假单胞菌是影响原料乳品质的主要嗜冷菌,拟建立一种针对假单胞菌及其耐热蛋白酶的双重PCR检测方法。针对假单胞菌的16S r DNA及apr X基因设计多对引物,利用单PCR反应进行筛选。利用优选的2对引物进行双重PCR反应体系优化,PCR产物的测序...假单胞菌是影响原料乳品质的主要嗜冷菌,拟建立一种针对假单胞菌及其耐热蛋白酶的双重PCR检测方法。针对假单胞菌的16S r DNA及apr X基因设计多对引物,利用单PCR反应进行筛选。利用优选的2对引物进行双重PCR反应体系优化,PCR产物的测序鉴定和特异性试验,建立了一种能同时检测分泌蛋白酶的假单胞菌双重PCR方法。用此方法对假单胞菌、肠道常见致病菌进行双重PCR检测,结果表明仅具有蛋白水解活性的假单胞菌在16S r DNA和apr X基因扩增区得到有效扩增,而致病菌和阴性对照在两扩增区均为阴性,表明此检测方法具有特异性。展开更多
文摘假单胞菌是影响原料乳品质的主要嗜冷菌,拟建立一种针对假单胞菌及其耐热蛋白酶的双重PCR检测方法。针对假单胞菌的16S r DNA及apr X基因设计多对引物,利用单PCR反应进行筛选。利用优选的2对引物进行双重PCR反应体系优化,PCR产物的测序鉴定和特异性试验,建立了一种能同时检测分泌蛋白酶的假单胞菌双重PCR方法。用此方法对假单胞菌、肠道常见致病菌进行双重PCR检测,结果表明仅具有蛋白水解活性的假单胞菌在16S r DNA和apr X基因扩增区得到有效扩增,而致病菌和阴性对照在两扩增区均为阴性,表明此检测方法具有特异性。