Dehydroheliobuphthalmin与Lapatinib联合应用靶向抑制NCI-H441细胞的研究

【目的】在细胞水平上探讨Dehydroheliobuphthalmin(Dehy)与Lapatinib(Lap)联合应用(Dehy+Lap)的潜在抗肿瘤机制。【方法】利用MTT,Western Blotting等方法以EGFR(wild-type)细胞NCI-H441和EGFR(mutant)细胞NCI-H1975为研究对象,对比不同处理对细胞的不同效果。【结果】在NCI-H441细胞中,Dehy+Lap联合应用降低细胞的存活率;抑制克隆形成;下调EGFR信号通路中p-EGFR、p-JNK、p-JAK、p-Stat3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平;增加细胞的总凋亡率;上调细胞cleaved-Caspase-8、cleaved-Caspase-9、cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP、Bax蛋白表达水平,下调Bcl-2蛋白表达水平;上调细胞p21、p27、p53中蛋白表达水平,下调CDK2、CDK4、CyclinD、CyclinE蛋白表达水平。在NCI-H1975细胞中Dehy+Lap联合应用未降低细胞的存活率;不抑制克隆形成;未改变相关凋亡蛋白表达水平;未改变相关周期蛋白表达水平。【结论】Dehy+Lap联合应用是一种新的抑制非小细胞肺癌细胞生长的方法,且仅对EGFR(wild-type)细胞NCI-H441有效,对EGFR(mutant)细胞NCI-H1975无效。

Lupalbigenin抑制Ba/F3 EGFR WT野生型肺癌细胞增殖作用机制

在细胞水平上探讨Lupalbigenin(LG)抑制Ba/F3 EGFR WT肺癌细胞增殖的机制。使用电转染构建细胞系,利用MTS、Western blot、流式细胞术等方法构建稳定表达的EGFR(野生型)细胞Ba/F3 EGFR WT为材料,检测不同浓度化合物对细胞相关检测指标的影响。结果表明:以Ba/F3为模式细胞构建稳定表达EGFR的Ba/F3 EGFR WT肺癌细胞;在Ba/F3 EGFR WT细胞中,LG能够抑制Ba/F3 EGFR WT细胞增殖;下调EGFR信号通路中P-EGFR、P-Erk、P-Gsk-3β和P-S6蛋白水平;增加细胞总凋亡率;上调细胞中Cleaved-Caspase-3、Cleaved-Caspase-6、Cleaved-Caspase-7、Bax、Cytochrome-C蛋白水平,下调Bcl-2蛋白水平;上调细胞中P27蛋白水平,下调CDK6、Cyclin A2、Cyclin D1蛋白水平。LG是一种天然小分子化合物,能够有效抑制野生型非小细胞肺癌细胞Ba/F3 EGFR WT增殖。有望为野生型EGFR肺癌提供药物开发的新思路,并为天然化合物在治疗人类疾病中提供理论基础。