牛建昭教授治疗多囊卵巢综合征经验拾要

多囊卵巢综合征是临床常见妇科疾病,牛建昭教授已从事50余年妇科临床和科研工作,积累了极为丰富的妇科内分泌疾病治疗经验。跟师学习的4年中,收集、整理了老师治疗多囊卵巢综合征的学术思想和经验总结。导师认为肾、肝、脾三脏功能失调是导致多囊卵巢综合征的主要因素,临床以虚实夹杂证常见,基本病机为肾虚、肝郁、痰湿、血瘀。肾精亏虚是本病的根本原因,而肝郁脾虚则是重要病机。注重中西药合并使用,取长补短。

牛建昭教授中医调周序贯疗法在IVF-ET技术中的临床应用

总结牛建昭教授中医中药在IVF-ET技术中的应用经验。认为中医药在辅助生殖技术中应配合西医共同致力于女性周期的构建。依据女性各期生理特点,分期论治,降调期以健脾益气、益精养肝、温补肾阳为主,月经期以养血活血、祛瘀生新为主,卵泡发育期以补肾养阴、益气养血为主,排卵期以疏肝行气、活血破卵为主,通过将中医调周序贯疗法应用于IVF-ET技术全周期,提高IVF-ET临床妊娠率。

牛建昭治疗反复IVF-ET自然流产的经验探讨

牛建昭教授认为,反复IVF-ET失败主要原因包括卵细胞质量低下和子宫内膜容受性差,牛老在治疗中强调"中医分型、西医辨病、中西结合、个性化治疗"的诊治思路,重视卵母细胞质量,强调子宫内膜容受性,注重先天,以补肾为主,在调经种子、补肾调周的基础上不忘后天,顾护脾胃、保证大便通畅,调畅情志,并提倡夫妻同治,临床疗效显著。

牛建昭教授治疗青春期子宫内膜异位症经验

牛建昭教授从事妇科临床、教学、科研近50年,擅长治疗各种妇科疑难杂症,其经验丰富且独到,尤其在治疗子宫内膜异位症方面亦颇有建树。子宫内膜异位症是由于各种病理因素导致有活性的内膜组织(包括腺体和间质),不仅生长在宫腔而且还附着在子宫内膜以外的其他部位,这些异常生长的内膜组织会引起女性经期痛经,严重者可引发不孕。中医学认为子宫内膜异位症的基本病机是“瘀阻胞宫冲任”,牛建昭教授在辨证论治、四诊合参的基础上,结合患者临床症状,认为青春期子宫内膜异位症的核心病机为“肾虚瘀结”,在治疗时注重“西医辨病,中医分型,中西结合,个性化治疗”的诊治思路,根据月经周期遣方用药,强调审因论治,注重情志调节。此外,对青春期女性确立了调经促卵、理气止痛、温补肾阳的治疗原则。根据患者个体差异随症加减,临床疗效显著。

复方鳖甲软肝方防治肺纤维化大鼠自由基损伤作用的实验研究

目的研究复方鳖甲软肝方防治肺纤维化大鼠自由基损伤的作用和机制。方法SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、强的松(0.56 m g/kg)组、复方鳖甲软肝方高、中、低剂量(1.4、0.7、0.35 g/kg)组,每组10只。除正常组、假手术组外,其余各组大鼠气管滴注盐酸博莱霉素制备大鼠肺纤维化模型。造模后第2天,各组分别ig给药,连续给药4周。测定各组大鼠肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(G SH-Px)、诱导型一氧化氮合酶(iNO S)活性和丙二醛(M DA)水平;采用W estern b lotting实验研究肺组织蛋白中核因子κB(NF-κB)和核因子κB抑制剂(IκBα)的表达。结果复方鳖甲软肝方能提高肺纤维化大鼠体内的G SP-Px和SOD活性,降低M DA水平和iNO S活性,减弱肺纤维化大鼠肺组织核蛋白中NF-κB表达,增强胞浆蛋白中IκBα的表达。结论复方鳖甲软肝方能调节肺纤维化大鼠体内自由基水平,减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤,调节肺组织蛋白IκBα的表达,进而抑制NF-κB表达,是该方防治肺纤维化的作用机制。

人参抑制小鼠胸腺细胞凋亡的实验研究

用大肠杆菌脂多糖（ＬＰＳ）所致小鼠胸腺细胞凋亡模型和琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术及免疫组织化学等方法，研究不同浓度高丽人参水提取物体内对小鼠胸腺细胞的影响。结果表明，每只小鼠腹腔注射１０～２０ｍｇ人参水提取物可防止ＬＰＳ所致小鼠体重及胸腺减重，提高胸腺细胞存活力，抑制胸腺细胞ＤＮＡ降解和促凋亡蛋白Ｂａｘ的过量表达，免疫组织化学研究结果在蛋白水平上初步解释了人参抑制小鼠胸腺细胞凋亡的作用机制。

~3H-白首乌总甙在动物体内分布与排泄的定量研究

作者试图以实验手段探讨中药归经理论,选用氚标记白首乌总甙为示踪剂,经尾静脉注入小白鼠体内,在1min—24h内10个时相点测定实验动物的15种器官组织450份样品中的示踪剂含量,动态定量研究证明~3H—白首乌总甙在小白鼠的肝、脾、肾上腺、肺和胆汁中含量较高,尤以肝脏为著;其对淋巴器官较敏感,并可透过血脑和血睾屏障;其绝大部分经肾脏从尿液中排出体外。作者并就此对中药白首乌的归经理论进行了讨论。

金雀黄素对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的研究金雀黄素对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子表达的影响。方法选用两种不同的人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231体外培养,VEGF免疫组化及原位杂交染色,并用图像分析仪进行定量分析。结果两种人乳腺癌细胞均可转录VEGF-mRNA,并在细胞质中翻译合成相应的蛋白。经金雀黄素处理后两种细胞表达的VEGF都明显减少。结论金雀黄素能通过下调VEGF-mRNA水平,减少VEGF的蛋白表达。

对异病同治内涵的思考

从中医异病同治的含义、异病同治的物质基础及证候微观指标的研究等方面 ,分析异病同治的内涵。结合具体研究项目 ,通过异病同治指导下开展中药复方干预多脏器纤维化研究 ,对在中医证候理论、中药复方研究等可能取得的进展进行了大胆设想 ;并以异病同治的理论为立论依据 ,通过研究提出中医关于多脏器纤维化的理论与异病同证同治的物质基础 ,寻求中医药防治脏器纤维化的共同性与特异性规律。

细胞坏死和凋亡（Apoptosis）DNA状态的比较

用琼脂糖凝胶电泳法、非放射性缺口翻译标记法（ｎｉｃｋｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ，ＮＴ）和末端脱氧核苷酸转移酶（ｔｅｒｍｉｎａｌｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＴｄＴ）标记法研究细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）和坏死时细胞总ＤＮＡ的ＤＮＡ断裂（ＤＮＡｓｔｒａｎｄｂｒｅａｋｓ，ＤＳＢ）状态。细胞凋亡标本取自皮下注射氢化可的松（１０ｍｇ／１００ｇ体重）的大鼠胸腺；坏死标本采用ＣＣｌ＿４（１００μ１／１００ｇ体重）的大鼠肝脏。结果表明：经激素处理的胸腺组织ＤＮＡ在琼脂糖凝胶电泳呈现清晰、规则的“梯子”状（ｌａｄｄｅｒ）带纹，而ＣＣｌ＿４处理后的肝脏组织ＤＮＡ则呈现不规则的带纹。缺口翻译标记时，凋亡和坏死组织的ＤＮＡ显色无差别，但ＴｄＴ末端标记时，坏死组织的ＤＮＡ显色较凋亡组织的ＤＮＡ显色速度快，着色深。以上结果提示：１．细胞凋亡和坏死时均存在ＤＳＢ，但ＤＳＢ类型不同。２．凋亡时ＤＮＡ降解成寡聚核小体而出现规则的“ｌａｄｄｅｒ”，坏死时ＤＮＡ降解成长短不等的片段。３．ＴｄＴ末端标记法显示，细胞凋亡ＤＳＢ显色特性不同于坏死。

绞股蓝总皂甙对地塞米松所致小鼠肾上腺皮质改变的拮抗作用研究

本文用组织学和药理学实验方法证明,绞股蓝皂甙对大剂量地塞米松所致小鼠肾上腺萎缩、功能低下、形态改变有显著拮抗作用。并提出该药与糖皮质激素类药物配伍运用的设想。

大豆异黄酮与葛根黄酮的雌激素受体调节剂作用机理的研究

由于雌激素替代疗法治疗妇女更年期综合征的副作用日益突出，近年来寻找植物来源的替代物成为世界许多科学家共同关心的课题。本课题首次系统地研究了葛根与大豆异黄酮的雌激素受体调节剂作用。

当归补血汤加味对氢化可的松所致大鼠肝损伤保护作用的研究

氢化可的松是肾上腺皮质激素之一。近年来,国内曾用氢化可的松造成动物“虚证”病理模型。当归补血汤是补气益血的代表分剂,为加强其补气生血功效,我们在原方基础上再加一味人参,造成“气血注射液”。本研究应用透射电镜研究了靠气血注射液”对氢化可的松所致肝损伤的保护作用,为其临床应用提供实验形态学依据。论文荣获1985年北京科研成果奖。实验分为三组。

用原位缺口翻译法比较两种细胞死亡的DNA状态

用原位缺口翻译法（ＩＮＴ）比较了细胞凋亡和坏死所伴随的ＤＮＡ断裂（ＤＳＢ）类型。ＩＮＴ实验条件为：取大鼠小肠制备冰冻切片，乙醇／醋酸固定，加２０μｍｏｌ／Ｌｂｉｏｔｉｎ－１１－ｄＵＴＰ、０．２ＩＵ／ＬＤＮＡ聚合酶Ⅰ，于３７℃中孵育３ｈ。正常大鼠小肠绒毛顶端上皮细胞可迅速被染色；而位于肠绒毛基底部的Ｓ期上皮细胞则不着色，仅在用蛋白酶Ｋ处理后才着色。细胞凋亡标本取自皮下注射氢化可的松（１０ｍｇ／１００ｇ体重）的大鼠胸腺；细胞坏死用ＣＣｌ４（１００μｌ／１００ｇ体重）处理的大鼠肝脏。结果表明，经激素处理的胸腺皮质细胞核只有在蛋白酶Ｋ处理后才被染色，而ＣＣｌ４处理后的肝细胞核不必用蛋白酶Ｋ消化就能直接显色。说明细胞凋亡的ＤＳＢ显色特性不同于细胞坏死。

NO抑制剂导致大鼠多脏器损伤的形态学研究

本文观察了ＮＯ抑制剂对小肠、脑、心、肺、脾、肝、肾、肾上腺、胸腺的形态学改变，结果表明，单用ＬＰＳ或ＮＡＭＥ１ｈ内均未见脏器明显病理改变，但ＬＰＳ＋Ｌ一ＮＡＭＥ１ｈ后，即可引起肠管紫绀，肠腔大量出血；组织学检查，小肠、肺呈弥慢性出血，肾、脾呈梗塞性坏死，但心、肝变化不明显。延长观察时间，单独注射Ｌ一ＮＡＭＥ２ｈ，小肠绒毛毛细血管明显充血扩张，６ｈ后可见绒毛内毛细血管内皮损伤，局部出血。但Ｄ一ＮＡＭＥ并不引起同样病变。本研究表明，ＮＯ释放对维持内皮细胞在病理或正常条件下的完整性具有重要意义。

大白鼠肾脏发生中γ-谷氨酰转肽酶变化的免疫组织化学研究

应用单克隆抗体免疫组织化学方法,显示胚胎及生后大鼠肾脏的γ-谷氨酰转肽酶(γ-GTP)。从胎龄第18天起,γ-GTP在近端小管细胞刷状缘、侧面及基底面膜上反应即呈阳性,生后1～3天反应呈强阳性。随着肾单位的发育,免疫反应虽有所减弱,但生后第30天仍可看到中等强度的反应。其中近端小管S_3段的免疫反应最强,皮质深层的近端小管比皮质浅层的反应强。细段降支的立方或扁平细胞的腔面及侧面细胞膜上,免疫反应亦呈阳性。免疫电镜观察表明,生后1～7天,在近端小管上皮细胞顶部微绒毛、胞膜内陷、吞饮小泡及侧面和基底面细胞膜上,免疫反应均呈阳性,但紧密连接处反应为阴性。基底部质膜内褶的发生及γ-GTP定位,似与周围毛细血管的发生密切相关。此外,γ-GTP还存在于肾间质细胞膜上,并偶见于细胞质内。