈1岁、1～3岁、3～5岁、〉5岁各不同年龄纽患儿中MP阳性检出率分则是18．4％，29．48％，27．91％和19．25％；不同季度MP感染的检出率分别是：1～3月14．12％，4～6月23．84％，7～9月35．48％，10-12月24．0％，其中第三季度（7～9月）MP感染的检出率明显高于其它季度（P〈0．01）。结论MP为西安地区儿童呼吸道感染的主要病原体，各年龄儿童人群普遍易感；2006年第三季度MP感染检出率较高，可能有小流行。

成年大鼠4种脊髓全横断方法的比较

目的 比较成年大鼠 4种脊髓全横断方法对后肢运动功能及脊髓组织学的影响 .方法 32只成年 SD大鼠分为A,B,C和 D 4组 ,每组 8只 ,分别以 4种不同方法全横切 T9脊髓 .A组以尖刀片自左向右横行一次性切断脊髓 ;B组将尖刀片自脊髓背部中线处垂直插入并分别向两侧缓慢细心切断脊髓 ;C组将一丝线穿过脊髓腹侧硬膜外腔 ,以长刃显微剪一次性完全横断脊髓 ,并将丝线由断端间隙中拉出 ;D组以尖刀片自脊髓背侧至腹侧分层快速划断脊髓 ,再抬起脊髓两断端以验证横断的完全性 .术后 1h肉眼观察脊髓形态变化 ,8wk时评估截瘫后肢自发性运动功能恢复后 ,处死动物 ,取脊髓损伤节段 ,行连续矢状冰冻切片 ,小鼠抗神经丝抗体免疫组化染色 ,光镜下观察有无神经纤维的残留或再生 ,以及空洞及瘢痕的形成 .结果 A,B两组术后脊髓肿胀、外翻 ,8wk时分别有 5 0 % ,38%的动物出现程度不等的功能恢复 ,镜下可见成束残留纤维和大量空洞 .C,D两组术后脊髓外观良好 ,8wk时无功能恢复和残留纤维 ,但有少量神经丝免疫反应再生纤维 .与 D组相比 ,C组断端间隙较大且空洞较多 .结论 经作者创新的 D组方法 ,横断完全、损伤较小 ,为简便易行。

IL-1的Ⅰ型受体在大鼠颈动脉体中的超微定位

目的 研究IL 1的Ⅰ型受体 (IL 1RⅠ )在大鼠颈动脉体内的表达和亚细胞定位。 方法 灌流固定的正常大鼠颈动脉体组织 ,用冰冻置换法包埋 ,超薄切片 ,胶体金免疫组织化学染色 ,电镜下观察。 结果 IL 1RⅠ样免疫反应阳性产物主要存在于主细胞 ,胶体金颗粒分布在胞膜、胞浆和胞浆中的细胞器及细胞核。支持细胞和毛细血管内皮细胞的胞浆中也可见少量免疫胶体金颗粒。 结论 IL 1RⅠ在大鼠颈动脉体特别是主细胞中有较强表达 ,此结果为进一步研究颈动脉体作为细胞因子化学感受器的可能性提供形态学基础。

人Nanog基因的克隆及其在COS-7L细胞中的表达

目的 :克隆人Nanog基因 ,构建其真核表达载体 ,并观察其在哺乳动物细胞COS 7L中的表达。方法 :利用HE2 93细胞的人基因组DNA为模板 ,以LA PCR技术 ,扩增Nango的基因 ,定向克隆到带Flag标签的pCMV载体中 ,测序后 ,挑选序列正确的真核表达质粒pFlag Nanog转染COS 7L细胞。用抗Flag标签的抗体 ,进行Westernblot和间接免疫荧光染色法检测Nango蛋白的表达。结果 :从人基因组DNA中克隆到序列正确的Nanog全长编码序列。所构建的Nanog质粒在COS 7L细胞中获得高效表达。结论 :人Nanog基因的克隆、真核表达载体的构建及在COS 7L中的表达均获得成功 ,为进一步研究其功能 ,尤其是探讨其在神经干细胞中的作用奠定了基础。

依托咪酯对成年大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞的保护作用

目的:观察依托咪酯(ET)对成年大鼠视神经切断后视网膜神经节细胞(RGC)存活的作用。方法:成年雌性SD大鼠42只,眶内距视神经根部1mm处切断左侧视神经,残端留置浸有荧光金(50g/L)的明胶海绵逆行标记RGC。术后大鼠随机分为ET(4mg/kg,ip,1次/d)治疗组、1,2-丙二醇(PG)溶剂对照组、生理盐水对照组和正常对照组。再根据术后不同存活时间将前3组动物分为7d和14d两个亚组,正常对照组动物则存活2d。于相应存活时间点处死动物,取出各组大鼠左侧视网膜平铺后计数存活RGC并得出RGC的平均密度。结果:术后7dET治疗组存活RGC平均密度为1307±55/mm2,显著高于PG对照组(1128±75/mm2)和生理盐水对照组(1068±75/mm2,P<0.001)。然而,未能在术后14d观察到ET的这种保护作用,因为ET治疗组存活RGC平均密度(210±36/mm2)与PG对照组(215±20/mm2)和生理盐水对照(208±19/mm2)间无显著差异(P>0.05)。结论:ET在视神经切断后一定时期内对RGC具有神经保护作用。

成年大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障通透性变化

为了观察脊髓挤压伤后血-脊髓屏障（BSCB）的通透性变化，本研究选用体重180～200g成年雄性SD大鼠39只，随机分为对照组（n=3）和脊髓损伤组（n=6）。后者又分为伤后0、8、24、72h以及1周、2周等6组，每组6只，再分为A组、B组，每组各3只。脊髓损伤组A组的组织切片行H．E．染色，显微镜下观察脊髓损伤后的形态学变化。对照组和B组动物股静脉注射30g／L伊文思蓝，30min后，以温生理盐水及4％多聚甲醛灌注动物，取出脊髓，行冰冻切片，荧光显微镜下观察。结果观察到，脊髓挤压伤术后72h内，损伤区周围均可见伊文思蓝染色，至1周后损伤区周围未见伊文思蓝染色。本研究结果提示，脊髓损伤72h内可能为有效给药时间窗，1周后给药，药物对脊髓损伤的治疗作用将难以达到治疗目的。